全 文 ：书高效液相色谱－电化学检测法测定
水红花子中花旗松素和槲皮素的含量
廖雪晴，陶凯丽，刘 琳，杨功俊＊
（中国药科大学药学院，南京２１１１９８）
摘要：建立高效液相色谱－电化学法测定水红花子中花旗松素和槲皮素的含量．高效液相色谱采用ＶＰ－ＯＤＳ
柱，以体积比为１８∶３∶２９的甲醇、乙腈和ｐＨ＝２．５的０．０４ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸氢二钾溶液的混合溶液为流动
相，设定流速为０．８ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测电位为＋０．７５Ｖ（ｖｓ．Ａｇ／ＡｇＣｌ），采用内标法定量处理．在选定色谱
条件下，花旗松素和槲皮素的线性范围分别为０．０４０～５０．０ｍｇ·Ｌ－１和０．０１０～５０．０ｍｇ·Ｌ－１，最低检测
限分别为１５．０μｇ·Ｌ
－１和３．０μｇ·Ｌ
－１．该方法简便，准确率高，重现性好，能获得满意的实验结果．
关键词：高效液相色谱；电化学检测；花旗松素；槲皮素；水红花子
中图分类号：Ｏ ６５８．１；Ｒ ２８４．１ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００７－８２４Ｘ（２０１６）０２－００１８－０５
ＤＯＩ：１０．１９４１１／ｊ．１００７－８２４ｘ．２０１６．０２．００５
水红花子为蓼科植物红蓼（Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｏｒｉｅｎｔａｌｅ Ｌ．）的干燥成熟果实，具有散血消瘀、利水消肿
和消积止痛等功能，常用于症瘕痞块、瘿瘤、食积不消等症状的治疗，也可用于治疗肿瘤、高血压和心
肌病等［１－２］．蓼属植物中含有多种以黄酮类化合物为主的生物活性物质，具有抗自由基、抗氧化、抗癌
和抗病毒等生物活性及药理作用，故蓼科植物中成分的提取和检测方法研究备受关注［３］．杨国勋
等［４］从红蓼果实中成功提取出槲皮素和花旗松素．目前，槲皮素和花旗松素常用的测定方法有光谱
法［５－６］、薄层色谱扫描法［７］、高效液相色谱法［８－１１］和电化学分析法［１２－１３］等．由于槲皮素和花旗松素为水
红花子中两种重要的黄酮类化合物，所以建立快速简便地检测水红花子中槲皮素和花旗松素的方法
显得尤为重要．中草药的成分一般比较复杂，高效液相色谱法具有良好的分析分离能力和重现性，
便于自动化操作，适用于常规复杂体系的分析，故中药材中活性成分的分离与检测主要选择该方
法，检测器一般选择紫外检测器和质谱检测器，前者价格低廉但灵敏度较低，后者灵敏度高但运行
成本较高．电化学检测器［１４］因具有灵敏度高、价格低廉、响应迅速和专属性好等优点而被广泛应用于
医药、生物和化学等领域．由于槲皮素和花旗松素的分子结构中都含有酚羟基，具有良好的电化学活
性，故可实现电化学检测．本文拟联合运用高效液相色谱和电化学检测方法，首次实现对水红花子中
槲皮素和花旗松素的分离与检测，以期为水红花子的内在质量控制提供科学依据，并为中药材的质
量鉴定和生物活性物质的测定提供参考方法．
１ 实验部分
１．１ 仪器与试剂
高效液相色谱－电化学检测系统［１５］的重要组成部分为ＬＣ－１０Ａ高效液相色谱仪（岛津公司，日
本）、电化学薄层池（上海辰华仪器有限公司，上海）和ＣＨＩ－６６０Ｄ电化学工作站（上海辰华仪器有限
收稿日期：２０１５－１２－１４．＊ 联系人，Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｊｙａｎｇ＠ｃｐｕ．ｅｄｕ．ｃｎ．
基金项目：国家自然科学基金资助项目（２１２７５１６２）．
引文格式：廖雪晴，陶凯丽，刘琳，等．高效液相色谱－电化学检测法测定水红花子中花旗松素和槲皮素的含量 ［Ｊ］．扬州大学学
报（自然科学版），２０１６，１９（２）：１８－２２．
第１９卷第２期 扬州大学学报（自然科学版） Ｖｏｌ．１９Ｎｏ．２
２０１６年５月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｙａｎｇｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ） Ｍａｙ ２０１６
书公司，上海）等．选择玻碳电极为工作电极，Ａｇ／ＡｇＣｌ为参比电极，不锈钢管为对电极．ＥＬＧＡ－Ｑ１５
高纯水发生器（ＥＬＧＡ，英国），ＦＥ２０型ｐＨ计（梅特勒－托利多仪器有限公司，上海），Ｎ－１１００旋转蒸
发仪（上海爱麟仪器有限公司，上海），ＳＨＺ－ＤⅢ循环水式真空泵（予华仪器有限公司，河南巩义），
混合纤维微孔滤膜（上海市新亚净化器件厂，上海），有机滤膜（ＮＡＶＩＧＡＴＯＲ，美国）．
甲醇、乙腈（Ｍｅｒｃｋ公司，德国，色谱纯），磷酸氢二钾（国药集团化学试剂有限公司，上海），磷
酸（南京化学试剂有限公司，南京），实验用水均为去离子水．
对照品花旗松素和槲皮素以及内标物水杨酸均购自上海阿拉丁试剂有限公司，避光储存于
－２０℃冰箱中；水红花子样品购自南京市百信药房．
１．２ 对照品溶液的制备
分别称取１０．０ｍｇ花旗松素、槲皮素和内标物水杨酸标准品，各自经甲醇溶解并稀释，于１０ｍＬ
容量瓶中定容，配制成０．５ｇ·Ｌ－１的标准储备液．在４℃下密封保存，待用．
１．３ 供试品溶液的制备
参照文献［１６－１７］，将１．０００ ３ｇ水红花子粉末置于索氏提取器中，向其中加入５０ｍＬ石油醚，
在６０～９０℃下加热回流４ｈ，弃去石油醚液；向药渣中加入５０ｍＬ甲醇，再在８５℃下加热回流３ｈ，
提取液经孔径为０．４５μｍ的混合纤维微孔滤膜过滤并转移至圆底烧瓶，在３５℃下旋转蒸发蒸干滤
液；残留的药渣经甲醇溶解后转移至１０ｍＬ容量瓶，稀释至刻度，摇匀，即获得样品溶液．移取
１．００ｍＬ该样品溶液至５０ｍＬ容量瓶，向其中加入１００μＬ ０．１ｇ·Ｌ
－１水杨酸标准溶液，稀释至
５０ｍＬ；然后经孔径为０．４５μｍ的有机滤膜过滤，过滤后溶液即供试品溶液，待用．
１．４ 色谱条件
色谱柱：ＶＰ－ＯＤＳ柱（１５０ｍｍ×４．６ｍｍ，内径为５μｍ）；柱温为２５℃；以甲醇、乙腈和ｐＨ＝２．５
的０．０４ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸氢二钾溶液的混合液为流动相，三者体积比为１８∶３∶２９，流速为０．８ｍＬ·
ｍｉｎ－１．流动相在使用前须经孔径为０．４５μｍ的混合纤维微孔滤膜过滤并进行超声脱气．设定检测电
位为＋０．７５Ｖ（ｖｓ．Ａｇ／ＡｇＣｌ），进样量为２０μＬ．
２ 结果与讨论
１．花旗松素；２．槲皮素；３．水杨酸．
图１ 高效液相色谱图
Ｆｉｇ．１ ＨＰＬＣ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｃｏｎｔｒｏｌ
２．１ 色谱条件的优化选择
１）流动相．保持其他条件不变，优化选择流动相中甲醇、
乙腈及磷酸氢二钾溶液的体积比．当Ｖ（甲醇）∶Ｖ（乙腈）∶
Ｖ（磷酸氢二钾）＝１８∶３∶２９时，样品中花旗松素、槲皮素及
内标物水杨酸分离峰形良好且保留时间适中，其高效液相色
谱如图１所示．同时，考察了磷酸氢二钾溶液浓度及酸度对
花旗松素和槲皮素色谱峰面积的影响，其待测物色谱峰面积
与内标物色谱峰面积之比（Ｃ待∶Ｃ内）随ｃ（Ｋ２ＨＰＯ４）及体系酸
度的变化关系曲线如图２所示．由图２可知，当磷酸氢二钾溶
液ｐＨ＝２．５或浓度为０．０４ｍｏｌ·Ｌ－１时花旗松素和槲皮素的
色谱峰面积与内标物水杨酸的色谱峰面积之比均达最高值，
说明在此条件下花旗松素和槲皮素的响应最大．故本实验选
择ｐＨ＝２．５的０．０４ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸氢二钾溶液作为流动相组成的一部分．
２）检测电位．图３给出了检测电位对花旗松素和槲皮素的色谱响应．由图３可知，随着检测电
位的增大，花旗松素和槲皮素的色谱峰面积与内标物水杨酸的色谱峰面积之比逐渐增大，当检测电
位高于０．７５Ｖ时，继续增加检测电位，色谱峰面积比基本保持不变．为了同时实现对花旗松素和槲
皮素的电化学检测，本文选择检测电位为０．７５Ｖ．
９１第２期 廖雪晴等：高效液相色谱－电化学检测法测定水红花子中花旗松素和槲皮素的含量
图２ 磷酸氢二钾溶液浓度（ａ）及酸度（ｂ）对花旗松素和槲皮素色谱峰面积的影响
Ｆｉｇ．２ Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ａ）ａｎｄ
ｐＨ（ｂ）ｏｎ ｔｈｅ ｐｅａｋ ａｒｅａ ｏｆ ｔａｘｉｆｏｌｉｎ ａｎｄ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ
图３ 检测电位对花旗松素和槲皮素色谱峰面积的影响
Ｆｉｇ．３ Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｎ
ｔｈｅ ｐｅａｋ ａｒｅａ ｏｆｔａｘｉｆｏｌｉｎ ａｎｄ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ
２．２ 线性范围与检测限
取１．０ｇ·Ｌ－１的花旗松素、槲皮素和水杨酸对
照品储备液适量，采用甲醇稀释定量，分别配制成
０．００５ ０，０．０１０，０．０１５，０．０２０，０．０３０，０．０４０，
０．０５０，０．０７０，０．１０，０．２０，０．５０，１．０，２．０，５．０，
１０．０，２０．０，５０．０ｍｇ·Ｌ－１等一系列浓度的花旗松
素溶液、槲皮素溶液及均含０．２ｍｇ·Ｌ－１水杨酸的
混合溶液．将上述不同浓度的工作溶液按选定的色
谱条件进行测定，以峰面积比（Ｙ）为纵坐标，质量
浓度（Ｘ）为横坐标进行线性回归，结果如表１所
示．由表１可知，在指定范围内，花旗松素和槲皮素
与内标物水杨酸的峰面积比与其质量浓度呈现良好的线性关系，花旗松素和槲皮素的检出限（信噪
比为３）分别为１５．０，３．０μｇ·Ｌ
－１，低于文献［１８－２０］中花旗松素和槲皮素测定的检测限，说明本文
方法具有较高的灵敏度．
表１ 花旗松素与槲皮素的线性范围与检出限（ｎ＝３）
Ｔａｂ．１ Ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔ ｏｆ ｔａｘｉｆｏｌｉｎ ａｎｄ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ（ｎ＝３）
化合物 线性回归方程 相关系数 线性范围／（ｍｇ·Ｌ－１） 检测限／（μｇ·Ｌ－１）
花旗松素 Ｙ＝０．１１５＋０．１９０ Ｘ ０．９９９ １ ０．０４０～５０．０ １５．０
槲皮素 Ｙ＝０．２２０＋１．１６５ Ｘ ０．９９９ ７ ０．０１０～５０．０ ３．０
２．３ 精密度
分别配制３种不同浓度的混合液：Ａ：０．２０ｍｇ·Ｌ－１花旗松素＋０．２０ｍｇ·Ｌ－１槲皮素
＋０．２ｍｇ·Ｌ－１水杨酸；Ｂ：１．０ｍｇ·Ｌ－１花旗松素＋１．０ｍｇ·Ｌ－１槲皮素＋０．２ｍｇ·Ｌ－１水杨酸；Ｃ：
１０．０ｍｇ·Ｌ－１花旗松素＋１０．０ｍｇ·Ｌ－１槲皮素＋０．２ｍｇ·Ｌ－１水杨酸．在同一天内采用本文方法对
３种溶液进行５次连续平行测定响应值，得到花旗松素、槲皮素的保留时间及两者与水杨酸的峰面积
比，计算平均相对标准偏差以评价其日内精密度；连续５天，每日１次对上述３种溶液进行色谱实
验，每组实验进行３次平行测定，计算平均相对标准偏差以评价其日间精密度，结果如表２所示．由
表２可见，本文方法具有良好的精密度．
２．４ 实际样品的含量测定
在本文实验条件下对供试品溶液进行色谱实验，重复测定５次，根据线性回归方程计算得
到实际样品中花旗松素的含量为０．９７７ ３ｍｇ·ｇ－１，相对标准偏差为４．３％；槲皮素的含量为
０．１０４ ９ｍｇ·ｇ－１，相对标准偏差为５．３％．
０２ 扬州大学学报（自然科学版） 第１９卷
表２ 花旗松素与槲皮素的精密度（ｎ＝５）
Ｔａｂ．２ Ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ ｔｅｓｔ ｏｆ ｔａｘｉｆｏｌｉｎ ａｎｄ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ（ｎ＝５）
化合物
相对标准偏差／％
保留时间
日内精密度
Ａ Ｂ Ｃ
日间精密度
Ａ Ｂ Ｃ
待测物与内标物的峰面积之比
日内精密度
Ａ Ｂ Ｃ
日间精密度
Ａ Ｂ Ｃ
花旗松素 ０．２３ ０．１６ ０．４５ ０．８４ ０．６２ ０．５６ １．２ １．１ ２．４ ２．７ ３．３ ３．１
槲皮素 ０．３８ ０．１４ ０．７３ ０．５４ １．１０ １．２０ １．６ １．３ ２．５ ３．４ ３．６ ２．９
为了验证本文方法的准确性，准确称取３份１．０００ ３ｇ水红花子，分别添加混合标准物质，进行添
加回收率试验，对每个添加水平平行测定５次，测定回收率如表３所示．由表３可见，花旗松素的回
收率为９７．００％～１０５．００％，槲皮素的回收率为９５．００％～１０３．００％，该方法测定花旗松素和槲皮素
的准确度高，可用于中药材水红花子中花旗松素和槲皮素的含量测定，为该药材的质量标准评价提
供了参考依据．
表３ 水红花子中花旗松素与槲皮素的回收率试验（ｎ＝５）
Ｔａｂ．３ Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｔａｘｉｆｏｌｉｎ ａｎｄ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ｉｎ Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｏｒｉｅｎｔａｌｅ（ｎ＝５）
化合物 添加量／（ｍｇ·Ｌ－１） 测量值／（ｍｇ·Ｌ－１） 回收率／％ 相对标准偏差／％
花旗松素
０．００
０．２０
１．００
１０．０
１．９６
２．１７
２．９３
１１．９２
１０５．００
９７．００
９９．６０
３．９
４．６
３．７
槲皮素
０．００
０．２０
１．００
１０．０
０．２１
０．４０
１．２４
１０．２５
９５．００
１０３．００
１００．４０
４．５
４．２
３．８
参考文献：
［１］ 郑宗建，翟延君，初正云，等．ＨＰＬＣ测定不同采收期水红花子中的槲皮素 ［Ｊ］．中国中药杂志，２００９，３４（６）：
７８３－７８４．
［２］ ＷＥＩ Ｙａｎ，ＣＨＥＮ Ｘｉａｏｑｉｎｇ，ＪＩＡＮＧ Ｘｉｎｙｕ，ｅｔ ａｌ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔａｘｉｆｏｌｉｎ ｉｎ Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｏｒｉｅｎｔａｌｅ ａｎｄ ｓｔｕｄｙ
ｏｎ ｉｔｓ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．Ｊ Ｆｏｏｄ Ｃｏｍｐｏｓ Ａｎａｌ，２００９，２２（２）：１５４－１５７．
［３］ 宋青，刘园，楼一层．红蓼植物的研究概述 ［Ｊ］．中国药师，２０１０，１３（６）：８７４－８７６．
［４］ 杨国勋，宋蕾，李奎莲，等．红蓼果实化学成分的研究 ［Ｊ］．中国药学杂志，２００３，３８（５）：３３８－３４０．
［５］ ＨＵ Ｙｕｆｅｉ，ＦＥＮＧ Ｔｉｎｇ，ＬＩ Ｇｏｎｇｋｅ．Ａ ｎｏｖｅｌ ｓｏｌｉｄ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｆａｓｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ｉｎ
ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｓａｍｐｌｅｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ－Ａｌ（Ⅲ）ｃｏｍｐｌｅｘ ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ ｐｏｌｙｍｅｒ［Ｊ］．Ｓｐｅｃｔｒｏｃｈｉｍ Ａｃｔａ Ａ，２０１４，
１１８：９２１－９２８．
［６］ ＬＩＵ Ｐｉｎｇ，ＺＨＡＯ Ｌｉａｎｇｌｉａｎｇ，ＷＵ Ｘｉａ，ｅｔ ａｌ．Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｆ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ ｂｙ ｓｉｌｖｅｒ ｎａｎｏｐ－
ａｒｔｉｃｌｅｓ ａｎｄ ｉｔｓ ａｎａｌｙｔｉｃａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｓｐｅｃｔｒｏｃｈｉｍ Ａｃｔａ Ａ，２０１４，１２２：２３８－２４５．
［７］ ＡＭＩＲ Ｍ，ＭＵＪＥＥＢ Ｍ，ＡＨＭＡＤ Ｓ，ｅｔ ａｌ．Ｄｅｓｉｇｎ ｅｘｐｅｒｔ－ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ＨＰＴＬＣ
ｍｅｔｈｏｄ：ａｎ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ａｎｄ ｒｕｔｉｎ ｉｎ Ｐｕｎｉｃａ ｇｒａｎａｔｕｍ，Ｔａｍａｒｉｎｄｕｓ ｉｎｄｉ－
ｃａ ａｎｄ Ｐｒｕｎｕｓ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍ Ｍｅｔｈ，２０１３，４（２）：６２－６７．
［８］ ＳＵＮ Ｚｈｉ，ＺＨＡＯ Ｌｏｎｇｓｈａｎ，ＺＵＯ Ｌｉｈｕａ，ｅｔ ａｌ．Ａ ＵＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ
ｓｉｘ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ，ｇａｌｉｃ ａｃｉｄ ａｎｄ ５，８－ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ－１，４－ｎａｐｈｔｈｏｑｕｉｎｏｎｅ ｉｎ ｒａｔ ｐｌａｓｍａ ａｎｄ ｉｔｓ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｔｏ ａ ｐｈａｒｍａ－
ｃｏｋｉｎｅｔｉｃ ｓｔｕｄｙ ｏｆ Ｃｏｒｔｅｘ Ｊｕｇｌａｎｄｉｓ Ｍａｎｄｓｈｕｒｉｃａｅ ｅｘｔｒａｃｔ［Ｊ］．Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｂ，２０１４，９５８：５５－６２．
［９］ ＩＲＩ Ａ，ＰＲＯＳＥＮ Ｈ，ＪＥＬＩＫＩ －ＳＴＡＮＫＯＶ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｔｒｉｘ ｅｆｆｅｃｔ ｉｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｍｅ
ｂｉｏｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ ｆｏｏｄ ｓａｍｐｌｅｓ ｂｙ ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ ｍｅｔｈｏｄ［Ｊ］．Ｔａｌａｎｔａ，２０１２，９９：７８０－７９０．
［１０］ ＺＨＥＮＧ Ｓｈｉｒｕｉ，ＭＡ Ｚｈｉｙｕａｎ，ＨＡＮ Ｈａｉｘｉａ，ｅｔ ａｌ．Ｐｏｓｔ－ｃｏｌｕｍｎ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ａｄｊｕｓｔｍｅｎｔ：ａ ｓｔｒａｔｅｇｙ ｔｏ ｅｌｉｍｉ－
ｎａｔｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒａｄｉｃｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ａｎｄ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ
ｉｎ ｒａｔ ｐｌａｓｍａ［Ｊ］．Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ Ｂｉｏｍｅｄ Ａｎａｌ，２０１４，９５：１７６－１８３．
１２第２期 廖雪晴等：高效液相色谱－电化学检测法测定水红花子中花旗松素和槲皮素的含量
［１１］ ＨＵＡＮＧ Ｙｏｎｇ，ＺＨＡＮＧ Ｐｅｎｇ，ＨＥ Ｆｅｎｇ，ｅｔ ａｌ．Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｏｕｒ ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ
Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｏｒｉｅｎｔａｌｅ Ｌ．ｉｎ ｄｏｇ ｐｌａｓｍａ ｂｙ ＵＰＬＣ－ＥＳＩ－ＭＳ／ＭＳ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｔｏ ｐｈａｒｍａｃｏｋｉ－
ｎｅｔｉｃ ｓｔｕｄｉｅｓ［Ｊ］．Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｂ，２０１４，９５７：９６－１０４．
［１２］ ＭＡＮＯＫＡＲＡＮ Ｊ，ＭＵＲＵＧＡＮＡＮＴＨＡＭ Ｒ，ＭＵＴＨＵＫＲＩＳＨＮＡＲＡＪ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｐｌａｔｉｎｕｍ－ｐｏｌｙｄｏｐａｍｉｎｅ
＠ＳｉＯ２ｎａｎｏｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｅｌｅｃｔｒｏｄｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ［Ｊ］．Ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｉｍ
Ａｃｔａ，２０１５，１６８：１６－２４．
［１３］ ＷＡＮＧ Ｆｅｉ，ＷＵ Ｙａｎｊｕ，ＬＵ Ｋｕｉ，ｅｔ ａｌ．Ａ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｖｏｌｔａｍｍｅｔｒｉｃ ｓｅｎｓｏｒ ｆｏｒ ｔａｘｉｆｏｌｉｎ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｇｒａｐｈｅｎｅ
ｎａｎｏｓｈｅｅｔｓ ｗｉｔｈ ｃｅｒｔａｉｎ ｏｒｉｅｎｔａｔｉｏｎ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｇｌａｓｓｙ ｃａｒｂｏｎ ｅｌｅｃｔｒｏｄｅ［Ｊ］．Ｓｅｎｓｏｒ Ａｃｔｕａｔ Ｂ，２０１５，２０８：１８８－
１９４．
［１４］ ＤＯＮＧ Ｐｉｎｇ，ＱＩＵ Ｐｅｉｊｕ，ＺＨＵ Ｙｉ，ｅｔ ａｌ．Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｏｕｒ ５－ｈｙｄｒｏｘｙ ｐｏｌｙｍｅｔｈｏｘｙｆｌａｖｏｎｅｓ
ｂｙ ｒｅｖｅｒｓｅｄ－ｐｈａｓｅ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｗｉｔｈ ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ，
２０１０，１２１７（５）：６４２－６４７．
［１５］ ＺＨＡＮＧ Ｒｏｎｇ，ＷＡＮＧ Ｌｅｉ，ＬＩＵ Ｓｈａｎｊｉｎｇ，ｅｔ ａｌ．Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ
ｉｎ Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａ ｃｏｒｄａｔａ Ｔｈｕｎｂ．ｂｙ ｒｅｖｅｒｓｅｄ－ｐｈａｓｅ ｈｉｇｈ－ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｗｉｔｈ ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ
ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ Ｌｉｑ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｒｅｌａｔ Ｔｅｃｈｎｏｌ，２０１５，３８（６）：７３３－７３９．
［１６］ 张元桐，翟延君，康廷国，等．ＨＰＬＣ测定不同地区水红花子中花旗松素含量 ［Ｊ］．中国中药杂志，２００７，
３２（２０）：２１９０－２１９１．
［１７］ 谢周涛，何再安，刘焱文．反相高效液相色谱法测定水红花子中槲皮素的含量 ［Ｊ］．药物分析杂志，２００６（９）：
１２９５－１２９６．
［１８］ ＣＨＥＮ Ｌｉａｎｇ，ＹＩＮ Ｙｅ，ＹＩ Ｈｏｎｇｗｅｉ，ｅｔ ａｌ．Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｉｖｅ ｍａｊｏｒ ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ
Ｒｈｉｚｏｍａ Ｓｍｉｌａｃｉｓ Ｇｌａｂｒａｅ ｂｙ ｈｉｇｈ－ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ Ｂｉｏｍｅｄ Ａｎａｌ，２００７，
４３（５）：１７１５－１７２０．
［１９］ ＤＩＮＥＳ Ｋ Ｖ，ＰＲＩＹＡ Ｒ Ｐ Ｖ，ＳＡＮＤＥＥＰ Ｋ Ｓ，ｅｔ ａｌ．ＬＣ－ＥＳＩ－ＭＳ／ＭＳ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ｉｎ ｒａｔ ｐｌａｓｍａ ａｆｔｅｒ
ｏｒａｌ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｍｅｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ，２０１５，２９（１１）：１７３１－１７３６．
［２０］ ＨＵＡＮＧ Ｙｕｅ，ＬＵ Ｗｅｎｗｅｉ，ＣＨＥＮ Ｂｏ，ｅｔ ａｌ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ １３ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｉｎ ｒｉｃｅ ｗｉｎｅ ｂｙ ｈｉｇｈ－
ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ Ａｎａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ，２０１５，８（４）：８２５－８３２．
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔａｘｉｆｏｌｉｎ ａｎｄ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ｉｎ Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｏｒｉｅｎｔａｌｅ ｂｙ
ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｗｉｔｈ ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ
ＬＩＡＯ Ｘｕｅｑｉｎ，ＴＡＯ Ｋａｉｌｉ，ＬＩＵ Ｌｉｎ，ＹＡＮＧ Ｇｏｎｇｊｕｎ＊
（Ｓｃｈ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｃｈｉｎａ Ｐｈａｒｍ Ｕｎｉｖ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１１１９８，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ ｒａｐｉｄ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）ｗｉｔｈ ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ
ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ（ＨＰＬＣ－ＥＣＤ）ｉｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔａｘｉｆｏｌｉｎ ａｎｄ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ｉｎ Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ
ｏｒｉｅｎｔａｌｅ Ｌ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｉｓ ｃａｒｒｉｅｄ ｏｕｔ ｏｎ ａ ＶＰ－ＯＤＳ ｃｏｌｕｍｎ ａｎｄ ａ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ
ｃｏｍｐｒｉｓｅｄ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｏｌ，ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ａｎｄ ０．０４ｍｏｌ·Ｌ－１ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ＝２．５）ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｖｏｌ－
ｕｍｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ １８∶３∶２９ａｔ ａ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｏｆ ０．８ｍＬ·ｍｉｎ－１．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｉｓ ｓｅｔ ａｔ＋０．７５Ｖ
（ｖｓ．Ａｇ／ＡｇＣｌ）．Ｔｈｅ ｑｕａｎｔｉｆｉｅｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｉｎｔｅｒｎａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ ｃｕｒｖｅｓ ｉｓ ｕｓｅｄ．Ｔｈｅ ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ ｏｆ
ｔａｘｉｆｏｌｉｎ ａｎｄ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ａｒｅ ｌｉｎｅａｒ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ０．０４０～５０．０ｍｇ·Ｌ－１ ａｎｄ ０．０１０～５０．０ｍｇ·Ｌ－１ ｗｉｔｈ
ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔ ｏｆ １５．０μｇ·Ｌ
－１ ａｎｄ ３．０μｇ·Ｌ
－１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｐｒｏｐｏｓｅｄ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，
ａｃｃｕｒａｔｅ，ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ，ａｎｄ ｓａｔｉｓｆａｃｔｏｒｙ ｒｅｓｕｌｔｓ ａｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ；ｔａｘｉｆｏｌｉｎ；ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ；
Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｏｒｉｅｎｔａｌｅ
（责任编辑 林 子）
２２ 扬州大学学报（自然科学版） 第１９卷