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裂褶菌多糖抑制枇杷果汁褐变的工艺优化



全 文 :58 2016, Vol.37, No.06 食品科学 ※工艺技术
裂褶菌多糖抑制枇杷果汁褐变的工艺优化
刘淑敏,张兴龙,邵兴锋*,许 凤,王鸿飞
(宁波大学食品科学与工程系,浙江 宁波 315211)
摘  要:以“宁海白”枇杷为实验对象,研究不同质量分数裂褶菌多糖粗提物、4 种常用褐变抑制剂(草酸、柠檬
酸、VC、L-半胱氨酸)对抑制枇杷果汁褐变的影响。结果发现,5 种褐变抑制剂的作用效果强烈顺序为:L-半胱氨
酸>草酸>VC>柠檬酸>裂褶菌多糖,其中裂褶菌多糖质量分数在0.8%时,褐变抑制率达到80%以上。基于果汁
风味考虑,选择裂褶菌多糖、VC、L-半胱氨酸一起作为抑制剂组合,并通过响应面优化试验得出最佳组合为:裂
褶菌多糖质量分数1%、VC质量分数0.025%、L-半胱氨酸质量分数0.004%。经回归分析和验证实验,得到的果汁褐
变抑制率为98.04%,与理论模型预测值99.22%接近,响应模型可靠。优化处理后的果汁可溶性固形物、VC和总酚
含量都得以提高。可见,裂褶菌多糖可以与其他抑制剂复合使用,运用于枇杷果汁褐变防控。
关键词:枇杷果汁;褐变;裂褶菌多糖;优化
Optimization of Browning Inhibition of Loquat Juice by Schizophyllan
LIU Shumin, ZHANG Xinglong, SHAO Xingfeng*, XU Feng, WANG Hongfei
(Department of Food Science and Engineering, Ningbo University, Ningbo 315211, China)
Abstract: Development of natural and safe browning inhibitors is a hot spot for the prevention of fruit juice browning.
In this study, loquat juice from the cultivar “Ninghaibai” was used to study the effects of different concentrations of
crude schizophyllan combined with four common browning inhibitors (oxalic acid, citric acid, VC, and L-cysteine) on
prevention of loquat juice from browning. It was indicated that the order of the efficacy of five browning inhibitors was as
follows: L-cysteine > oxalic acid > VC > citric acid > schizophyllan. The percent inhibition of browning by schizophyllan
at a concentration of 0.8% was over 80%. Based on fruit juice flavor, we chose the inhibitor combination consisting of
schizophyllan, ascorbic acid and L-cysteine. The optimum inhibitor combination, i.e. 1% schizophyllan, 0.025% ascorbic
acid and 0.004% L-cysteine, was obtained using response surface methodology. The results of verification showed that
the percent inhibition of juice browning by the optimized combination was 98.04%, approaching to the predicted value of
99.22%, suggesting that the response surface model was reliable. The contents of total soluble solids (TSS), ascorbic acid
and total phenol in loquat juice were increased after treatment with the inhibitor combination. These results showed that
schizophyllan can be used in combination with other inhibitors to prevent loquat juice browning.
Key words: loquat juice; browning; schizophyllan; optimization
DOI:10.7506/spkx1002-6630-201606010
中图分类号:TS255.4 文献标志码:A 文章编号:1002-6630(2016)06-0058-06
引文格式:
刘淑敏, 张兴龙, 邵兴锋, 等. 裂褶菌多糖抑制枇杷果汁褐变的工艺优化[J]. 食品科学, 2016, 37(6): 58-63. DOI:10.7506/
spkx1002-6630-201606010. http://www.spkx.net.cn
LIU Shumin, ZHANG Xinglong, SHAO Xingfeng, et al. Optimization of browning inhibition of loquat juice by
schizophyllan[J]. Food Science, 2016, 37(6): 58-63. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-
201606010. http://www.spkx.net.cn
收稿日期:2015-06-10
基金项目:浙江省自然科学基金项目(R15C20002);浙江省科技厅公益性应用研究项目(2013C32094);
宁波市农业和社会发展攻关项目(2014C50084)
作者简介:刘淑敏(1989—),女,硕士研究生,研究方向为农产品贮藏与加工。E-mail:275002187@qq.com
*通信作者:邵兴锋(1980—),男,副教授,博士,研究方向为农产品贮藏与加工。E-mail:shaoxingfeng@nbu.edu.cn
※工艺技术 食品科学 2016, Vol.37, No.06 59
枇杷是我国南方的一种特产水果,不仅酸甜适口,
营养丰富,且具有润肺、止咳、和胃、清热等作用,
深受消费者喜爱。“宁海白”枇杷作为新的品种,品
质优良,皮薄,果肉呈白色,含糖量高、风味浓郁,
市场价值较高 [1]。但是,该种枇杷采后货架期短、极
易发生腐烂,亟需发展其加工产业。用枇杷制作的果
汁风味独特,营养丰富而全面,是理想的滋补保健
品。酶促褐变是果汁加工中遇到的主要障碍之一,多
酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)、过氧化物酶
(peroxidase,POD)能非常迅速地将酚类物质氧化为
褐色物质,造成果汁感官质量下降及营养物质损失[2]。
目前,实验研究常采用物理、化学和生物等方法来抑制
果汁的酶促褐变。其中最有效的抑制方法是添加褐变抑
制剂。最早使用的褐变抑制剂是亚硫酸盐,但由于亚硫
酸盐应用于果汁不具有安全性,目前已被限制使用。此
外,VC、L-半胱氨酸等也是经常使用的褐变抑制剂。如
詹嘉红[3]研究了pH值、还原剂(VC、L-半胱氨酸)、有
机酸(柠檬酸、草酸)对枇杷鲜果中PPO活性的影响,
结果表明,这几种因素可明显抑制PPO活性,且其最适
pH值为6.3。枇杷果肉果冻生产中,在护色剂乙二胺四乙
酸二钠添加量0.02%、柠檬酸添加量0.01%、异VC-Na添
加量0.03%时,枇杷果肉的护色效果最好,基本保持与鲜
果一样的色泽及亮度[4]。何志刚等[5]以枇杷为原料制备枇
杷清汁,加入0.3~0.5 g/㎏的VC可有效抑制枇杷浆汁的
氧化褐变。林剑阳[6]也探讨了抗氧化剂对枇杷果汁护色的
影响,通过感官评定证明添加0.1% VC+0.005%焦亚硫
酸钠护色效果最佳。近年来,探索生物褐变抑制剂成为
该领域的研究热点。如β-环糊精可将酚类物质等底物包
埋,防止果蔬汁中褐变发生,且可以与VC共同作用强化
VC的防褐变作用[7]。le Bourvellec等[8]发现天然花青素及
其氧化产物咖啡酰奎宁酸对PPO也有抑制作用,且其抑
制作用随质量分数的增加而增加。同时,Billaud等[9]发现
葡萄糖、果糖焦糖化的反应产物和L-半胱氨酸、葡萄糖
美拉德反应产物可以抑制PPO的活性,从而抑制酶促褐
变;Chisari等[10]则发现葡萄糖和果糖对鲜切冬瓜的PPO和
POD有较好的抑制作用,从而有效抑制褐变。
裂褶菌多糖,又称裂褶菌素,是一种水溶性的β-D-
葡聚糖,具有抑制肿瘤、抗菌消炎、调节免疫功能、抗
辐射等功能[11]。其生理功能广泛受到关注,但将该多糖
应用于果蔬汁褐变防控研究中还未见相关报道。在本实
验中,选取裂褶菌多糖提取物作为天然褐变抑制剂,并
与传统褐变抑制剂(柠檬酸、草酸、VC、L-半胱氨酸)
协同作用于“宁海白”枇杷果汁中,期望能够探索出新
型的果蔬汁褐变抑制方法,为以后的生产应用提供技术
条件和理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
“宁海白”枇杷(Eriobotrya japonica Lindl. cv.):
采摘自浙江省宁海县一市镇,挑选成熟、新鲜、无损
伤、无害虫的果实用于实验。将枇杷剥皮去核,果肉立
即放入匀浆机12 000 r/min组织捣碎10 s得到枇杷果浆,
再4 000 r/min离心10 min得上清液为原汁,备用。
裂褶菌:产自于云南省。柠檬酸、草酸、L-半胱氨
酸、VC均为食品级。
1.2 仪器与设备
HR2003型匀浆机 飞利浦家庭电器有限公司;
JY6002型电子天平 上海舜宇恒平科学仪器有限公司;
HH-2数显恒温水浴锅 国华电器有限公司;TDZ4-WS
台式低速离心机 湖南湘仪实验室仪器开发有限公司;
UV1600分光光度计 上海美谱达仪器有限公司;恒温
恒湿培养箱 宁波东南仪器有限公司;循环水真空泵
英峪予华仪器厂;冷冻干燥机 北京博医康实验仪器有
限公司;自动部分收集器、紫外检测器、恒流泵 上海
沪西分析仪器有限公司。
1.3 方法
1.3.1 褐变抑制率测定
褐变抑制率的测定采用分光光度计法。以蒸馏水为参
比,在波长420 nm处测定其吸光度A0,然后取40 mL果汁
倒入离心管,置于4 ℃条件下,24 h后再测其吸光度A24。˅h100㽀ਈᣁࡦ⦷/%=˄1ˉ
A24
A24-A0
1.3.2 总可溶性固形物(total soluble solids,TSS)含量
测定
TSS含量采用手持糖量仪直接测定。
1.3.3 VC含量测定
采用钼蓝比色法[12],取2 mL果汁加入到试管中,随
后依次加入草酸-乙二胺四乙酸溶液3 mL,偏磷酸乙酸
0.5 mL,5%硫酸溶液1.0 mL及5%钼酸铵溶液2 mL;加
水定容到20 mL,混匀后于30 ℃水浴放置10 min。以空
白管调零,测定760 nm波长处吸光度。配制质量分数为
0.00、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06 mg/mL的VC
溶液,按上述方法测定吸光度,以VC含量作横坐标,绘
制标准曲线。
1.3.4 总酚含量测定
参考Sato等 [13]的方法。取0.4 mL果汁加入0.4 mL
福林-酚试剂充分振荡后静置3 min,再加入0.04 mL饱
和Na2CO3溶液,经充分振荡后静置于暗室1 h后,测定
60 2016, Vol.37, No.06 食品科学 ※工艺技术
700 nm波长处吸光度。配制不同质量分数没食子酸溶
液,按上述方法测定A700 nm,并绘制标准曲线。
1.3.5 裂褶菌多糖提取
参考文献[14-15]的方法,裂褶菌粉末放到烧杯中,
按照料液比1∶30(g/mL)加入蒸馏水。接着100 ℃水浴
30 min,取出,加入酒精静置24 h,再次水浴加热,去除
酒精,依次加入无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤。所得沉淀
物干燥即得裂褶菌粗糖,裂褶菌多糖纯化参考周林等[16]
的方法,再采用DEAE cellulose-52离子柱层析分离纯化,
获得裂褶菌多糖。
1.3.6 单因素试验
新鲜的“宁海白”枇杷,经剥皮、去核、打浆、
离心后,分别加入一定量的褐变抑制剂,使其质量
分数达到一定值,并测定其吸光度。VC的质量分数
为0.005%、0.010%、0.015%、0.020%、0.025%、
0.030%;草酸质量分数为0.002%、0.004%、0.006%、
0.008%、0.010%、0.012%;L-半胱氨酸质量分数为
0.001%、0.002%、0.003%、0.004%、0.005%;柠檬酸
质量分数为0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%;
裂褶菌多糖质量分数为0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、
1.0%、1.2%。加入褐变抑制剂后的果汁在4 ℃条件下放
置24 h后,再测定其吸光度。
1.3.7 响应面试验设计
根据单因素试验结果,选择裂褶菌多糖、L-半胱氨
酸和VC质量分数3 个因素与褐变抑制率进行响应面设
计,采用Design-Expert 8.0.6软件对试验数据进行回归分
析,优化枇杷果汁的抑制褐变工艺。在分析得到的最佳
工艺条件下,做3 组平行实验(优化组)验证响应面分
析的可靠性,以不加抑制剂的果汁作为对照组,同时测
定TSS、VC、总酚含量。Box-Behnken试验各因素水平
见表1。
表 1 枇杷果汁护色工艺Box-Behnken设计试验因素与水平
Table 1 Variables and their coded values used in the Box-Behnken
design for optimizing browning inhibition of loquat juice
水平
因素
A L-半胱氨酸
质量分数/%
B VC质量
分数/%
C裂褶菌多糖
质量分数/%
-1 0.002 0.015 0.600
0 0.003 0.020 0.800
1 0.004 0.025 1.000
1.4 数据统计与分析
所有实验重复3 次,采用Excel处理数据,计算标
准偏差。数据图片用Origin Pro 8.1绘制。显著性差异用
SPSS分析(P=0.05)。
2 结果与分析
2.1 单因素试验结果
0
0.005 0.010 0.015 0.020 0.025 0.030
20
40
60
80
100
A
VC䋼䞣ߚ᭄/%㻤বᡥࠊ⥛/%
B㽀ਈᣁࡦ⦷/%
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
0.001 0.002 0.003 0.004 0.005
L-ॺ㜡≘䞨䍘䟿࠶ᮠ/%
C㽀ਈᣁࡦ⦷/%
10
20
30
40
50
60
70
80
90
0.002 0.004 0.006 0.0100.008 0.012㥹䞨䍘䟿࠶ᮠ/%
20
0
0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
40
60
80
100
D㽀ਈᣁࡦ⦷/% Ḑ⃜䞨䍘䟿࠶ᮠ/%
E㻤বᡥࠊ⥛/%
40
45
50
55
60
65
70
75
80
85
0.2 0.4 0.6 1.00.8 1.2㺖㼊㦠໮㊪䋼䞣ߚ᭄/%
A. VC;B. L-半胱氨酸;C.草酸;D.柠檬酸;E.裂褶菌多糖。
图 1 不同抑制剂对枇杷果汁的褐变抑制效果
Fig.1 Inhibitory effects of different inhibitors on browning of loquat juice
2.1.1 VC及L-半胱氨酸对枇杷果汁褐变的影响
从图1A、B可以看出,在VC质量分数0.020%以内,
其褐变抑制率随着VC质量分数的增加而明显上升;直到
VC质量分数为0.020%之后,抑制率达到90%左右。继续
※工艺技术 食品科学 2016, Vol.37, No.06 61
增加其质量分数并没有显著提高抑制效果(P>0.05),
甚至有缓慢下降趋势。因此0.020%的VC对枇杷果汁的褐
变抑制作用较好。而L-半胱氨酸对果汁褐变抑制作用与
VC对果汁的褐变抑制作用趋势相似,0.003%的L-半胱氨
酸对枇杷果汁的褐变抑制作用较好。继续增加L-半胱氨
酸的质量分数也不能显著提高抑制效果(P>0.05)。
VC是食品加工中重要的食品添加剂,其主要作用是
将褐色物质醌还原为无色的酚类物质,并且阻止醌类物
质进一步反应形成褐色物质,但添加VC的质量分数对果
汁的褐变影响很大,添加量少,抑制效果不佳;添加量
大,在果汁存放过程中会发生非酶褐变[17]。L-半胱氨酸
抑制果汁褐变被认为是其直接与PPO活性中心的铜离子
结合而抑制其活性,也有人认为酶促反应的产物的醌类
物质可能被L-半胱氨酸还原成无色化合物。可见,L-半
胱氨酸抑制果汁褐变是多种原因作用的结果。在本研究
中,相同质量分数的L-半胱氨酸对枇杷果汁褐变的抑制
效果好于VC。
2.1.2 草酸及柠檬酸对枇杷果汁褐变的影响
从图1C、D可以看出,草酸及柠檬酸对果汁的褐变
抑制率随着质量分数的上升而上升,当柠檬酸质量分数
达到0.6%时,果汁褐变抑制率接近100%,几乎完全抑制
果汁褐变;草酸质量分数达到0.012%时,果汁褐变抑制
率为80%,也能很好地起到抑制果汁褐变的作用。柠檬
酸、草酸主要是通过螯合PPO和POD的金属离子来抑制
酶活,另一方面草酸、柠檬酸是酸性的,可以降低反应
体系的pH值,使PPO远离最适pH值范围,从而抑制酶的
活性,但是添加草酸或柠檬酸后,果汁会有酸涩口感,
影响风味[18]。本研究也发现这两种抑制剂对“宁海白”
枇杷果汁褐变都能起到较好的抑制效果,但影响果汁口
感,因此不建议使用。
2.1.3 裂褶菌多糖对枇杷果汁褐变的影响
由图1E可以看出,在裂褶菌多糖提取物质量分数
0.2%~0.8%之间,随着多糖提取物质量分数的上升,褐
变抑制率上升;但是当多糖质量分数达到0.8%后,褐变
抑制率随着多糖质量分数的上升而增加缓慢,且作用效
果不显著(P>0.05)。杜贞等[19]研究发现不同质量分数
的马齿苋多糖提取物对翅果油树愈伤组织的褐变有一定
缓解作用,在0.19 g/L的多糖添加物质量浓度下,子叶愈
伤组织产生生物量最多,抗褐变效果与VC的作用相似,
推测其褐变机制是多糖中弱酸性物质与酚类的羟基作用
形成酯类,从而减少PPO作用底物的含量。此外,很多
研究表明,一些真菌子实体多糖具有清除自由基、提高
抗氧化酶活性、螯合Fe2+的能力等抗氧化作用。如Chen
等[20]从香菇的子实体中分离出3 种糖,测定了它们清除超
氧阴离子自由基、羟自由基的能力,以及对Fe2+的螯合
能力,结果证实其中一种糖有较强的体外抗氧化活性。
从林芝子实体中分离出的3 种多糖、双孢菇多糖也被证实
具有较强的自由基清除和螯合能力,表明其具有良好的
体外抗氧化活性[21-22]。Gao等[23]也发现红菇胞外多糖在体
外清除自由基及还原力实验中具有很强的抗氧化能力。
裂褶菌多糖对果汁明显的褐变抑制作用可能也是由于其
具有较强的抗氧化作用,抑制了果汁的褐变发生。
裂褶菌多糖除了具有上述抗氧化、抗癌、提高免疫
力等生理活性外,它极易溶于水、黏度大、乳化能力和
乳化稳定性也很强[24]。此外,它是经过微生物发酵用物
理方法提取的多糖,无毒、无副作用。所以在枇杷果汁
中添加裂褶菌多糖和VC、L-半胱氨酸作为复合抑制剂进
行优化试验,且3 种抑制剂都是人体所需的营养物质,将
这些抑制剂应用到果汁生产中,不仅能抑制褐变,还能
增加果汁营养物质含量。
2.2 响应面试验结果
2.2.1 响应面试验设计及结果
在单因素试验的基础上,选择裂褶菌多糖提取物和
L-半胱氨酸、VC作为复合抑制剂,根据Box-Behnken试
验设计原理进行响应面试验。结果见表2,并用Design-
Expert 8.0.6对试验结果进行分析。
表 2 Box-Behnken设计方案及结果
Table 2 Box-Behnken design with response values of browning inhibition
试验号 A L-半胱氨酸质量分数
B VC质量
分数
C 裂褶菌多糖
质量分数
Y 褐变
抑制率/%
1 1 0 -1 69.45
2 0 0 0 77.44
3 1 0 1 84.88
4 0 -1 1 93.24
5 1 1 0 77.99
6 0 1 1 85.98
7 -1 0 1 94.22
8 0 0 0 91.70
9 0 1 -1 75.35
10 -1 1 0 85.86
11 -1 -1 0 83.40
12 0 0 0 96.07
13 -1 0 -1 84.57
14 0 0 0 82.66
15 0 -1 -1 84.02
16 0 0 0 83.52
17 1 -1 0 79.84
2.2.2 模型方差分析及显著性检验
对表2中以褐变抑制率为响应值,通过Design-Expert
8.0.6软件对响应值与各因素的编码值进行回归拟合后,
得到如下回归方程:
Y=82.92+2.73A+6.80B+5.03C+0.092AB-2.63AC+
0.54BC+0.32A2-1.99B2-4.24C2
从表 3 可以看出,所得的 Y 回归方程高度显著
62 2016, Vol.37, No.06 食品科学 ※工艺技术
(P<0.001),且失拟检验不显著(P=0.211 9),说明
此回归模型很理想,用方程Y拟合3 个因素与褐变抑制率
之间的关系可行。模型的R2=0.951 2,说明该模型拟合度
较好[25]。RSN=14.304大于4,说明试验精度较高。综合以
上分析得知:该模型与实际情况拟合很好,可用于预测
褐变抑制率的变化情况。
表 3 回归方程系数显著性检验表
Table 3 Significance test of regression model equation
方差来源 平方和 自由度 均方和 F值 P值 显著性
模型 749.94 9 83.33 15.16 0.000 8 **
A L-半胱氨酸质量 59.53 1 59.53 10.83 0.013 3 *
B VC质量分数 370 1 370 67.32 <0.000 1 **
C裂褶菌多糖质量分数 202.05 1 202.05 36.76 0.000 5 **
AB 0.034 1 0.034 6.19×10-3 0.939 5
AC 27.63 1 27.63 5.03 0.059 9
BC 1.16 1 1.16 0.21 0.660 2
A2 0.42 1 0.42 0.077 0.789 7
B2 16.65 1 16.65 3.03 0.125 3
C2 75.54 1 75.54 13.74 0.007 6 **
残差 38.47 7 5.5
失拟 24.61 3 8.2 2.37 0.211 9
纯误差 13.87 4 3.47
总误差 788.41 16
R2=0.951 2 RSN=14.304          
注:**.差异极显著(P<0.01);*.差异显著(P<0.05)。
从3 个因素(A、B、C)对褐变抑制率的影响来看,
一次项A(L-半胱氨酸质量分数)、B(VC质量分数)和
C(裂褶菌多糖质量分数)对褐变抑制率均有显著的影
响;交互项中的AB、BC、AC对结果没显著影响,影响
的顺序依次是AC>BC>AB;二次项C2对结果有显著的影
响,A2和B2无显著影响。
响应面等高图直观地反映出各因素交互作用对褐变
抑制率的影响,椭圆趋势表示两因素交互作用显著,圆
形及其他表示两因素交互作用不显著。从图1~3也可以
看出,L-半胱氨酸、VC及裂褶菌多糖质量分数两两之间
都没有交互作用。
当L-半胱氨酸质量分数一定时,果汁的褐变抑制率
随着VC质量分数的增加而明显增加(图2);而当VC质
量分数一定时,果汁褐变抑制率也随着L-半胱氨酸质量
分数增加而增加,但增加不明显。由图3可知,当L-半胱
氨酸质量分数一定时,果汁的褐变抑制率随着多糖质量
分数的增加变化不明显;当多糖质量分数一定时,果汁
褐变抑制率随着L-半胱氨酸质量分数增加而缓慢增加。
当裂褶菌多糖质量分数一定时,果汁褐变抑制率
随着VC质量分数增加而明显增加;当VC质量分数一定
时,果汁褐变抑制率随着多糖质量分数增加而增大,但
趋势不明显(图4)。
60
0.028
0.024
0.020
0.016
0.012 0.001
0.002
0.003
0.004
0.005
70
80
90
100
A L
-ॺ㜡≘䞨䍘䟿࠶ᮠ/%㽀ਈᣁ
ࡦ⦷/%
B VC䍘䟿࠶ᮠ/%
0.001 0.002 0.003 0.004 0.005
0.028
0.024
0.020
0.016
0.012
A L-ॺ㜡≘䞨䍘䟿࠶ᮠ/%B VC 䍘䟿࠶
ᮠ/% 㽀ਈᣁࡦ⦷/% 90
80
5
70
图 2 L-半胱氨酸和VC质量分数对果汁褐变抑制率影响的
响应面和等高线图
Fig.2 Response surface and contour plots for inhibitory rate as a
function of L-cystine and ascorbic acid
70
1.05
0.93
0.80
0.68
0.55 0.001
0.002
0.003
0.004
0.005
75
85
80
90
95
100
A L
-ॺ㜡≘䞨䍘䟿࠶ᮠ/%㽀ਈᣁࡦ
⦷/%
C㻲㽦㧼ཊ㌆䍘䟿࠶ᮠ/%
0.001 0.002 0.003 0.004 0.005
A L-ॺ㜡≘䞨䍘䟿࠶ᮠ/%C 㻲㽦㧼ཊ㌆䍘䟿
࠶ᮠ/% 㽀ਈᣁࡦ⦷/%90
90
95
95
85
80
75
1.05
0.93
0.80
0.68
0.55
5
图 3 L-半胱氨酸和裂褶菌多糖质量分数对果汁褐变抑制率
影响的响应面和等高线和等高线图
Fig.3 Response surface and contour plots for inhibitory rate as a
function of L-cystine and schizophyllan
※工艺技术 食品科学 2016, Vol.37, No.06 63
60
50
70
80
90
100
110㽀ਈᣁࡦ⦷/%
1.05
0.93
0.80
0.68
0.55
C㻲㽦㧼ཊ㌆䍘䟿࠶ᮠ/% 0.0280.0240.0200.0160.012B VC䍘䟿࠶ᮠ/%
B VC䍘䟿࠶ᮠ/%
㽀ਈᣁࡦ⦷/%
70
80
90
100
85
1.05
0.93
0.80
0.68
0.55
C
㻲㽦㧼ཊ㌆䍘䟿࠶ᮠ/%
0.0280.0240.0200.0160.012
图 4 VC和裂褶菌多糖质量分数对果汁褐变抑制率影响的响应面和等高线图
Fig.4 Response surface inhibitory rate for inhibitory rate as a function
of ascorbic acid and schizophyllan
2.2.3 最佳工艺参数及验证
通过计算分析,得到的最佳抑制剂组合为:L-半胱
氨酸质量分数0.004%、VC质量分数0.025%、裂褶菌多
糖质量分数1%。在此条件下,果汁褐变抑制率理论值
99.22%。为了检验该响应面优化方法的可靠性,采用上
述最适宜抑制剂组合进行验证实验,得出的褐变抑制率
为98.04%,与预测值接近。并且优化实验所得果汁的
TSS、VC及总酚含量都高于对照组(表4)。其中TSS含
量差异显著(P<0.05),这是添加了裂褶菌多糖的缘
故。可见优化处理不仅抑制褐变,还能提高果汁品质。
表 4 优化组与对照组部分营养物质含量
Table 4 The contents of some nutrients in optimized and control groups
组别 TSS含量/% VC含量/(mg/100 g) 总酚含量/(mg/100 g)
对照组 9.8b 3.41a 4.65a
优化组 11.0a 3.52a 4.83a
注:同列肩标相同字母表示差异不显著(P>0.05);不同字母表示差异
显著(P<0.05)。
3 结 论
本实验结果显示,5 种褐变抑制剂的作用效果大小顺序
为L-半胱氨酸>草酸>VC>柠檬酸>裂褶菌多糖,其中裂
褶菌多糖质量分数在0.8%时,褐变抑制率达到80%以上。
从安全、抑制效果、果汁风味考虑,筛选出裂褶菌多
糖、VC、L-半胱氨酸。采用响应面试验对这3 种抑制剂组
合进行优化,获得的最佳工艺参数为L-半胱氨酸质量分数
0.004%、VC质量分数0.025%、裂褶菌多糖质量分数1%。
经回归分析和验证实验,得出优化后的果汁褐变抑
制率为98.04%,与理论模型99.22%接近,且优化后处理
的果汁品质也有所提高。
参考文献:
[1] 张玉, 王建清. 枇杷的营养及功能成分研究进展[J]. 食品科学, 2005,
26(9): 602-604. DOI:10.3321/j.issn:1002-6630.2005.09.162.
[2] de la ROSA L A, ALVAREZ-PARRILLA E, MOYERS-MONTOYA
E, et al. Mechanism for the inhibition of apple juice enzymatic
browning by Palo Fierro (desert ironweed) honey extract and other
natural compounds[J]. LWT-Food Science and Technology, 2011,
44(1): 269-276. DOI:10.1016/j.lwt.2010.05.030.
[3] 詹嘉红. 枇杷果实酶促褐变控制研究[J]. 广州食品工业科技, 2004,
20(4): 49-55. DOI:10.3969/j.issn.1673-9078.2004.04.018.
[4] 蒙文权. 枇杷果肉果冻防褐变工艺技术研究与开发[J]. 农产品加工,
2014, 10(8): 25-28. DOI:10.3969/jissn.1671-9646(X).2014.10.008.
[5] 何志刚, 林晓姿, 李维新. 枇杷清汁的研制[J]. 食品工业科技, 2004,
25(2): 92-94. DOI:10.3969/j.issn.1002-0306.2004.02.035.
[6] 林剑阳. 枇杷浓缩汁加工工艺的优化[J]. 莆田学院学报, 2015,
22(4): 53-56.
[7] LÓPEZ-NICOLÁS J M, NÚÑEZ-DELICADO E, SÁNCHEZ-
FERRER Á, et al. Kinetic model of apple juice enzymatic browning
in the presence of cyclodextrins: the use of maltosyl-β-cyclodextrin as
secondary antioxidant[J]. Food Chemistry, 2007, 101(3): 1164-1171.
DOI:10.1016/j.foodchem.2006.03.018.
[8] le BOURVELLEC C, le QUÉRÉ J M, SANONER P, et al. Inhibition
of apple polyphenol oxidase activity by procyanidins and polyphenol
oxidation products[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry,
2004, 52(1): 122-130. DOI:10.1021/jf034461q.
[9] BILLAUD C, ROUX E, BRUN-MÉRIMEE S, et al. Inhibitory effect
of unheated and heated D-glucose, D-fructose and L-cysteine solutions
and Maillard reaction product model systems on polyphenoloxidase from
apple. Ⅰ. Enzymatic browning and enzyme activity inhibition using
spectrophotometric and polarographic methods[J]. Food Chemistry, 2003,
81(1): 35-50. DOI:10.1016/S0308-8146(02)00377-1.
[10] CHISARI M, BARBAGALLO R N, SPAGNA G. Characterization
and role of polyphenol oxidase and peroxidase in browning of fresh-
cut melon[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2007, 56(1):
132-138. DOI:10.1021/jf0721491.
[11] 刘伟峰. 裂褶菌多糖发酵产物主要活性成分的药理作用研究[D]. 长
春: 吉林农业大学, 2011.
[12] 张宪政. 植物生理学实验技术[M]. 沈阳: 辽宁科学技术出版社, 1989.
[13] SATO M, RAMARATHNAM N, SUZUKI Y, et al. Varietal
differences in the phenolic content and superoxide radical scavenging
potential of wines from different sources[J]. Journal of Agricultural
and Food Chemistry, 1996, 44(1): 37-41. DOI:10.1021/jf950190a.
[14] 陈炅然, 王琴. 蕨麻多糖的提取及其清除自由基的作用[J]. 中国兽医
科技, 2004, 34(4): 59-62. DOI:10.3969/j.issn.1673-4696.2004.04.015.
[15] 杨娜, 王鸿飞, 许凤, 等. 蕨麻多糖提取及抗氧化活性研究[J]. 中国
食品学报, 2014, 14(2): 60-65. DOI:10.11920/xnmdzk.2015.04.003.
[16] 周林, 郭祀远, 郑必胜. 高分子质量裂褶菌多糖的纯化及表征[J]. 食
品与发酵工业, 2009, 34(12): 47-50. DOI:10.13995/j.cnki.11-1802/
ts.2008.12.003.
[17] 郝惠英, 赵光鳌. 苹果酒中多酚及其褐变[J]. 酿酒, 2002, 29(2): 45-
47. DOI:10.3969/j.issn.1002-8110.2002.02.025.
[18] 杨桂馥. 软饮料工业手册[M]. 北京: 中国轻工业出版社, 2002.
[19] 杜贞, 穆楠, 武银玉, 等. 马齿苋多糖提取物对翅果油树愈伤组织诱
导的影响[J]. 西北植物学报, 2010, 30(3): 610-614.
[20] CHEN H, JU Y, LI J, et al. Antioxidant activities of polysaccharides
from Lentinus edodes and their significance for disease prevention[J].
International Journal of Biological Macromolecules, 2012, 50: 214-
218. DOI:10.1016/j.ijbiomac.2011.10.027.
[21] FAN L P, LI J W, DENG K Q, et al. Effects of drying methods on the
antioxidant activities of polysaccharides extracted from Ganoderma
lucidum[J]. Carbohydrate Polymers, 2012, 87(2): 1849-1854.
DOI:10.1016/j.carbpol.2011.10.018.
[22] 张强, 宫璐婵, 孟凡荣, 等. 双孢菇多糖抗氧化活性的研究[J]. 中国林
副特产, 2010(1): 16-19. DOI:10.3969/j.issn.1001-6902.2010.01.006.
[23] GAO C J, WANG Z Y, SU T T, et al. Optimisation of exopolysaccharide
production by Gomphidius rutilus and its antioxidant activities
in vitro[J]. Carbohydrate Polymers, 2012, 87(3): 2299-2305.
DOI:10.1016/j.carbpol.2011.10.064.
[24] 冀颐之. 裂褶菌胞外多糖的研究[D]. 天津: 天津科技大学, 2003.
DOI:10.7666/d.y543541.
[25] LEE W C, YUSOF S, HAMID N S A, et al. Optimizing conditions
for enzymatic clarification of banana juice using response surface
methodology (RSM)[J]. Journal of Food Engineering, 2006, 73(1): 55-
63. DOI:10.1016/j.jfoodeng.2005.01.005.