全 文 ：— 17 —现代中药研究与实践2013年第27卷第4期Chin Med J Res Prac,2013 July.Vol.27 NO.4
蒙药耧斗菜不同产地木兰花碱含量的比较研究
庄志鹤，鞠爱华 *，张 静，蔡丽娟
（内蒙古医科大学药学院，内蒙古 呼和浩特 010110）
摘　要：目的　对蒙药耧斗菜不同产地木兰花碱的含量进行比较研究，建立蒙药耧斗菜中木兰花碱的
含量测定方法与质量评价标准。方法　采用高效液相色谱法，流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾（12:88）
（每 100 mL 中加 0.2 mL 三乙胺，再以磷酸调 pH值为 4.0）；检测波长为 286 nm ；流速为 1.0 mL/min ；柱
温为 22℃。结果　木兰花碱在 20.95~419.00 μg/mL 范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系（r= 0.999 5,
n=6），平均加样回收率为 101.2％，RSD 为 1.240％，不同产地耧斗菜中木兰花碱含量在 0.07~0.48% 之间，
其中以山东青州产地含量最高，以呼市大青山井儿沟产的含量最低。结论 该方法精密度、重复性、稳定性
良好，方法准确、可靠，对蒙药耧斗菜药材的质量控制与质量评价提供实验依据。
关键词：蒙药耧斗菜；木兰花碱；含量测定；质量控制与评价
中图分类号：R927.2 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2013)04-0017-03
Comparison Research on Content of Magnofl orine of the Mongolian Medicine
Aquilegia from Different Origins
ZHUANG Zhi-he, JU Ai-hua*, ZHANG Jing, CAI Li-juan
(College of Pharmacy, Inner Mongolia Medical University, Hohhot 010110, China)
Abstract: Objective To analyse the content of magnofl orine of the Mongolian medicine Aquilegia from
different origins, and establish magnoflorine conent determination method and quality evaluation standard.
Methods HPLC was carried out under the following conditions, the mobile phase was acetonitrile-0.05 mol/L
potassium dihydrogen phosphate (12:88) (add 100 mL per 0.2 mL triethylamine, pH 4.0), the detection wavelength
286 nm, the fl ow rate 1.0 mL/min and the column temperature 22℃. Results The linear range of magnofl orine
was 20.95~419.00 μg/mL (r=0.999 5, n=6), the average recovery was 101.2%, RSD was 1.240%, and the
content of magnofl orine of the Aquilegia from different origins ranged from 0.07 to 0.48%. Among of them, The
highest concentrations was from Qingzhou Shandong and the lowest was from Daqingshan JingErgou Hohhot.
Conclusion This method was accurate and reliable, which could be used for quality control.
Key words: Mongolian Aquilegia viridifl ora Pall; magnofl orine; content determanation; quality control and
quality evaluation
收稿日期：2013-04-15
基金项目：国家药典委员会国家药品标准提高暨2015版药典科研项目
（M56）
作者简介：庄志鹤（1990-），女，硕士研究生，从事中蒙药化学成分
及质量标准研究。E-mail:cfzhuangzhihe0407@163.com
*通讯作者：鞠爱华（1955-）女，教授，主要从事中蒙药鉴定、质量标
准及新药研发等方面的研究
DOI:10.13728/j.1673-6427.2013.04.026
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耧斗菜为毛茛科植物耧斗菜Aquilegia viridiflora
Pall 的干燥全草。别名血见愁、猫爪花，蒙药名乌日
乐其 -额布斯。夏末、秋前采收，阴干备用。主产于
内蒙古、河北、山东、辽宁等地。生于海拔 2 000~2
300 m 间的山地路河边的潮湿草地。味苦，性重、稀、
钝、凉、柔，有小毒。具有通经活血，催产，下胎衣，
愈伤，燥协日乌素，止痛等功效。主治月经不调，
经血淋漓不止，胎盘滞留，腹痛，刃伤。根据文献
报道，耧斗菜中主含特征性化学成分为生物碱类（木
兰花碱、小檗碱、黄连碱等），我们以耧斗菜中所含
主要活性成分木兰花碱为检测指标，采用高效液相色
谱法，对产于内蒙古、山东、辽宁三个产地 8个批次
的耧斗菜中木兰花碱的含量进行了研究，为耧斗菜的
质量控制、评价及资源开发利用提供实验依据。
1　仪器与试药
1.1　仪器
依利特高效液相色谱仪，紫外 -可见检测器；
KQ-250A 型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有
限公司）；AL204 型电子分析天平。
1.2　试药
木兰花碱对照品自制；药材分别采集于内蒙古呼
市大青山、山东青州、通辽罕山、辽宁本溪等地，并
经内蒙古医科大学药学院生药教研室鞠爱华教授鉴
定。乙腈为色谱纯；其他均为分析纯；水为超纯水。
2　试验方法与结果
2.1　色谱条件
依利特色谱柱（4.6 mm×250 mm）；流动相乙
腈 -0.05 mol/L 磷酸二氢钾（12:88）（每 100 mL 中加
0.2mL 三乙胺，再以磷酸调 pH值为 4.0），检测波长
286 nm，流速为 1.0mL/min，进样量 20 μL，柱温为
22℃。对照品、供试品及阴性色谱图见图 1、图 2、
图 3。
图 1 对照品 HPLC色谱图
Fig.1 HPLC chromatogram of the control
图 2 供试品 HPLC色谱图
Fig.2 HPLC chromatogram of samples
图 3 阴性对照品HPLC色谱图
Fig.3 HPLC chromatogram of blank samples
2.2　对照品溶液的制备
精密称取木兰花碱对照品适量，置棕色量瓶中，
加 80% 甲醇制成每 1 mL 含木兰花碱 251.4 μg 的溶
液，即得。
2.3　供试品溶液的制备
取供试品粉末（过 60 目筛）约 1.0 g，精密称定，
置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸 -80%甲醇（1:100）
溶液 20 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率 250 w，
频率 40 KHz）50 min，冷却到室温，再称定重量，用
80% 甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续
滤液，再用 0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
2.4　线性范围考察
精密称取木兰花碱对照品 14.13 mg，置 10 mL 量
瓶中，加80%甲醇溶解并稀释至刻度。精密吸取0.15、
0.74、1.19、1.78、2.22和2.97 mL分别至10 mL量瓶中，
用 80%甲醇稀释至刻度，分别吸取 20 μL 注入液相
色谱仪中，按上述色谱条件测定，记录各图谱的木兰
花碱峰面积积分值。结果峰面积 Y与浓度 X之间呈
现良好的线性关系，回归方程为 Y=20.084X+127.71，
r=0.999 5，（Y为峰面积积分值，X为浓度）。结果表
明（见表 1）木兰花碱在 20.95~419 μg/mL 范围内与
峰面积呈良好线性关系。
表 1标准曲线测定结果
Tab.1 Results of the standard curve measurement
浓度
(μg/mL) 20.95 104.75 167.60 251.40 314.25 419.00
峰面积 461.88 2199.34 3610.91 5222.93 6509.57 8427.78
2.5　精密度试验
取耧斗菜样品约 1.0 g，精密称定，按“供试品
溶液的制备”方法操作制备供试品溶液，按上述色
谱条件测定，连续进样 6针，测得木兰花碱峰面积，
结果见表 2，RSD 为 0.37%，表明仪器精密度良好。
表 2供试品溶液的精密度试验结果
Tab.2 Results of samples solution precision tests
序号 1 2 3 4 5 6 RSD（%）
峰面积 4809.21 4801.23 4804.10 4840.31 4811.86 4840.48 0.37
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2.6　稳定性试验
取耧斗菜样品约 1.0 g，精密称定，按“供试品
溶液的制备”方法操作制备供试品溶液，制备溶液后
分别于 0、1、2、4、6 及 8 h 进样，记录峰面积积分
值并计算相应的含量，结果见表 3，RSD 为 1.92%，
供试品溶液在 8 h 内稳定。
表 3供试品溶液稳定性试验结果
Tab.3 Results of samples solution stability tests
时间
（h） 0 1 2 4 6 8 平均值
RSD
（%）
含量
（%） 0.46 0.46 0.46 0.47 0.48 0.48 0.47 1.92
2.7　重复性试验
取同一批次的耧斗菜粉末约 1.0 g，精密称定，
共 6 份。分别按“供试品溶液的制备”方法操作制
备供试品溶液，并按上述色谱条件测定每份的含量，
结果见表 4，RSD 为 0.85%，表明该方法重现性良好。
表 4重复性试验结果
Tab.4 Results of repeatability tests
序号 称样量（g） 含量（%） 平均含量（%） RSD（%）
1 1.0002 0.48
0.48 0.85
2 1.0001 0.48
3 1.0002 0.47
4 1.0003 0.48
5 1.0004 0.48
6 1.0004 0.48
2.8　加样回收率试验
取已知含量的耧斗菜粉末约 0.5 g，供 6 份（木
兰花碱含量为 0.478 0%）。每份加入木兰花碱对照品
2.136 9 mg, 按“供试品溶液的制备”方法操作制备供
试品溶液，按上述色谱条件测定，计算回收率。计算
结果见表 5，表明本试验准确度好。
表 5加样回收试验结果
Tab.5 Results of recovery tests
序号 取样量(g)
含量
(μg)
对照品
加入量
(μg)
测定总
量 (μg)
回收率
（%）
平均回
收率 (%) RSD(%)
1 0.5001 2390 2136.90 4572.41 102.10
101.20 1.24
2 0.5000 2390 2136.90 4538.51 100.50
3 0.5001 2390 2136.90 4555.06 101.30
4 0.4996 2390 2136.90 4510.21 99.30
5 0.5004 2390 2136.90 4590.42 102.90
6 0.5002 2390 2136.90 4551.36 101.10
2.9　供试品的含量测定
2.9.1　不同产地耧斗菜中木兰花碱的含量分析 取不
同产地的耧斗菜药材，分别按“供试品溶液的制备”
方法操作制备供试品溶液，按上述色谱条件测定，计
算木兰花碱含量。计算结果见表 6。
表 6不同产地耧斗菜中木兰花碱含量测定结果
Tab.6 Results of magnoflorine content of different origin Aquilgia
产地批次 称样量（g） 峰面积 含量（%） 平均含量（%）
山东青州 1.0001 4996.37 0.48 0.480.9999 4876.30 0.47
山东潍坊 1.0001 3533.10 0.34 0.341.0001 3518.54 0.34
内蒙古通辽罕山 1.0002 2275.60 0.22 0.221.0001 2298.00 0.22
内蒙古锡林浩特西
乌旗
1.0000 1416.30 0.12 0.14
1.0002 1666.25 0.16
辽宁本溪 1.0003 2965.32 0.29 0.281.0006 2739.23 0.26
内蒙古呼市蛮汉山 1.0004 1293.20 0.12 0.131.0009 1323.01 0.13
内蒙古呼市大青山
十八台
1.0001 1355.94 0.13 0.12
1.0001 1193.98 0.11
内蒙古呼市大青山
井儿沟
1.0003 773.69 0.07 0.07
1.0003 751.35 0.07
表中 8 个批次样品测定的数据显示，不同产地耧
斗菜中木兰花碱的含量相差悬殊，在 0.07~0.48% 之
间，其中以山东青州产地的含量最高（0.48%），以
内蒙古呼市井儿沟产地含量最低（0.07%）。
3　讨论
3.1　实验根据相关文献 [1-3] 中有关木兰花碱的测定
波长为 222 nm、278 nm 及 284 nm，经在 200~800 nm
波长范围内进行光谱扫描证明，对照品及供试品均在
286 nm 处有最大吸收。故选择 286 nm 为检测波长，
既可保证样品测定，又可排除其它组分的干扰。
3.2　实验参考了文献 [1-3] 中有关木兰花碱的提取方
法，分别对不同提取方法、不同提取溶剂、提取溶剂
中甲醇的浓度和加入盐酸的比例以及不同提取时间
进行了比较，最后选用盐酸 -80% 甲醇（1:100）超
声提取 50 min 制得供试品溶液。
3.3　木兰花碱对照品不稳定，配制后应置棕色瓶中
避光低温放置或临用时配置。
3.4　蒙药耧斗菜为带根全草入药，我们实验发现耧
斗菜地下部分（根茎）中的木兰花碱含量明显高于地
上部分（茎叶），故样品在含量测定时，取样要有代
表性。取全草药材足量，粉碎（过60目筛），充分混匀，
否则即使是同一批样品，木兰花碱含量也会有差异。
参考文献
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究 [J]. 中国中药杂志 , 2009, 34(7): 922-923
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药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量 [J]. 中国生化药物杂志 , 2012,
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