全 文 ：2012 年第 1 期 39
收稿日期:2011-11-08
作者简介: 曲春风 (1981 －) ，男，硕士，从事仪器分析方面研究工作。E-mail:qcf_81@ 163． com。
通信作者: 周燕霞，E-mail:zcx_11@ 126． com。
文献著录格式: 曲春风，张倩，田芯，等． 野生与仿生栽培刺五加叶浸出物中多糖与黄酮含量分析［J］． 浙江农业科学，2012 (1) :39 － 41．
野生与仿生栽培刺五加叶浸出物中
多糖与黄酮含量分析
曲春风，张 倩，田 芯，周燕霞
( 山东大学 威海分校海洋学院，山东 威海 264209)
摘 要:依据药典中浸出物含量测定的方法，分别对刺五加叶的水提浸出物和醇提浸出物中多糖与黄酮含
量进行测定。刺五加叶中醇提浸出物含量明显高于水提浸出物含量，水浸出物中，9 月 11 日采收的仿生栽培刺
五加叶水浸出物中可溶性多糖的含量最高，5 月 25 日采收的野生刺五加叶浸出物中可溶性多糖的含量最低。醇
浸出物中，7 月 25 日采收的野生刺五加叶浸出物中总黄酮的含量最高，5 月 25 日采收的野生刺五加叶浸出物中
总黄酮的含量最低。本方法简便可靠、快速、重现性好，适用于刺五加叶浸出物中多糖与黄酮含量测定。
关键词:刺五加; 浸出物; 多糖; 黄酮; 含量分析
中图分类号:S 567 文献标志码:A 文章编号:0528-9017(2012)01-0039-03
刺五加 (Acanthopanax senticosus) 属于刺五加
科植物，其干燥根［1］、茎、叶可作药用［2］。刺五
加主要分布于中国 ( 东北、华北)、远东、朝鲜及
日本［3］，前苏联将刺五加作为人参代用品而广泛
载培［4］。我国吉林、黑龙江省野生资源丰富，蕴
藏量大。
2000 年以前之历代本草专著及新中国以来之
各版 《中国药典》均记载其药用部位为根。2000
年版 《中国药典》将其药用部位规定为根及地上
茎枝。在中国医药学中，刺五加被作为药物广泛应
用已有悠久的历史。其有特异性香气，性温，味
辛，微苦，有益气健脾，补肾安神之功效。《神农
本草经》将刺五加列为上品，并初步认识到其有
“益气”的作用; 至《名医别录》中就指出五加有
“补中，益精; 坚筋骨，强志意”的功效; 久服
“轻身耐老”，与它药配伍，亦可 “进饮食，健气
力，不忘事”。另雷斅著 《炮灸论》记五加皮有
“阳人使阴，阴人使阳”的作用。 《甄权本草》还
记载它能 “破逐恶风血……治内不足”。
现代药理研究表明刺五加可增强机体非特异性
防御能力，除具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、抗
辐射、抗损伤及抗疲劳作用外，还可治疗心脑血管
疾病、糖尿病、神经衰弱、益气健脾、补肾安神、
益精壮骨之功效［5］。近年来，经过对刺五加生理
活性和化学成分方面的研究，表明刺五加有效成分
为苷类，其中丁香苷，异秦皮啶是主要有效成
分［6 － 20］。为了探讨野生刺五加与仿生栽培刺五加
的性状及内在质量，提高其有效成分的利用率，我
们对野生刺五加与仿生栽培刺五加依据药典中浸出
物含量测定的方法，分别对刺五加不同部位中的水
提浸出物和醇提浸出物的含量进行了分析测定。
1 材料与方法
1. 1 试验样品及来源
采自吉林省通化地区。试验样品均由山东大学威
海分校海洋学院张崇禧教授鉴定为刺五加 ( 表1)。
1. 2 试验仪器及试剂
试验仪器:752 型紫外-可见分光光度计 ( 上
海光谱仪器有限公司) ，KQ-250DB 型超声波清洗
器 ( 昆山市超声仪器有限公司) ，电子计数天平
(500 g / 0. 001 g，金羊天平仪器厂) ，百灵LAI14
型电子天平 (110 g / 0. 000 1 g) ，常熟市百灵天平
仪器有限公司，101-2A 型数显电热鼓风干燥箱，
上海锦屏仪器仪表有限公司通州分公司。无水乙醇
为分析纯、蒸馏水。
试验试剂: 蒽酮、葡萄糖、浓硫酸、盐酸、无
水乙醇、三氯化铝溶液、醋酸钠溶液、乙醇等，均
为分析纯。蒸馏水自制，芦丁对照品购于中国药品
DOI:10.16178/j.issn.0528-9017.2012.01.030
40 2012 年第 1 期
表 1 刺五加的样品来源
入药部位 采收日期 采收地点 样品来源
叶 05-25 食用期 野生
叶 07-23 开花期 野生
叶 07-25 开花期 野生
叶 09-11 果期 野生
叶 09-21 果熟期 野生
叶 05-25 食用期 仿生栽培
叶 07-25 花期 仿生栽培
叶 09-11 果期 仿生栽培
生物制品检定所。
1. 3 试验方法
1. 3. 1 浸出物的制备
水提浸出物的制备。分别精密称取刺五加叶粉
末 ( 恒重)2. 000 g，每个样品称取 3 份 (3 次平
行) ，分别置于100 mL 具塞三角瓶中，加蒸馏水
50 mL，浸泡 30 min，超声提取 30 min，静置过滤，
重复提取 2 次，过滤 3 次，滤液分别置蒸发皿中蒸
干 ( 蒸发皿在105 ℃下恒重，称重)。浸出物重量
=总重 －蒸发皿净重。
醇提浸出物的制备。精密称取刺五加叶粉末
( 恒重)2. 000 g，每个样品称取 3 份 (3 次平行) ，
分别置于 100 mL 具塞三角瓶中，加 70% EtOH 50
mL，浸泡 30 min，超声提取 30 min，静置过滤，
重复提取 2 次，过滤，3 次滤液分别置蒸发皿中蒸
干 ( 先在105 ℃下恒重) ，再把带浸出物的蒸发皿
恒重，称重。浸出物重量 =总重 －蒸发皿。
1. 3. 2 浸出物中可溶性多糖分析
显色剂 ( 蒽酮-浓硫酸) 的制备。取 98%的浓
硫酸 76 mL，稀释成 100 mL 溶液; 精密称取蒽酮
0. 100 0 g，放入 100 mL 容量瓶中，逐渐加入上述
配制的硫酸溶液至刻度并摇匀，冷却至室温，备用
( 需临用前现配)。
标准曲线的制备。将葡萄糖于 60 ℃烘 1 h，再
逐渐升温至 105 ℃ 干燥至恒重。精密称取 10. 55
mg，置 100 mL 容量瓶中，用蒸馏水溶解并稀释至
刻度，取 16 支试管，除空白试液外，其余 5 组都
做 3 次平行实验，按表 2 加试剂，于 620 nm 处测
定吸光度，记录数据，绘制标准曲线。将所得数据
进行统计处理，得回归方程:
y = 5. 081 7x + 0. 032 9，R2 = 0. 999。
样品液的制备与测定。各取水提浸出物 0. 25
mg，分别置于 25 mL 容量瓶中，用 50% 的乙醇定
容至刻度，混匀。分别取 1. 0 mL 加入具塞试管中，
再加入蒽酮 － 浓硫酸试剂 5. 0 mL，混匀。同时另
取 1 支具塞试管加 50% EtoH 1 mL，再加入蒽酮 －
浓硫酸试剂 5. 0 mL，作为空白实验。置沸水浴中
加热 10 min，冷却至室温。于 620 nm 处测定吸光
度，记录数据。
1. 3. 3 醇浸出物中总黄酮的分析
显色剂溶液的配制。0. 1 mol·L － 1三氯化铝溶
液的配制: 取结晶三氯化铝2. 46 g 于 100 mL 容量
瓶中，用无水乙醇定容，摇匀，备用。
1 mol·L － 1醋酸钠溶液的配制: 取结晶醋酸钠
13. 6 g 于 100 mL 容量瓶中，用蒸馏水定容，摇匀，
备用。
对照品溶液的制备。精密称取干燥至恒重的芦
丁对照品 5. 8 mg，置 50 mL 容量瓶中，以 75%乙
醇定容至刻度。
标准曲线的制备。吸取对照品溶液 0. 0，1. 0，
1. 5，2. 0，2. 5，3. 0，3. 5 mL 于 7 支 25 × 250 mL
试管中，按表 2 加试剂，混匀，静置 40 min。在
420 nm 处测吸光度，3 次平行，以吸收值 D 为纵
坐标，质量 mg 为横坐标，绘制标准曲线，将所得
数据进行统计处理，得回归方程 y = 0. 103 5 x +
0. 129 9，R2 = 0. 999
样品溶液的制备与测定。取醇浸提物 0. 25 mg
分别置于 25 mL 容量瓶中，用 75% 的乙醇定容至
刻度。吸取 5 mL 于试管中，加入 75%乙醇 1 mL，
0. 1 mol 三氯化铝溶液 3. 0 mL 及 1 mol·L － 1醋酸钠
溶液 5. 0 mL，摇匀，静置 40 min，取样品溶液于
420 nm 处测吸光度，3 次平行，记录数据。
2 结论与分析
2. 1 刺五加叶浸提物成分及含量
刺五加叶浸提物成分及含量见表 2。
2. 2 方法学考查
2. 2. 1 多糖含量分析方法学考查
回收率试验: 称取6 份已知多糖含量的样品粉
末约 0. 6 g，精密称定，置于磨口锥形瓶中分别加
入 27. 53 mg·mL － 1的葡萄糖对照品溶液 0. 5 mL，
按前面样品处理法提取，并按样品测定项操作，计
算总多糖含量和回收率。平均回收率为 100. 32%，
RSD = 0. 223% (n = 6)。
精密度试验: 称取已知多糖含量样品粉末约
0. 6 g，精密称定，按样品测定方法，连续测 6 次，
测得吸光度并计算含量，RSD = 0. 223% (n = 6)。
曲春风，等: 野生与仿生栽培刺五加叶浸出物中多糖与黄酮含量分析 41
表 2 刺五加叶浸提物成分及含量
采样
日期
样品来源
水提物含
量 /%
醇浸出物
含量 /%
多糖含
量 /%
总黄酮
含量 /%
05-25 野生 15 27 15. 06 13. 01
07-23 野生 12 20 16. 18 24. 98
07-25 野生 15 17 20. 12 26. 19
09-11 野生 13 20 19. 25 24. 18
09-21 野生 27 30 19. 02 20. 06
05-25 仿生栽培 15 20 15. 16 14. 11
07-25 仿生栽培 12 13 18. 12 16. 23
09-11 仿生栽培 12 17 20. 32 25. 34
稳定性试验: 取样品溶液，每隔10 min 测 1
次吸光度，记录在 60 min 内的吸光度值，求得
RSD 值为 1. 23% (n = 6)。
2. 2. 2 总黄酮含量分析方法学考查
回收率试验: 精密称取5 份已知总黄酮含量的
刺五加醇浸出物约 0. 25 mg，置于磨口锥形瓶中分
别加入0. 034 3 mg·mL － 1的芦丁标准品溶液 2 mL，
提取后按样品测定项操作，计算黄酮含量和回收
率。平均回收率为 100. 46%，RSD = 0. 77%。
精密度试验: 精密称取已知总黄酮含量的刺五
加粉末约 0. 5 g，连测 5 次，测得 RSD 为 0. 278%。
稳定性试验: 取样品溶液，每隔10 min 测 1
次 60 min 内的吸光值，求得 RSD = 1. 32% (n =
6)。
3 小结和讨论
刺五加叶的水提物浸出率和醇提物浸出率较
高，其中刺五加叶的水提物中浸出率最高的是 9 月
21 日采收的野生刺五加含量为 27%，最低的是 9
月 11 日采收的仿生刺五加含量为 12%; 醇提物浸
出率最高的也是 9 月 21 日采收的野生刺五加含量
为 30%，最低的是 7 月 25 日采收的仿生刺五加含
量为 13%。综合分析: 野生刺五加叶中水，醇浸
出物含量相对都高于仿生刺五加叶浸出物含量。
水浸出物中可溶性多糖的含量最高的是 9 月
11 日采收的仿生栽培刺五加叶浸出物含量为
20. 32%，最低的是 5 月 25 日采收的野生刺五加叶
浸出物含量为 15. 09%。
醇浸出物中总黄酮的含量最高的是 7 月 25 日
采收的野生刺五加叶浸出物含量为 26. 19%，最低
的是 5 月 25 日采收的野生刺五加叶浸出物含量
为 13. 01%。
由于浸出物的含量与药材质量密切相关，可以
作为刺五加质量评价标准之一。
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(责任编辑:张瑞麟)