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生晒参、红参与平性参对气虚大鼠作用的比较研究



全 文 :第 20卷 第 4期
Vol.20 No.4
2014年 4月
April.2014Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
生晒参、红参与平性参对气虚大鼠作用的
比 较 研 究*
赵 远1,孙 娜1,刘蓬蓬1,徐 珊1,张 凡1,2,贾天柱1,2(通讯作者)
(1.辽宁中医药大学,辽宁 大连 116600;2.辽宁省中药炮制工程技术研究中心,辽宁 大连 116600)
[摘要] 目的:比较生晒参、红参与平性参对气虚大鼠的作用。方法:通过游泳劳损法结合限食法实验复制大鼠气虚证模
型,分别给予生晒参、红参与平性参混悬液灌胃,比较三者对气虚大鼠的作用。结果:生晒参、红参与平性参能够增加大鼠耐
疲劳游泳时间,降低cAMP的含量和cAMP/cGMP比值,并且升高cGMP的含量;同时能够降低LDH的活性。结论:生晒参、红参与
平性参对气虚大鼠均有治疗作用,人参各高剂量组差异无统计学意义,在数值上显示生晒参与平性参优于红参。
[关键词] 生晒参;红参;平性参;气虚
[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X(2014)04-0012-04
Research on The Effect of Sun-dried Ginseng, Red Ginseng and Mild Property
Ginseng on Qi Deficiency of Rats
ZHAO Yuan1, SUN Na1, LIU Peng-peng1, XU Shan1, ZHANG Fan1,2, JIA Tian-zhu1,2 (Corresponding Author)
(Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, Dalian Liaoning 116600; 2. Liaoning Province Traditional Chinese
Medicine Engineering Technology Research Center, Dalian Liaoning 116600)
[Abstract] Objective: To compare the effect of sun-dried ginseng, red ginseng and mild property ginseng on Qi deficien-
cy of rats. Methods: Swimming strain method and Caloric restriction method were applied to copy Qi deficiency syndrome
model of rats, which were given sun-dried ginseng, red ginseng and mild property ginseng suspension gavage respectively; the
effect on qi deficiency rats was compared. Results: Sun-dried ginseng, red ginseng and mild property ginseng can increase
rats fatigue endurance swimming, reduce the content of cAMP and cAMP/cGMP ratio, elevate the content of cGMP, as well as
reduce the activity of LDH. Conclusions: Sun-dried ginseng, red ginseng and mild property ginseng and provide therapeutic
effect of qi deficiency rats, without significant difference between the high dose group. un-dried ginseng, mild property ginseng
are better than red ginseng, just in values.
[Key words] Sun-dried ginseng; Red ginseng; Mild property ginseng; Qi deficiency
气虚证由劳倦内伤或重病、久病后元气不足导致,
具有脏腑组织功能低下,抗病力减弱的病理变化。人
参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津养血、安
神益智之功效[1]。《药性论》中提到:“人参主五脏气不
足”,说明人参对气虚证具有较好的治疗作用,而人
参的炮制品主要有生晒参与红参,查阅中外文献,关
于生晒参与红参对气虚作用的对比,目前尚未见文献
报道,而平性参更无研究,各种人参对气虚作用的对
比,有待于深入研究。本实验通过对比生晒参与红参、
平性参对大鼠气虚的治疗效果,探讨其作用与机理,
为临床用药提供依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物 健康Wistar大鼠80只,雌雄各半,(200±
5)g,6-8周龄,由大连医科大学实验动物中心提供(许
可证号:SCXK(辽)2008-0002)。
1.2 主要试剂、药物及仪器
1.2.1 主要试剂 大鼠环磷酸鸟苷(cGMP)酶联免
疫试剂盒;大鼠环磷酸腺苷(cAMP)酶联免疫试剂
盒;乳酸脱氢酶(LDH)测试盒,均购自南京建成生物
科技有限公司。
1.2.2 实验药物 人参购于辽宁省桓仁县,经对照中
国药典2010版鉴定为五加科植物人参。生晒参:取净
制鲜参,切片,置烘箱内40℃-50℃烘干。红参:取净
制鲜参,切片,在常压蒸制2 h取出,置烘箱内40 ℃-
50 ℃烘干;平性参:取净制鲜参,切片,拌入辅料(专*基金项目:国家中医药管理局行业专项课题(19种生熟异用
中药饮片临床规范使用研究,编号:201107007)
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DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2014.04.006
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利配方)蒸制,置烘箱内40℃-50℃烘干。
1.2.3 主要仪器 Multiskan-MK3型酶标仪(赛默飞
世尔仪器有限公司);SHA-C(7084)型恒温振荡器(常
州国华电器有限公司);TGL-16C型离心机(上海安亭
科学仪器厂);BS600电子天平(上海有声衡器有限公
司);游泳水槽。
1.3 实验方法
1.3.1 造模[2] 各组给相应试剂和药物药40 min后,
负重(10 g/100 g)放入(30±5)℃,深(35±3)cm水槽
游泳,进行力竭游泳,从放入水槽开始计时,当每组
大鼠出现自然沉降的时间为其耐疲劳游泳时间,当
全组50%的大鼠出现自然沉降时,全部停止游泳。第
15天给水给药后不再游泳。
1.3.2 分组 随机分为对照组、模型组、生晒参高剂
量组 [0.32 g/(100g·d)]、生晒参低剂量组 [0.081 g/
(100g·d)]、红参高剂量组[0.32 g/(100g·d)]、红参低剂
量组 [0.081 g/(100g·d)]、平性参高剂量组 [0.32 g/
(100g·d)]与平性参低剂量组[0.081 g/(100g·d)](以下
简称生高组、生低组、红高组、红低组、平高组和平低
组),每组10只。
1.3.3 实验给药 在每次造模前40 min,空白组常规
饲养,自由饮食饮水,其余各组控制饮食(喂食量为
平时的1/2),每天灌胃给蒸馏水1 mL/100 g,人参各
组每天灌胃给药(1 mL/100 g)。
1.4 实验观察指标
1.4.1 体质状况 观察各组大鼠精神、皮肤、大便等
情况,以判断是否符合气虚模型及气虚程度。
1.4.2 体重指标 在实验开始的第0、3、6、9、12和15
天分别于喂食后2 h,测量体重,比较大鼠体重变化。
1.4.3 游泳时间 记录第14天每只大鼠游泳时间。
1.4.4 对发生肠胀气的影响 在末次给药后1 h处
死各组动物,迅速解剖检查其肠胀气发生数。将其回
肠和近回肠端放入水中,以其浮出水面者为回肠胀
气、以下沉者为不胀气[3]。
1.4.5 血浆cAMP、cGMP 动物用乙醚麻醉后,腹主
动脉采血1mL不抗凝,3500 r/min离心10 min,取血
清,按照试剂盒说明书操作要求,用酶标仪测定血清
cAMP和cGMP含量。
1.4.6 血清乳酸脱氢酶(LDH) 依上述方法采血
后,离心,取血清,用酶标仪测定血清LDH含量。
1.5 统计学方法 用IBM SPSS Statistics 19.0统计
学软件,结果以均数±标准差(x±s)表示,采用方差分
析。
2 结 果
2.1 体质状况 每天观察实验动物的精神、活动、皮
毛、尾色、大便,有无缩肩拱背、觅食等情况,并3 d记
录一次。量化分级方法:A.精神:“+++”表示精神萎
靡,眼睑下垂,反应迟钝;“++”表示倦怠乏力,反应
不灵敏;“+”动作缓慢,缺乏灵气;“-”活泼好动。B.皮
肤及毛发:“+++”全身毛发枯槁,竖立,皮肤松弛,皮
下无脂肪,抓之触骨;“++”背部毛发干枯,无光泽,
皮肤松弛,少许脂肪,易抓取;“+”皮肤略松弛,松软,
张力减小,背部毛发少光泽;“-”皮肤与脂肪连接紧
密,柔韧有弹性,毛发光亮,柔顺。C.鼻、尾颜色:“+++”
苍白或透青色:“++”淡红少泽;“+”粉红光淡;“-”红
润有光泽;D.大便:“+++”大便稀溏;“++”大便不成
形,但不太稀;“+”大便粘软有形;“-”大便干、成形。
[注:“+”累计7个以上,(包括7个),属气虚重证;“+”累
计5-7,(包括5个),属气虚轻证。]E.缩肩拱背、觅食有
无。根据“+”数,人参各炮制品组对气虚均有治疗或
缓解作用,生晒参组和平高组治疗作用较好。(见表1、
表2)
表1 模型组大鼠体质状况表
体质状况 0 d 3 d 6 d 9 d 12 d 15 d
精神 - - + ++ +++ +++
皮肤及毛发 - + + ++ +++ +++
鼻、尾颜色 - + ++ ++ +++ +++
大便 - - - + + ++
合计(+) 0 2 4 7 10 11
缩肩拱背 无 无 无 有 有 有
觅食 无 无 无 有 有 有
表2 第15 d各组大鼠“+”总数表
组别 模型组 空白组 生高组 生低组 红高组 红低组 平高组 平低组
“+”数 11 0 2 4 5 7 3 5
2.2 体重变化 每3 d测定1次体重,实验第1天各组
大鼠体重与正常组大鼠体重比较无明显差异;在实验
第15天,各组体重比较出现明显差异,从体重趋势图
可以看出生高组和平高组的作用较好。(见图1)
图1 生晒参、红参和平性参对气虚大鼠的体重影响
2.3 游泳时间 人参各组对大鼠的系重游泳时间
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组别
组别 只数 cAMP/cGMP
均有延长的作用(P<0.05),生高组、红高组、平高组
对延长大鼠的游泳时间均有显著作用(P<0.05),高
剂量各组的作用显著优于低剂量组;与红参高剂量组
对比,平性参高剂量可延长系重游泳时间,差异有统
计学意义(P<0.05),更接近空白组数据,说明平性参
高剂量组在大鼠耐疲劳游泳方面作用最好。(见表3)
2.4 对发生肠胀气的影响 人参各组均能够减少
气虚大鼠的肠胀气发生率,其中以生高组最为明显。
(见表3)
表3 对气虚大鼠游泳时间和发生肠胀气的影响 (x±s)
给药剂量 动物只数 游泳时间 肠胀气数 发生率
[g/(100 g·d)] (只) (S) (只) (%)
空白组 - 10 449.80±6.36 1 10
模型组 - 10 257.00±15.57a 10 100
生低组 0.081 10 285.00±19.67abc 5 50
生高组 0.324 10 398.90±18.14ab 2 20
红低组 0.081 10 271.80±32.96abc 5 50
红高组 0.324 10 364.20±23.69ab 4 40
平低组 0.081 10 301.00±10.45abc 5 50
平高组 0.324 10 438.00±12.74bc 4 40
注:与空白组比较,aP<0.05;与模型组比较,bP<0.05;与红
高组比较,cP<0.05。
2.5 对气虚大鼠cAMP、cGMP及cAMP/cGMP的影响
模型组大鼠的cAMP、cAMP/cGMP比值均增高(P<0.01),
但cGMP下降(P<0.01或P<0.05);各治疗组均能降低
cAMP、cAMP/cGMP比值(P<0.01),并且能升高cGMP
的含量(P<0.01),说明生晒参、红参和平性参对cAMP、
cGMP及cAMP/cGMP均有影响;比较各组间的作用,
生晒参组与平性参组略优于红参组,但差异无统计学
意义(P>0.05)。(见表4)
2.6 对气虚大鼠LDH活性的影响 各治疗组对
LDH的活性均有降低的作用,其中以红高组、红低组
与平高组作用最为显著(P<0.05或P<0.01)。(见表4)
表4 对大鼠cAMP、cGMP和LDH活性的影响 (x±s)
cAMP cGMP LDH
(nmol/L) (nmol/L) (mmol/L)
空白组 10 11.76±0.51 9.04±0.56 1.30±0.04 2.36±0.64
模型组 10 16.78±0.77d 5.10±0.60d 3.35±0.55d 3.53±0.35d
生低组 10 14.93±0.82bde 5.81±0.28ade 2.57±0.19bde 3.33±0.48de
生高组 10 12.13±0.60b 7.68±0.43bd 1.58±0.09bd 2.99±0.20ac
红低组 10 15.06±0.68bde 5.44±0.29de 2.76±0.05bde 2.69±0.97be
红高组 10 12.78±1.87bc 7.40±1.10bd 1.73±0.08bd 2.61±0.46b
平低组 10 14.03±0.66bde 6.11±0.20bde 2.30±0.09bde 3.06±0.62d
平高组 10 11.99±0.68b 7.98±1.32bd 1.53±0.17bc 2.84±0.20b
注释:与模型组比较,aP<0.05,bP<0.01;与空白组比较,cP<
0.05,dP<0.01;与红高组比较,eP<0.05。
3 讨 论
劳则气损,过度劳累则会导致气虚,则气化作用
减弱,物质转化和能量转化的作用就会降低。气虚动
物则会出现毛乱,枯槁无光泽,体质量下降等现象。
本研究中根据大鼠体质状况的研究,计算大鼠“+”数
量,模型组“+”数量与空白组“+”数量比较结果表明
气虚大鼠的造模成功[4],从各组间大鼠“+”数量对比
结果表明人参各组对气虚大鼠均有治疗作用,对比各
组“+”数,表明出生晒参组和平高组作用较好;通过
观察各组人参对气虚大鼠的游泳时间的影响,各实
验治疗组均有延长作用,其中平性高组的延长效果
最好,而各组对体重的影响,其中生高组和平性高组
的作用最好,在对大鼠发生肠胀气的影响中,与其他
各组比较生高组的作用最好。
气虚则卫气不足,导致免疫功能低下,结合现代
医学研究,cAMP、cGMP是调节细胞功能的重要物
质[5],cAMP、cGMP的平衡改变,会引起细胞功能发生
明显变化。一般认为cAMP与cGMP的含量与机体免疫
调节有关。本实验中,模型组大鼠的cAMP、cAMP/cGMP
比值增高,但cGMP含量下降,说明气虚大鼠免疫功
能降低。生晒参、红参和平性参都能使cAMP和cAMP/
cGMP比值降低,并且使cGMP的含量升高,说明生晒
参、红参和平性参对cAMP、cGMP和cAMP/cGMP均有影
响,高剂量组的作用优于低剂量组;生晒参与平性参
略优于红参,但差异无统计学意义(P>0.05)。
“人之所有者,血与气耳”(《素问·调经论》),气
与血在人体生命活动中占有着重要作用。气能生血,
血能载气,气与血相生相行。故气虚则导致血虚,“气
血相生,气虚则导致血虚”,气虚大鼠必将伴随着血
虚的症状,本实验选用LDH的活性来判断各组对大鼠
血虚的影响,研究表明LDH广泛存在于心肌细胞的
胞浆中,临床常用于判断心肌细胞缺血情况[6]。本研
究结果显示,模型组LDH的活性增高,说明气虚型组
大鼠可能存在心肌损伤,其原因可能为气虚则血虚,
血虚则导致血液对心脏的濡养不足,导致心脏等组织
缺血缺氧,出现心肌损伤,各治疗组能够降低气虚大
鼠的LDH含量说明人参各制品能够缓解由气虚引起
大鼠的心肌损伤。
人参在治未病方面表现出良好的作用,但是在服
用过程中,发现人参有致使人流鼻血等温燥之性,正
是这种温燥之性阻碍了人参的广泛应用,本实验根
据“相反为制”的传统炮制原则,使用一种新的专
利辅料炮制人参,该方法能够降低导致“上火”的成
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小鼠抗衰老指标的影响[6,7]。从实验结
果看,与模型组小鼠比较,蒙药手掌-37味丸不同剂
量组及维生素E组小鼠血清SOD、CAT、GSH-Px的活
性明显升高,MDA的含量降低。衰老机体的自由基
代谢发生改变,对自由基的清除能力下降,其结果是
自由基对机体的损伤增加,严重影响细胞的结构和
功能[8]。超氧化物歧化酶(SOD)是体内重要的抗氧化
酶之一,可以抑制和阻断自由基反应,降低自由基
代谢产物丙二醛的生成,SOD的活力反应了机体清
除自由基的能力,SOD清除超氧离子自由基,但生成
过氧化氢,CAT分解过氧化氢,两者协同作用才能
彻底清除超氧离子。GSH-Px主要是清除过氧化脂
质,以阻断自由基的链式反应,MDA是脂质过氧化的
主要产物之一,其水平随着年龄的增加而升高,可
反映自由基对机体的损伤程度[9,10]。蒙药手掌参-37味
丸能够提高D-半乳糖致衰老小鼠血清中抗氧化酶
(SOD、CAT、GSH-Px)的活性和抑制自由基代谢产
物(MDA)的生成,能使机体紊乱的自由基代谢得到
改善,可减轻脂质过氧化损伤,发挥其抗衰老作用。
蒙药手掌参-37味丸能够清除自由基,抑制脂
质过氧化物的生成等功效,具有抗衰老,提高免疫力
的作用。本研究为将蒙药手掌参-37丸的开发利用
提供了实验依据,有关蒙药手掌参-37味丸抗衰老作
用机制需要进一步研究和探讨。
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(收稿日期:2013-08-28 编辑:朱民)
分——人参皂苷Ro含量[7]。
本次实验结果表明,生晒参、红参与平性参均为
人参的炮制品,在对气虚大鼠的治疗作用中,生晒参
与平性参在数值上优于红参,可能与生晒参补脾益
肺的功效有关。然而在研究LDH的活性方面,发现
红参组的作用略强,可能与红参复脉固脱的功效有
关,但是红参与生晒参对血虚作用的对比还有待进
一步研究。
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(收稿日期:2013-09-02 编辑:蒋凯彪)
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