全 文 ：草龙质量标准的研究
朱 丹1， 周 琼2， 黄瑞松3* ， 陆峥琳3， 李 琼1， 陈艳梅1
(1． 广西医科大学药学院，广西 南宁 530021;2． 广西大学农学院，广西 南宁 530003;3． 广西民族医药
研究院，广西 南宁 530001)
收稿日期:2015-11-25
基金项目:广西科学研究与技术开发计划项目 (桂科攻 14124002-11-2)
作者简介:朱 丹 (1980—)，女，博士，讲师，从事生药学和中药药理学研究。E-mail:englishzhudan030@ sina． com
* 通信作者:黄瑞松 (1958—)，男，主任药师，从事中草药质量标准和新药研究。E-mail:hrs． 3130064@ 163． com
摘要:目的 建立壮药草龙 Ludwigia hyssopifolia (G． Don )Exell的质量标准。方法 观察草龙的性状和显微特征，分
析水分、灰分及水溶性浸出物含有量，TLC法对没食子酸进行定性鉴别，HPLC法定量测定其含有量。结果 11 批样
品水分为 9. 0% ～ 12. 6%，总灰分为 4. 4% ～ 12. 7%，酸不溶性灰分为 0. 1% ～ 1. 5%，水溶性浸出物为 11. 8% ～
31. 1%。TLC斑点清晰，分离度良好。没食子酸在 0. 197 4 ～ 4. 935 0 μg 范围内呈良好的线性关系 (r = 0. 999 9)，平
均加样回收率 (n = 6)为 97. 54%，ＲSD为 1. 99%，平均含有量为 2. 61%。结论 该方法专属性和准确性较好，可用
于草龙的质量控制。
关键词:草龙;性状;显微特征;水分;灰分;水溶性浸出物;没食子酸
中图分类号:Ｒ284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2016)07-1516-06
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2016. 07. 017
Quality standard for Ludwigia hyssopifolia
ZHU Dan1， ZHOU Qiong2， HUANG Ｒui-song3* ， LU Zheng-lin3， LI Qiong1， CHEN Yan-mei1
(1． Pharmaceutical College，Guangxi Medical University ，Nanning 530021，China;2． College of Agriculture，Guangxi University，Nanning 530003，
China;3． Guangxi Academy of Minority Nationality Medicine and Pharmacology，Nanning 530001，China)
ABSTＲACT:AIM To establish the quality standard for Zhuang medicine Ludwigia hyssopifolia (G． Don)Ex-
ell． METHODS The traits of L． hyssopifolia were observed either through unaided eyes or microscope． The con-
tents of water，ash and water-soluble extract were analyzed． The qualitative and quantitative determination of gallic
acid were performed by TLC and HPLC，respectively． ＲESULTS In eleven batches of samples，the contents of
water，total ash，acid-insoluble ash and water-soluble extract were 9. 0% － 12. 6%，4. 4% － 12. 7%，0. 1% －
1. 5% and 11. 8% － 31. 1%，respectively． The TLC spots were clear and well-separated． Gallic acid showed a
good linear relationship within the range of 0. 197 4 － 4. 935 0 μg (r = 0. 999 9)，whose average recovery (n = 6)
was 97. 54% with the ＲSD of 1. 99%，and the average content was 2. 61% ． CONCLUSION This specific and
accurate method can be used for the quality control of L． hyssopifolia．
KEY WOＲDS:Ludwigia hyssopifolia (G． Don)Exell;traits;microscopic characteristics;water;ash;water-sol-
uble extract;gallic acid
草龙又名丁香蓼、水仙桃、田浮草、香须公、
小锁匙筒、针筒草、木败等，为柳叶菜科植物草龙
Ludwigia hyssopifolia (G． Don ) Exell 的干燥全
草［1］，在我国产于台湾、广东、香港、海南、广
西、云南等地，是广西壮族民间常用药材，具有通
火路、调谷道气道、清热毒、祛湿毒、消肿生肌之
功，用于贫痧 (感冒发热)、货烟妈 (扁桃体炎)、
口腔炎、屙泻 (泄泻)、喯咁 (疳症)、呗脓 (痈
疮)［2-3］。现代研究表明，草龙全草含有没食子酸、
棕榈酸、异香草醛、β-谷甾醇、豆甾醇-3-O-β-D-
葡萄糖苷、齐墩果酸等化合物［4-5］，其中没食子酸
具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化、抑菌、心血管保护、
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降血糖、防治神经退行性疾病等药理活性［6-10］。目
前，关于草龙质量控制方面的研究较少［11］，《中国
药典》2010 年版及地方标准均未收载其质量标准，
致使该药材处于无质量控制状态，严重影响临床用
药安全性及进一步开发利用。为此，本研究采集了
11 批不同产地的草龙药材，通过考察其性状、显
微、TLC、检查、浸出物、没食子酸含有量，建立
了草龙药材质量控制方法，并拟定了各检查、浸出
物、含量测定等项目的限度，为该药材的质量控制
和开发利用提供科学依据。
1 仪器与材料
1. 1 仪器 LC-20AT 高效液相色谱仪 (配置自动
进样器及二极管阵列检测器)、LCsolution 色谱工
作站 (日本岛津公司);KQ-100DE 数控超声波清
洗器 (昆明市超声仪器有限公司) ;X205 BDU 电
子分析天平 (十万分之一，瑞士梅特勒-托利多公
司);EASY PUＲE II超纯水器 (美国热电公司)。
1. 2 材料与试剂 草龙药材采自广西 11 个不同产
地，具体信息见表 1。其中，3 ～ 6 号样品采集对号
带花果腊叶标本，经广西中医药研究院赖茂祥研究
员和广西中医药大学韦松基教授鉴定，均为柳叶菜
科植物草龙 Ludwigia hyssopifolia (G． Don)Exell。
没食子酸对照品 (成都曼斯特生物科技有限公司，
含有量 98%，批号 UST-13040103)。甲醇为色谱纯
(美国 Fisher 公司);水为超纯水;其他试剂均为
分析纯。硅胶 G、H薄层板 (海洋牌，青岛海洋化
工厂分厂，批号 20110308，厚度 0. 2 ～ 0. 25 mm;
银龙牌，烟台化工研究所，批号 20110412，厚度
0. 2 ～ 0. 25 mm)。
表 1 样品信息
Tab. 1 Information of samples
编号 采集时间 采集地点
1 2013. 10. 16 岑溪市水汶镇
2 2013. 10. 29 武鸣县藤祥镇
3 2014. 07. 24 金秀县桐木镇
4 2014. 07. 28 宾阳县黎塘镇
5 2014. 07. 31 大新县龙门乡
6 2014. 08. 06 凤山县凤城镇
7 2014. 08. 06 凤山县凤城镇
8 2014. 08. 07 田阳县玉凤镇
9 2014. 08. 07 巴马县城
10 2014. 08. 28 宾阳县芦圩镇
11 2014. 11. 17 防城港市港口区
2 方法与结果
2. 1 性状鉴别 本品根呈圆柱形，灰黄色，稍弯
曲，多须根，直径 0. 3 ～ 0. 8 cm。茎表面灰绿色至
灰褐色，具细纵皱纹，多分枝，幼枝被微柔毛，质
软，易折断，断面皮部薄，黄白色，木部浅黄白
色，中心有宽广的髓部。叶纸质，披针形，多皱
宿，全缘，有稀柔毛，上表面灰绿色，下表面灰褐
色，长 2 ～ 10 cm，宽 0. 5 ～ 1. 5 cm。偶见花腋生，
萼片和花瓣均 4 枚，雄蕊 8 枚。偶见蒴果。气微，
味苦。见图 1。
图 1 草龙
Fig. 1 L． hyssopifolia
2. 2 显微鉴别
2. 2. 1 根横切面 呈近圆形，木栓层由 5 ～ 7 列扁
平长方形细胞组成，排列整齐。维管束无限外韧放
射状排列成环。维管射线明显;木质部分化到中
心，无髓部，但木薄壁细胞较多，薄壁细胞中可见
草酸钙针晶。见图 2。
1． 枯萎的表皮 2． 皮层 3． 木栓层 4． 韧皮部 5． 导管
6． 木射线 7． 初生木质部
1． withered epidermis 2． cortex 3． phellem 4． phloem 5． ves-
sel 6． xylem ray 7． primary xylem
图 2 根横切面
Fig. 2 Transverse section of root
2. 2. 2 茎横切面 呈偏圆形。表皮具较厚的角质
层;皮层较窄，维管束无限外韧型放射状排列成
环;韧皮部较窄，外侧具较多韧皮纤维，常聚集成
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束构成断续的同心环，形成层约 2 层;木质部导管
单个或成列，木纤维细胞较多，维管射线明显;髓
部较大，髓部散生草酸钙簇晶。见图 3。
1． 表皮 2． 皮层 3． 韧皮部纤维 4． 韧皮部 5． 木质部
6． 簇晶 7． 髓
1． epidermis 2． cortex 3． phloem fibers 4． phloem 5． xylem
6． cluster crystal 7． pith
图 3 茎横切面
Fig. 3 Transverse section of stem
2. 2. 3 叶横切面 上下表皮细胞各 1 列，细胞类
圆形，有少量非腺毛;叶肉组织分化明显，栅栏组
织 1 列，细胞形状呈长柱形，不通过主脉;海绵组
织由类圆形或长柱形的薄壁细胞构成，排列疏松，
有明显细胞间隙，具大量簇晶及少量针晶。叶脉
上、下表皮内侧具厚角组织。维管束类圆形，外韧
型，形成层不明显，叶片中脉及叶肉组织中多见簇
晶，叶肉组织中富含针晶束。见图 4。
1． 表皮 2． 栅栏组织 3． 海绵组织 4． 木质部 5． 韧皮部
6． 簇晶
1． epidermis 2． palisade tissue 3． spongy tissue 4． xylem
5． phloem 6． cluster crystal
图 4 叶横切面
Fig. 4 Transverse section of leaf
2. 2. 4 叶表面 表皮细胞呈不规则形或多边形，
上表皮细胞垂周壁弯曲呈浅波状，下表皮细胞垂周
壁弯曲呈深波状，下表皮气孔较多，多为不定式，
还有平轴式和不等式。可见非腺毛。见图 5 ～ 6。
1． 上表皮细胞 2． 气孔
1． upper epidermal cell 2． stoma
图 5 叶上表皮
Fig. 5 Upper epidermis of leaf
1． 下表皮细胞 2． 气孔
1． lower epidermal cell 2． stoma
图 6 叶下表皮
Fig. 6 Lower epidermis of leaf
2. 2. 5 粉末 呈黄白色。草酸钙针晶及簇晶多见，
针晶长 28 ～ 71 μm，簇晶直径 15 ～ 95 μm。可见螺
纹导管或网纹导管，螺纹导管直径 10 ～ 23 μm，网
纹导管直径 9 ～ 51 μm。有少量非腺毛，长 56 ～
350 μm。叶表皮可见气孔，多为不定式。见图 7。
图 7 粉末显微图
Fig. 7 Powder micrographs
2. 3 TLC鉴别 取本品粉末 0. 5 g，加水 20 mL，
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超声处理 30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加入甲醇
1 mL 溶解，作为供试品溶液。取没食子酸适量，
加甲醇制成每 1 mL含 1 mg该成分的溶液，作为对
照品溶液。按照《中国药典》2010 年版附录Ⅵ B
的 TLC法，分别吸取上述两种溶液 5 μL，点于同
一硅胶 H 薄层板上，以二甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲
酸 (5 ∶ 4 ∶ 0. 5 ∶ 0. 5)溶液为展开剂展开，取出，
晾干，喷以 1% 铁氰化钾溶液-1% 三氯化铁溶液
(1 ∶ 1)混合溶液，日光下检视。结果，11 批药材
供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，均显示
相同颜色的斑点，重复性较好。见图 8。
1 ～ 11． 草龙 12． 没食子酸
1 － 11． L． hyssopifolia 12． gallic acid
图 8 TLC色谱图
Fig. 8 TLC chromatogram
2. 4 检查 分别参照《中国药典》2010 年版一部
附录 IX H 水分测定法 “第一法”和 IX K 灰分测
定法［12］，测得 11 批药材的水分为 9. 0% ～12. 6%，
总灰分为 4. 4% ～ 12. 7%，酸不溶性灰分为
0. 1% ～1. 5%。见表 2。
表 2 水分、总灰分、酸不溶性灰分和水溶性浸出物测定
结果 (n =2)
Tab. 2 Determination results of water，total ash，acid-in-
soluble ash and water-soluble extract (n =2)
批号 水分 /% 总灰分 /% 酸不溶性灰分 /% 浸出物 /%
1 10. 0 7. 2 0. 2 16. 7
2 9. 4 4. 6 0. 1 13. 7
3 10. 4 7. 7 0. 3 31. 1
4 9. 5 4. 8 0. 2 11. 8
5 10. 4 12. 7 0. 7 26. 9
6 12. 6 10. 2 1. 0 34. 2
7 11. 2 7. 8 0. 4 20. 0
8 11. 9 12. 5 1. 5 30. 5
9 10. 0 9. 0 1. 0 26. 5
10 9. 5 5. 6 0. 2 15. 4
11 9. 0 4. 4 0. 8 10. 3
平均值 10. 4 7. 8 0. 6 21. 6
2. 5 浸出物测定 参照《中国药典》2010 年版一
部附录 X A 水溶性浸出物测定法 “热浸法”［12］，
测得 11 批药材水溶性浸出物为 10. 3% ～ 34. 2%。
见表 2。
2. 6 含有量测定
2. 6. 1 溶液制备 取没食子酸适量，加水制成每
1 mL含 108 μg 该成分的溶液，作为对照品溶液。
精密称取粉末 (过 4 号筛)0. 2 g，置于具塞锥形
瓶中，精密加入 10%盐酸溶液 25 mL，称定质量，
水浴 30 min，放冷，10%盐酸补足减失的质量，摇
匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液。取制备供
试品溶液的 10%盐酸，作为阴性对照溶液。
2. 6. 2 色谱条件和系统适应性试验 Gemini C18色
谱柱 (4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ;流动相甲醇-
0. 1%磷酸 (1 ∶ 99) ;体积流量 1. 0 mL /min;柱温
25 ℃;检测波长 272 nm。理论塔板数按没食子酸
计算，应不低于 2 000，取对照品和供试品溶液各
10 μL，进样测定。结果，在供试品和对照品溶液
色谱图相应的位置上，有相同保留时间的色谱峰，
而阴性对照无干扰。见图 9。
1． 没食子酸
1． gallic acid
图 9 HPLC色谱图
Fig. 9 HPLC chromatograms
2. 6. 3 线性关系考察 取没食子酸对照品
9. 87 mg，加水制成 493. 5 μg /mL 贮备液，精密吸
取 5、4、3、2、1、0. 2 mL，加水定容至 5 mL，摇
匀，精密吸取 10 μL，注入色谱仪。以峰面积为纵
坐标 (Y)，进样量 (μg)为横坐标 (X)绘制标
准曲线，得到回归方程 Y = 2 770 704. 84X － 89 286
(r = 0. 999 9) ，在 0. 197 4 ～ 4. 935 0 μg 范围内呈
良好的线性关系。
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2. 6. 4 精密度试验 取同一供试品溶液 (批号
4) ，在”2. 6. 2 “项色谱条件下连续进样 5 次，测
得没食子酸峰面积 ＲSD 为 0. 54%，表明仪器精密
度良好。
2. 6. 5 重复性试验 精密称取同一样品粉末 (批
号 4)6 份，每份 0. 2 g，按 “2. 6. 1”项下方法制
备供试品溶液，在 “2. 6. 2”项色谱条件下测定，
测得没食子酸含有量 ＲSD 为 1. 30%，表明该方法
重复性良好。
2. 6. 6 稳定性试验 取同一供试品溶液 (批号
4)，在“2. 6. 2”项色谱条件下，分别于 1、2、4、
8、12、24 h进样测定，测得没食子酸峰面积 ＲSD
为 0. 85%，表明供试品溶液在 24 h内稳定性良好。
2. 6. 7 加样回收率试验 精密称取含有量己知的
同一样品粉末 (批号 4)6 份，每份 0. 1 g，精密加
入含没食子酸对照品的 10%盐酸溶液 (68 μg /mL)
25 mL，按 “2. 6. 1”项下方法制备供试品溶液，
在“2. 6. 2”项色谱条件下测定，结果见表 3。
表 3 加样回收率试验结果 (n =6)
Tab. 3 Ｒesults of recovery tests (n =6)
称样量 /
g
原有量 /
mg
加入量 /
mg
测得量 /
mg
回收率 /
%
平均回收
率 /%
ＲSD /
%
0. 100 6 1. 720 7 1. 700 0 3. 420 8 100. 06
0. 099 6 1. 703 6 1. 700 0 3. 339 6 96. 28
0. 102 0 1. 744 7 1. 700 0 3. 440 0 99. 78
0. 100 8 1. 724 1 1. 700 0 3. 380 5 97. 48
0. 099 0 1. 693 3 1. 700 0 3. 321 4 95. 82
0. 099 0 1. 693 3 1. 700 0 3. 321 9 95. 85
97. 54 1. 99
2. 6. 8 样品含有量测定 分别取 11 批不同产地草
龙药材粉末 (过 4 号筛)0. 2 g，按“2. 6. 1”项下
方法制备供试品溶液，在 “2. 6. 2”项色谱条件下
进样测定，结果见表 4。
表 4 含有量测定结果 (n =2)
表 4 Ｒesults of content determination (n =2)
编号 没食子酸 /% 编号 没食子酸 /%
1 3. 57 7 5. 14
2 0. 69 8 2. 76
3 1. 68 9 4. 50
4 1. 90 10 1. 07
5 3. 23 11 0. 52
6 3. 70
3 讨论
据调查，草龙药材的易混品为毛草龙 Ludwigia
octovalxis L．，两者在性状方面具有一定差异。毛
草龙全株被柔毛，草龙只是幼枝及花序，叶下面脉
上被微柔毛;毛草龙花瓣先端微凹，具 4 对明显脉
纹，柱头头状，而草龙花瓣长椭圆形，花柱短，柱
头扁球形［13-14］。草龙显微鉴别主要特征为根薄壁
细胞中多见针晶束，茎髓及皮层薄壁细胞中富含簇
晶，韧皮部中木纤维细胞常聚集成束构成断续的同
心环，韧皮纤维较多，叶片中脉及叶肉组织中多见
簇晶，叶肉组织中富含针晶束。
文献记载，草龙含有没食子酸成分［4-5］。TLC
结果显示，11 批草龙药材均检出没食子酸成分，
而且斑点明显，无干扰，故采用没食子酸作为对照
品。本实验考察了三氯甲烷-丙酮-甲酸 (7 ∶ 2 ∶
1)、甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6 ∶ 10 ∶ 1)、二甲苯-乙
酸乙酯-丙酮-甲酸 (5:4:0. 5:0. 5)上层水溶
液，以及硅胶 G、H(均为青岛海洋牌)。结果，以
二甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲酸(5 ∶ 4 ∶ 0. 5 ∶ 0. 5)上
层水溶液为展开系统、硅胶 H 为吸附剂时，层析
效果较好。同时，比较氨蒸气熏、喷以 1%三氯化
铁乙醇溶液、喷以 1%铁氰化钾-1%三氯化铁溶液
(1 ∶ 1)混合溶液 3 种显色方式，发现 1%铁氰化
钾-1%三氯化铁溶液 (1 ∶ 1)显色效果较好。耐用
性试验表明，对不同品牌预制板、展开温度(8 ℃
和 30 ℃)、展开湿度 (55%和 88%)和点样方式
(点状点样和条带状点样)均具有良好的耐用性。
由表 2 可知，11 批草龙药材水分为 9. 0% ～
12. 6%，总灰分为 4. 4% ～ 12. 7%，酸不溶性灰分
为 0. 1% ～ 1. 5%，水溶性浸出物为 10. 3% ～
34. 2%。考虑到各产地气候条件及药材的差异，建
议草龙药材水分不得超过 15. 0%，总灰分为不得
超过 15. 0%，酸不溶性灰分为不得超过 3. 0%，水
溶性浸出物为不得少于 10. 0%。
没食子酸成分具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化、抑
菌、心血管保护、降血糖、防治神经退行性疾病等
药理作用［6-10］，故选择其作为草龙含量测定的控制
指标具有重要意义。经方法学考证，该方法精密度
和重复性高，供试液在一定时间内具有良好的稳定
性，加样回收率符合要求。经测定，11 批草龙药
材没食子酸含有量为 0. 52% ～ 5. 14%，平均
2. 61%，考虑到药材来源差异情况，建议草龙药材
中没食子酸 (C7H6O5)含有量按干燥品计算，应
不得少于 0. 50%。
参考文献:
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散瘀软膏质量标准的研究
周爱珍1， 尹 华2*
(1． 浙江医药高等专科学校，浙江 宁波 315100;2． 浙江中医药大学，浙江 杭州 310053)
收稿日期:2016-01-24
基金项目:浙江省科技厅重点项目 (2007C23020) ;浙江省中医药科学研究基金项目 (2016ZB116)
作者简介:周爱珍 (1982—) ，女，博士生，讲师，从事中药炮制及新药研发的教学和科研工作。Tel:15067441897，E-mail:aizhen_
zhou@ sina． com
* 通信作者:尹 华 (1965—) ，女，教授，博士生导师，从事中药质量标准及新药研发方面的教学和科研工作。Tel: (0571)
86613604，E-mail:maryyinhua@ 163． com
摘要:目的 建立散瘀软膏 (大黄、黄芩、黄柏等)的质量标准。方法 TLC法鉴别大黄、黄芩、黄柏。HPLC法对
黄芩苷、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚含有量进行测定。结果 TLC斑点清晰，阴性对照无干扰。5 个成分
分别在 224. 0 ～ 4 480 ng(r = 0. 999 3)、70. 40 ～ 1 407 ng(r = 0. 999 6)、76. 80 ～ 1 536 ng(r = 0. 999 7)、158. 2 ～ 3 165 ng
(r = 0. 999 2)、66. 00 ～ 1 320 ng (r = 0. 999 7)范围内线性关系良好，平均加样回收率分别为 97. 4% (ＲSD = 1. 0%)、
99. 2% (ＲSD = 2. 1%)、98. 5% (ＲSD = 1. 1%)、97. 7% (ＲSD = 1. 8%)、98. 3% (ＲSD = 1. 5%)。结论 该方法去
除了基质干扰，保证实验结果的准确性。
关键词:散瘀软膏;黄芩苷;大黄酸;大黄素;大黄酚;大黄素甲醚
中图分类号:Ｒ927. 2 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2016)07-1521-05
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2016. 07. 018
Quality standard for Sanyu Ointment
ZHOU Ai-zhen1， YIN Hua2*
(1． Zhejiang Pharmaceutical College，Ningbo 315100，China;2． Zhejiang Chinese Medical University，Hangzhou 310053，China)
ABSTＲACT:AIM To establish the quality standard for Sanyu Ointment (Ｒhei Ｒadix et Ｒhizoma，Scutellariae
Ｒadix，Phellodendri Chinensis Cortex，etc．)． METHODS TLC was applied to identifying Ｒhei Ｒadix et Ｒhizo-
ma，Scutellariae Ｒadix and Phellodendri Chinensis Cortex． The contents of baicalin，rhein，emodin，chrysophanol
and physcion were determined by HPLC． ＲESULTS The clear TLC spots indicated no disturbance due to nega-
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2016 年 7 月
第 38 卷 第 7 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
July 2016
Vol． 38 No． 7