全 文 ：知识与经验
分光光度法测定夜交藤中多糖
李金花１，农石生２，黄锁义３＊
（１．右江民族医学院 检验学院，百色５３３０００；　２．右江民族医学院 临床全科医学方向，百色５３３０００；
３．右江民族医学院 药学系，百色５３３０００）
中图分类号：Ｏ６５７．３２　　　文献标志码：Ｂ　　　文章编号：１００１－４０２０（２０１２）０９－１１１５－０２
　　多糖是由许多单糖分子以苷键相连形成的高分
子化合物，多糖水解最终为单糖葡萄糖。多糖几乎
存在于所有生物体中，具有能量储存、防御功能、抗
肿瘤作用、免疫促进活性等多方面的生物功能，所以
近年来多糖成为天然药物研究的热点［１－２］。夜交藤
为蓼科植物何首乌的干燥藤茎，性微温、味苦，具有
养心安神、祛风湿等功能，用于治疗神经衰弱、失眠、
多梦、全身酸痛、贫血等症［３］。夜交藤红色素稳定性
的研究已有报道［４］，关于夜交藤多糖成分的提取及含
量测定的研究尚未见报道。本工作基于硫酸－苯酚
法［５］，即利用多糖在硫酸作用下先水解成单糖，并迅
速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚缩合生成橙黄色
化合物，提出了分光光度法测定夜交藤中多糖含量。
１　试验部分
１．１　仪器与试剂
７２２型光栅分光光度计；ＫＱ　５２００ＤＢ型数控超
声波清洗器；ＳＨＢ－Ⅲ型循环水式多用真空泵；ＨＨ－
ｓｙｚｌ－Ｎｉ６－Ｃ型电热恒温水浴锅。
葡萄糖对照品溶液：０．１ｇ·Ｌ－１，使用时用水稀
释至所需浓度。
苯酚溶液：用移液管移取１２．５０ｍＬ苯酚，置于
２５０ｍＬ容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
所用试剂均为分析纯，试验用水为蒸馏水。
１．２　试验方法
１．２．１　多糖的提取
将新鲜夜交藤干燥、粉碎、过３８μｍ筛。
收稿日期：２０１１－０７－２５
基金项目：右江民族医学院２０１０～２０１２年度普高学生科研项
　目（右医科字［２０１０］９号）
＊ 联系人。Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｕａｎｇｓｕｏｙｉ＠１６３．ｃｏｍ
超声波提取：称取夜交藤粉末９．０００　０ｇ于圆
底烧瓶中，加水３０ｍＬ置于数控超声波清洗器中，
水浴温度６５℃，超声功率８０Ｗ，超声波提取３ｈ，抽
滤。滤渣再加水，重复提取２次，合并３次滤液。
水提醇析提取：称取夜交藤粉末９．０００　０ｇ放
入烧杯中，加水３０ｍＬ，将其置于电热恒温水浴锅
中，温度控制在６５℃，回流３ｈ，用循环水式多用真
空泵进行抽滤，滤液放入５００ｍＬ大烧杯中。用同
样的方法重复提取２次，合并３次滤液。
取上述两种方法所得的提取液，用电热恒温水
浴锅加热浓缩至１０～２０ｍＬ，冷却至２０℃后，加入
乙醇６０ｍＬ，在背光处静置２４ｈ，用布氏漏斗抽滤，
滤饼依次用乙醇和乙醚清洗两次，烘干得到灰色粉
末状粗多糖固体０．２９３　８ｇ（超声波提取），０．５９０　０ｇ
（水提醇析提取）。
１．２．２　多糖含量的测定
称取夜交藤粗多糖０．０１０　２ｇ置于５０ｍＬ烧杯
中，加１ｍｏｌ·Ｌ－１硫酸溶液２ｍＬ，加热水解２ｈ，冷
却至室温，定容于１００ｍＬ容量瓶中。移取１．０ｍＬ
样品溶液，置于５０ｍＬ小烧杯中，加苯酚（５＋９５）溶
液１．５ｍＬ，再加硫酸７．５ｍＬ，混匀后放置２０ｍｉｎ，
在波长４８４ｎｍ［６］处测其吸光度，由线性回归方程计
算夜交藤中多糖的含量。
２　结果与讨论
２．１　提取方法的对比
分别采用超声波提取法和水提醇析提取法对夜
交藤进行提取，对两种不同提取方法所得结果用
ＳＰＳＳ　１３．０软件处理。结果表明：水提醇析提取夜
交藤多糖量的平均值为０．５９０　０ｇ，标准偏差为
０．７４１　６ｍｇ，相对标准偏差为０．０３３　１７％；超声波提
取夜交藤多糖量的平均值为０．２９３　８ｇ，标准差偏为
·５１１１·
李金花等：分光光度法测定夜交藤中多糖
０．２８６　４ ｍｇ，相对标准偏差为 ０．０１２　８１％；当
α＜０．０５时，经ｔ检验，ｔ＝８２３．３５８，说明这两种方法
具有显著性差异。试验结果表明：水提醇析提取法
比超声波法提取的夜交藤多糖量高。大多数多糖水
解最终为葡萄糖，将多糖水解成单糖时，水解不完全
则测不准，过度又会导致多糖的差向异构化，因水提
醇析法提取效率高。试验选择水提醇析法对夜交藤
多糖进行提取。
２．２　标准曲线与检出限
依次移取葡萄糖对照品溶液５，１０，２０，３０，
３５ｍＬ，分别用水定容至５００ｍＬ容量瓶中，移取上
述对照品溶液系列各１．０ｍＬ置于５０ｍＬ小烧杯
中，按试验方法显色后测其吸光度，以葡萄糖的质量
浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线，葡萄
糖的质量浓度在７．０ｍｇ·Ｌ－１以内与吸光度呈线性
关系，线性回归方程为Ａ＝０．１２６　９ρ－２．０７６×
１０－３，相关系数为０．９９９　５。
２．３　回收试验
按试验方法对夜交藤多糖溶液平行测定５次，
测得夜交藤中多糖的平均质量分数为１．５３７％。同
时加０．１５ｍｇ·Ｌ－１葡萄糖对照品溶液进行回收试
验，方法的平均回收率为１０３．２％，相对标准偏差
（ｎ＝５）为０．９８％。
本工作用水提醇析法提取了夜交藤中的多糖，
并采用硫酸－苯酚法对其多糖含量进行了较详细的
研究，为天然食品和天然药物的开发应用提供了理
论依据。
参考文献：
［１］　董群，方积年．多糖在医药领域中的应用［Ｊ］．中国药学
杂志，２００１，３６（１０）：２－５．
［２］　王蓉，吴剑波．多糖生物活性的研究进展［Ｊ］．国外医
药·抗生素分册，２００１，２２（３）：９７－１００．
［３］　四川医学院．中草药学［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，
１９７９：１９４－１９５．
［４］　陈雪，黄锁义，李金花，等．影响夜交藤红色素稳定性的
因子研究［Ｊ］．检验医学教育，２００９（３）：４６－４８．
［５］　赵玉英，海平，孙占才，等．蒙药广枣多糖组分分析和糖
含量测定［Ｊ］．药物分析杂志，２００１，２１（６）：４４０－４４２．
［６］　马俊杰，马玉山，王丽，等．萹蓄多糖的提取及含量测定
［Ｊ］．内蒙古民族大学学报，２００９，２４（３）：
檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴檴
２８２－２８３．
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