全 文 ：中国农学通报 2009,25(03):45-48
Chinese Agricultural Science Bulletin
基金项目：黄山学院自然科学项目“箬叶提取物的制备及抗氧化活性研究”（2007xdkj037）。
第一作者简介：黄龙翔，男，1988年出生，本科，专业：生物技术。通信地址：245041 安徽省黄山市 黄山学院南区生命及环境科学学院，
E-mail：huanglx530@163.com。
通讯作者：胡长玉，男，1965年出生，从事植物资源及生理研究，已发表学术论文13篇。通信地址：245041安徽省黄山市黄山学院南区生命及环境科
学学院，Tel：0559-2546631，E-mail：hcy@hsu.edu.cn。
收稿日期：2008-10-10，修回日期：2008-12-06。
箬叶提取物的制备及抗氧化活性研究
黄龙翔，戴果先，胡长玉
（黄山学院生命与环境学院，安徽屯溪 245041）
摘 要：采用热水煮提、配比不同浓度的乙醇从箬叶中提取水溶性、醇溶性提取物，正交实验表明：水提箬
叶工艺条件为箬叶、水配比15 g:200 ml，110℃，时间120 min，测得的吸光度值高；醇提的工艺条件为时
间90 min、温度60℃、乙醇质量分数90%时测得的吸光度值高。对超氧阴离子自由基清除能力，箬叶水
提取物在浓度0.04~5.12 mg/ml之间呈增长趋势，水提取物浓度为5.12 mg/ml时，达到33.33%，乙醇提取
物在浓度0.04~5.12 mg/ml之间对超氧阴离子的清除能力呈负增长趋势；对羟基自由基清除能力，水提
取物在浓度0.04~5.12 mg/ml之间呈增长趋势，当浓度为5.12 mg/ml时，达到13.88%；乙醇提取物在浓度
0.04~5.12 mg/ml之间呈负增长趋势，当提取物浓度超过 0.64 mg/ml时，呈负增长趋势显著增加，
达-93.75%。箬叶水提取物具有较强的抗氧化能力，有广泛的应用价值。
关键词：箬叶；正交实验；提取物；抗氧化活性
中图分类号：TQ917 文献标识码：A
Study on Preparation and Antioxidant Activity of Extract from
Indocalamus tessellatus Leaves
Huang Longxiang, Dai Guoxian, Hu Changyu
(College of Life and Environmental Sciences, Huangshan University, Tunxi Anhui 245041)
Abstract: By using the method of boiling-water extraction、ethanol extraction and orthogonal, the
water-soluble and extracts ethanol-soluble extracts were obtained from Indocalamus leaves, and the results
showed that when the water-soluble extraction condition was at the ratio of material 15 g to liquid 200 ml,
extracting temperature 110 ℃ and extracting time 120min, the absorbance tested was highest. The
ethanol-soluble extraction condition was extracting time 90min, extracting temperature 110 ℃ , and quality
score 90% , and the absorbance tested was highest. In the experiment of scavenging activity to O2-, the
concentration of water-soluble extracts between 0.04-5.12mg/ml showed growing tendencies, when the
concentration was 5.12 mg/ml, the scavenging rate was 33.33%. The ethanol-soluble extracts showed negative
growing tendency between 0.04-5.12 mg/ml. In the experiment of scavenging activity to·OH, the concentration
of water-soluble extracts between 0.04-5.12 mg/ml showed growing tendency, when the concentration was 5.12
mg/ml, the scavenging rate was 13.88% . The ethanol-soluble extracts showed negative growing tendency
between 0.04-5.12 mg/ml. When the concentration exceed 0.64 mg/ml, negative growing tendency was
significant, even reached -93.75%. In conclusion, the water-soluble extracts of Indocalamus tessellatus leaves
had relatively strong antioxidant activity, so its application value is wide.
Key words: Indocalamus tessellatus leaves, orthogonal design, extracts, antioxidant activity
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箬叶为禾本科(Graminales)竹亚科(Bambusoideae)
箬竹属(Indocalamus)植物叶的总称，该属植物约为 20
种以上，均产自中国，主要分布于长江以南各省区[1]。
俗称竹箬、箬皮，即箬竹 [Indocalamus tessellatus
(Munro) Keng f]的叶子，秆高约 1 m，径 5 mm，地下茎
为复轴型。节间长5~20 cm，每节分枝1~3枝。箨环下
常有一圈木栓质环壮物隆起。箨鞘长度短于节间，长
4.5~18 cm，背部被白色细毛和贴生棕色小刺毛；箨舌
平截形，长0.5~1 mm；箨耳显著，呈半月，脱落性，边缘
具长4~12 mm流苏状刚毛；箨叶长三角形，先端渐尖，基
部圆形。小枝具叶1~3片，叶片长批针形，长10~30 cm，
宽1.5~6.5 cm，次脉6~12对，小横脉明显，叶耳显著，呈
半月形，顶端有流苏状繸毛。圆锥花序细长，长8~14 cm，
其主轴、分枝及小穗轴均密被白色细毛；小穗轴淡紫色
或暗紫色，有5~9小花，长2~4 cm。花果期1~8月。产
霍山、金寨、潜山、黄山、歙县（清凉峰）、休宁、祁门、青
阳（九华山）等地。生于海拔1000 m以下山坡、沟谷林
下阴坡和半阴坡。山区群众用叶垫茶篓、包粽子、制斗
笠[2]。
国内对箬叶的研究主要集中在箬叶单糖组成、
多糖类及其衍生物以及箬竹叶中挥发油的提取及成
分分析 [3-5]，而对箬叶抗氧化活性方面的研究却很少
见报道。
笔者运用正交实验制备箬叶的水提物和乙醇提
物，分别进行清除超氧阴离子自由基能力和清除羟自
由基能力的比较。为箬叶抗氧化性方面的开发，提供
依据。
1 材料与方法
1.1 材料、试剂与仪器
1.1.1 材料 箬叶2008年3月购于安徽省屯溪黎阳农户
家中，为自然晾晒后储藏。
1.1.2 试剂与仪器 无水乙醇，氯化硝基四氮唑蓝
（NBT），吩嗪硫酸甲酯（PMS），D-脱氧核糖，硫代巴
比妥酸（TBA）及还原型辅酶Ⅰ（NADH·2Na）均为上
海源聚生物科技有限公司试剂，硫酸亚铁、维生素C、
双氧水、三氯乙酸均为分析纯，上海化学试剂有限公
司产品。
HH-S数显恒温水浴锅，江苏省金坛市医疗仪
器厂；722可见分光光度计，上海精密科学仪器有限
公司；800型电动离心机，江苏省金坛市医疗仪器
厂；PL203型电子精密天平，梅特勒－托利多仪器
（上海）有限公司；BCD-171D型容声电冰箱；SHZ-
Ⅲ D 型循环水真空泵，上海亚荣生化仪器厂；
DHG-9070A型电热恒温鼓风干燥箱，上海精宏实验
设备有限公司。
1.2 方法
1.2.1 箬叶水提物制备工艺的正交实验设计 选取浸提
时间，浸提温度，物料比 3项为考察因素，进行正交实
验设计 [6]，因素水平见表 1；水浴提取，测定其吸光度
值，结果见表2。
箬叶提取物得率/%=提取物干重（g）/箬叶干重
（g）×100%
1.2.2 箬叶乙醇提物制备工艺的正交实验设计[7] 用无
水乙醇，分别配制30%、60%、90%的乙醇溶液，影响乙
醇提物提取得率[8]的主要因素有：温度，时间，乙醇浓
度等。选取水提物实验所得最优物料比 15:200，以浸
提时间，浸提温度，乙醇浓度 3项为考察因素，进行L9
（33）正交实验设计，因素水平见表3；乙醇提取，趁热过
滤，测定其吸光度，结果见表4。
表1 箬叶水提取物制备的因素水平
因素
1
2
3
乙醇浓度A/%
30
60
90
浸提温度B/℃
40
50
60
浸提时间C/min
30
60
90
表3箬叶乙醇提取物制备的因素水平
实验号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
k1
k2
k3
R
A物料比
/(g·ml-1)
1
1
1
2
2
2
3
3
3
0.692
0.765
0.779
0.087
B提取温
度/℃
1
2
3
1
2
3
1
2
3
0.717
0.755
0.763
0.046
C提取时间
/min
1
2
3
2
3
1
3
1
2
0.713
0.766
0.756
0.053
吸光度
0.627
0.733
0.715
0.752
0.781
0.761
0.771
0.752
0.814
表2 箬叶水提物制备工艺的正交实验方案及结果
因素
1
2
3
物料比A
[箬叶重量(g):水体积(ml)]
5:200
10:200
15:200
浸提温度
B/℃
90
100
110
浸提时间
C/min
60
120
180
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黄龙翔等：箬叶提取物的制备及抗氧化活性研究
1.2.3 清除超氧阴离子自由基能力测定 NBT还原法[9]：
将箬叶提取物分别配成为浓度为0（对照），0.04，0.08，
0.16，0.32，0.64，1.28，2.56和 5.12 mg/ml的水溶液，取
0.1 ml分别加入1 ml含557 μmol/L NADH的16 mmol/
L Tris-HCl（pH 8.0），1 ml含45 μmol/L PMS的16 μmol/
L Tris-HCl（pH 8.0），以及 1 ml含 108 μmol/L NBT的
16 mmol/L Tris-HCl（pH 8.0）。25 ℃温浴 5 min，取出
在548 nm下测吸光值（n=3）。根据下式计算超氧阴离
子自由基清除率：清除率=（1-样品管A546/对照管A546）×
100%。
超氧阴离子自由基不仅具有重要的生物功能，也
与多种疾病有密切联系，它是基态氧接受一个电子后
形成的第一个氧自由基，可以经过一系列反应生成其
它的氧自由基[10]。
O2-的形成是氧毒性的主要因素之一，笔者采用
NBT法测定O2-的清除能力。NBT与O2-的作用会有明
显的颜色变化，若加入的物质可清除O2-，降低NBT的
还原程度，颜色变化程度将减弱[11]。
1.2.4 清除羟自由基能力测定 D2-脱氧核糖法[9]：将箬
叶提取物分别配成为浓度为0（对照），0.04，0.08，0.16，
0.32，0.64，1.28，2.56和5.12 mg/ml的水溶液，取0.1 ml
分别加入0.6 ml反应缓冲液（含2.67 mmol/L脱氧核糖
和 0.13 mmol/L EDTA的 0.2 mol/L pH 7.4的磷酸盐缓
冲液），0.4 mmol/L的硫酸亚铁0.2 ml，2.0 mmol/L抗坏
血酸 0.05 ml，以及 20 mmol/L的H2O2 0.05 ml，37℃下
温浴 15 min，取出后加入 1%硫代巴比妥酸 1 ml和 2%
三氯乙酸 1 ml，沸水浴 15 min，取出立即放在冰上冷
却，532 nm测吸光值（n=3）。清除率=（1-样品管A546/对
照管A546）×100%。
羟自由基是化学性质非常活泼的一种活性氧分
子，几乎能和所有的生物大分子发生各种不同类型的
反应，并有非常高的速度常数，是进攻性最强的化学物
质之一，实验采用反应体系产生的羟自由基OH，通过
考察羟基自由基OH对脱氧核糖分子氧化破坏情况来
确定提取物是否对羟自由基OH有清除能力[11]。
2 结果与分析
2.1 箬叶提物制备工艺的正交实验结果与分析
2.1.1 箬叶水提物制备工艺的正交实验结果与分析 由
表 3可以看出，影响箬叶水提物得率的所选因素的主
次顺序为A>C>B；水提箬叶提取物的最佳工艺条件为
A3B3C2，即物料比为15:200，提取温度为110℃，提取
时间为 120 min，此条件下箬叶提取物的吸光度为
0.814，最高。
2.1.2 箬叶乙醇提物制备工艺的正交实验结果与分析 由
表4可以看出，影响箬叶乙醇提物得率的所选因素的主次
顺序为A>B>C；水提箬叶提取物的最佳工艺条件为
A3B3C2，即乙醇浓度为90%，提取温度为60℃，提取时间
为60 min，此条件下箬叶提取物的吸光度为2.118，最高。
2.2 抗氧化性的测定
2.2.1 超氧阴离子自由基（O2-）清除能力的测定 图1给
出了两种箬叶提取物对超氧阴离子的清除结果，由图
可看出，乙醇提取物对超氧阴离子的清除能力呈负增
长趋势，乙醇提取物在浓度为0.64 mg/ml以下时，负增
长趋势不很明显，清除率基本上处于-6%~6%，乙醇提
取物浓度超过0.64 mg/ml时，负增长趋势显著增加，清
除率甚至达到-144%，故乙醇提取物没有对超氧阴离
子的清除能力，甚至增强超氧阴离子的活性；而箬叶水
提取物，在浓度 0.04~5.12 mg/ml之间成增长趋势，箬
叶水提取物浓度为 5.12 mg/ml时，达到 33.33%。总的
来说，水提取物对O2-的清除能力更为明显。
表4 箬叶乙醇提物制备工艺的正交实验方案及结果
实验号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
k 1
k 2
k 3
R
A乙醇浓
度/%
1
1
1
2
2
2
3
3
3
1.749
1.817
2.045
0.296
B提取温
度/℃
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1.866
1.820
1.926
0.106
C提取时间/
min
1
2
3
2
3
1
3
1
2
1.861
1.882
1.869
0.021
吸光度
1.742
1.723
1.783
1.804
1.772
1.876
2.053
1.964
2.118
-160
-140
-120
-100
-80
-60
-40
-20
0
20
40
60
0.040.080.160.320.641.282.565.12
提取物浓度/(mg/ml)
清
除
率
/
%
箬叶水提物 箬叶乙醇提取物
图1 两种箬叶提取物对超氧阴离子自由基清除能力的比较
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中国农学通报 http://www.casb.org.cn
2.2.2 对羟基自由基的清除能力的测定 图2给出了两
种提取物清除羟基自由基的结果。从图可以看出，乙
醇提取物对羟自由基的清除能力呈负增长趋势，乙醇
提取物在浓度为 0.64 mg/ml以下时，呈负增长趋势不
很明显，清除率基本上处于-8.125%~8.125%，当乙醇
提取物浓度超过 0.64 mg/ml时，呈负增长趋势显著增
加，清除率甚至达到-93.75%。而水提取物，在浓度
0.04~5.12 mg/ml之间呈增长趋势，箬叶水提取物浓度
小于 0.32 mg/ml时，清除率为负数。水提取物浓度为
5.12 mg/ml时，达到13.88%。总的来说，水提取物对羟
自由基清除能力更为明显。
3 讨论
箬叶的水提取物和乙醇提取物均有一定的抗氧化
能力，无论是对超氧阴离子的清除能力，还是对羟自由
基清除能力，箬叶的水提取物总是表现的更为明显，而
且图1和图2的对应曲线增长趋势几乎完全相同。这
是因为同一种物质的不同提取方法，所得到的对超氧
阴离子的清除能力和羟自由基清除能力呈平行关系。
通常在乙醇提取实验中，当含醇量为50%~60%时
可除去淀粉等杂质；含醇量达 60%时，无机盐开始沉
淀；含醇量达75%以上时，可除去蛋白质等杂质，当含
醇量达80%时，几乎可除去全部淀粉、多糖、蛋白质、无
机盐类杂质，但是鞣质、水溶性色素、树脂等不易除去
[12]。在水提取实验中，有效成分包括黄酮、糖类、氨基
酸、肽和蒽醌类化合物等[13]。乙醇提取物物成分为鞣
质、水溶性色素、树脂等等，热水提取物成分则为黄酮、
糖类、氨基酸、肽和蒽醌类化合物等。这也就说明了起
着强抗氧化能力[14]的是黄酮、糖类、氨基酸、肽和蒽醌
类化合物等。
4 结论
对箬叶进行抗氧化的分析，进行箬叶的水提取物
和乙醇提取物抗氧化的比较，水提取物抗氧化能力更
为明显。这也论证了日常生活中水煮箬叶来更好地发
挥其抗氧化活性。因此，对于箬叶能较强清除超氧阴
离子自由基和羟自由基的这个特性应从药用的研发上
加以利用。
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-100
-80
-60
-40
-20
0
20
0.040.080.160.320.641.282.565.12
提取物浓度/(mg/ml)
清
除
率
/
%
箬叶水提物 箬叶乙醇提取物
图2 两种箬叶提取物对羟自由基清除能力的比较
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