全 文 ：分析与检测
2013年第 39卷第 1期(总第 301期) 187
超声醇溶-紫外分光光度法测定不同产地三七花中总黄酮含量*
朱艳琴1，殷勤红2，杨俊1，杨朝芬1，孙晓东1
1(昆明理工大学分析测试研究中心，云南 昆明，650093)
2(昆明积大制药股份有限公司，云南 昆明，650106)
摘 要 对不同产地三七花中总黄酮的含量进行了分析。以芦丁为对照品，采用紫外分光光度计在 508 nm 处
测定三七花中总黄酮的含量。在单因素实验基础上，最终选择乙醇体积分数为 60%、料液比为 1∶ 25、超声时间 1
h为适宜提取工艺;并以此法对三七花中总黄酮的含量进行比较，显示不同产地的三七花总黄酮含量最高为
0. 73%，含量最低为 0. 43%。
关键词 三七花，总黄酮，超声醇溶
第一作者:硕士，工程师(E-mail:zyq23788@ sohu. com)。
* 云南省分析测试技术开发与服务平台建设项目(2010DH025)
收稿日期:2012 － 10 － 16，改回日期:2012 － 12 － 14
三七花是传统名贵中药五加科植物三七的干燥
花蕾 (flower buds of Panax notoginseng (Burk)
F. H. Chen) ，盛产于云南文山、广西等地，含有各种人
参皂苷［1］、三七花苷元［2］等，作为药材已载入《云南
中草药选》，“甘凉，清热平肝，降压，治疗高血压，头
昏，目眩，耳鸣，急性咽喉炎”。三七花既是名贵中药
药品，又是优等食品、保健品，可泡茶、炒肉、煲汤等药
膳食疗，长期服用对治病和养生都颇有裨益［3 － 10］。
但目前相关的研究力度尚为薄弱［11 － 13］。本实验采用
超声醇溶-紫外分光光度法对不同产地的 12 批三七
花总黄酮含量进行研究。
1 材料与方法
1. 1 材料与仪器
三七花，2009 年 8 月采于云南省各地州，经云南
大学中草药生物资源研究所云百草实验室虞泓教授
鉴定为五加科植物三七(Panax notoginseng(Burk)
F. H. Chen)的干燥花蕾。无水乙醇、NaOH、NaNO2、
Al(NO3)3(中国医药集团上海化学试剂公司，AR
级) ;芦丁对照品(中国药品生物制品检定所，批号
100080 － 200306)。
UV －2550 型紫外可见分光光度计(SHIMADZU
制作所) ，SB3200 型超声波清洗器(必能信超声有限
公司) ;BP211D电子天平(Sartorius公司)。
1. 2 实验方法
1. 2. 1 芦丁标准溶液配制
精确称取经 60℃减压干燥至恒重的芦丁标准对
照品 30. 7 mg，加 60%乙醇溶解并定容至 50 mL，制成
浓度为 0. 614 mg /mL的对照品溶液。
1. 2. 2 待测样品的提取
取本品粉末 0. 2 g，加 60%乙醇溶液 5 mL，超声 1
h，混匀，5 000 转 r /min 离心 5 min，重复 3 次。吸取
上清液 2 mL 至 25 mL 量瓶中，用 60%乙醇溶液定
容。用分光光度计在 508 nm 波长处测定吸光度，以
60%乙醇代替样品溶液，作为空白溶液。
2 结果
2. 1 单因素试验
2. 1. 1 乙醇浓度对总黄酮含量的影响
称取编号为 S12 的三七花粉末 0. 2 g，分别加浓
度为 30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%乙醇溶
液 5 mL，照 1. 2. 2 项下方法操作，考察不同乙醇浓度
对总黄酮含量的影响，结果见图 1。
图 1 乙醇浓度对总黄酮含量的影响
Fig． 1 Effect of ethanol concentration on the
yield of total flavones
随着乙醇浓度的增加，三七花总黄酮含量也升
高，但乙醇浓度为 60%时，总黄酮含量为最大;随着
乙醇浓度的进一步增加，三七花总黄酮含量却降低。
因此提取液选择乙醇浓度为 60%。
食品与发酵工业 FOOD AND FERMENTATION INDUSTRIES
188 2013 Vol. 39 No. 1 (Total 301)
2. 1. 2 料液比对总黄酮含量的影响
称取编号为 S12 的三七花粉末 0. 2 g，分别加
60%乙醇溶液 2、3、4、5、6、7、8 mL，照 1. 2. 2 项下方
法操作，考察不同料液比对总黄酮含量的影响，结果
见图 2。由图 2 可知，当料液比为 1∶ 25 时，三七花总
黄酮含量为最大，随着料液比的进一步增加，总黄酮
增加不明显。因此选择料液比为 1∶ 25。
图 2 料液比对总黄酮含量的影响
Fig．2 Effect of liquid to solid ratio on the yield of total flavones
2. 1. 3 超声时间对总黄酮含量的影响
称取编号为 S12 的三七花粉末 0. 2 g，加 60%乙
醇溶液 5 mL，分别超声 20、40、60、80、100、120 min，
照 1. 2. 2 方法操作，结果见图 2。超声时间为 60 min
时，总黄酮含量为最大;随着超声时间的进一步增加，
三七花总黄酮含量增加不明显。因此提取液选择超
声时间为 60 min。
图 3 超声时间对总黄酮含量的影响
Fig． 3 Effect of extraction time on the yield of total flavones
2. 2 标准曲线的绘制
取上述对照品溶液各 0. 2、0. 4、0. 6、0. 8、1. 0、
1. 2 mL芦丁对照品溶液，分别置于 20 mL试管中，加
甲醇至 2 mL，再加 50 g /L 亚硝酸钠溶液 1 mL，摇
匀，放置 6 min;再加入 100 g /L 硝酸铝溶液 1 mL，
摇匀，放置 6 min;再加入 40 g /L 氢氧化钠溶液 10
mL，再加入 60% 乙醇稀释至刻度，摇匀，放置 15
min后，以蒸馏水为空白溶液，在 508 nm 波长处测
定各标准品溶液的吸光度。以吸光度 A 为纵坐标，
浓度(mg /mL)为横坐标绘制标准曲线，并求出回归
方程为:Y = 13. 825X － 0. 007 4，R2 = 0. 999 4。样品
测定见图 4。
图 4 总黄酮标准曲线图
Fig． 4 Standard curves of total flavones
2. 3 方法学考察
2. 3. 1 精密度试验
取编号为 S12 的样品溶液，分别在 508 nm 波长
处测定吸光度，分别为 0. 255，0. 256，0. 257，0. 255，
0. 258，0. 257，平均值为 0. 256，RSD 为 0. 47%(n =
6) ，表明试验的精密度良好。
2. 3. 2 稳定性试验
取编号为 S12 的待测样品，分别放置于室温，于
0、10、20、30、40、50、60 min 时测定吸光度，分别为
0. 257、0. 254、0. 251、0. 246、0. 245、0. 242、0. 241，平
均值为 0. 248，RSD为 2. 46%(n = 7) ，表明待测样品
在 1 h内较稳定。
2. 3. 3 重复性试验
取编号为 S12 的样品，按照 1. 2. 2 项下的方法操
作，平行制备 6 份样品，分别在 508 nm波长处测定吸
光度，含 量 分 别 为 0. 472%，0. 476%，0. 482%，
0. 485%，0. 476%，0. 478%，平均值为 0. 478%，RSD
为 0. 98%(n = 6) ，表明试验的重复性良好。
2. 3. 4 加样回收率试验
取已知含量的三七花(编号 S12)粉末各 6 份，每
份约 0. 1 g，分别加入上述芦丁对照品溶液各 1 mL，
按 1. 2. 2 项下的方法平行制备样品溶液，测定吸光
度，结果见表 1。
表 1 加样回收率试验表
Table 1 Recovery of adding standards
样品称
样量 / g
样品含量 /
mg
加入对照
品量 /mg
测定量 /
mg
回收率 /
%
平均回
收率 /%
RSD /
%
0. 102 5 0. 492 0 0. 614 0 1. 102 5 99. 43
0. 104 6 0. 502 1 0. 614 0 1. 108 9 98. 83
0. 105 8 0. 507 8 0. 614 0 1. 102 2 96. 80 98. 1 1. 3
0. 106 5 0. 511 2 0. 614 0 1. 118 2 98. 86
0. 100 8 0. 483 8 0. 614 0 1. 088 7 98. 51
0. 107 5 0. 516 0 0. 614 0 1. 106 2 96. 12
分析与检测
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2. 4 三七花总黄酮含量的测定
取下表中 12 个不同产地的三七花样品，按
1. 2. 2 项下的方法平行制备样品溶液，测定吸光度，
计算其含量，结果见表 2。
表 2 三七花中总黄酮含量测定结果
Table 2 Assay results of flavones in Panax notoginseng flowers
产地及
编号
总黄酮
含量 /%
来源地
总黄酮
含量 /%
云南马关县八寨镇(S1) 0. 73 云南文山县平坝镇(S7) 0. 53
云南文山县开化镇东山乡
(S2)
0. 72
云南西畴县莲花塘乡
(S8)
0. 50
云南文山县开化镇东山乡
合掌村(S3)
0. 61
云南砚山县阿猛镇茂地
冲村(S9)
0. 56
云南文山县马塘镇(S4) 0. 58
云南砚山县江娜镇铳卡
村(S10)
0. 43
云南文山县老回龙镇(S5) 0. 55
云南砚山县江娜镇空心
山(S11)
0. 45
云南文山县腻脚乡(S6) 0. 65 云南砚山县维摩乡(S12) 0. 48
3 讨论与结论
本研究采用超声醇溶的方式提取三七花中的黄
酮类化合物，并对总黄酮含量进行了测定。从研究结
果看，云南马关县八寨镇和文山县开化镇东山乡的三
七花总黄酮含量最高，达到了 0. 73%和 0. 72%;而云
南砚山县江娜镇铳卡村和空心山的三七花总黄酮含
量最低，仅有 0. 43%和 0. 45%。表明云南产三七花
总黄酮含量差异较大，这可能与三七花的产地、种植
条件、采收期等有关。三七花因含特有的甘味而受到
众多消费者的喜爱，随着研究的逐步深人，必然会为
新药研发提供更坚实的理论基础，同时也为三七花的
可持续产业化发展道路指明了方向。
参 考 文 献
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Ultrasonic sound ethanol dissolve-ultraviolet spectrophotometric
determination of total flavones in Panax notoginseng
flowers from different areas
Zhu Yan-qin1，Yin Qin-hong2，Yang Jun1，Yang Chao-fen1，Sun Xiao-dong1
1(Research Center for Analysis and Measurement，Kunming University of Science and Technology，Kunming 650093，China)
2(Kunming Jida Pharmaceutical Co.，Ltd，Kunming 650091，China)
ABSTRACT A comparative analysis of the total flavones content in Panax notoginseng flowers from different areas
was performed． The total flavones content in Panax notoginseng flowers was determined at 508nm by ultraviolet spec-
trophotometric with rutin as the reference substance． Based on the experiment of single factor，the optimum extraction
conditions were as follow:ethanol concentration 60%，ratio of liquid to solid 1:25，extraction time 1h． Total flavones
in Panax notoginseng flowers from different areas were compared and highest content was 0． 73%，the lowest was only
0． 43% ． The repetition，stability and precision of the method in analyzing the total flavones content are promising．
The method can be used to control the quality of Panax notoginseng flowers．
Key words Panax notoginseng flowers，total flavones，ultrasonic sound ethanol dissolve