全 文 ：Journal of Kunming Medical University
CN 53 -1221/ R
昆明医科大学学报 2013，（3）：12～ 14
绿菇抗氧化活性研究
陈亚萍，李玉鹏，郭蕴苹，简 虹，付继军，邱开雄，柳 波
（昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室，云南昆明 650500）
［摘要］目的 研究绿菇抗氧化活性．方法 采用DPPH自由基清除法对野生食用菌绿菇提取物的体外自由
基清除作用进行研究．结果 绿菇的乙酸乙酯和正丁醇提取物活性较好，IC50分别为0.24，1.90mg/mL．结论
各提取部分均比芦丁（IC50=0.063mg/mL） 抗氧化活性弱.
［关键词］绿菇；野生食用菌；抗氧化活性
［中图分类号］R285［文献标识码］A［文章编号］1003－4706（2013） 03－0012－03
Study on the Antioxidant Activity of Wild MushroomRussula
virescens
CHENGYa－ping，LIYu－peng，GUOYun－ping，JIANHong，FUJi－jun，QIUKai-xiong，LIUbo
（Dept. of Chemistry，School of Pharmaceutical Science，Kunming Medical University，
Kunming Yunnan 650500，China）
［Abstract］ObjectiveStudy on the antioxidant activity of Wild mushroomRussulavrescensin Yunnan.
MethodsDPPHradicalscavengingactivitywasusedinvitrotoinvestigatetheeffectofwildmushroomR.virescens
extracts．ResultsItwasfoundthattheEtOAcandn-BuOHextractsofR.virescesexhibit dmoderatescavenging
actions with IC50values of 0.24 and 1.90 mg/mL， respectively.ConclusionNo extra s have stronger scavenging
actionsthanrutin （IC50=0.063mg/mL） .
［Keywords］Rusulavirescens；Wildediblefungi；Antioxidantactivity
［基金项目］云南省应用基础研究计划基金资助项目（2012FB156）；云南省教育厅科研基金重点资助项目 （201Z035）；
云南省教育厅科研基金资助项目（09Y0182）
［作者简介］陈亚萍 （1981~），女，云南宣威市人，理学硕士，实验师，主要从事天然产物活性成分研究工作．
［通讯作者］ 柳波．E-mail:350111085@qq.com；邱开雄．E-mail:chenneyao16@hotmail.com
绿菇 Russulavirescens（Schaeff） Fr. 属红菇
科红菇属真菌，云南俗称 “青头菌” ， 我国各
地均有分布[1]；文献报道其子实体热水提取物对小
鼠肉瘤180和艾氏腹水癌的抑制率均为70%[2]；关
于绿菇的化学成分和作用报道较少[3]．为了探索绿
菇的食用功能因子，为绿菇的食用和开发提供科
学的依据，采用DPPH自由基清除法对绿菇的体外
抗氧化活性进行了研究[4-6]．
1 材料和方法
1.1仪器和试剂
仪器：722s型可见分光光度计（上海精密科
学仪器有限公司）；RE-52A旋转蒸发仪（上海亚
荣生化仪器厂），FA2004型电子天平（上海精密
科学仪器有限公司） ．试剂：DPPH（1，1-二苯
基 -2- 苦基肼自由基， Sigma-Fluka 公司产品）；
芦丁对照品（中国医药集团贵州生物试剂公司）；
95％乙醇（分析纯，天津化学试剂有限公司），其
它试剂均为国产分析纯．
1.2 真菌来源
绿菇于2009年9月购自昆明市环西桥农贸市
场，标本保存于昆明医科大学药学院医药化学系
科研室．
绿菇的乙酸乙酯提取物对DPPH自由基清除活
性IC50值相对于其它提取物的IC50值小，表现了
较强的自由基清除活性，但比芦丁弱，见表2．
3 讨论
绿菇的乙酸乙酯和正丁醇提取物活性较好，自
由基清除 IC50分别为 0.24， 1.90 mg/ mL，进一步
研究该两部分化学成分，可能得到抗氧化活性较强
的化合物．作为对照品的芦丁是黄酮类化合物中抗
氧化活性较强的化合物，同时具有降低毛细血管脆
1.3提取与分离
绿菇 （0.45 kg），用 95 %乙醇提取 5 次， 减
压回收至无乙醇味，得乙醇提取物18.9g．乙醇提
取物用水溶解，依次用石油醚，乙酸乙酯，正丁
醇，甲醇进行萃取，减压浓缩后分别得到石油醚
（1.9g），乙酸乙酯 （1.5g），正丁醇 （3.3g），甲
醇 （7.2g），水相 （5.0g） 六个部分.乙醇提取物
和萃取的各部分分别取 20 mg进行抗氧化活性测
试．
1.4抗氧化活性测定
1.4.1DPPH液的配制 准确称取DPPH试剂25
mg，用95％分析纯的乙醇溶解，并定量转入250
mL容量瓶中，用95％乙醇定容，摇匀，得质量浓
度为100mg/L的 DPPH储备液，置于冰箱中冷藏
备用．
1.4.2样品溶液的配制 准确称取待测试样品20
mg，溶解在分析纯的乙醇中，并转入100mL的容
量瓶中，用乙醇定容，摇匀，得质量浓度为 200
mg/L的样品溶液，置于冰箱中冷藏备用．
1.4.3芦丁标准溶液的配制 准确称取芦丁 2.5
mg，溶解在分析纯的乙醇中，并转入100mL的容
量瓶中，用乙醇定容，摇匀，得质量浓度为 25
mg/L的样品溶液，置于冰箱中冷藏．
1.4.4清除DPPH自由基能力的测定 准确量取
1.2mLDPPH液，加入 2.8 mL95 %乙醇溶液，混
匀，在λ =520nm测吸光度作为Ac值，自由基
清除率为零．分别准确量取各样品溶液0.2、0.4、
0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6 mL， 加入 1.2 mL
DPPH液及2.6、2.4、2.2、 .0、1.8、1.6、1.4、1.2
mL的95％乙醇溶液混合均匀，在λ=520nm测
吸光度作为Ai值．另外分别准确量取各样品溶液
0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6mL，加入
3.8、3.6、3.4、3.2、3.0、2.8、2.6、2.4 mL 的 95
％乙醇溶液后混合均匀，在λ=520nm测吸光度
作为空白校正Aj值．以芦丁作为阳性对照．按下
式计算自由基清除率K值．
K＝1-（Ai-Aj）
Ac
×100%
2 结果
绿菇乙醇提取物及其不同溶剂萃取部分对
DPPH自由基的清除率随着量的加大有逐步增强的
趋势；但不同提取物自由基清除作用差别较大，
乙酸乙酯萃取部分相对其它提取物清除率略高，
见表1．
表1 绿菇提取物DPPH自由基清除率（%）
Tab.1The DPPH radical scavenging rates ofR.irscensextracts（%）
0.04mg 0.08mg 0.12mg 0.16mg 0.20mg 0.24mg 0.28mg 0.32mg
石油醚 0.63 2.14 2.51 2.87 2.89 3.64 4.14 6.66
乙酸乙酯 9.01 9.64 9.76 10.14 10.64 11.01 11.76 13.39
正丁醇 0.96 1.08 2.39 4.30 6.21 6.45 8.12 9.60
甲醇 1.20 1.58 1.74 1.86 2.73 3.10 4.35 5.34
水 0.68 1.50 1.85 2.05 2.18 3.14 3.24 4.10
乙醇 0.39 0.65 0.78 1.29 1.94 2.20 2.72 3.10
样 本
自由基清除率（%）
项 目 DPPH（IC50/mg）
石油醚萃取部分 6.61
乙酸乙酯萃取部分 0.24
正丁醇萃取部分 1.90
甲醇萃取部分 28.91
水相 18.91
乙醇提取物 8.82
芦丁 0.063
表2 绿菇提取物清除DPPH自由基活性的IC50值如下
Tab.2IC50values ofR.virescensextracts scavenging
activity against DPPH radica
13第3期 陈亚萍，等．绿菇抗氧化活性研究
性，改善微循环的作用，在临床上主要用于糖尿
病和高血压的辅助治疗[7]．
绿菇属于红菇属（Russula） 红菇科 （Russu-
laceae） 真菌．该科真菌是担子菌亚门(Basidiomy-
cotina） 伞菌目（Agaricales） 最大的科之一，据统
计，全世界约有577种，广布于世界各地．该科
的许多真菌在中医学上可治疗腰酸腿痛、手足麻
木、经络不舒、筋骨不适、四肢抽搐等．该科真
菌如环纹乳菇（Lactariusinsulsus）、辣味乳菇 （L.
piperatus）、绒白乳菇（L.vellereus） 和红菇属的大
红菇 （Russulaalutacea），密褶黑菇 （R.densifoli-
a），臭红菇（R.foetens） 等，都是山西著名中药
舒筋丸的配料．国内外研究说明：该科真菌中分
离得到的化合物主要是酚类、倍半萜、色烯类、
生物碱类、甾醇、氨基酸、脂肪酸及类酯类、游
离糖、烃类、及芳香挥发性成分等，它们的活性
研究主要在细胞毒、抗菌等方面．其中，倍半萜
类化合物是该科真菌的主要次生代谢产物[6-9]．
绿菇这种野生食用类真菌，广泛受到云南各
族人民的欢迎，抗氧化活性研究已成为现代食品
研究重要部分．笔者首次用DPPH自由基清除活性
研究方法对该真菌不同溶剂提取物抗氧化活性进
行研究，该研究为其研究开发和应用提供了科学
依据．在此研究基础上，我们将进一步采用新的
药理活性筛选方法跟踪，分离得到新的活性成分，
从该真菌中寻找新的天然抗氧化剂和新的活性化
合物．
（致谢：昆明医科大学 2011 届毕业生张忠
诚、彭琪、梅建丽等参与了部分研究工作，特此
致谢！）
［参考文献］
［1］ 汤建国，邵红军，刘吉开． 变绿红菇化学成分研究
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（2012－12－14收稿）
第34卷14 昆明医科大学学报