全 文 ：高效液相色谱法测定松橄榄胶囊中尿苷的含量
戚雁飞 ,龚青 ,鲁敏(浙江省药品检验所 ,杭州 310004)
摘要:目的　建立高效液相色谱法测定松橄榄胶囊中尿苷的含量。方法　使用 Dikma-C
18
柱(250mm×4.6mm, 5.0μm), 0.02
mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相 , 流速 1mL/min;检测波长为 262nm。结果　此方法线性关系良好 , 平均回收率为 100.5%,
RSD=1.0%(n=9)。结论　本方法可用于松橄榄胶囊的质量控制。
关键词:松橄榄胶囊;尿苷;高效液相色谱法
中图分类号:R917.792.1　　　文献标识码:B　　　文章编号:1007-7693(2006)05-0385-02
DeterminationofuridineinSongganlancapsulesbyHPLC
QIYan-fei, GONGQing, LUMing(ZhejiangInstituteforDrugControl, Hangzhou310004, China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　ToestablishanHPLCmethodforthedeterminationofuridineinSongganlancapsules.METHODS　
HPLCwasusedtodetermineuridineinSongganlancapsulesonDikma-C18 column(250mm×4.6mm, 5.0μm).Themobilephasewas
0.02%KH
2
PO
4
.Thedetactionwavelengthwas262nm.RESULTS　Thelinearityofthismethodwaswell.Theaveragerecoverywas
100.5% andtherelativestandarddeviationwas1.0%(n=9).CONCLUSION　ThemethodcanbeusedforqualityconreolofSong-
ganlancapsules.
KEYWORDS:Songganlancapsules;uridine;HPLC
　　松橄榄胶囊为隐孔菌发酵物经加工制成的胶囊剂。隐
孔菌发酵物中含有尿苷 , 其具有一定的药理活性 , 故选择尿
苷作为含量测定的指标 , 建立了松橄榄胶囊中尿苷的 HPLC
含量测定方法。实验结果表明 , 方法简便 、准确 、重现性好 ,
可作为松橄榄胶囊质量控制的有效方法。
1　仪器与试药
Agilentl00系列高效液相色谱仪 , 紫外检测器 , HP-
Chemstation色谱工作站。 UV-260紫外分光光度计(岛津);
尿苷对照品 , 由中国药品生物制品检定所提供 (批号 887-
200001,含量测定用), 甲醇为色谱纯 , 水为重蒸水 , 其余为分
析纯。样品由某公司提供。
2　实验方法与结果
2.1　测定波长的选择
取尿苷适量 , 加 15%甲醇制成对照品溶液 , 用紫外分光
光度计记录其紫外吸收光谱 , 结果显示 , 尿苷在 261.8nm波
长处有最大吸收 , 故选择 262nm为测定波长。
2.2　色谱条件和系统适应性试验
色谱柱:DiscoveryC18(250nm×4.6nm, 5μm);流动相:
0.02%磷酸二氢钾;检测波长:262nm;柱温:25℃;流速:1.0
mL/min, 进样量为 10μL。理论塔板数按尿苷峰计算不低于
3000。在此条件下尿苷与其他组分峰能达到很好分离。
2.3　对照品 、供试品溶液和空白溶液的制备
2.3.1　对照品溶液　取经五氧化二磷减压干燥 24h的尿苷
对照品适量 ,精密称定 , 加 15%甲醇制成每 lmL含 20μg的溶
液。
2.3.2　供试品溶液的制备　精密称取松橄榄胶囊的内容物
约 0.4g,置圆底烧瓶中 , 精密加入 15%甲醇 50mL, 称定重量 ,
加热回流 1h, 放冷 , 称重 , 用 15%甲醇补足减失的重量 , 摇
匀 , 滤过 ,取续滤液 , 作为供试品溶液。
2.3.3　空白溶液　取不含隐孔菌发酵物的阴性样品同法制
成空白对照溶液。
2.4　测定方法
精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10μL, 分别注入
高效液相色谱仪 ,测得色谱峰面积 , 计算样品含量。
2.5　线性关系考察
精密称取经减压干燥 24h的尿苷对照品适量 , 加 15%甲
醇配成每 1mL含尿苷 19.23μg的对照品溶液。分别精密吸
取该对照品溶液 1, 5, 10, 15, 20, 30μL, 注入高效液相色谱仪 ,
测得峰面积 Y,以进样量(μg)为横坐标 ,峰面积为纵坐标 ,作
标准曲线 , 并以最小二乘法计算得回归方程:Y=2 474X-
2.373, r=1.000 0, 结果显示进样量在 0.019 2 ～ 0.576 9μg
范围内有良好的线性关系。
2.6　进样精密度试验
取供试品溶液 ,按以上色谱条件 , 重复进样 6次 , 测定尿
苷的峰面积 , 结果 RSD为 0.04%(n=6)。
2.7　样品重复性试验
精密称取同一批松橄榄胶囊按供试品溶液方法制备 ,经
多次测定 , 其含量的 RSD=0.9%(n=6)。
2.8　专属性试验
取空白溶液同法测定 ,在尿苷对照品峰相应的位置未出
现色谱峰 , 说明空白溶液对尿苷的测定无干扰。
2.9　稳定性试验
·385·中国现代应用药学杂志 2006年 10月第 23卷第 5期　　　　　　　　　　　　　　　ChinJMAP, 2006October, Vol.23No.5
DOI :10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2006.05.016
从 0 ～ 42h, 取同一供试品溶液 ,按以上色谱条件 ,每间隔
一定时间进样 1针 , 测定峰面积 ,结果 RSD为 0.2%(n=7),
说明样品放置 42h稳定。
2.10　回收率试验
精密称取已知含量的松橄榄胶囊 , 各精密加入尿苷对照
品适量 , 按供试品溶液制备法制备 , 依法测定并计算 , 结果显
示平均回收率为 100.5%, RSD=1.0%。结果见下表 1。
表 1　回收率试验结果
Tab1　Resultsofrecoveryexperiments
编号 样品中含量(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
%
平均回收率
%
RSD
%
1 0.3946 0.4808 0.8796 100.89
2 0.4030 0.4808 0.8842 100.10
3 0.4209 0.4808 0.8975 99.14
4 0.5022 0.5769 1.0862 101.23
5 0.5353 0.5769 1.1116 99.90 100.5 1.0
6 0.5125 0.5769 1.0938 100.76
7 0.6294 0.6731 1.3145 101.79
8 0.6320 0.6731 1.3002 99.28
9 0.6233 0.6731 1.3069 101.57
2.11　样品测定
按拟定方法测定三批样品 ,结果见表 2。
3　讨论
3.1　提取溶剂的选择
根据尿苷的溶解性 ,本实验分别考察了 15%甲醇 、水及
表 2　样品测定
Tab2　Resultsofsampledetermination
批号 尿苷含量(mg/粒) RSD(%)
040701 0.77 1.9
040815 0.76 1.6
040816 0.78 1.2
50%乙醇 3种提取溶剂。经试验比较 , 15%甲醇和水两种溶
剂所提取的含量较高 , 而以 15%甲醇为溶剂可方便过滤 , 故
选择 15%甲醇作为提取溶剂。
3.2　提取方法的选择
本实验比较了超声提取和加热回流两种方法 , 时间分别
为 0.5, 1, 2h, 提取溶剂为 25, 50, 100mL, 结果用 15%甲醇
50mL回流 1h提取已较完全 , 故选择此为最佳提取方法。
3.3　色谱条件和系统适应性试验
色谱柱比较了 DiscoveryC18和 DikmaC18柱 ,均可得到较
好的分离;流动相用 0.02mol/L磷酸二氢钾溶液即可 , 尿苷出
峰后 1h仍有较大色谱峰 , 故出峰后可用甲醇-0.02mol/L磷
酸二氢钾溶液(10∶90)洗脱除去杂质。
3.4　对照品选择
松橄榄胶囊为隐孔菌发酵物经加工而成的单味制剂。
据报道 , 隐孔菌发酵物还含有多糖 、隐孔酸等成分 , 但均未找
到合适的对照品 ,故选择尿苷进行含量测定研究。
收稿日期:2005-06-14
作者简介:陈威 ,男(1973年 7月 ～ ),理学士 ,毕业于浙江医科大学药学系 ,从事医院制剂工作。
高效液相色谱法测定石榴皮中没食子酸的含量
陈威 ,来谊 ,沈利君(杭州市萧山区第一人民医院药剂科 ,杭州 311200)
摘要:目的　测定石榴皮中没食子酸的含量。方法　采用高效液相色谱法 , Zorbax-C18色谱柱 ,流动相水-二甲基甲酰胺-冰醋酸
(99.82-0.15-0.03), 检测波长 270nm,流速 1mL· min-1 , 柱温为室温。结果　在 0.081 ～ 0.811μg· mL-1范围内 , 没食子酸峰
面积(Y)与其进样量(X)呈良好的线性关系(r=0.9999),平均日内 、日间 RSD为 1.01%和 1.60%(n=6),不同浓度的平均回
收率为 98.35%, RSD=1.63%(n=6)。结论　该法快速简便 ,稳定可靠 , 专属性强。
关键词:没食子酸;高效液相色谱法;含量测定
中图分类号:R917.720.1　　　文献标识码:B　　　文章编号:1007-7693(2006)05-0386-03
DeterminationofgalicacidinmegranatespericarpwithHPLC
CHENWei, LAIYi, SHENLi-jun(DepartmentofPharmacy, theFirstPeoplesHospitalofXiaoshan, Hangzhou311200, China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　Todeterminethecontentofgallicacidinmegranates-pericarpwithHPLC.METHODS　AzorbaxC-
18 column(250mm×4.6mm, 5μm)wasused.Themobilephasewaswater-dimethyformamide-glacialaceticacid(99.82∶0.15∶
0.03), anddetectedat270nm;withflowrateof1.0mL· min-1 , andthetemperatureofcolumnwasatroomtemperature.RESULTS
·386· ChinJMAP, 2006October, Vol.23No.5　　　　　　　　　　　　　　　中国现代应用药学杂志 2006年 10月第 23卷第 5期