全 文 ：翡翠珠组织培养技术的研究
李　京 ,白　卉 ,曹　焱
(黑龙江省林业科学研究所 ,哈尔滨 150081)
摘　要:以翡翠珠腋芽为实验材料 , 研究了翡翠珠组织培养的适宜条件。试验表明 , 翡翠珠的最佳继代培养基为
MS+6-BA 0.5 mg/ L +K T 1.0 mg/ L +NAA 0.02 mg/ L ,增殖系数达 5.37 倍;最适生根培养基为 WPM+IBA
0.1mg/ L ,生根率达 54.6%。
关键词:翡翠珠;组织培养
A Study on the Tissue Culture Technique in
Senecio rowleyanus Jacobsen
Li Jing , Bai Hui , CaoYan
(Heilingjiang Forestry Research Institrte, Harbin 150081)
Abstract:By using axillary bud of Senecio row leyanus Jacobsen as mate rial , the experiment w as made to find out the
best culture pro cess and the proper culture medium.The technical system of tissue culture fo r pr opaga tion was e s-
tablished.The results show that the optimal subculture medium is MS+6-BA 0.5 mg/ L +KT 1.0 mg/ L +NAA
0.02 mg/ L , the multiplication rate clum ps is 5.37.The best roo ting medium is WPM+IBA 0.1mg/ L , and the ro o-
ting ra te is up to 54.6% .
Key word:S enecio row leyanus Jacobsen;ti ssue cul ture
　　翡翠珠(Senecio row leyanus Jacobsen)又名珠峰千里光 ,
为多年生常绿匍匐肉质草本植物 , 原产南非南部[ 1] 。 茎纤
细 ,全株被白色皮粉 , 叶互生 ,较疏 , 圆心形 , 深绿色 , 肥厚多
汁 ,极似珠子 , 故有佛串珠 、绿葡萄 、绿之铃之美称。目前 , 翡
翠珠采用常规繁殖极其困难 ,因此本文中利用组织培养技术
对其进行繁殖 ,以解决这一问题。
1　试验材料与方法
1.1　试验材料
选取生长健壮无病株的带腋芽茎条切段作为外殖体。
1.2　研究方法
1.2.1　外殖体的表面消毒。 采回的茎条 , 先整段用适量洗
涤剂认真清洗后 , 自来水冲洗干净 ,剪成几大段 ,备用。 在超
净工作台上将实验材料用 70%酒精浸 20s , 0.1%升汞灭菌
3～ 5min ,无菌水冲洗干净 , 最后分切为 1.0cm 切段 , 用无菌
滤纸吸干表面水分进行接种。
1.2.2　培养基及培养条件。以 MS , 1/2MS ,WPM 为基本培
3　讨论
利用组织培养快繁技术 , 通过外源激素(植物生长调节
剂)处理使甜叶菊增殖和生根 ,这样不仅可以提高种苗繁殖
速度和倍数 ,提高种苗质量 , 也是保持品种典型性的最佳方
式。在快速繁殖过程中 , 外源激素的种类及其浓度不同 , 对
外植体的脱分化或再分化方向有较大的影响 ,这与前人在白
头翁和红景天等所报道的结果是一致[7 , 8 , 9] 。 在甜叶菊增殖
培养中 ,筛选出最适的增殖培养基为 MS+BA 0.4mg/ L+
NAA 0.1mg/ L , 说明甜叶菊的增殖受 BA 和 NAA 协同作
用 ,只有当 BA 和 NAA 浓度适当时 , 才能达到甜叶菊的增殖
与芽的素质相统一 , 否则对甜叶菊的快速繁殖有不利的影
响。虽然 NAA 和 IBA 都可使甜叶菊生根 , 但是最适宜的生
根培养基为 MS+IBA 0.25mg/ L。
总之 ,在甜叶菊组培中植物激素对器官分化起着非常重
要的作用 ,尤其是细胞分裂素与生长素的比值 ,对组织分化
的方向起决定性作用 ,本试验仅对甜叶菊对各种激素适宜浓
度范围及其比例进行了初步探索 ,其最佳的快速繁殖技术体
系有待进一步完善。
参 考 文 献
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作者简介:张子学(1956-),男 ,安徽省砀山县人 ,副院长 ,教授 ,
农学专业 ,获省科技进步三等奖 1项 ,市科技进步一等奖 1项 ,长期
从事药用植物的组织培养工作 , 发表论文 20 余篇。 E-m ail:zh zxue
@163.com
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第 2 期(总第 93) 中 国 林 副 特 产 No.2(GSNO.93)
2008 年 4 月 Fo rest By-P roduc t and Speciality in China Apr.2008
DOI :10.13268/j.cnki.fbsic.2008.02.014
养基 ,分别加入不同质量浓度的 IAA , NAA , IBA , 6-BA 和
KT 。每处理中加蔗糖 20g/ L , pH 5.8 ,琼脂 5.5g/ L。培养温
度为(22±2)℃, 湿度 70%, 每日光照 12h , 光照强度 1500 ～
1800 lx 。
2　结果与分析
2.1　无菌培养的建立
将已灭菌的试验材料接种到 MS +6-BA1.0mg/ L +
NAA0.02mg/ L 培养基上 , 进行诱导培养 , 外殖体接种 10d
后 ,腋芽开始萌动 、伸长 ,接种 26d 后长出带叶丛芽。
2.2　增殖培养基的筛选
2.2.1　基本培养基的筛选及对茎丛生长的影响
为了得到最适的培养基 ,进行了不同基本培养基中茎丛
生长对比试验(表 1)。 在外源激素(KT1.0mg/ L , IAA
0.02mg/ L)相同的M S、WPM 、NT 的培养基上培养 35d , 从苗
高及产生不定芽个数看 , MS 培养基优于其它基本培养基。
这表明翡翠珠的生长需要较高的盐浓度 , 当盐浓度低时 , 会
抑制其生长分化。
表 1　基本培养基对茎丛生长的影响
基本培
养基
接种外
植体
35d的生
长量/ cm
平均每个外殖
体分化数 备注
MS 50 1.50 4.56 茎节较短 ,枝条粗壮 ,叶片深绿饱满
NT 50 1.48 2.12 茎节较短 ,枝条纤细 ,叶片浅绿色
WPM 50 1.63 1.84 茎节较长 ,枝条纤细 ,叶片浅绿色
2.2.2　植物激素对茎丛生长的影响
在植物组织培养中起重要作用的激素主要是生长素和
细胞分裂素 ,高水平的细胞分裂素倾向于诱导不定芽形成 ,
也使侧芽增生加速 , 结果形成过于细密的不定芽 , 同时嫩芽
的质量下降 ,不利于下一步的生根和种植到土壤或介质中。
因此 ,在力求提高嫩茎质量兼顾有较多数量的情况下。必须
减少细胞分裂素的用量[ 2] 。
表 2　植物激素对茎丛增殖生长的影响
试验
序号 激素/mg· L-1
处理
数
增殖
倍数
35d平均
苗高/ cm
1 6-BA 0+KT 0+NAA 0 25 1.26 1.41
2 6-BA 0+KT 1.0+NAA 0.01 25 3.32 1.93
3 6-BA 0+KT 2.0+NAA 0.02 25 3.52 1.02
4 6-BA 0.5+KT 0+NAA 0.01 25 4.66 2.16
5 6-BA 0.5+KT 1.0+NAA 0.02 25 5.37 1.96
6 6-BA 0.5+KT 2.0+NAA 0 25 4.07 1.43
7 6-BA 1.0+KT 0+NAA 0.02 25 4.68 1.26
8 6-BA 1.0+KT 1.0+NAA 0 25 4.39 1.20
9 6-BA 1.0+KT 2.0+NAA 0.01 25 4.05 1.77
　　本试验培养基中附加不同浓度的 6-BA 、KT , NAA 结果
见表2。在试验过程中发现 , 培养基中加入 6-BA 可明显提高
腋芽分化率 ,但浓度过高(1.0 mg/ L)会诱导产生大量的愈伤
组织 ,影响茎丛的分化。培养基中只加入 6-BA 分化得到的
茎丛茎纤细 ,叶片薄 , 而加入较低浓度的 KT(1.0mg/ L)分化
得到的茎丛茎粗壮 , 叶片厚实 , 但浓度过高(2.0mg/ L)又会
明显地降低分化率。接种 35d 后 ,通过对比不同激素组合的
平均增殖倍数和平均苗高两个考核指标 ,并结合试验中观察
到的生长状况 ,确定最佳激素组合为 BA0.5 mg/ L +KT1.0
mg/ L +NAA0.02 mg/ L。
2.3　生根培养基的筛选
选取丛生芽中高 2cm 以上的壮苗 , 转入生根培养基培
养。生根培养的目的是使初培养和芽的增殖这两个阶段培
养的无菌苗生出不定根 , 并使苗继续生长。在大多数植物
中 ,低盐的培养基对生根的效果好。在植物的再生植株生根
诱导过程中 ,生根剂的效果是很明显的[ 3 、4] 。因此诱导生根
选择低盐浓度的WPM 为基本培养基 , 附加不同浓度的 IBA、
NAA 和 IAA 。筛选适宜生根培养基的试验设计水平和观察
结果见表 3。试验中观察到接种 5 ～ 10d 后 , 无根苗基部膨
大 ,形成少量黄白色致密愈伤组织;10d 左右 , 从愈伤组织基
部长出白色的幼根。
表 3　不同浓度的生长素对翡翠珠生根的影响
生长
素
浓度/
m g· L -1
开始生
根/ d
生根/
条
根长/
cm
生根率/
%
幼苗生
长量/ cm
CK 0.00 15 0～ 1 1.5 8.2 1.4
IBA
0.05 12 1～ 2 3.6 15.4 1.8
0.10 8 3～ 6 2.9 54.6 3.1
0.20 8 3～ 4 3.0 22.1 2.7
NAA
0.05 14 1～ 2 4.4 21.4 3.8
0.10 9 2～ 4 3.8 46.8 3.4
0.20 10 2～ 4 3.4 41.5 3.4
IAA
0.05 12 1～ 3 2.0 10.5 1.6
0.10 7 2～ 5 2.6 35.7 2.2
0.20 9 2～ 3 1.8 30.2 1.9
2.4　试管苗的炼苗与移栽
将生根试管苗在室温散射光下培养 3d , 打开封口膜于温
室大棚炼苗 7d 后 , 将试管苗轻轻从培养基中取出 , 洗去根部
培养基 , 移栽至蛭石∶腐殖土(1∶1)混合的基质中进行培
养。30d 后成活率为 74.8%。
3　结论
3.1　在增殖培养阶段 , 以 MS +6-BA0.5 mg/ L +KT1.0
mg/ L +NAA0.02 mg/ L 这一组合增殖效果为最理想。
3.3　在生根培养阶段 , 以WPM +IBA0.1mg/ L生根效果最
好。
3.4　利用激素可促进腋芽的快速形成 , 从而使嫩茎获得增
殖 ,这是快繁的一个重要途径。本试验选择该途径繁殖速率
较快 ,繁殖系数较高 , 遗传性状稳定。
参 考 文 献
[ 1] 　中国园林网.www.YUANLIN.com
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2008 年 中　国　林　副　特　产 第 2 期