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4 00
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野生与栽培刺五加叶的质量评价
康毅华 王宗权
黑龙江中医药大学教学实验中心 ( 』黑龙江 哈尔滨 150 04 0)
摘要 目的 : 对野生与栽培刺五加叶的质量进行评价 。 方法 : 以总皂 普为指标 , 用 比色法对野生和栽培刺五加
叶 中皂 普的含量进行测定 。 结果 : 野生刺五加叶中皂普的含量显著 高于栽培刺五加叶 。 结论 : 说明刺五加叶的质量
与其生态环境有密切关 系 , 为刺五加的开发利用提供 了科学依据
关键词 刺五加 ; 皂普 ; 比 色法 ; 野生 ; 栽培 ; 质量评价
Q u a l i t y E v a l u a t i o n o f W I Id a n d C u l t i v a t e d R a d i x aC
u l i s
A e a n t h o P a n a c i s eS n t i c o s i L e a v e s
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本 品为五加科植物刺 五 加方创动之碑脚 aI , ,批 os us
( 尺配户丫 . et 人头2 2动 2 . )H a n l侣的干燥叶 。 刺五加主产于东北 , 其
药用历史悠久 , (神农本草经》将其列为上品 。 性味辛 、微苦 、
温 , 归脾 、 肾 、心经 。 有益气健脾 、补肾安神的功能 , 用于脾肾
阳虚 、体虚乏力 、食欲不振 、腰膝酸痛 、失眠多梦 。 刺五加叶主
要有效成分为皂昔 , 具有补益强壮 、益气健脾 、扶正固本等作
用 , 是一种免疫增强剂 。 其叶作为药用也有较长的时间 , 黑龙
江省完达山制药厂生产的 “ 刺五加注射液 ” 于 19 83 年被黑龙江
省卫生厅批准生产 , 19 94 年被中华人民共和国卫生部批准为
国家中药保护品种 , 该品种用于治疗冠心病 、心绞痛 、脑血栓
及脑动脉硬化等症 。 黑龙江华富药业有限责任公司生产的
“ 冠心宁胶囊 ” 也是用刺五加叶制成 , 该产品用于冠心病 、心绞
痛 、脑动脉硬化 、脑血栓和高血脂等症 。 白求恩医科大学用刺
五加叶总皂普制成了保健茶 , 已经推向市场 。
现代药理实验证实刺五加叶皂普具有抗心肌缺血 〔1〕, 缩
小心肌梗塞范围 , 改善心肌代谢 〔2 一 4〕 , 增加营养性心肌血流
量 〔5〕 , 降血糖 〔“ 一 7〕 , 抗癌 〔8 一 9〕 , 抗心率失常〔10 一 ` 1〕和抗衰老作
用 〔理 。 刺五加叶抗疲劳作用强于刺五加根 , 刺五加能改善大
脑皮层的兴奋 、抑制过程 ,提高脑力劳动效果 , 叶 、根提取物混
合使用时效果更明显 〔13] 。
由于刺五加叶野生资源的大量开发利用 , 为了保证刺五
加的资源可持续发展 , 所以引种栽培已势在必行 , 为此我们采
用比色法 〔14 一 ` 5〕对野生和栽培刺五加叶皂普含量进行了测定 ,
以比较野生和栽培刺五加叶的质量 。 为刺五加引种栽培提供
了一定的科学依据 。
1 仪器、 试剂和样品
DOI : 10. 14035 /j . cnki . hl jyy . 2005. 06. 006
黑龙江医药 e H山劝红iang M曰 i Cine Ju om al V( 卫 .18 用 .260 5 4 0 1
1
.
1 仪器
2 72型光栅分光光度计 ( 山东高密分析仪器厂 ), 电子天平
入亚刃n 1 E民八E一24 0 。
1
.
2 试剂
齐墩果酸对照品由中国药品生物制品检定所提供 。 试剂
均为分析纯 。
1
.
3 样品来源
供试品采自伊春 ( 2 00 1年 5月1 5日 ) 、二龙山 ( 2 00 1年 5月23
日) 、帽儿山 ( 20 01年 7月20 日 ) 、黑龙江中医药大学药用植物园
( 20 01年 5月20 日 , 2 00 1年7月29 日 ) 。
2 方法 、 结果
2
.
1 方法学考察
2
.
1
.
1 测定波长的选择 根据文献报道齐墩果酸与香草醛
一一浓硫酸加热反应生成的混合物在 540 nr 处显示最大吸
收 , 通过用 7 2 型分光光度计测定不同波长得吸收 ,结果表明 ,
刺五加叶总皂昔的最大吸收波长与齐墩果酸相同 , 最大吸收
值在540 nl 处 ,故选定 540 nm 为测定波长 。
2
.
1
.
2 对照品溶液的制备 精密称取齐墩果酸对照品 l ngr ,
置 1耐容量瓶中 , 加甲醇溶解并稀释至刻度 , 制成对照品溶
液 。
2
.
1
.
3 供试品溶液的制备 取干燥至恒重的伊春 、二龙山 、
帽儿山 、药用植物园中的刺五加叶 (过 40 目筛 )髦 ,精密称定 。
置索氏提取器中 , 加甲醇适量 , 加热回流提取 12 小时 ,提取液
回收甲醇至干 , 残留物悬浮于2 5 n l l水中 , 用 乙醚 1 5 1刀 1脱脂 3次 ,
水溶液层用水饱和正丁醇 15m l提取4次 , 合并正丁醇溶液并以
少量水洗正丁醇层 , 用0 . 6 % 碳酸钠溶液 15 I n l萃取 3次 ,减压蒸
干 , 残 留物用甲醇溶解 , 定量移至 l a泪1定量瓶中 , 并稀释至刻
度 , 摇匀 , 备用 。
取备用液 I inl , 加入D 101 型大孔吸附树脂柱内 (玲Orm , 中
1
.
5二 , 树脂高 20 rm ) , 按 3 11 11/~ 流速 , 以水 5。 xl l洗脱 , 继用
7 0 % 乙醇洗脱 , 弃去初馏出液 s r ld , 收集洗脱液5 (b 公, 置水浴上
蒸干 , 残留物以甲醇溶解 , 定量移入s n d容量瓶中 , 并稀释至刻
度 , 即得供试品溶液 。
2
.
1
.
4 线性关系的考察 精密量取对照品溶液 20 、 40 、 60 、
80
、
10 0川, 分别置于试管中 , 挥干 , 加入 8 %香草醛乙醇溶液
0
.
5 11 11
,
72 % 硫酸溶液s n U ,摇匀 。 置恒温 60 ℃水浴加热1伍 n i n ,
取出试管置冰水浴中冷却 15 111 121 , 以溶剂代对照品的同样操作
规程制备试剂空白 , 分别于 540 n l处测吸收光度值 。 回归方
程为 A = 23 . 166 1xC + 0 . 00 32 , r = 0 . 99 94 , 说明在3 . 636 火 一 ”
n官司一 1 . 8 18 只 10飞1咨 /司范围内线性关系良好 。
2
.
1
.
5 稳定性试验 取同一供试品溶液 , 每隔 6加飞谊测定 1
次 , 共测 4次 , 结果表明 , 供试品在 h3 内基本稳定 。 R SD =
3
.
9 48 %
。
2
.
1
.
6 精密度试验 将同一对照品溶液 , 测定 5次 , 测得齐墩
果酸对照品吸收度 , 其R S D = 0 . 402 % , 按拟定方法测定同一
批供试 品的含量 , RSI ) = 0 . 71 4 % , 试验结果表 明精密度良
好 。 见表1 。
表 1 精密度试验
测定次数 对照品吸收度 供试品含量 / %
R 3 〕 / %
对照品 供试品
1 0
.
13 7 3
.
13 1
0
.
13 7
13 1
14 8 0
.
4 0 2 0
.
7 14
16 5
5 0
.
13 6 3
.
18 3
2
.
1
.
7 重复性试验 称取同一批样品 , 按 “供试品溶液制备”
项下操作 , 吸取供试品溶液 4即 l , 按 “ 2 . 1 . 4’ 项下操作 , 于
54 0nl 处测吸收光度值 。 计算供试品中皂普含量 , 供 i刃班D =
3
.
4 74 %
。 见表 2
表 2 重复性试验测定结果
样品号 供试品中皂昔含量 / % R S D / %
1 3
.
1 66
3
.
3 23
3
.
4 7 4
3 科6
5 3
.
2 7 1
2
.
1
.
9 回收率试验 取总皂普含量为3 . 3 75 % 的二龙山样品
适量 (约 0 . 59 ) , 分别精密加入一定量得齐墩果酸对照品 ,按样
品溶液制备方法制备供试液 , 按样品含量测定方法测定吸收
光度值 , 计算其结果 。 见表3 。
表 3 回收率试验结果表
样品中齐墩果酸的含量 /飞 加入量 /哩 测得量 /叩 回收率 / % 平均回收率 / % R S D / %
7
.
2 9 4 13
.
0 9 4
7
.
1 5 5 6
.
0 2 7 12
.
9 76
7
.
15 9 6
.
0 3 2 13
.
0 5 4
9 6
.
4 7
96
.
59
9 7
.
73
9 9
.
5 8
9 8
.
5 9
9 7
.
7 9 2 0
.
5 7 8
7
.
1 8 0 6
.
0 0 9 1 3
.
1 64
7
.
2 1 0 1 3
.
1 4 6
·2 0 4
· 黑龙江医药 He曲侧红鳄 M曰 i cine J6Unar l ( V卫. 81 用 . 6 2 05 0
2
.
2 样品含量测定 精密量取供试品 40川, 按“ 2 . 1 . 4’ 项下
进行操作 。 测得的样品浓度为齐墩果酸的浓度 , 乘以 2 . 3 6( 该
系数为刺五加叶皂普平均分子量与齐墩果酸分子量之 比 )即
为刺五加叶皂普的浓度 ,计算即得 。 结果见图 1 。 由图 1可知 ,
野生与栽培的刺五加叶中总皂昔的含量有显著差异 (P <
0
.
05)
, 伊春含量最高 , 其次为二龙山 、药用植物园 (5 月20 日) ,
帽儿山 、药用植物园 (7 月29 日)中总皂普含量最低 。 从而说明
刺五加叶中总皂普的含量具有空间异质性 。
ǎ承à如喇
伊春 二龙山 帽儿山
产地
5月 2 0日 7月2 9日
图1 各野生产地与栽培刺五加中总皂普含量的比较图
相同字母表示差异不显著 (P > 0 . 0 5) , 不同字母表示差异显著(P < 0 . 0 5)
3 讨论
3
.
1 由于刺五加叶皂昔分离纯化较困难 ,作为标准品难于推
广应用 ,故选用其皂昔元齐墩果酸作为标准品 , 直接比色测定
齐墩果酸的含量 。 选择刺五加叶皂普的平均分子量与齐墩果
酸分子量之比2 . 36 作为系数 , 将直接比色测定的结果乘以此
系数 , 即可计算出样品中皂普的含量 。 从图1中样品含量测定
结果可以看出 , 野生和栽培刺五加叶中皂昔含量有差异 。
3
.
2 不同地理区域各样地间刺五加叶皂普含量的差异程度
不同 。 各样地生态的不同造成刺五加叶皂普积累的差异 , 说
明次生代谢产物的合成与环境有显著的关系 。
3
.
3 野生刺五加叶皂普的含量高于人工栽培 ,这与刺五加的
生物学特性有很大关系 。 探索影响刺五加叶皂昔含量的因
素 , 将可能为人工栽培一选择优 良种源及适宜的栽培条件提
供重要的依据 。
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收稿 日期 : 2 0 0 5一0 5一 12