全 文 ：19 5 4年 第 6卷 第 1期 吉 林 农 业 大 学 学 报 衬
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怀牛膝茎有效成分的初步研究’
杨 秀 伟 介带
( 吉林省 中医 中药研 究所 )
要
通过对怀牛膝茎的化学实验 、 薄层层析 , 证明牛膝茎和根均含有三菇皂贰 。 从根和茎中
均提得总皂试 , 精制总皂试经水解 , 分离得皂贰元 , 经与标准品同板薄层鉴定和红外光谱分
析证明 , 根与茎的皂试 试元均为齐墩果酸 。经对怀牛膝根和茎中的总贰含量测定 ,结果表明怀
牛膝茎中总皂贰含量达 1 . 54 % , 稍低于同株植物根中总皂戒含量 , 因此认为 , 怀牛膝茎是不
可忽视的药用资源 。
怀牛膝 ( A e h y r a n t h e s b i d e n t a l a B l . ) 为览科,草本植物 , 主产河南 , 为中 医 常
用重要 中药之一 。 历来药用其干燥根 。 《本草纲目》 记载其茎可药 用 〔 l 〕 : “ 牛 膝 乃
足厥阴 , 少阴之药 。 所主之病 。 大抵得 酒则能补肝肾 , 生用则能去恶血 , 二者而已。 ”
(j 申农本草经》 则将怀牛膝列为上品 。近代研究证明 :怀 牛膝根含有经基脱皮街 酮 〔 2 〕 、
脱 皮 街 酮 ( e e d j s t e r o n e ) 、 牛 膝 街 酮 ( i n o k o s t e r o n e ) 〔 3 〕 、 紫 茎 牛 膝 街 酮
( r u b r o s t e : p n e ) 〔 4 〕 、 豆幽醇 、 日一谷街醇 、 日一香 树 精 ( 日一 a m y r i n ) 〔 5 〕 、
粘液质 〔 6 〕 、 多量钾盐 〔 7 〕 和三菇皂试 。 三菇皂试为怀 牛膝根的主要成分 , 水解后 生
成齐墩果酸和葡萄糖醛酸 〔 ” 〕 。 实验证明 : 齐墩果峻可以阻止大白鼠肝硬变的发生 〔” 〕 ,
对四氯化碳 引起大 白鼠急性肝损伤有明显 的保护作用 〔`“ 〕 。 临床证 明 : 齐墩果 酸 有 清
热 、 消炎 、 抑菌 、 强心和抑制 S一 1 80 瘤株生长的作用 〔“ 〕 。 临床上治疗传染性 急 性 黄
疽型肝炎 , 有 一明显的降低谷一丙转氨酶和利胆退黄作用 帅 〕 。 以 50 爪 g / 日 齐 墩 果 酸
(片剂 ) 试用于临床肝炎患者 , 未见不 良反应 〔`” 〕 。 齐墩果酸毒性低 、 使用安全 〔`们
深受患者欢迎 。
迄今为止 , 怀牛膝茎的化学成分未见文献报道 。 为 了扩大药源 , 我们以怀牛膝茎为
试验材料 , 通过提取分离和鉴定证明 : 怀牛膝茎亦含有齐墩果酸 。 现将初步研究结果报
告如下 。
. 本文系作者的毕业论文 , 承李树殿老师指导 , 经李 向高副教授审改并惠赠齐墩果酸标准品 .
二 药用植物专业 19 8 2年毕 业生 . 本文 19 5 3年 6月 15 日收到 .
4总 吉 林 农 业 大 学 学 报 1 9息略年
一 、 材料与处理
1
、 正品怀牛膝根 : 系购自长春药材采购供应站 。 经 60 ℃烘干 , 粉碎成 60 目粉末 , 备
用 。
2
、 东北 引种的怀牛膝根 、 茎 : 系采 自吉林农大药用植物标本园 。 处理 同上 。
二 、 供试液的制备
分别取正品怀牛膝根 、 东北 引种怀牛膝根和茎如图 1 所示流程分离 。 A 为供试 液 。
怀牛膝根 、 茎粗粉
三 、 化学实验
} 甲醇回流提取 24 小
今时 , 回收甲醇
1
、 莫 里 西 ( m o l i s e h ) 反 应 : 取
A 层 2 m l , 水浴蒸干 , 加 l m l水溶解 其
于试管中 , 加数滴 a 一茶酚试剂 , 摇匀 ,
再沿管壁缓缓滴加浓硫酸 l m l , 二液 面
交界处出现红紫色环 。
2
、 李伯曼 ( L i e b e r m a n n一 B u r一
浸膏杏加蒸馏水溶解 , 过滤水溶液
{
乙醚脱脂 ( 8 次 )
合并水溶液
水 落层
h a r d )
: 反应取 A 层 3 m l , 水浴蒸干 ,
3
、 三氯化锑氯仿饱和溶液反应 :
化锑氯仿饱和溶液 , 呈现紫蓝色。
工 二水层 正丁醇层 ( A层 )
图 1 供试液提取流程
加浓硫酸一醋酚 口、剂 1一 2滴 , 产生紫色。
取 A 层溶液 2 m l于试管中 , 水浴蒸干 , 加入三 氯
4
、 取两支粗细一致的试管 , 各加入 A层溶液 5 m l , 水浴蒸干 , 分别加入 5 m l水 ,
其 中一管再加入 o . I N盐酸 5 m l ; 另一管再加入 0 . 州氢氧化钠溶液 5 m l , 密 塞 , 强 烈 振
摇 。 结果两管所形成泡沫高度相等 , 10 分钟仍未消失。
5
、 取滤纸 1 张 , 向其上滴加 2滴供试液 , 再滴三氯醋酸试剂 1滴 , 加热 至 1 0 0℃
显红色 , 后渐变为紫色 。
以 上 5 项实验 , 正品怀牛膝根 , 东北引种的怀牛膝根 、 茎 的供试反应相同 。
四 、 薄 层 定 性
取供试液 3 m l , 浓缩至原体积的 1 / 3作为点样溶液 , 以根提取液作对照 。
取微晶纤维素板 (吸附剂 : 水 = 1 , 5 , 搅成粘稠状 , 铺板 , 干燥后备用 ) , 以正丁
醇 : 乙醇 : 25 %氨水 (1 8 , 3 . 5 , 18 , 上层 ) 为展开剂 。 将展开后的薄板小心挥去 溶 剂
后喷浓硫酸 , 在 85 ℃显色 10 分钟 , 3 个样品各显 2个灰红紫色斑点 (如图 2一 l) 。
A
l斑点 : R f = 0 . 9 3 ; B I斑点 : R f = 0 . 7 4。
第。卷 第 1期 怀牛膝茎有效成分的初步研究
公 示 Q -
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A ,
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B 3
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吸附剂 ; 纤维素
展开剂 : 正丁醇 : 乙醇 : 肠男氨水 : ( 15 , 3 . 5 , 1 8 , 上层 )
显色剂 : 浓硫酸
吸附剂 : 中性氧化铝
展开剂 : 正 丁醇 : 乙醇 : 25 另氨水 ( 25 : 3 . 5 , 25 , 上层 )
显色 剂 : 浓硫酸
吸附剂 :
展开剂 :水 ( 4 盆
乙酸乙醋 :
显色剂 :
2 - 1
2一 2
图 2 正 T 醉薄层层析谱
取中性氧化铝板 ( 购自浙江黄岩硅胶厂 ) , 以正丁醇 、 乙醇 、 25 %氨水 (1 8 , 3 . :5
1 8 , 上层 ) 为展开剂 , 将展开后的薄板小心挥去溶剂后喷浓硫酸显色 5分钟 ( 1 1 0℃ ) ,
3 个样品各显 2个红紫色斑点 (如图 2一 2) , A : 斑点 : R f二 0 . 71 ; B : 斑点 : R f = 0 . 54 。
取硅胶 G板 (吸附剂 : 水 = 1 : 2 , 搅成粘稠状 , 铺板 , 干燥后备 用 。 用 时 在 n o℃
活化半小时 ) , 以正丁醇 、 乙酸 乙醋 、 水 (4 , 1 , 5) 为展开剂 。 将展开后 的薄板 小 心
挥去溶剂 , 喷五氯化锑显色 5分钟 (1 10 ℃ ) , 3 个样品各显 2个斑点 。 斑点由粉红 色 渐
变为紫色 (如图 2一 3 ) 。 A 3斑点 : R f = 吞. 6 9 ; B :斑点: R f = 0 . 2 5。
以上实验证明 : 无论正品怀牛膝根 , 还是东北引种的怀牛膝根 、 茎 , 正丁醇萃取液
均含有相同成分 , 确有三菇皂试 。
4年的 吉 林 农 业 大 学 学 报 1 98 4
五 、 皂戒元的提取 、 分离
取东北引种的怀牛膝根 、 茎粗粉 ( 60 目 ) , 首先按图 3 流程提取精制皂贰 。 然后按
图 4 流程提取精制皂贰元 。
怀牛膝根 、 茎粗粉】甲醇回流提取 24小杏时 , 回收甲醇浸膏工加蒸馏水溶解 , 过滤水溶液
精制皂试
}
5%硫酸 (水 : 乙 _醇〕
令 , 1门 ) 回流 6 小困酸醇液
.层l
甲
水
未 4
正丁醇层 水层
! 减压回收正丁醇
}挥散乙醇
+ 至无醇味
}用少量甲醇溶解杏约 10倍量丙酮中
浸膏倾人过滤
酸水液今尽滤
沉
4
淀 酸
未
水
1黄白色沉淀 工母液
}
!毒
4
— 卜黄白色沉淀
回收丙酮 ,残渣用少量甲醇溶解倾入新丙酮中 , 过滤
二
}先用水洗至中性再
+ 用氯仿洗
4 上仿氯液 残渣
杏挥散氯仿
沉淀
! 溶于 乙醇中 , 加 l % 活性
}碳回流 1 小时 , 过滤 , 回今收乙醇
合并
母液 粉末状结晶寺9 5 % 乙醇重结晶
针状结晶杏真空减压干燥
针状结晶 。
复入在,沉反后加生醚。法最中乙产止上次酮量不为依4,到丙少淀
i
|
l.t
.冷
、 黄白色沉淀
依解次溶1醇复反甲量再少法用上.les土丫
黄白色沉淀 (精制皂贰 )
图 3 牛膝皂贰的提取流程 图 4 皂俄元的提取流程
1
、 结晶 O的理 化性质
无色针状结晶 , 不溶于水 , 溶于甲醇 、 乙醇 、 丙酮 、 氯仿 , 也不溶于石油醚。 . m P ,
3 0 7一 3 1 0 , 与已知齐墩果酸标准品混融熔点不下降 。
2
、 薄层定性
以图 4 流程提得 的东北引种怀牛膝根 、 茎的针状结晶氯仿溶液作为 点 样 溶 液 , 以
已知齐墩果酸氯仿溶液为标准溶液 , 用硅胶 G板 (浙江黄岩硅胶厂 ) 为层析板 , 分别 以
苯 : 乙酸乙醋 (7 , 1) 、 苯 : 乙酸乙醋 (3 , 7) 、 氯仿 : 甲醇 ( 2 0 , 1 ) 、 正 己 烷 : 乙
酸 乙醋 ( 7 , 3) 为展开剂展开 。 将展开后 的薄层板小心挥去展开剂 , 以 20 %五氯化锑氧
仿液喷雾 , 于 1 2。℃显色 5分钟 , 得到层析谱 (图 5 ) 。
第 6卷 第 1期 怀牛碑茎亨效成分 的初步研究
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吉 林 农 业 大 学 学 报 1 9 84年
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-卫竺些丝型塑鲍些丝一— 一一一一一一一竺从层析谱上可以看出 : 结晶O 的斑点 (紫色 ) 与标准品完全一致 。 不同展开剂 所 呈
现的斑点R f值分别为 0 . 36 一 0 . 82 一 0 . 78 一 0 . 5 , 并和标准品齐墩果酸混合后进行层析 ,
仍呈单一斑点 。
3
、 结昌O的化学试脸
氯仿一浓硫酸反应 氯仿层由橙黄色转为缨红 色 , 硫酸层有绿色荧光 。
醋醉一浓硫酸反应 硫酸层 (下层 ) 显玫瑰红 色。
4
、 光讼分析
自东北引种怀牛膝茎提得的结晶 O 红 外 吸 收光谱 如 图 6所 示 。 I R v e m 一 ’ : 3 40 0
( 一 O H ) , 16 5 0 ( C = O ) , 2 9连。 , 1 3 5 5 , 1 3 6 0 ( 一 C H 。 ) , x 4 6 o ( b > C H ) , 2 8 6 0
( r C H Z )
,
1 0 4 2 (乙一 O H ) , 7 5 0 ( ) C = C ( H r 一 O H ) 。 与已知齐墩果酸标准 品核对
完全一致。
六 、 定 量 分 析
按图 3 流程提得的精 制 皂 贰 ,, 真 空
减压干燥至恒重称重。 按下式计算含量 。
结果如表 1 。
皂俄 %=f 精制皂俄重 / 生药重 x 1 0 % 。
项 目
{赣影 裂裸 东北引种怀牛膝茎
O峥.卜」4t孟`夕`皂俄冤 1 。 7 9
小 结 与 讨
1
、 从以上分析证明 : 怀牛膝茎确含有齐墩果酸 , 其含量实为可观 , 只是比其根含
量稍低而已 。 目前生产提取齐墩果酸的原料多为草药青叶胆 (S w e , it a m i l e o sn is
.T N
.
H e e t w
。
L
.
S ih ) )
。 鉴于青叶胆生长在云南高海拔山区 , 产量有限 , 从其 提
取齐墩果酸制成的齐墩果酸片供不应求 , 满足不了保健事业的需要 。 而怀牛膝几乎全国
各地均有栽培 , 资源丰富 , 然而其茎弃而不用 , 或当柴烧实为可惜 。 我们从怀牛膝茎提取
齐墩果酸较易获得纯品 。 因此 , 以怀牛膝茎为原料提取齐墩果酸 , 解决了原料不足的问
题 。 此外还可大搞综合利用 , 变废为宝 , 能获得较大的经济收益 , 值得重视 。
2
、 鉴于东北引种的怀牛膝根所含化学成分和原产地一致 (正丁醇萃取部分 ) , 唯
含量较原产地偏低 。 虽然其根木质化大一些 , 我们认为还是可以入药的 。但用量可以酌情
增加 。
参 考 文 献
〔 1 〕
〔 2 〕
李时珍著 : 《 本草纲 目 》 人民卫生出版社影印 第比卷 草部 : 色9 6 , 19 57年
北京医学院主编 : 《 中草药成分化学 》 , 人民卫生出版社 , 1 9 8 0年 , 第 4 20 页
吉 林 农 业 大 学 学 报 1 9台4年
〔 3 〕
〔 4 〕
〔 5 〕
〔 6 〕
〔 7 〕
〔 8 〕
〔 9 〕
〔一。〕
〔1 1〕
〔1幻
小川俊太郎等 : 药学杂志 ( 日文 ) , 第。 1 6期 , 1。了1年 9 1页
C
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A
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7 6 : 23 1 77 W ( x g 7 2 )
卫生部药品生物制品检定所等: 中药鉴别手册 (第 2 册 ) , 科学出版社 , 1 0 7 9年 , 第 10 了页
四川医学院主编 : 《 中草药学 》 , 人民卫生 出版社 , 19 7 9年 , 第 19 7页
C
.
A
.
2 3 : 4 0 2 1 ( 一。 2。 )
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韩德五等 : 《 中医杂志 》 第 3期 , 1 9 81 年 , 第 21 7页
马学惠等 : 《 药学学报 》 第 2期 , 1 9 8 2年 , 第93 页
湖南医药工业研究所 : 中草药通讯 , 第 4期 , 19 7了年 , 第 32 页
中国人民解放军第五十九医院 : 中草药通讯 , 第 5期 , 1 97 2年 , 第 38 页
(内部资料 )
湖南医药工业研究所 : 《 中草药通讯 》 , 第 4期 , 19 7 7年 , 第 36 页
, 月. 勺月 , 司. 口 , 口卜 . 月卜 月, 切 ` 卜 . , 司 , . 卜勺 心. 司户 . 闷卜 闷, 口卜曰卜. 心卜月. . 闷 , 川口 月卜 月 , 叫户心 门, . , 奋 `卜 阅 , 月卜司卜心 月卜刊 . 阅卜口卜月卜口月 p刃目
第 39 8页
司 , 刁阅 , 月 , 曰卜
猪用促长剂 ( P 一 IP A 制剂 )
获吉林省政府科研成果二等奖
由吉林农业大学牧医系和辽源津渭农药厂联合研制成功的猪用促长剂 ( P一 IP A 制
剂 ) , 于 1 9 8 3年 10 月 , 荣获吉林省人 民政府颁布的 1 9 8 2年度科研成果二等奖 。
猪用促长剂商品名为 《 育肥灵 》 , 是一种人工合长成的生长促进剂 (详见本刊 1 9 8 2年
第 2 期 ) 。 经专家鉴定和用户使用后证明 , 该药适用于架子猪 、 克朗猪及商品育肥猪 , 具
有调节猪的新陈代谢 、 使之增强食欲 、 红血球增数 、 促进蛋 白质合成等功效 ; 而且对大
肠杆菌 , 巴氏杆菌等具有抑制作用 。 仔猪断奶后使用 , 日增重较对照猪提高 15 一 18 % ,
5 个月即可出栏 , 平均头重达 2 0 斤左右 , 还可使饲料利用率提高4一 13 % 。
另据卫生部门测定 , 该药化学性质稳定 , 容易保存 , 使用方便 , 安全可靠 。 具有高
效 、 低毒 、 无致癌致畸等特点 , 对猪肉的商品价值和食用 口味均无不良影响 , 是较为理
想的新型猪用促长剂 。
吉林省科委将此项成果列为 19 8 3年农业科技推广成果之一 ; 国家科委也将此项成果
列为全国农村适用技术成果 。 (科宣 )