全 文 ：菊花脑的组织培养与快速繁殖
符运柳 ,王永壮 ,郭庆辉 ,覃和业＊　(热作两院种苗组培中心,海南儋州 571737)
摘要　[目的 ]建立菊花脑快繁技术体系 ,为菊花脑的规模化生产提供依据。 [方法]以菊花脑的顶芽和腋芽为外植体进行组培快繁研
究。 [结果 ]在不添加任何激素的MS培养基中培养 5d后 ,能诱导出幼芽;1/2MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L培养基对丛生芽的增
殖效果较好;生根培养基为 1/2MS+NAA0.1mg/L,生根率达 100%。 [结论]菊花脑嫩芽组织的培养应该根据不同的发育期选择不同
激素配比的培养基。
关键词　菊花脑;组织培养;快速繁殖
中图分类号　S339.4　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2010)24-13367-02
TissueCultureandRapidPropagationofChrysanthemumnankingenseH.M.
FUYun-liuetal　(TissueCutureCentre, HainanAcademyofTropicalAgriculturalSciences, Danzhou, Hainan571737)
Abstract　[ Objective] ToestablishtherapidpropagationsystemandprovidethebasisforthescaleproductionofChrysanthemumnankingense
H.M.[ Method] ThetopbudsandaxilarybudsofChrysanthemumnankingenseH.M.wereusedasexplantsfortissuecultureandrapidprop-
agation.[ Result] Theresultsshowedthattheyoungbudscouldbeinducedafter5dculturedonthemediumMS.The1/2MSmediumwith6-
BA0.5mg/LandNAA0.1mg/Lwasthebeterformultiplicationcultureofclumpybuds.Themediumforrootingwas1/2MSwithNAA0.1
mg/L, Therootingratiowasupto100%.[ Conclusion] TheculturemediumwithdiferenthormonecombinationsforculturingofChrysanthe-
mumnankingenseH.M.shouldbechosenaccordingtothedevelopmentalstages.
Keywords　ChrysanthemumnankingenseH.M.;Tissueculture;Rapidpropagation
作者简介　符运柳(1978-),女 ,海南东方人 ,硕士 ,助理研究员 ,从事
植物组织培养研究。 ＊通讯作者, 助理农艺师 , E-mail:lyz-
pqinheye@163.com。
收稿日期　 2010-05-04
　　菊花脑(Chrysanthemumnankingense)又名菊花菜 、菊花
叶 ,属菊科多年生宿根草本植物。其嫩茎 、叶具有特殊的清
香味 ,可炒食或汤食 ,营养丰富 ,含有多种人体必须的氨基
酸 、纤维素以及大量的微量元素 ,为炎热高温季节重要绿叶
蔬菜之一。此外 ,菊花脑对人体有很好的药用保健功能 ,可
消暑 、解渴 、润喉 、清热 、凉血 、调中健脾 、开胃 、降压 、解毒 ,并
可用于辅助治疗各种皮肤病 ,被誉为高档营养保健蔬菜 ,已
成为城乡消费者越来越喜爱的特色蔬菜 ,具有很好的开发
价值。
菊花脑的传统繁殖方式为种子育苗 、分株栽植和扦插繁
殖 。分株繁殖的植株生长较快 ,生产上多用分株繁殖 ,但长
期采用分株法繁殖容易引起种性退化 ,产量下降。而利用组
织快繁技术 ,除了能在短期内生产大量生长期一致的种苗 ,
为规模化生产提供种苗保证外 ,还解决了因长期采用分株繁
殖导致种性退化 、产量下降的问题。目前有关菊花脑的组织
培养报道还很少。梁称福以菊花脑种子为材料 ,进行了无菌
萌发试验 [ 1] ;费建业等以菊花脑的叶片为外植体 ,研究了组
织培养再生体系 [ 2] ,但以菊花脑嫩茎为外植体进行组织培养
和快速繁殖尚未见报道 。笔者选择菊花脑的顶芽和腋芽为
外植体进行组培快繁研究 ,旨在建立菊花脑的快繁技术体
系 ,为菊花脑的规模化生产提供参考。
1　材料与方法
1.1　材料　菊花脑健壮无病的嫩芽 。
1.2　无菌材料的获得　取新抽生的菊花脑嫩芽 , 在流水下
冲洗 30 min,再用洗涤剂溶液浸泡 10 min,流水冲洗干净 ,置
于超净工作台上 , 用 70%的酒精浸泡 15 s后取出 ,用无菌水
冲洗 2次 ,再用 0.1%的 HgCl2溶液消毒 5 ～ 6min, 无菌水冲
洗 5 ～ 7次 , 无菌滤纸吸干水分后 ,切成 1.5 cm的带芽茎段
接种于诱导培养基上。培养温度为(25±2)℃, 光照时间
10 h/d, 光照强度 1 500～ 2 000 lx。
1.3　诱导和增殖培养　以不添加任何植物激素的 MS培养
基为启动培养基;以 MS为基础培养基添加不同种类激素进
行增殖培养 ,具体添加水平如表 1所示。 10d后基部切口处
愈伤化 ,继续培养会从愈伤上分化出绿色小芽 , 20 d后 , 分
化的小芽进入旺盛生长期 ,此时将丛生芽切分成小块 ,转入
适宜的培养基中 , 进行继代培养 , 增殖系数达 5.0以上。
表 1　不同激素配比对菊花脑丛生芽增殖的影响
Table1　Theeffectsofdifferenthormonesontheclusteredshootspro-
liferationofChrysanthemumnankingense
处理
Treatment
苗芽长势
Growthvigorofseedlings
MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L丛生芽多 ,长势旺盛 ,严重玻璃化
MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L丛生芽多 ,玻璃化程度较重
MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L丛生芽多 ,玻璃化程度较轻
MS+6-BA0.2 mg/L+NAA0.1 mg/L玻璃化程度轻微 ,但丛生芽少且细弱
1/2MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L丛生芽多 ,玻璃化程度轻微
1/2MS+NAA0.1 mg/L 无丛生芽 ,长根 ,长势正常
1.4　生根培养　以 1/2MS为基本培养基 ,添加不同浓度的
NAA进行生根培养。以上培养基均加入 3%的蔗糖和 0.6%
卡拉胶 , pH值为 5.8 ～ 6.0, 121 ℃高压灭菌 20 min。
1.5　移栽　将幼苗种植在椰糠 、泥沙和珍珠岩(2∶1∶1)混合
的基质中。
2　结果与分析
2.1　无菌材料的获得　将消毒好的菊花脑嫩芽切成 1.5 cm
左右茎段 ,接种于不添加任何激素的 MS培养基上 ,培养约
7d后 ,腋芽开始萌发 ,且从茎段基部长出不定根 ,生成完整
植株 ,但长势比较细弱。
2.2　增殖培养　将长至 3 ～ 4 cm的嫩芽切段 ,接种于不同
激素配比(表 1)的培养基上 , 10 d后 ,接种于不同浓度 BA与
NAA配比的培养基上的嫩芽基部切口处愈伤化 ,继续培养会
从愈伤处分化出绿色小芽。从表 1中可以看出 ,单独添加
安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(24):13367-13368 责任编辑　王强　责任校对　况玲玲DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.24.131
NAA的培养基配方 ,无丛生芽产生 ,而 NAA与 BA配比的培
养基配方 ,丛生芽多(图 1),但都存在不同程度的玻璃化 ,且
BA浓度越高 ,玻璃化程度越严重 ,说明 BA对丛芽产生有促进
作用 ,但浓度过高不利于芽的正常生长 ,试验表明 , 1/2MS+
6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L较适宜菊花脑的增殖培养。
图 1　菊花脑增殖培养
Fig.1　TheproliferationofChrysanthemumnankingense
图 2　菊花脑生根苗
Fig.2　TherootingseedlingsofChrysanthemumnankingense
2.3　生根 、炼苗和移栽　切取 3 ～ 4 cm的单株接种于添加
0 ～ 0.3mg/LNAA的 1/2MS培养基上 , 7 d后均能长出不定
根 , 且生根率均高达 100%,但 NAA为 0 mg/L时根比较细
长 ,而 NAA为 0.1 ～0.3mg/L时能长出 4 ～ 6条粗壮 、白色根
(图 2),故试验选用 1/2MS+NAA0.1mg/L为生根培养基。
生根培养约 35d后 ,打开瓶盖炼苗 , 42 d后将苗从培养瓶中
取出 , 洗净根部培养基 ,用多菌灵溶液浸泡后 ,移栽至椰糠 、
泥沙和珍珠岩混合的基质中(体积比 2∶1∶1), 遮荫保湿 , 成
活率 >95%。
3　结论与讨论
菊花脑常用繁殖技术有播种 、分株 、扦插 3种 ,其中 ,播
种育苗量大 ,可用于大面积生产 ,但操作比较麻烦 ,需用地膜
覆盖 ,相对成本高;分株繁殖的植株生长较快 ,成本较低 ,操
作简便 ,但容易引起种性退化 ,影响产量;扦插繁殖的植株根
系发达 ,生命力强 ,产量较高 ,但技术含量高 ,操作麻烦 [ 3] 。
通过组织培养技术 ,不仅可在短期内提供批量种苗 ,满足规
模化生产的需要 ,且操作简便 ,大大降低生产成本。笔者以
菊花脑嫩芽为外植体建立了菊花脑的离体快繁体系 。研究
结果表明 ,在增殖培养阶段 , BA对丛芽的产生有促进作用 ,
但添加的浓度过高 ,容易产生玻璃化 ,不利于芽的正常生长。
所有处理中 , 1/2MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L培养
基较适宜菊花脑的增殖培养;1/2MS+NAA0.1mg/L培养基
适合菊花脑的生根培养。
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