全 文 ：脉 ,降低外周血管阻力 ,增加肾血流量而不降低肾小
球滤过率 ,是目前作用最强的利尿药。随着临床广
泛应用 , 其配伍禁忌与不良反应的报道逐渐增
多 〔8-10〕。且呋塞米的利尿作用主要发生在给药后 1
～ 2h,而三药的利尿作用均较为均匀而持久 ,具体
表现在 1 ～ 5 h。
参 考 文 献
[ 1] 国家药典委员会 .中国药典 [ S] .一部 .北京:化学工
业出版社 , 2005:193, 249.
[ 2] 王利文 ,苏成业 , 刘国雄 .猪苓的利尿作用 [ J] .药学学
报 , 1964, 11(12):815-817.
[ 3] 韩旭 ,王家骥 .黄芪注射液药理研究 [ J] .北京中医 ,
2000, 19(1):44-45.
[ 4] 王茂盛 .中药学 [ M] .北京:科学出版社 , 2002:375-
376.
[ 5] 陈奇 .中药药理研究方法学 [ M].北京:人民卫生出版
社 , 2006:324-331, 379-383
[ 6] 江苏新医学院 .中药大辞典 [ M].上海:上海科学技术
出版社 , 1986:1596, 2191, 2038.
[ 7] 吴逢波 , 李健 ,唐尧 .利尿药的评价及合理应用 [ J] .华
西医学 , 2008, 23(2):423-424.
[ 8] 赵志研 .长期服用速尿致非胰岛素依赖型糖尿病 2例
[ J] .中国医院药学杂志 , 1999, 19(6):382-383.
[ 9] 鄢泽圣 .呋塞米导致急性全身性脓疱疹 [ J] .药物流行
病学杂志 , 2002, 12(1):44-45.
[ 10] 张端阳 .呋塞米静注致急性尿潴留 3例 [ J] .药物不
良反应杂志 , 2001, 3(2):122-123.
收稿日期:2009-08-20＊通讯作者:鄢丹 , Tel:010-66933325, E-mail:yd277@126.com。
·制剂与质量·
大孔吸附树脂法制备无患子皂苷及其抑菌活性表征
傅　勇1 ,雷　鹏 1 ,韩玉梅 1, 2 ,鄢　丹 3＊
(1.成都中医药大学 ,四川 成都 610075;2.重庆理工大学 , 重庆 400050;3.解放军第 302医院 , 北京
100039)
　　摘要　目的:制备无患子皂苷抑菌活性部位。方法:以无患子皂苷的洗脱率 、精制度为指标 ,考察大孔吸附树
脂对无患子皂苷的吸附性能和洗脱参数 ,并采用管碟法评测各洗脱部位抑菌活性强弱 , 以确证无患子皂苷制备工
艺的合理性。结果:13.6mL无患子皂苷样品液(生药 0.01g/mL)上大孔吸附树脂柱(Υ15 mm×H90 mm,干重 2.5
g),用蒸馏水 、 30%乙醇 、 70%乙醇各 3BV依次洗脱 , 抑菌活性部位无患子皂苷富集于 70%乙醇洗脱液中。 结论:
通过大孔吸附树脂富集与纯化 , 无患子皂苷洗脱率为 93.8%,精制度为 250.1%, 为无患子抑菌活性部位的开发提
供了物质保障 , 亦为其它皂苷类化合物的纯化工艺研究提供了实验参考。
关键词　大孔吸附树脂;纯化;无患子皂苷;抑菌活性
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2010)02-0267-06
InvestigationontheProcesofSapindusSaponinPurifiedwithMacroporous
AdsorptionResinandScreeningofItsBacteriostasis
FUYong1 , LEIPeng1 , HANYu-mei1, 2 , YANDan3
(1.ChengduUniversityofTCM, Chengdu610075, China; 2.ChongqingUniversityofTechnology, Chongqing400050, China;
3.302 MilitaryHospitalofChina, Beijing100039, China)
Abstract　Objective:Tostudythetechnologicalparametersofthepurificationprocessofsaponinswithmacroporousadsorption
resin.Methods:Theadsorptivecharacteristicsandelutiveparametersoftheprocesswerestudiedbytakingtheelutiveandpurifiedratio
ofsaponinsasmarkers.Bacteriostasisactivityofeachpartselutedwasevaluatedbythemeanofcup-platemethod.Results:13.6 mL
oftheextractionofsapindussaponin(crudedrugs0.01g/mL)waspurifiedwithacolumnofmacroporousadsorptionresin(Υ15 mm
×H90mm, dryweight2.5g)andwashedwith3BVofdistiledwater, thenelutedwith3BVof30% ethanoland3BVof70%ethanol,
mostofsaponinswerecollectedinthe70% ethanol.Conclusion:Withmacroporousadsorptionresinadsorbingandpurifying, theelu-
tiveratioofsaponinswas93.8% andthepurityreached250.1%.Sothisprocessofapplyingmacroporousadsorptionresintoadsorb
andpurifysaponinsisfeasible, andsuppliesreferencetothepurificationofothertypesofsaponin.
Keywords　Macroporousadsorptionresin;Purification;Sapindussaponin;Bacteriostasis
·267·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 33卷第 2期 2010年 2月
　　无患子为无患子科(Sapindaceae)植物无患子
(SapindusmukorossiGaertn)的假种皮 ,始记载于 《本
草纲目 》,具有清热祛痰 、消积杀虫等功效 ,多用于
喉痹肿痛 、咳喘 、白带 、疮癣 、肿毒的治疗〔1〕。现代
研究表明 ,无患子皂苷(soapnutsaponin)含有丰富的
糖苷类物质 ,主要为三萜皂苷类 、倍半萜糖类 〔2, 3〕 ,
有抗菌 、杀菌 、消炎和祛屑止痒等作用 〔2-6〕。因此 ,对
无患子皂苷类成分分离及药理活性筛选研究具有重
要意义 。
大孔吸附树脂是一类新型的非离子型高分子化
合物 ,近年来在药学领域(特别是天然药物精制)中
应用日益广泛 ,成为纯化中药有效成分的一种有效
方法。已有利用大孔吸附树脂对中药黄芪 、三七 、人
参 、赤芍等皂苷类成分纯化的报道〔7-12〕 ,但未见有对
无患子皂苷类成分纯化及药理活性的相关报道 。影
响其纯化效果的主要因素如树脂类型 、吸附容量 、洗
脱溶剂等常因纯化物质的理化性质不同而有所不
同 〔10〕。本实验以吸附容量 、洗脱率 、固形物量 、精制
度为评价指标 ,研究大孔吸附树脂纯化无患子皂苷
的工艺条件与参数 ,并结合其主要药效(抑菌活性)
进行确证。本研究结果提示所优化并经药理试验验
证的无患子皂苷制备工艺合理可行 ,为进一步开发
无患子皂苷有效部位提供了物质保障 ,亦为其它皂
苷类成分的纯化工艺研究提供了实验参考 。
1　仪器与材料
50 Bio紫外 -可见分光光度计(美国瓦里安技术
中国有限公司), BP211D电子天平(德国赛多利斯
股份有限公司)。无患子药材为无患子 (Sapindus
mukorosiGaertn)的种子(购于成都市五块石药材市
场 ,经重庆市药品检验所张毅鉴定),齐墩果酸对照
品 , (批号:110709-200505 ,由中国药品生物制品检
定所提供), D101、D201、D301大孔吸附树脂(天津
农药厂), D140、D141A大孔吸附树脂(晨光化工研
究院), M-H培养基(肉汤)、pH(7.4±0.2)(批号
060608,北京三药科技开发公司), M-H培养基(琼
脂)、pH(7.4±0.1)(批号 0608231),抗生素微生物
检定培养基 Ⅱ 、pH7.8 ～ 8.0(批号 061122,中国药
品生物制品检定所);白色念珠菌 [ Candidaalbicans
CMCC(F)98001, 由中国药品生物制品检定所提
供 ] ,氨苄青霉素(0803221)(山东鲁抗辰欣药业有
限公司),二甲基亚砜(DMSO), N, N-二甲基甲酰胺
(DMF),牛津杯外径(7.8mm)。
2　方法与结果
2.1　无患子皂苷含量测定
2.1.1　对照品溶液的制备:精密称取齐墩果酸对
照品 10.78 mg,置 10 mL量瓶中 ,加入少量甲醇超
声溶解 ,放冷 ,用甲醇定容至刻度 , 摇匀 , 即得每 1
mL含齐墩果酸对照品 1.078mg。
2.1.2 　标准曲线的制备:精密吸取对照品溶液
20、40、60、80、100μL于 5支具塞磨口试管中 ,水浴
加热挥去溶剂 ,于每支试管中分别精密加入 1.0 mL
5%香兰素试剂(5%香兰素试剂配制:称取 500 mg
香兰素溶于 10.0 mL冰醋酸中即得 ,需新鲜配制)、
4.0 mL高氯酸 ,密塞 ,摇匀 ,于 70 ℃水浴恒温加热
20 min,取出后立即用冰水浴冷却 2 ～ 3 min,于 540
nm波长处测定吸光度 ,随行试剂作空白参比 ,以吸
光度 A为纵坐标 ,齐墩果酸的质量(μg)为横坐标 ,
绘制标准曲线 , 并经回归处理 , 得回归方程为 Y=
0.0156x+0.0102(r=0.9968),说明吸光度 A与齐
墩果酸质量在 21.56 ～ 107.8 μg范围内有良好的线
性关系。
2.1.3 　供试品溶液的制备及总皂苷含量测定:称
取无患子药材粉末(过三号筛)约 2.5 g[同时另取
本品粉末测定水分(2005年版中国药典一部附录 IX
H第一法)] ,精密称定 ,加 6倍量 85%乙醇回流提
取 3次 ,每次 2 h,得无患子皂苷提取液 ,回收乙醇至
无醇味 ,加 150 mL水溶解 ,水饱和的醋酸乙酯萃取
3次 ,每次 80 mL,弃去醋酸乙酯层 ,合并水层 ,并转
移至 250 mL量瓶中 ,加水稀释至刻度 ,摇匀 ,即得供
试品溶液(每 1 mL相当于含原生药量 0.01 g)。精
密吸取供试品溶液 10 μL于具塞磨口试管内 ,水浴
加热挥去溶剂 ,按 “2.1.2”项下操作 ,并以标准曲线
法计算 ,无患子皂苷浓度以齐墩果酸计为 4.11 mg/
mL(n=3, RSD=2.15%)。
2.2　工艺参数考察与优化
2.2.1 　大孔吸附树脂预处理与再生:分别称取
D101 、D201 、D301 、D140 、D141A大孔吸附树脂各 2.5 g(干
重),以乙醇湿法装柱(Υ15 mm×H90 mm),用乙醇
洗脱 ,不时检测流出的乙醇液 ,当流出的乙醇液与水
(2∶1)混合不呈白色混浊时即可 ,蒸馏水洗至无醇
味;再生时可先用 10%氢氧化钠溶出或 10%盐酸洗
脱后 ,再按预处理的方法进行处理 。
2.2.2 　大孔吸附树脂类型的选择:大孔吸附树脂
常因类型不同 ,比表面积 、孔径 、极性差异较大 ,由此
决定的吸附容量也有较大的差异 。本实验以吸附容
量为指标 ,对 D101 、D201 、D301 、D140 、D141A大孔吸附树
脂进行考察 ,以确定纯化无患子皂苷的大孔吸附树
脂类型。各类大孔吸附树脂物理性能见表 1。
　　精密吸取供试品溶液各 20mL分别上样于经预
处理的不同类型的树脂柱内 ,预吸附 2 h,流速 1
·268· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 33卷第 2期 2010年 2月
BV/h(BV为柱床沉降体积),过柱流出液重吸附 1
次 ,收集流份 。测定流份中无患子皂苷的含量 ,计算
吸附容量 ,结果见表 2。
　表 1 各类大孔吸附树脂物理性能
树脂型号 厂名 极性 比表面积/(m2 /g)平均孔径/nm
D101 天津农药厂 非极性 400 30
D201 天津农药厂 弱极性 150 30
D301 天津农药厂 中极性 330 19
D140 晨光化工研究院 弱极性 500 ～ 600 95
D141A 晨光化工研究院 非极性 500 ～ 600 80
　表 2 各类大孔吸附树脂吸附容量
树脂型号 上柱液中总皂苷量/mg
过柱液中总皂苷量/mg
树脂吸附量/mg
吸附容量/(mg/g)
D101 82.20 26.11 56.09 22.44
D201 82.20 49.26 32.94 13.18
D301 82.20 65.21 16.99 6.80
D140 82.20 42.18 40.02 16.01
D141A 82.20 55.37 26.83 10.73
　　注:吸附容量 =(上柱液中总皂苷量 -过柱液中总皂苷量)/干
树脂量
　　由表 2可知 , D101大孔吸附树脂吸附容量较大 ,
2.5 g(干重)D101大孔吸附树脂可吸附无患子皂苷
56.09 mg,相当于供试品溶液 13.6 mL,故选择 D101
大孔吸附树脂纯化无患子皂苷。
2.2.3 　洗脱溶媒的确定:精密吸取供试品溶液(生
药 0.01 g/mL)13.6 mL依法上柱 , 依次用蒸馏水
3BV、30%乙醇 、 50%乙醇 、70%乙醇 、 95%乙醇各
4BV洗脱 ,洗脱速度 1 BV/h,按 1BV/份收集流份。
测定各流份中无患子皂苷的含量 ,计算洗脱率并测
定固形物量(见表 3)。以收集流份数为横坐标 ,洗
脱率为纵坐标绘制洗脱曲线(见图 1)。
图 1　洗脱曲线图
1 ～ 3号蒸馏水洗脱液 , 4 ～ 7号 30%乙醇洗脱液 , 8 ～ 11号
50%乙醇洗脱液 , 12 ～ 15号 70%乙醇洗脱液 , 16 ～ 19号
95%乙醇洗脱液
　　表 3 不同浓度乙醇洗脱实验数据
洗脱溶媒
1BV
固形物 /mg 洗脱液中皂苷量 /mg 洗脱率 /%
2BV
固形物 /mg 洗脱液中皂苷量 /mg 洗脱率 /%
蒸馏水洗脱 51.2 4.68 8.34 14.5 1.37 2.44
30%乙醇洗脱 49.6 - - 51.2 - -
50%乙醇洗脱 55.4 5.86 10.45 68.3 9.12 16.26
70%乙醇洗脱 30.7 8.45 15.07 32.8 10.53 18.77
95%乙醇洗脱 3.6 - - 1.2 -
　　续表 3 不同浓度乙醇洗脱实验数据
洗脱溶媒
3BV
固形物 /mg 洗脱液中皂苷量 /mg 洗脱率 /%
4BV
固形物 /mg 洗脱液中皂苷量 /mg 洗脱率 /%
蒸馏水洗脱 2.2 - -
30%乙醇洗脱 49.6 - - 61.2 1.12 2.00
50%乙醇洗脱 33.5 4.88 8.70 26.5 3.65 6.51
70%乙醇洗脱 6.1 2.65 4.72 - - -
95%乙醇洗脱 - - - - - -
　　注:(1)“ -”表示未检出;(2)洗脱率(%)=[洗脱液中皂苷量(mg)/树脂吸附皂苷量(mg)] ×100%
　　结果表明 , 50%乙醇和 70%乙醇洗脱部位为皂
苷类成分的主要存在部位 ,且 70%乙醇洗脱能力强
于 50%乙醇 ,故确定以 70%乙醇作为无患子皂苷类
成分的洗脱溶媒;蒸馏水 、30%乙醇洗脱时均有一定
·269·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 33卷第 2期 2010年 2月
量的固形物存在 ,说明蒸馏水 、30%乙醇洗脱达到了
除杂的目的 ,同时蒸馏水洗脱流份 Molish反应呈阳
性 ,进一步证实蒸馏水洗脱可除去糖类成分 ,从而纯
化了皂苷类成分 。
2.2.4　洗脱溶媒用量的确定:精密吸取供试品溶
液(生药 0.01 g/mL)13.6 mL依法上柱 ,依次用蒸
馏水 3BV、30%乙醇 、70%乙醇 、95%乙醇各 4BV洗
脱 ,洗脱速度 1BV/h,以 1BV/份收集流份 。测定各
流份中无患子皂苷含量 ,计算洗脱率并测定固形物
量(见表 4);以收集流份数为横坐标 ,洗脱率为纵坐
标绘制洗脱曲线(见图 2)。
图 2　洗脱曲线图
1 ～ 3号为蒸馏水洗脱液 , 4 ～ 7号为 30%乙醇洗脱液 , 8 ～ 11
号为 70%乙醇洗脱液 , 12 ～ 15号为 95%乙醇洗脱液
　　表 4 洗脱溶媒用量实验数据
洗脱溶媒
1BV
固形物 /mg 洗脱液中皂苷量 /mg 洗脱率 /%
2BV
固形物 /mg 洗脱液中皂苷量 /mg 洗脱率 /%
蒸馏水洗脱 49.9 4.61 8.22 13.9 1.31 2.34
30%乙醇洗脱 50.1 - - 49.4 - -
70%乙醇洗脱 111.2 9.55 17.03 122.9 25.21 44.95
95%乙醇洗脱 4.3 - - 1.0 - -
　　续表 4 洗脱溶媒用量实验数据
洗脱溶媒
3BV
固形物 /mg 洗脱液中皂苷量 /mg 洗脱率 /%
4BV
固形物 /mg 洗脱液中皂苷量 /mg 洗脱率 /%
蒸馏水洗脱 2.0 - -
30%乙醇洗脱 52.2 - - 59.8 1.02 1.82
70%乙醇洗脱 41.1 9.98 17.79 13.7 - -
95%乙醇洗脱 - - - - - -
　　注:(1)“ -”表示未检出;(2)洗脱率(%)=[洗脱液中皂苷量(mg)/树脂吸附皂苷量(mg)] ×100%
　　结果表明 ,蒸馏水洗脱用量至 3BV时 ,流出液
中几乎无固形物 ,说明糖类等水溶性杂质已除去;
30%乙醇洗脱用量至 3BV时 ,在流份中未检出无患
子皂苷 ,而固形物量较高 ,说明 30%乙醇洗脱可达
到除杂质的目的 ,当 30%乙醇用量至 4BV时 ,无患
子皂苷洗脱率为 1.82%,说明皂苷随 30%乙醇用量
的增加已有部分被解吸附 ,故确定 30%乙醇用量至
3BV;70%乙醇洗脱用量至 3BV时 ,皂苷已基本被解
吸附完全 ,当 70%乙醇用量至 4BV时 ,流出液中未
检出皂苷类成分;95%乙醇洗脱液中有少量杂质 ,无
皂苷存在 。故确定洗脱溶媒用量为蒸馏水 3BV、
30%乙醇 、70%乙醇各 3BV,收集 70%乙醇洗脱部
位 。
综上所述 ,初步确定最佳工艺为 D101大孔吸附
树脂纯化无患子皂苷 ,蒸馏水 、30%乙醇 、70%乙醇
各 3BV以 1BV/h速度依次洗脱 ,收集 70%乙醇洗
脱部位 。
2.2.5 　验证试验:精密吸取供试品溶液 (生药
0.01 g/mL)13.6 mL依法上柱 ,平行 3份 ,分别用蒸
馏水 、30%乙醇 、 70%乙醇各 3BV洗脱 , 洗脱速度
1BV/h,以 1BV/份收集流份 。测定各流份中无患子
皂苷含量 、固形物量 ,计算洗脱率及精制度 (见表
5)。表 5结果表明 ,蒸馏水 、30%乙醇洗脱部位均未
检出无患子皂苷 , 但有固形物存在 ,表明达到了除
杂 、纯化的目的;70%乙醇洗脱部位皂苷洗脱率
93.8%,为其主要富集部位 ,且精制度达 250.1%,
纯化效果较好 ,表明所选工艺条件适宜无患子皂苷
的富集纯化且重现性良好。
2.3　抑菌活性试验
2.3.1 　菌液和样品液制备:
2.3.1.1　实验菌液的制备:将冻干的菌种划线接
种于 M-H琼脂培养基上培养 24 ～ 48h后 ,挑选菌落
转种于 M-H肉汤培养基中 , 37 ℃水浴振荡培养 4 ～
6h,置 4 ℃冰箱中保存 。
·270· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 33卷第 2期 2010年 2月
　　表 5 工艺参数验证性试验结果
评价指标 试验 1 试验 2 试验 3 平均结果
上柱液中皂苷量 /mg 56.09 56.09 56.09 56.09
上柱液中固形物量 /mg 848.0 848.0 848.0 848.0
上柱液中总固形物中皂苷含量 /% 6.6 6.6 6.6 6.6
水洗脱部位皂苷量 /mg - - - -
水洗脱部位总固形物量 /mg 60.4 63.8 61.5 61.9
30%乙醇洗脱部位皂苷量 /mg - - - -
30%乙醇洗脱部位总固形物量 /mg 155.1 148.5 154.9 152.8
70%乙醇洗脱部位皂苷量 /mg 53.21 51.79 52.80 52.6
70%乙醇洗脱部位总固形物量 /mg 321.8 315.3 318.7 318.6
70%乙醇洗脱部位总固形物中皂苷含量 /% 16.5 16.4 16.6 16.5
70%乙醇洗脱部位洗脱率 /% 94.8 92.4 94.1 93.8
无患子皂苷精制度 /% 250.5 248.9 251.0 250.1
RSD/% 0.43
　　注:(1)“ -”表示未检出;(2)洗脱率(%)=[洗脱率中皂苷量(mg)/树脂吸附皂苷量(mg)] ×100%;(3)无患子皂苷精制度(%)=(70%
乙醇洗脱液固形物中皂苷含量 /无患子上柱液固形物中皂苷含量)×100%
2.3.1.2　样品的配制:取完成图 1、图 2实验项下
不同乙醇浓度洗脱液各适量 ,挥干洗脱液 ,加 DMSO
和蒸馏水溶解并以蒸馏水稀释至所需相同浓度(其
中图 2中 70%乙醇洗脱部位稀释浓度加倍),流通
蒸汽灭菌 30min,备用;将氨苄青霉素加蒸馏水溶解
并以磷酸缓冲液 (pH=7.8)稀释成不同浓度的溶
液 ,滤过除菌 ,作实验参照备用;随行用蒸馏水稀释
DMSO,经滤过除菌处理后作溶媒空白备用 。
2.3.2　测定方法:取灭菌后的抗生素微生物鉴定
培养基 Ⅱ(培养基厚度为 3 mm),冷至 48 ～ 50 ℃,
分别加入适量的菌液(以得清晰的抑菌圈为度),置
入水平的培养平皿中 ,除去气泡 ,待培养基凝固后 ,
在需要放牛津杯的位置做好标记。
在培养平皿上间隔 2.5 ～ 3.0 cm放置牛津杯 ,
注意与标记位置对应 ,取相同量的各样品加样 ,做 3
～ 4个复管 ,再置于 37 ℃培养箱中进行培养 16 ～ 18
h后 ,用游标卡尺准确测量各样品抑菌直径(整个过
程无菌操作),结果见表 6。
　表 6　　　　　不同洗脱部位样品对白色念
珠菌的抑菌作用( x±s, mm)
样品编号 抑菌圈直径 样品编号 抑菌圈直径
A(F) 16.25±0.48 D 19.24±0.32
B(G) 13.87±0.14 E(I) 9.21±0.32
C 18.54±0.14 H 22.51±0.24
　　注:A(F)为图 1(图 2)中 1～ 3号蒸馏水洗脱液;B(G)为图 1
(图 2)中 30%乙醇洗脱液;C为图 1中 50%乙醇洗脱液;D为图 1中
70%乙醇洗脱液;E(I)为图 1(图 2)中 95%乙醇洗脱液;H为图 2中
70%乙醇洗脱液
2.3.3 　结果分析:表 6测定数据直观分析可知 ,在
图 1、图 2实验中 50%和 70%乙醇洗脱部位是抑菌
主要活性部位 ,且图 1实验中 50%、70%乙醇洗脱
部位活性强度均低于图 2实验中 70%乙醇洗脱部
位(后者供试品浓度减半)。对上述数据进行样品
聚类分析(图 3),从结果可以看出 , 95%乙醇洗脱部
位 E(I)几无抑菌活性首先被单独聚为一类;图 1、
图 2实验中 50%和 70%乙醇洗脱部位 C、D、H与蒸
馏水 、30%乙醇洗脱部位 A(F)、B(G)各聚为一类;
结合数据直观分析结果 ,提示本研究建立的无患子
皂苷制备工艺合理 、可行 。
图 3　不同洗脱部位抑菌活性聚类分析结果图
3　结论与讨论
3.1　中药无患子主要含有三萜皂苷类 、倍半萜糖
苷类 、脂肪油 、蛋白质等多种成分 ,无患子皂苷富集 、
纯化存在一定的困难。本实验采用大孔树脂吸附法
富集 、纯化无患子皂苷 ,得出最佳工艺条件为 D101大
孔吸附树脂纯化无患子皂苷 ,蒸馏水 、30%乙醇 、
70%乙醇各 3BV以 1BV/h速度依次洗脱 , 收集
70%乙醇洗脱部位。以此工艺条件纯化无患子皂
·271·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 33卷第 2期 2010年 2月
苷 ,可达到较好的纯化效果 ,精制度达 250.1%,且
洗脱率为 93.8%。此外 ,从抑菌活性角度对制备工
艺进行了验证性研究 ,确证了所建立的大孔吸附树
脂适宜于无患子皂苷的分离 、纯化。
3.2 　大孔吸附树脂类型多样 ,不同类型的树脂 ,含
水量差异较大。故在吸附容量评价时 ,以树脂干重
计客观的反映了树脂吸附能力的强弱 。大孔吸附树
脂是一类新型非离子型高分子化合物 ,在生产过程
中加入了致孔剂等 ,形成了有机物残留问题 。故应
对纯化后的无患子皂苷进行有机物残留限量研究及
制订药用级大孔吸附树脂标准以扩大大孔吸附树脂
在药学研究生产中的作用 。
参 考 文 献
[ 1] 中国常用中草药彩色图谱 [ J] .贵阳:贵州科学技术出
版社 , 1997:371.
[ 2] 长尾常敦 .关于肿瘤细胞增殖抑制成分的研究:无患子
果皮中的活性成分 [ J] .国外医学 · 中医中药分册 ,
2002, 24(4):246.
[ 3] NakayamaK, FujinoH, KasaiR, etal.Solubilizingprop-
ertiesofsaponinsfromSapindusmukorossiGaertn[ J] .
ChemPharmBul, 1986, 34(8):3279-3283.
[ 4] IbrahimM, AleemAK, SantoshKT, etal.Antimicrobial
activityofSapindusmukorossiandRheumemodiextractsa-
gainstH.pylori:invitroandinvivostudies[ J] .WorldJ
Gastroenterol, 2006, 12(44):7136-7142.
[ 5] ShiJZ, LiuGT.Efectofα-hedefinandsapindosideBon
hepaticmicrosomalcytochromeP-450 inmice[ J] .Acta
PharmSinica, 1996, 17(3):264-266.
[ 6] 王维胜 , 龙子江 ,张玲 , 等.无患子皂苷对肾性高血压大
鼠血压及血管活性物质的影响 [ J] .中国中药杂志 ,
2007, 32(16):1703-1705.
[ 7] 吴巧凤 ,严云良.归芪补血冲剂中黄芪甲苷的含量测定
[ J] .时珍国药研究 , 1997, 8(2):130-131.
[ 8] 潘宏林 , 张坦 ,赵元元 .不同提取方法对黄芪药材中黄
芪甲苷含量测定的影响 [ J] .中药材 , 2004, 27(10):
774-775.
[ 9] 唐第光 .大孔吸附树脂法提取三七总皂苷工艺探讨
[ J] .中成药 , 1990, 12(8):5-7.
[ 10] 侯世祥 ,田恒康 .大孔吸附树脂在中药复方分离纯化
工艺中的应用 [ J] .中药新药与临床药理 , 2000, 11
(3):131-133.
[ 11] 彭华 ,陈洁炜 , 黄湘兰 , 等 .大孔树脂富集纯化人参总
皂苷工艺条件优选 [ J] .中药材 , 2006, 29(4):392-
394.
[ 12] 刘永刚 ,金向群 , 叶瑾 , 等 .大孔树脂纯化赤芍总苷的
研究 [ J].中药材 , 2005, 28(3):195-196.
收稿日期:2009-05-14基金项目:国家科技支撑计划项目(2007BAI48B06);区科研院所改革与发展专项基金(2009032)作者简介:胡佳惠(1984-),女,硕士研究生 ,从事仪器分析新方法及新药研究;Tel:15022916882, E-mail:candy1baby1@yeah.net。＊通讯作者:闫明 , Tel:0991-2574309, Fax:0991-2557730, E-mail:yanming21cn@sohu.com。
HPLC指纹图谱在白花丹提取工艺对比中的应用
胡佳惠 1 ,高　莉 1 ,彭晓明1 ,霍仕霞 1 ,闫　明 2＊
(1.石河子大学药学院 ,新疆 石河子 832003;2.新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所 ,新疆 乌鲁木齐
830049)
　　摘要　目的:建立并优化白花丹的最佳色谱条件 , 采用 HPLC指纹图谱选择白花丹药材最佳的提取方法。方
法:以保留时间 、相对峰面积为指标 ,综合评判 , 对白花丹半仿生提取法 、醇提取法与水提取法进行工艺对比。结
果:建立了白花丹最优的 HPLC-FPs分离条件 , 3种提取工艺得到 4个共有峰 ,白花丹醇提物与半仿生提取物的指纹
图谱相关性较好 , 得到 9个共有峰。白花丹药材用半仿生提取优于水提和醇提。结论:白花丹半仿生提取有望取
代水提 、醇提法 ,为其入血成分 、制剂工艺及药效学研究奠定了基础。
关键词　白花丹;高效液相色谱;指纹图谱;工艺对比
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2010)02-0272-04
ProcessComparisonofFingerprintsofDiferentExtractsofPlumbagozeylanica
byHighPerformanceLiquidChromatography
HUJia-hui1 , GAOLi1 , PENGXiao-ming1 , HUOShi-xia1 , YANMing2
(1.PharmacyColegeofShiHeZiUniversity, Shihezi832003, China;2.XinJiangInstituteofTraditionalUighuiMedicine, Urumqi
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