全 文 ：倪 婧，李 彪，施 蕊，等． 雪莲果茎叶萃取物抑菌活性研究［J］． 江苏农业科学，2013，41(4) :271 － 273．
雪莲果茎叶萃取物抑菌活性研究
倪 婧1，2，李 彪3，施 蕊2，王金华2，熊 智2
(1．云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所，云南蒙自 661100;2．西南林业大学 /西南地区生物多样性保育国家林业局
重点实验室，云南昆明 650224;3．云南瑞升烟草技术(集团)有限公司，云南昆明 650106)
摘要:以茄腐镰刀菌、玉米纹枯病菌和小麦赤霉病菌为受体，探究不同质量浓度的雪莲果茎、叶有机萃取物对供
试菌株的抑菌作用。结果表明，雪莲果茎和叶中的几种萃取物对茄腐镰刀菌、玉米纹枯病菌和小麦赤霉病菌有一定的
抑制作用，且抑制强度随提取物质量浓度的升高而增加，相同浓度时雪莲果叶萃取物抑菌作用强于雪莲果茎萃取物。
相同浓度的雪莲果茎、叶萃取物对同一供试菌株的抑菌率几乎都出现如下规律:最后水相物 ＞正丁醇萃取物 ＞乙酸乙
酯萃取物 ＞二氯甲烷萃取物 ＞石油醚萃取物，说明雪莲果叶中对 3 种供试菌株有抑制作用的物质主要分布在高极性
溶剂中。
关键词:雪莲果茎;雪莲果叶;萃取物;抑菌活性
中图分类号:S482． 2 + 92 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2013)04 － 0271 － 03
收稿日期:2012 － 09 － 30
基金项目:西南林业大学科技创新基金(编号:1214) ;云南省西南林
业大学生物技术特色专业建设项目(编号:50116001) ;云南省教育
厅科学研究基金(编号:2012Z068)。
作者简介:倪 婧(1987—) ，女，云南建水人，硕士研究生，研究方向
为森林保护。E － mail:nixiaoxian@ 126． com。
通信作者:熊 智，教授，主要从事微生物学和分子生物学、农林产品
二次资源利用研究。E － mail:zhix65． swfc@ gmail． com。
雪莲果(Smallanthus sonchifolius)别称雪莲薯、亚龙果、亚
贡，为菊科向日葵属双子叶草本植物，具有耐强光、耐中低温
等特性，原产于秘鲁南部和玻利维亚西部的安第斯山脉一带，
是当地印第安人的传统根茎食品。20 世纪 80 年代中期，日
本以及一些欧洲国家陆续开始引种雪莲果，我国现有海南、云
南、江苏等几个省(市)种植雪莲果［1］。因雪莲果具有特殊的
保健功能及药用价值，目前国内外对雪莲果的研究主要集中
在块茎化学成分及其相关产品的开发上。雪莲果块茎含有大
量的水分及糖类，主要是低聚果糖［2］，并含有酚酸、类黄酮、
萜类、挥发油、氨基酸成分以及钾、钙、锌、铁、镁等元素，具有
较高的营养价值［3］。Yan等分析雪莲果根抗氧化活性时分离
鉴定出绿原酸［4］。Simonovska等用 TLC法分析雪莲果块茎和
叶的提取物及块茎的酸水解产物，发现其中含有绿原酸、咖啡
酸、阿魏酸、原儿茶酸等［2］。由于雪莲果中含有诸多对健康
起作用的成分，因而相关产品的研究不断出现，如雪莲果和芦
荟混合发酵酒［5］、果酱［6］、保健酸奶［7］、果酒［8］、果醋、果茶、
糖浆及雪莲果干粉等。
为弄清不同地区雪莲果多糖含量的差异，龚力民等用分
光光度法对比分析了海南省、湖南省和云南省 3 个产地雪莲
果的多糖含量，结果表明云南省产雪莲果多糖的含量较
高［9］。因此，目前云南省昆明、嵩明、石林等地大量种植雪莲
果。但是雪莲果茎叶被农民抛弃，没有开发利用，造成了资源
的大量浪费。近年的现代药理研究发现雪莲果叶提取物在降
血糖、抗氧化、抗真菌等方面具有较强活性，这主要与其中的
酚酸类物质密切相关［10 － 11］。另外，Valentová 等的研究表明，
雪莲果叶提取物可清除自由基，缓解肝细胞氧化损伤，保护肝
脏;雪莲果叶中黄酮类物质能抑制脂质氧化，预防动脉
硬化［13 － 15］。
目前关于雪莲果的研究已经成为热点，而国内对雪莲果
茎叶的研究还较少，特别是有关茎叶中不同溶剂萃取物对植
物病原菌的抑菌研究还少见有相关报道。本研究利用雪莲果
茎叶的石油醚等溶剂粗提取物对茄腐镰刀菌(Fusarium sola-
ni)等 3 种病原真菌进行了抑菌试验，旨在拓宽雪莲果资源的
利用，为进一步研制和开发新型高效植物源杀菌剂提供理论
依据和应用基础，为雪莲果茎、叶的开发利用提供科学依据。
1 材料与方法
1． 1 试验材料
雪莲果茎叶采自云南省嵩明县，经风干、粉碎(60 目) ，冷
藏备用。供试茄腐镰刀菌(Fusarium solani)、玉米纹枯病菌
(Rhizoctonia solani Kuha)和小麦赤霉病菌(Gibberella sanbinet-
ti)由云南大学微生物研究所提供。
1． 2 试验方法
1． 2． 1 提取方法 分别称取准备好的雪莲果茎、叶粉末各
100 g，放入 1 000 mL锥形瓶中，加入 500 mL 蒸馏水，煎煮 3
次，每次 1 h，抽滤，合并 3 次滤液，浓缩，得到雪莲果茎水提物
19． 71 g，雪莲果叶水提物 28． 66 g。
分别称取雪莲果茎、叶水提取物各 10 g，分别加入
100 mL 蒸馏水，装入分液漏斗，依次用石油醚、二氯甲烷、乙
酸乙酯、正丁醇与水相等体积各萃取 3 次，浓缩，得到不同极
性萃取物浸膏。用蒸馏水分别将得到的 4 种有机物萃取浸膏
和最后水层得到的浸膏配成 30． 0、20． 0、10． 0、7． 5、5． 0、
2． 5 mg /mL 的溶液对供试菌株进行抑菌试验。
1． 2． 2 抑菌方法 在无菌条件下，取制备好的不同浓度雪莲
果茎、叶提取浓缩液与制备好的 PDA 培养基(40 ℃左右)按
照 1 ∶ 9(体积比)的比例混匀，然后分别倒入直径为 9 cm 的
培养皿中(每皿 15 mL) ，冷却制成有毒培养基平板后，分别接
—172—江苏农业科学 2013 年第 41 卷第 4 期
DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2013.04.065
入供试菌饼(d = 4 mm) ，每个菌种设 3 皿重复。以同样的方
法，将提取溶剂与制备好的 PDA 培养基(40 ℃左右)按照
1 ∶ 9 的比例混匀作为对照培养基。3 d 后测量菌落生长直
径，每个菌落按十字交叉法测量，以其平均值代表菌落的大
小。抑菌率的计算公式如下:纯生长量 =菌落平均直径 －菌
饼直径;抑菌率 =［(对照纯生长量 －处理纯生长量)/对照纯
生长量］× 100%。
2 结果与分析
雪莲果茎萃取物对 3 种供试菌株有不同程度的抑菌活性
结果见表 1。
表 1 雪莲果茎萃取物对 3 种植物病原菌的抑菌率
病原菌 萃取溶剂
不同浓度雪莲果茎萃取物的抑菌率(%)
30． 0 mg /mL 20． 0 mg /mL 10． 0 mg /mL 7． 5 mg /mL 5． 0 mg /mL 2． 5 mg /mL
茄腐镰刀菌 石油醚 36． 77 ± 1． 21bc 30． 27 ± 0． 26bc 10． 56 ± 0． 16a 3． 72 ± 0． 03a 0a 0a
二氯甲烷 38． 97 ± 0． 82c 31． 33 ± 1． 04bc 13． 56 ± 0． 43a 6． 63 ± 0． 12a 0a 0a
乙酸乙酯 41． 11 ± 2． 01c 34． 87 ± 0． 63bc 16． 57 ± 0． 31ab 6． 82 ± 0． 22a 0a 0a
正丁醇 45． 37 ± 1． 25c 37． 01 ± 1． 21bc 17． 42 ± 0． 45ab 8． 11 ± 1． 00a 0a 0a
水 57． 33 ± 0． 47d 48． 66 ± 0． 41c 21． 97 ± 0． 72b 15． 33 ± 0． 15ab 6． 73 ± 0． 21a 0a
玉米纹枯病菌 石油醚 15． 83 ± 0． 42ab 7． 77 ± 0． 13a 0a 0a 0a 0a
二氯甲烷 21． 67 ± 0． 81b 10． 38 ± 0． 42a 3． 84 ± 0． 13a 0a 0a 0a
乙酸乙酯 23． 32 ± 0． 54b 11． 93 ± 1． 01a 4． 87 ± 0． 01a 0a 0a 0a
正丁醇 29． 76 ± 0． 07bc 11． 77 ± 0． 64a 3． 66 ± 0． 12a 0a 0a 0a
水 59． 63 ± 1． 00c 21． 63 ± 0． 34b 11． 25 ± 0． 21a 4． 28 ± 0． 04a 0a 0a
小麦赤霉病菌 石油醚 21． 52 ± 0． 77b 9． 66 ± 0． 07a 1． 62 ± 0． 03a 0a 0a 0a
二氯甲烷 25． 49 ± 1． 24b 13． 28 ± 0． 54ab 6． 42 ± 0． 07a 0a 0a 0a
乙酸乙酯 32． 87 ± 0． 79bc 14． 97 ± 1． 02ab 6． 89 ± 0． 17a 0a 0a 0a
正丁醇 32． 98 ± 0． 12bc 17． 76 ± 0． 53ab 10． 24 ± 0． 15a 2． 61 ± 0． 05a 0a 0a
水 53． 66 ± 1． 23c 31． 55 ± 0． 72bc 21． 34 ± 1． 05b 9． 78 ± 0． 05a 1． 04 ± 0． 02a 0a
注:表中数据为 3 次重复试验的“平均值 ±标准差”;表中同栏数据后不同小写字母表示在 0． 05 水平上差异显著。下表同。
由表 1 可知，雪莲果茎中的几种有机萃取物对 3 种供试
的植物病原菌有一定的抑制作用，且浓度越高抑制作用越强，
当浓度低至 2． 5 mg /mL 时雪莲果茎的几种溶剂萃取物对 3
种供试菌株的抑菌率为 0，说明低浓度(2． 5 mg /mL)的雪莲
果茎石油醚萃取物、二氯甲烷萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁
醇萃取物以及最后水相对茄腐镰刀菌、玉米纹枯病菌和小麦
赤霉病菌无抑制作用。当浓度在 5． 0 mg /mL 时，除最后水相
对茄腐镰刀菌和小麦赤霉病菌有微弱的抑制作用外，雪莲果
茎的其他溶剂萃取物对 3 种供试菌株均无抑制作用。当浓度
在 7． 5 mg /mL时，雪莲果茎的几种溶剂萃取物对茄腐镰刀菌
均有不同程度的抑制作用，且出现萃取溶剂极性越大抑制作
用越强的现象，说明雪莲果茎中对茄腐镰刀菌有抑制作用的
物质分布在高极性溶剂中的比分布在低极性溶剂中的多，或
者是分布在高极性溶剂中的物质抑菌作用强于分布在低极性
溶剂中的物质。7． 5 mg /mL的 4 种雪莲果茎的有机萃取物对
玉米纹枯病菌没有抑制作用，而 7． 5 mg /mL 的水相物质对玉
米纹枯病菌的抑菌率为 4． 28%;当浓度在 7． 5 mg /mL 时，除
正丁醇外，其他 3 种有机溶剂从雪莲果茎中萃取的物质对小
麦赤霉病菌没有抑制作用。雪莲果茎的石油醚萃取物对玉米
纹枯病菌的抑菌活性很小，当浓度达到 30． 0 mg /mL 时抑菌
率也仅有 15． 83%，而 30． 0 mg /mL的石油醚萃取物对茄腐镰
刀菌和小麦赤霉病菌的抑菌率分别是 36． 77%和 21． 52%。
表 1 显示，相同的萃取物在同一浓度下对 3 种供试菌株的抑
菌率大小顺序为茄腐镰刀菌 ＞小麦赤霉病菌 ＞玉米纹枯病
菌，说明茄腐镰刀菌对雪莲果茎萃取物的抗性小于小麦赤霉
病菌和玉米纹枯病菌。
雪莲果叶萃取物对 3 种供试菌株有不同程度的抑菌活
性，结果见表 2。
由表 2可以看出，雪莲果叶中的几种萃取物对 3种供试菌
株有一定的抑制作用，且浓度越高抑制作用越强。2． 5 mg /mL
的雪莲果叶有机萃取物、5． 0 mg /mL 的石油醚萃取物和二氯
甲烷萃取物对玉米纹枯病菌没有抑制作用，本试验所设的其
他浓度的其他几种萃取物对 3 种供试菌株均有一定的抑制作
用。在本试验所设的浓度范围内，最小浓度(2． 5 mg /mL)的
雪莲果叶萃取物均对茄腐镰刀菌和小麦赤霉病菌有一定的抑
制作用，雪莲果叶萃取物对这 2 种菌的最小抑制浓度需要进
一步研究。对于有抑菌作用的试验组，相同浓度的萃取物对
同一供试菌株的抑菌率几乎出现最后水相 ＞正丁醇萃取物 ＞
乙酸乙酯萃取物 ＞二氯甲烷萃取物 ＞石油醚萃取物的规律，
说明雪莲果叶中对 3 种供试菌株有抑制作用的物质分布在高
极性溶剂中的比分布在低极性溶剂中的多，或者是分布在高
极性溶剂中的物质抑菌作用强于分布在低极性溶剂中的物
质。雪莲果叶中 20． 0、30． 0 mg /mL 的最后水相对小麦赤霉
病菌的抑菌率为 100%，说明 20． 0、30． 0 mg /mL 的最后水相
物质能够完全抑制小麦赤霉病菌的生长。表 2 还显示，雪莲
果叶中 20 mg /mL或 30 mg /mL 的萃取剩下的水相物质与有
机萃取物对同一种供试菌株的抑菌率存在显著差异，而按萃
取顺序相连的 2 种萃取物对同一种供试菌株的抑菌率之间没
有显著差异。
综合表 1 和表 2 可以看出，雪莲果茎和叶中的几种萃取
物对 3 种供试菌株有一定的抑制作用，且抑制强度随提取物
质量浓度的升高而增加，相同浓度的雪莲果叶萃取物抑菌作
用强于雪莲果茎的萃取物。
—272— 江苏农业科学 2013 年第 41 卷第 4 期
表 2 雪莲果叶萃取物对 3 种植物病原菌的抑菌率
病原菌 萃取溶剂
不同浓度雪莲果叶萃取物的抑菌率(%)
30． 0 mg /mL 20． 0 mg /mL 10． 0 mg /mL 7． 5 mg /mL 5． 0 mg /mL 2． 5 mg /mL
茄腐镰刀菌 石油醚 53． 41 ± 0． 02c 32． 56 ± 1． 72b 23． 66 ± 0． 43ab 16． 29 ± 1． 02ab 7． 56 ± 0． 08a 0． 65 ± 0． 01a
二氯甲烷 56． 71 ± 0． 16c 34． 52 ± 0． 28b 23． 38 ± 1． 43ab 17． 65 ± 0． 21ab 8． 53 ± 0． 06a 2． 54 ± 0． 02a
乙酸乙酯 66． 49 ± 1． 27cd 41． 97 ± 1． 53bc 29． 63 ± 1． 32b 17． 89 ± 0． 83ab 9． 35 ± 0． 45a 2． 74 ± 0． 14a
正丁醇 67． 33 ± 1． 02cd 43． 53 ± 2． 68bc 27． 64 ± 1． 37b 18． 55 ± 0． 79ab 8． 56 ± 0． 70a 1． 22 ± 0． 02a
水 97． 43 ± 1． 01e 68． 56 ± 1． 73d 40． 62 ± 1． 61bc 27． 46 ± 0． 58b 18． 87 ± 0． 43ab 9． 76 ± 0． 30a
玉米纹枯病菌 石油醚 32． 77 ± 1． 11b 19． 53 ± 0． 79ab 10． 54 ± 1． 75a 6． 53 ± 0． 16a 0a 0a
二氯甲烷 43． 18 ± 2． 06bc 26． 34 ± 0． 57b 12． 66 ± 1． 62a 7． 64 ± 0． 04a 0a 0a
乙酸乙酯 49． 23 ± 0． 15c 29． 87 ± 1． 69b 17． 27 ± 0． 64ab 10． 29 ± 1． 05a 4． 73 ± 0． 04a 0a
正丁醇 54． 88 ± 1． 24c 32． 93 ± 2． 51b 17． 52 ± 0． 64ab 11． 25 ± 0． 41a 6． 71 ± 0． 43a 0a
水 77． 21 ± 0． 65d 45． 66 ± 1． 52c 26． 17 ± 1． 65b 18． 69 ± 1． 50ab 9． 15 ± 0． 48a 2． 03 ± 0． 01a
小麦赤霉病菌 石油醚 53． 19 ± 0． 58bc 39． 81 ± 1． 67b 20． 53 ± 1． 00ab 14． 23 ± 0． 17ab 7． 42 ± 0． 41a 1． 61 ± 0． 02a
二氯甲烷 67． 51 ± 0． 74cd 42． 51 ± 1． 74bc 26． 01 ± 1． 20ab 15． 63 ± 0． 54ab 8． 59 ± 0． 05a 3． 11 ± 0． 06a
乙酸乙酯 85． 32 ± 0． 01d 62． 73 ± 1． 84c 34． 77 ± 2． 83b 20． 94 ± 0． 45ab 12． 76 ± 0． 24a 4． 76 ± 0． 05a
正丁醇 91． 26 ± 0． 37d 70． 43 ± 1． 68cd 53． 09 ± 1． 28bc 32． 56 ± 0． 67b 15． 33 ± 0． 57ab 7． 03 ± 0． 12a
水 100． 00 ± 0． 00e 100． 00 ± 0． 00e 75． 65 ± 1． 98cd 56． 29 ± 2． 09c 27． 88 ± 1． 02ab 16． 91 ± 0． 03ab
3 结论与讨论
雪莲果茎和叶中的几种萃取物对茄腐镰刀菌、玉米纹枯
病菌和小麦赤霉病菌有一定的抑制作用，且抑制强度随提取
物质量浓度的升高而增加，相同浓度的雪莲果叶萃取物抑菌
作用强于雪莲果茎的萃取物。说明雪莲果叶中的抑菌物质含
量高于茎中的含量，或者叶中的抑菌物质活性高于茎中的抑
菌物质活性。
雪莲果茎和叶中相同浓度的萃取物对同一供试菌株的抑
菌率几乎出现最后水相 ＞正丁醇萃取物 ＞乙酸乙酯萃取物 ＞
二氯甲烷萃取物 ＞石油醚萃取物的规律，说明雪莲果叶中对
3 种供试菌株有抑制作用的物质分布在高极性溶剂中的比分
布在低极性溶剂中的多，或者是分布在高极性溶剂中的物质
抑菌作用强于分布在低极性溶剂中的物质。
本研究中未出现对 3 种供试菌株的抑菌率为 100%的试
验组，说明在本研究所设的浓度范围内雪莲果茎的萃取物没
有能够完全抑制供试菌株生长或者使供试菌株致死，须进一
步研究。本研究仅用雪莲果茎叶的几种有机萃取物对 3 种供
试菌株进行实验室研究，雪莲果茎叶的其他有机萃取物对其
他菌株的抑菌活性有待进一步研究。本研究的结果是实验室
条件所得结果，并未验证田间试验是否与此结果一致，将来可
对该方面进行研究。
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