全 文 ：一枝蒿有效部位
对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用＊
孟繁龙 1 ,李治建 2 ,斯拉甫 ·艾白 2, 3 ,范晓红 1 ,周　露 1
(1.新疆石河子大学药学院 ,石河子　832000;2.新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所 ,乌鲁木齐　830049;3.新
疆维吾尔自治区维吾尔医医院 ,乌鲁木齐　830049)
[摘　要 ] 　目的　筛选四氯化碳(CCl
4
)致小鼠急性肝损伤最佳模型 , 并研究一枝蒿有效部位(AR)对 CCl
4
所致小
鼠急性肝损伤的保护作用。方法　采用不同浓度的 CCl4花生油溶液予小鼠腹腔注射 , 测定小鼠血清中天冬氨酸氨基转
移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)的含量。一枝蒿有效部位予小鼠连续灌胃 5 d, 用最佳 CCl4模型造成小鼠急性肝
损伤 , 测定小鼠血清中 ALT和 AST的含量 ,观察光镜下小鼠肝组织的病理变化。结果　0.11% CCl4模型组为最佳模型。
AR低 、中 、高剂量组均能抑制 CCl
4
引起的急性肝损伤所致的 ALT、AST升高。结论　AR对 CCl
4
所致急性肝损伤的小鼠
有保护作用。
[关键词 ] 　一枝蒿有效部位;损伤 ,肝 , 急性;四氯化碳
[中图分类号 ] 　R285　　　[文献标识码 ] 　A　　　[文章编号 ] 　1004-0781(2010)10-1266-03
ProtectiveEffectofArtemsiaRupestrisL.ExtractonCCl4 -inducedAcuteLiverInjuryinMice
MENGFan-long1 , LIZhi-jian2 , SILAPU· Aibai2, 3 , FANXiao-hong1 , ZHOULu1 (1.ColegeofPharmacy,
ShiheziUniversity, Xinjiang832000, China;2.XinjiangInstituteofTraditionalUighurMedicine, Urumqi
830049, China;3.UighurMedicineHospitalofAutonomousRegion, Urumqi830049, China)
ABSTRACT　Objective　ToinvestigatetheprotectiveefectofArtemsiaRupestrisL.(AR)extractonCCl4-inducedacuteliverinjuryinmice.　Methods　TheratsweregivenwithdifferentlevelsofCCl
4
byintraperitonealinjection.Theserum
contentsofALTandASTweredetected.AfterintragastricadministrationofARextractfor5 days, theratswereinjectedwith
optimumdoseofCCl
4
toinduceacuteliverinjury.TheserumlevelsofALTandASTweredetected.Pathologicalchangeswere
examedbyHE.　Results　Thesampelof0.11% CCl
4
solutionistheoptimalsample.ARextractcouldsignificantlydecrease
theactivitiesofALT, AST.ARextractcouldalsoprotecttheliverfrompathologicalinjury.　Conclusion　ARextractprotects
liverfromacutehepatictoxicityinducedbyCCl4.KEYWORDS　ArtemsiarupestrisL.extract;Injury, liver, acute, CCl4
　　一枝蒿(ArtemsiarupestrisL.)为菊科多年生草本
植物 。我国主要分布在新疆海拔 1 600 ～ 4 500m森林
草原带;哈萨克斯坦 、俄罗斯 、蒙古等欧洲地区亦有分
布 [ 1] 。分析表明 ,该植物所含的化合物主要为酮酸
类 、黄酮类 、香豆素类 、糖苷类等 。据报道 ,一枝蒿具有
保肝抗炎 、调节免疫 、抗变态反应 、抗氧化 、抗病毒等作
用 [ 2-3] 。笔者对不同浓度四氯化碳(CCl4)致小鼠急性
肝损伤模型进行筛选 ,并采用筛选的理想模型研究一
　[收稿日期 ] 　2009-12-28　[修回日期 ] 　2010-02-10
　[基金项目 ] 　＊国家自然科学基金资助项目(基金编号:
30660238)
　[作者简介 ] 　孟繁龙(1982 -), 男 , 河北唐山人 , 在读硕士 ,
主要 从事药 理学研 究。 电话:(0)15292863011, E-mail:
mengfanlong12@126.com。
　[通讯作者 ] 　斯拉甫· 艾白(1960 -), 男 , 维吾尔族 , 新疆
伊犁人 , 研究员 ,主任药师 , 硕士生导师 , 主要从事药理和毒理
学研究。电话:0991-2563702, E-mail:aibai@263.com。
枝蒿有效部位对 CCl4致小鼠急性肝损伤的保护作用。
1　材料　
1.1　药物 　一枝蒿有效部位 (简称:AR), 批号:
20091019,由新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所提
取纯化 。一枝蒿药材乙醇提取液经大孔吸附树脂分离
纯化 ,所得有效部位按照 《中华人民共和国药典 》2005
年版一部附录分光光度法测定其总黄酮含量为 69%。
1.2　试剂　联苯双酯滴丸(德州德药制药有限公司 ,
批号:081201);CCl4(分析纯 ,天津市富宇精细化工有
限公司 ,批号:20090428);花生油(山东鲁花集团有限
公司 ,生产日期:20090720);丙氨酸氨基转移酶(ALT)
试剂盒 (中生北控生物科技股份有限公司 , 批号:
091201.200907);天冬氨酸氨基转移酶(AST)试剂盒
(中生北控生物科技股份有限公司 , 批号:090601.
200907)。
1.3　仪器 　Alegra64R型高速低温离心机 , 美国
·1266· HeraldofMedicineVol.29 No.10October2010
Beckman公司;PM400 /3型全自动生化仪 , 意大利
AUTOLAB。
1.4　动物 　昆明种小鼠 , 102只;雄雌各半 ,体质量
18 ～ 22 g,由新疆实验动物研究中心供应 ,许可证号:
SCXK(新)2003-0002。
2　方法　
2.1　模型的筛选　关于 CCl4致小鼠肝损伤的实验 ,
文献报道较多为 0.1% CCl4致小鼠肝损伤模型 ,但通
过预试 ,效果不佳 ,所以采用不同浓度的 CCl4对致小
鼠肝损伤模型进行筛选。取昆明种小鼠 40只 ,雌雄各
半 ,称质量 , 随机分为 4组 , 按 CCl4不同浓度分为
0.10%, 0.11%, 0.13%和空白对照组 ,每组 10只。除
空白对照组外其余各组小鼠均腹腔注射不同浓度的
CCl4花生油溶液 0.1 mL· (10 g)-1 ,空白对照组给予
同等体积 0.9%氯化钠溶液。禁食 12h后 ,眼球取血 ,
静置 30 min, 3 000 r·min-1(离心机半径 6.0 cm)离心
30 min,分离血清 ,测定血清中 AST、ALT的含量 。
2.2　AR对 CCl4致小鼠急性肝损伤的保护作用　取
昆明种小鼠 72只 ,雌雄各半 ,随机分为 6组 ,即空白对
照组 、联苯双酯组 、CCl4模型组及高 、中 、低剂量药物
组 。联苯 双 酯 组 灌 胃 给 予 联 苯 双 酯 混 悬 液
40 mg· kg-1·d-1;高 、中 、低剂量药物组分别灌胃给予
AR溶液 80 , 40和 20 mg· kg-1 · d-1;空白对照组和
CCl4模型组均给予同等体积 0.9%氯化钠溶液。连续
给药 5d,第 5天给药后 1h,除空白对照组外其他各组
小鼠腹腔注射 CCl4花生油溶液 ,空白对照组给予等容
量的 0.9%氯化钠溶液 ,禁食 12 h后 ,眼球取血 ,静置
30 min, 3 000r· min-1离心 30 min,分离血清 ,按照试
剂盒说明测定血清中 AST、ALT的含量 。
2.3　形态学观察　所取肝组织用 10%福尔马林固
定 ,制备肝组织切片 ,苏木精-伊红(HE)染色 ,普通光
镜下观察肝组织病理结构改变 。
2.4　统计学方法　结果以均数 ±标准差(x±s)表示 ,
采用 PEMS3.1数据处理软件 ,组间比较采用 t检验。
3　结果　
3.1　模型筛选结果 　与空白对照组比较 , 0.10%,
0.11%和 0.13% CCl4组小鼠血清中 AST、ALT均有升
高 。 0.10% CCl4组 ALT明显升高 ,差异有显著性(P
<0.05),但 AST升高不明显;0.11% CCl4组 AST、ALT
差异有显著性(P<0.05);0.13% CCl4组标准差太大 ,
且与空白对照组比较 AST、ALT升高过大。因此 ,采用
0.11%浓度的 CCl4致小鼠急性肝损伤模型效果较佳。
结果见表 1。
3.2　AR对小鼠急性肝损伤血清中 AST、ALT的影响　
模型组与空白对照组比较 ,血清中 AST及 ALT均明显
增高 ,差异有极显著性(P<0.01),表明造模成功;与模
型组比较 ,联苯双酯组和低 、中 、高剂量药物组 ALT、AST
有显著性降低(P<0.05或 P<0.01)。结果见表 2。
表 1　不同浓度的 CCl
4
对小鼠血清中 AST、ALT含量的影响　
Tab.1　EffectsofdiferentconcentrationofCCl4 onthe
serumcontentsofALTandASTinmice　 U· L-1 , x±s
组别 小鼠 /只 ALT AST
0.10%CCl4组 10 　178±16＊1 　246±72
0.11%CCl4组 10 　283±18＊1 　333±67＊1
0.13%CCl4组 10 1 914±1 512＊2 1 888±1 380＊2
空白对照组 10 　 53±12 　196±58
　　与空白对照组比较 , ＊1P<0.05, ＊2P<0.01
Comparedwiththeblankcontrolgroup, ＊1P<0.05, ＊2P<
0.01
表 2　各组急性肝损伤小鼠血清 AST、ALT的含量　
Tab.2　TheserumcontentsofALTandASTinmice
withacuteliverinjury　 U· L-1 , x±s
组别 小鼠 /只
给药剂量 /
(mg· kg-1· d-1) ALT AST
联苯双酯组 12 40 103±79＊1 258±88＊2
高剂量药物组 12 80 77±29＊1 223±56＊2
中剂量药物组 12 40 88±31＊1 239±64＊2
低剂量药物组 12 20 135±72＊1 246±51＊2
CCl4模型组 12 … 343±257＊3 423±258＊3
空白对照组 12 … 60±15 217±72
　　与模型组比较 , ＊1P<0.01, ＊2P<0.05;与空白对照组比
较 , ＊3P<0.05
Comparedwiththemodelgroup, ＊1P<0.01, ＊2 P<0.05;
Comparedwiththeblankcontrolgroup, ＊3P<0.05
3.3　对 CCl4肝损伤小鼠肝脏病理组织的影响　空白
对照组小鼠肝脏外观呈红褐色 ,质地软而富有弹性:在
光镜下观察到肝小叶结构完整 ,细胞排列整齐 ,大小均
匀 ,分界清楚 ,肝细胞索以中央静脉为中心呈放射状排
列 ,肝窦清晰 。模型组小鼠肝脏表面呈黄褐色 ,边缘钝
而厚 ,质脆;镜下观察可见肝小叶破坏 ,肝细胞肿胀 ,出
现肝细胞变性 ,坏死 ,炎症细胞浸润。高 、中 、低剂量药
物组与联苯双酯组肝小叶基本完整 ,细胞排列整齐 ,只
有少量的炎症细胞浸润。
4　讨论　
CCl4被公认为经典的化学肝损伤毒剂 ,其作用机
制为在肝细胞内质网中经细胞色素 P450依赖性混合功
能氧化酶的代谢 , 生成活泼的三氯甲基自由基
(CCl3· )和氯自由基(Cl· ),这些自由基细胞内和细
胞膜的大分子共价结合 ,使酶功能丧失 ,细胞脂质氧
化 ,导致肝细胞损伤坏死 ,细胞质内的转氨酶渗入血
·1267·医药导报 2010年 10月第 29卷第 10期
液 ,从而造成 ALT及 AST活性的升高 [ 4] 。本实验结果
证明 , AR能显著降低 CCl4引起的急性肝损伤后血清
中 ALT和 AST的水平 ,明显减轻肝细胞的变性坏死及
炎性浸润等病理改变。有文献表明 , AR总黄酮具有
对超氧阴离子自由基 、羟自由基的清除作用 [ 5] ,从而
提高提高肝细胞的抗氧化能力 ,保护酶活性而提高细
胞膜的稳定性 。提示 AR对肝脏的保护作用可能与
AR总黄酮抗氧化性与清除自由基有关。
[ DOI] 　10.3870/yydb.2010.10.004
[参考文献 ]
[ 1] 　李　军 , 杨树森 ,卡哈尔 ,等.新疆一枝蒿野生转家种栽培
技术 [ J] .中国中药杂志 , 1993, 18(7):406-407.
[ 2] 　斯拉甫 , 古丽娜 ,刘　发 ,等.维药一枝蒿抗过敏作用的实
验研究 [ J] .中国民族医药杂志 , 1996, 2(2):35-36.
[ 3] 　李　军 , 李秀莲 ,敖秉臣 ,等.复方一枝蒿冲剂体外和小鼠
体内抗菌作用的探讨 [ J] .中国医院药学杂志 , 1994, 11
(9):428.
[ 4] 　徐叔云 , 卞如濂 , 陈　修.药理实验方法学 [ M] .2版.北
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[ 5] 　阿不都热依木 ,斯拉甫 , 哈木拉提 ,等.电子顺磁共振技术
研究一枝蒿总黄酮抗氧化作用 [ J] .中国药理学通报 ,
2001, 17(6):648-500.
芪连汤颗粒对糖尿病肾病大鼠
过氧化物酶体增殖物激活受体 -r表达的影响
杨　李 ,邓惠玲 ,刁　波 ,王小昆 ,朱以良
(广州军区武汉总医院实验科 , 430070)
[摘　要 ] 　目的 　探讨芪连汤颗粒对糖尿病肾病(DN)大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体-r(peroxisome
proliferators-activatedreceptor-r, PPAR-r)表达的影响。方法　SD大鼠 55只 , 随机分为正常对照组 10只 , 45只建立 DN大
鼠模型 , 并随机分为模型对照组 、高剂量药物组 ,低剂量药物组 , 每组 15只。高 、低剂量药物组分别灌胃给予芪连汤颗粒
溶液 10, 5g· kg-1· d-1。正常对照组和模型对照组灌胃给予等量 0.9%氯化钠溶液 ,连续 4个月。取大鼠抗凝全血 ,分离
单核细胞提取总蛋白 , 取动物肾脏组织总蛋白 , 用 Western-blot方法检测 PPAR-r与 GAPDH比值(P/G)。结果　正常对
照组单核细胞内 P/G值为(0.857 6±0.069 3),肾脏内 P/G值为(0.912 6±0.066 7)。模型对照组单核细胞内 P/G值
为(0.621 9±0.095 0),肾脏内 P/G值为(0.706 2±0.097 0)。高剂量药物组单核细胞内 P/G值为(0.806 3±0.081 0),
与模型对照组比较差异有显著性(P<0.05), 肾脏内 P/G值为(0.827 7±0.062 0), 与模型对照组比较差异有显著性(P
<0.05)。低剂量药物组单核细胞内 P/G值为(0.764 8±0.087 0), 与模型对照组比较差异有显著性(P<0.05),肾脏内
P/G值为(0.785 7±0.099 0)。结论　芪连汤颗粒能够保护 DN大鼠 , 可能通过激活单核细胞系统和肾脏内 PPAR-r表
达 , 对 DN大鼠的全身炎症状态进行调节。
[关键词 ] 　芪连汤颗粒;糖尿病肾病;过氧化物酶体增殖物激活受体-r
[中图分类号 ] 　R285　　　[文献标识码 ] 　A　　　[文章编号 ] 　1004-0781(2010)10-1268-04
EffectofQilianSoup-granulaonExpressionsofPPAR-rinDiabeticNephropathyRats
YANGLi, DENGHui-ling, DIAOBo, WANGXiao-kun, ZHUYi-liang(DepartmentofMedicalExperiment,
WuhanGeneralHospitalofGuangzhouCommand, Wuhan430070, China)
ABSTRACT　Objective　Toexploretheeffectofqiliansoup-granulaonexpressionsofperoxisomeproliferators-activated
receptor-r(PPAR-r)indiabeticnephropathy(DN)rats.　Methods　55ratsweredividedinto10normalratsand45 DNrats,
whichsubdividedintomodelcontrol, highdoseandlowdoseofqiliansoup-granula, at10 and5 g· kg-1· d-1 forfourmonths.
Withdrawthewholebloodandisolatedmonocytes(Mos), andmeasuredtheproteinexpressionofPPAR-rinbothmonocytesand
kidneyswithwestern-blot.　Results　ThelevelofPPAR-r/GAPDH(P/G)inmonocytesandkidneyofnormalcontrolgroup
were(0.857 6±0.069 3)and(0.912 6±0.0.066 7), respectively;inmodelcontrolwere(0.621 9±0.095 0)and(0.706
2±0.097 0);inqiliansoup-granulahighdosegroupwere(0.806 3±0.081 0)and(0.827 7 ±0.062 0), whichwere
significantdifferentfromthoseinthemodelcontrol(P<0.05).ThelevelofP/Ginlowdoesofqiliansoup-granulagroupwas(
0.7648±0.087 )inMos, whichshowedsignificantdiferencecompairedwiththemodelcontrol.　Conclusion　Qiliansoup-
granulacouldprotectagainstDNinrats, themechanismofwhichmayberelatedtoelicitingexpressofPPAR-rinnephridial
tissueandMos, andadjustingthesystemicinflammatorystateonDN-rats.
KEYWORDS　QiLiansoup-granula;Diabeticnephropathy;Peroxisomeproliferators-activatedreceptor-r(PPAR-r)
·1268· HeraldofMedicineVol.29 No.10October2010