全 文 ：水红花子炮制品最佳提取工艺研究
周晓玉，王添敏，赵 敏，翟延君*
(辽宁中医药大学药学院，大连 116600)
摘要 目的:通过对水红花子炮制品不同提取方法的研究，确定其最佳提取工艺。方法:以水红花子有效成分
花旗松素、槲皮素含量及出膏率为指标，采用正交设计制定水红花子炮制品的不同提取方法，并采用 HPLC 法测定
不同方法提取物中有效成分的含量。结果:优选出的最佳提取工艺条件为加 10 倍量 70%乙醇，提取 3 次，每次
2 h。结论:该工艺稳定可行，可为工业化生产提供参考。
关键词 水红花子;炮制品;正交设计;提取工艺;HPLC
中图分类号:R283 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2011)12-1851-04
收稿日期:2011-06-01
基金项目:国家自然科学基金项目(30873437)
作者简介:周晓玉(1987-) ，女，在读研究生，研究方向:中药品种鉴定与质量评价;Tel:15998521829，E-mail:zh_x_y@ sohu. com。
* 通讯作者:翟延君，Tel:13019499386，E-mail:lnzyzyj@ sohu. com。
水红花子为蓼科植物红蓼 Polygonum orientale
L. 的干燥成熟果实。具有散血消癥、消积止痛的功
能，主治癥瘕痞块、瘿瘤肿痛、食积不消、胃脘胀痛等
症〔1〕，临床生用或炮制使用。药理实验表明水红花
子生、制品均有不同程度的抑瘤效果，但生品偏于散
血消癥，制品长于消积止痛〔2〕。经查阅文献花旗松
素〔3〕及槲皮素〔4〕为水红花子有效成分，均有良好的
抑瘤及抗氧化效果，其中前者在调节脂代谢、抗病毒
等方面有较强作用〔5〕，后者具有消炎镇痛等作
用〔6〕。本实验采用正交实验设计方法，以水红花子
有效成分花旗松素、槲皮素含量和出膏率作为指标，
优选水红花子炮制品的最佳提取工艺。
1 材料、仪器与试剂
1. 1 药材与对照品 水红花子购于沈阳市药材公
司，经本院翟延君教授鉴定为蓼科植物红蓼 Polygo-
num orientale L. 的干燥成熟果实。花旗松素购于百
灵威化学技术有限公司，批号 LPB0105;槲皮素购于
中国药品生物制品检定所，批号 081-9003。
1. 2 仪器与试剂 Agilent 1100 LC 高效液相色谱
仪，202-1 型恒温干燥箱，RE-52 型旋转蒸发仪，SHZ-
D(Ⅲ)型循环水式真空泵，DK-B-Ⅰ型电子恒温水浴
锅，KQ-B型玻璃仪器气流烘干器，KQ3200 型超声
波清洗器。乙醇、磷酸(均为分析纯)、色谱甲醇、纯
净水。
2 实验方法与结果
样品炮制:称取水红花子生品 2 000 g，分 4 次
置于热高压罐缓慢加热 5 min 至压力达到 12Pa，爆
花备用。
对照品溶液的制备: (1)精密称取花旗松素适
量，加甲醇制成 0. 247 mg /mL 的溶液，过 0. 45 μm
的微孔滤膜备用。(2)精密称取槲皮素适量，加甲
醇制成 0. 208 mg /mL的溶液，过 0. 45 μm的微孔滤
膜备用。
供试品溶液的制备〔7〕:精密称取水红花子炮制
品不同方法提取物各 0. 2 g，加甲醇 25 mL 溶解，超
声提取 40 min，过 0. 45 μm的微孔滤膜备用。
色谱条件:色谱柱:Agilent(4. 6 mm × 200 mm，
5μm)。流动相为甲醇∶ 0. 1%磷酸梯度洗脱(表 1) ，
柱温:25 ℃，检测波长:270 nm，流速:1. 0 mL /min。
表 1 流动相梯度洗脱溶剂配比
时间 /min 甲醇 /% 0. 1%磷酸水
0
10
20
30
40
55
30
39
47
47
58
56
70
61
53
53
42
44
2. 1 水提工艺
2. 1. 1 因素水平的设计:根据影响水提取的主要
因素，选择加水量、提取时间、提取次数作为考察
因素，每个因素选择 3 个水平进行实验，结果见
表 2。
2. 1. 2 正交实验及结果:取按因素水平表安排的
方法炮制的水红花子炮制品粗粉过 40 目筛，精密称
取 20 g，共 9 份，按“供试品溶液制备”项下方法提
取，合并提取液，滤过，浓缩，定容至 100 mL 容量瓶
中制成供试品溶液。从供试品溶液中精密吸取 25
mL，浓缩干燥，计算出膏率。并以每份提取液中花旗
松素和槲皮素含量为考察指标，采用高效液相色谱法
进行测定，结果见表 3。
·1581·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 34 卷第 12 期 2011 年 12 月
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2011.12.002
表 2 因素水平表
水平
因素
A加水量
/倍
B提取时间
/h
C提取次数
/次
D
空白
1
2
3
8
10
12
1
1. 5
2
1
2
3
2. 1. 3 方差分析结果:对以上结果，以出膏率为指
标进行方差分析，结果见表 4。
方差分析结果显示:影响水提工艺的因素主次
顺序为:C ＞ A ＞ B，其中提取次数 C 对出膏率的影
响有显著性差异。直观分析结果显示:影响因素 A3
＞ A2 ＞ A1，B1 ＞ B2 ＞ B3，C3 ＞ C2 ＞ C1。
表 3 正交实验表及结果
实验号 A B C D 花旗松素含量 /(mg /g)
槲皮素含量 /
(mg /g)
出膏率
/%
1 1 1 1 1 0. 508853 0. 062253 6. 5
2 1 2 2 2 0. 406426 0. 085563 7. 334
3 1 3 3 3 0. 570696 0. 051166 9. 446
4 2 1 2 3 0. 39372 0. 08106 9. 264
5 2 2 3 1 1. 035843 0. 085943 10. 856
6 2 3 1 2 0. 544483 0. 077783 7. 18
7 3 1 3 2 1. 16193 0. 22132 12. 072
8 3 2 1 3 0. 624694 0. 065922 7. 534
9 3 3 2 1 1. 011202 0. 114537 7. 854
K1-1 0. 495 0. 688 0. 559 0. 852
K1-2 0. 658 0. 689 0. 604 0. 704
K1-3 0. 933 0. 709 0. 923 0. 530
R1 0. 438 0. 021 0. 364 0. 322
K2-1 0. 066 0. 122 0. 069 0. 088
K2-2 0. 082 0. 079 0. 094 0. 128
K2-3 0. 134 0. 081 0. 119 0. 066
R2 0. 068 0. 043 0. 050 0. 062
K3-1 7. 760 9. 279 7. 055 8. 403
K3-2 9. 083 8. 575 8. 151 8. 845
K3-3 9. 154 8. 143 10. 791 8. 748
R3 1. 393 1. 136 3. 736 0. 442
表 4 出膏率方差分析结果
离和平方差 自由度 方差 F值 显著性
A 3. 69 2 1. 8485 11. 410
B 1. 971 2 0. 9855 6. 083
C 22. 137 2 11. 0685 68. 324 *
D 0. 329 2 0. 1645 1. 000
F0. 05(2，2)= 19. 000
故最佳工艺确定为 A3B1C3，即加水量 12 倍，提
取 3 次，每次提取 1 h。
2. 2 乙醇回流提取工艺
2. 2. 1 因素水平的设计:根据影响乙醇提取的主
要因素，选择醇浓度、加醇量、提取时间和提取次数
作为考察因素，每个因素选择 3 个水平进行实验，结
果见表 5。
表 5 因素水平表
水平
因素
A醇浓度
/%
B加醇量
/倍
C提取时间
/h
D提取次数
/次
1
2
3
60
70
80
6
8
10
1
1. 5
2
1
2
3
2. 2. 2 正交实验及结果:取按正交因素水平表安
排的方法炮制的水红花子粗粉过 40 目筛，精密称取
·2581· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 34 卷第 12 期 2011 年 12 月
20g，共 9 份，按“供试品溶液制备”项下方法提取，
合并提取液，滤过，浓缩，定容至 100 mL容量瓶中制
成供试品溶液。从供试品溶液中精密吸取 25mL，浓
缩干燥，计算出膏率。并以每份提取液中花旗松素
和槲皮素含量为考察指标，采用高效液相色谱法进
行测定，结果见表 6。
2. 2. 3 方差分析结果:对以上结果，以出膏率为指
标进行方差分析，结果见表 7。
表 6 正交实验表及结果
实验号 A B C D 花旗松素含量 /(mg /g)
槲皮素 /
含量(mg /g)
出膏率
/%
1 1 1 1 1 2. 144428 1. 099109 7. 17
2 1 2 2 2 2. 268506 1. 334415 10. 46
3 1 3 3 3 3. 895164 2. 493333 14. 27
4 2 1 2 3 3. 244534 1. 993866 13. 1
5 2 2 3 1 2. 605824 1. 340496 8. 35
6 2 3 1 2 3. 144372 1. 821435 10. 96
7 3 1 3 2 3. 985685 1. 953714 10. 8
8 3 2 1 3 3. 193575 1. 5642 10. 43
9 3 3 2 1 3. 210416 1. 486888 7. 89
K1-1 2. 769 3. 125 2. 827 2. 654
K1-2 2. 998 2. 689 2. 908 3. 133
K1-3 3. 463 3. 417 3. 496 3. 445
R1 0. 694 0. 728 0. 669 0. 791
K2-1 1. 642 1. 682 1. 495 1. 309
K2-2 1. 719 1. 413 1. 605 1. 703
K2-3 1. 668 1. 934 1. 929 2. 017
R2 0. 077 0. 521 0. 434 0. 708
K3-1 10. 633 10. 357 9. 520 7. 803
K3-2 10. 803 9. 747 10. 483 10. 740
K3-3 9. 707 11. 040 11. 140 12. 600
R3 1. 096 1. 293 1. 620 4. 797
表 7 出膏率方差分析结果
离和平方差 自由度 方差 F值
A 2. 09 2 1. 045 1. 000
B 2. 512 2 1. 256 1. 202
C 3. 984 2 1. 992 1. 906
D 35. 092 2 17. 546 16. 790
F0. 05(2，2)= 19. 000
方差分析结果显示:影响醇提工艺的因素主次
顺序为:D ＞ B ＞ C ＞ A。直观分析结果显示:影响因
素 A2 ＞ A1 ＞ A3，B3 ＞ B1 ＞ B2，C3 ＞ C2 ＞ C1，D3 ＞ D2
＞ D1。故最佳工艺确定为 A2B3C3D3，即加 10 倍量
70%乙醇，提取 3 次，每次提取 2 h。
2. 3 最佳提取工艺的验证实验 由水提工艺和醇
提工艺的正交实验结果显示，醇提工艺的花旗松素
和槲皮素含量明显高于水提工艺，现取本药材对水
提和醇提的最佳工艺进行放大实验，对工艺的可行
性进行验证，实验结果见表 8。
表 8 验证实验结果
工艺 试验号 投料量/ g
花旗松素
的含量 /
(mg /g)
槲皮素
的含量 /
(mg /g)
出膏率
/%
水提工艺 1 1000 1. 16193 0. 22132 12. 06
2 1000 1. 16135 0. 21298 12. 01
3 1000 1. 16999 0. 21348 12. 10
醇提工艺 1 1000 3. 8957 2. 4937 14. 25
2 1000 3. 8625 2. 4866 14. 10
3 1000 3. 8952 2. 4912 14. 15
·3581·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 34 卷第 12 期 2011 年 12 月
验证结果显示:醇提最佳工艺的花旗松素和槲
皮素含量均优于水提，因此选择醇提方法。
3 结论与讨论
3. 1 花旗松素和槲皮素是黄酮类化合物，为水红
花子的有效成分，花旗松素已作为对照品被收入
2010 版中国药典，该化合物专属性强，与槲皮素协
同可作为提取工艺考察指标。
3. 2 本实验选择了水和乙醇 2 种溶剂对水红花子
炮制品的提取方法进行了正交设计实验，以 3 个指
标考察不同因素对提取效果的影响并对最佳提取方
法进行了优选。由实验结果可以看出，水提最佳工
艺和醇提最佳工艺在出膏率上相差 2%左右，但水
提取液中水红花子的有效成分花旗松素和槲皮素的
含量明显低于乙醇提取液。
3. 3 实验结果显示:水红花子炮制品的最佳提取
工艺应选择乙醇回流法，即加 10 倍量 70%乙醇，提
取 3 次，每次提取 2 h。验证实验表明，该工艺稳定
可行，可为工业化生产提供参考。
参 考 文 献
［1］国家药典委员会 . 中华人民共和国药典［S］. 一部 . 北
京:中国医药科技出版社，2010:77.
［2］翟延君 . 水红花子质量标准规范化研究［D］. 沈阳:辽
宁中医学院，2005.
［3］张元桐，翟延君，康廷国，等 . HPLC 测定不同地区水红
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(20) :2190-2191.
［4］张元桐，翟延君，曲静，等 . HPLC 测定水红花子中槲皮
素的含量［J］.中成药，2006，28(2) :236-238.
［5］乔华 . 花旗松素的生物活性及其应用［J］. 中草药，
2003，34(8) :附 15-附 16.
［6］王艳芳，王新华，朱宇同，等 . 槲皮素药理作用研究进展
［J］.天然产物研究与开发，2003，15(2) :171-173.
［7］翟延君，张元桐，何静，等 . 水红花子 HPLC指纹图谱的
研究［J］.中成药，2007，29(8) :1101-1104.
正交实验优化藕节炭炮制工艺的研究
温献业1，刘光明2，曾 颖1
(1. 广东省医学科学院 /广东省人民医院，广东 广州 510080;2. 广东省新兴中药学校，广东 新兴 527400)
摘要 目的:筛选藕节炭炮制的最佳工艺。方法:采用正交试验，以水浸出物及鞣质的含量、凝血时间为指标，
结合成品性状，对藕节炒炭的炮制工艺条件进行优选。结果:藕节炭炮制的最佳工艺为250 ℃烘制 15 min。结论:
所选的最佳炮制工艺较为合理，能为制定藕节炭饮片的质量标准提供参考。
关键词 藕节炭;炮炭工艺;鞣质;浸出物
中图分类号:R283 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2011)12-1854-03
收稿日期:2011-07-29
基金项目:广东省科技计划项目(编号:2009B060600009)
作者简介:温献业(1979-) ，男，主管药师，主要从事医院药学工作;Tel:020-83827812，E-mail:wenxianye88@ 163. com。
* 通讯作者:曾颖，E-mail:zhaozengying@ 163. com。
藕节为睡莲科植物莲 Nelumbo nucifera Gaertn.
的干燥根茎节部。性平，味甘、涩，有收敛止血之功，
炒炭后可增强收敛止血的作用，是中医治疗出血症
的常用药物。2010 年版中国药典一部及《全国中药
炮制规范》中藕节的炮制方法均为炒炭，该法为手
工操作，器具敞开，原药气味散失大，所用“武火”、
“中火”、“文火”等“火候”无客观的温度参考，完全
依靠个人经验判断，各地藕节炭的炮制程度及内在
质量也存在较大的差异，这些因素都直接影响藕节
炭的成品质量及临床疗效。因此，以水浸出物及鞣
质的含量、凝血时间为指标，结合成品性状，对藕节
炭的炮制工艺进行优选，对提高藕节炭成品质量有
重要的意义，并为制定藕节炭饮片质量标准提供依
据。
1 仪器与材料
1. 1 药材、试剂 藕节，购自肇庆市民康大药房连
锁有限公司(产地:广东，批号:20100812) ，经广东
省新兴中药学校彭瑞松副主任药师鉴定为睡莲科植
物莲 Nelumbo nucifera Gaertn. 的干燥根茎节部。
没食子酸标准品购自中国药品生物制品检定所
(批号:110831-200302) ;磷钼钨酸等试液均为 AR
级。
·4581· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 34 卷第 12 期 2011 年 12 月