全 文 ：HPLC法测定薜荔中儿茶素的含量
夏爱军①，韦少宣②，廖厚知③
［摘 要］ 目的 建立薜荔中儿茶素的含量测定方法。方法 采用 HPLC法进行测定，色谱柱为 Agilent C18(4． 6 mm ×
250 mm，5 μm) ;流动相为乙腈-0． 4%磷酸溶液(10∶ 90) ;流速为 1． 0 ml·min －1;检测波长为 280 nm。结果 薜荔中儿茶素含量
在 10． 05 ～ 90． 45 μg·ml －1范围内线性关系良好(r = 0． 9998) ;平均回收率为 99． 17%，ＲSD为 1． 01%。结论 所建立的方法
简便快速、准确、灵敏、重复性好，可用于薜荔中儿茶素的含量测定。
［关键词］ 薜荔;儿茶素;HPLC
［中图分类号］ Ｒ927． 2 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1008-9926(2015)4-0333-03
［DOI］ 10． 3969 / j． issn． 1008-9926． 2015． 04． 017
Determination of Catechin in Ficus Pumila Linn．
XIA Ai-jun①，WEI Shao-xuan②，LIAO Hou-zhi③
①Department of Pharmacy，Hospital 303 of PLA，Nanning 530021，China;②Department of Traditional
Chinese Medicine，Nanning 530021，China;③Guangxi Huike Institute of Materia Medica，Nanning 530007，China
［Abstract］ Objective To establish a method for determination of catechin content in Ficus Pumila Linn．
Methods Agilent C18(4． 6 mm × 250 mm，5 μm)colmnn was used． The mobile phase was acetonitrile-0． 4%
phosphonic acid solution (10∶ 90)at a flow rate of 1． 0 ml·min －1 ． The detection wavelength was 280 nm． Ｒesults
The linearity of hyperin was good within the range of 10． 05 － 90． 45 μg·ml －1 ． The average recovery was 99． 17%，
while ＲSD was 1． 01% ． Conclusion This method is accurate，sensitive and easily reproducible． It can be applied to
quality control in Ficus Pumila Linn．
［Key words］ Ficus Pumila Linn．;catechin ;HPLC
薜荔为桑科植物薜荔(Ficus pumila Linn．)的
干燥带叶不育幼枝。又名凉粉藤、广王不留行、石
莲、常春藤、石龙藤、石壁藤、补血王等。分布于我国
华东、中南、西南等地，广西全区均有分布。味酸、性
凉。具有祛风除湿、活血通络、解毒消肿之功。主治
风湿痹痛、坐骨神经痛、泻痢、尿淋、水肿、疟疾、闭
经、产后瘀血腹痛、咽喉肿痛、睾丸炎、漆疮、痛疮肿
毒、跌打损伤［1］。薜荔的叶含有脱肠草素、香柑内
酯、芸香苷、内消旋肌醇等成分［1］;茎、叶含有白桦
醇、羽扇豆醇、β -谷甾醇、白桦酸、胡萝卜苷、正二十
六烷醇、豆甾醇、儿茶素等化学成分［2］。有效成分
儿茶素具有抗氧化、保护心血管、抗肿瘤、抗茵、抗病
毒、抗炎、免疫调节、神经保护、调节糖脂代谢等药理
作用，在临床应用上具有重要的医疗保健价值［3］。
作者简介:夏爱军，主任药师。研究方向:医院药学。Tel: (0771)
2870266;E-mail:singerxaj2002@ aliyun． com
作者单位:① 530021 广西南宁，解放军 303 医院药剂科;
② 530021 广西南宁，广西中医学院药学院中药教研室;③ 530007
广西南宁，广西汇科药物研究所
本研究建立了薜荔中儿茶素的含量测定方法，旨在
为薜荔的质量标准制定提供试验依据。
1 材料
1． 1 仪器 LC-2010A 高效液相色谱仪;SPD-
M10Avp紫外检测器(日本岛津制作所) ;Lcsolution
色谱工作站;Agilent C18色谱柱(4． 6 mm ×250 mm，5
μm) ;双频加热型超声波清洗器(上海冠特超生仪
器有限公司) ;阿修罗实验室超纯水机(重庆阿修罗
科技发展有限公司)。
1． 2 试药 儿茶素对照品(中国食品药品检定研
究院，批号:110877-201102) ;乙腈为色谱纯;磷酸为
分析纯;水为超纯水(自制)。薜荔药材〔于 2013 年
3 月—12 月分别采于广西武鸣县(20130301)、武宣
县 (20130401)、东 兴 市 (20130501)、平 果 县
(20130601 )、临 桂 县 (2013801 )、钟 山 县
(20131001 )、罗 城 县 (20131101 )、苍 梧 县
(20131201)〕(由广西汇科药物研究所廖厚知工程
师鉴定为薜荔 Ficus pumila Linn．的不育茎、叶)。
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2 方法和结果
2． 1 色谱条件 以乙腈-0． 4%磷酸溶液(10∶ 90)为
流动相;Agilent C18柱(4． 6 mm × 250 mm，5 μm)为
色谱柱;流速为 1． 0 ml·min －1;柱温为 30 ℃;检测波
长为 280 nm。
2． 2 溶液的制备 (1)对照品溶液 精密称取儿
茶素对照品 10． 05 mg置 10 ml量瓶中，加甲醇溶解
并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。精密量取贮备液
3 ml，置 100 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即
得 30 μg·ml －1的儿茶素对照品溶液。(2)供试品溶
液 取本品粉末(批号:20130301)约 1 g，过 4 号筛，
精密称定，置具塞锥形瓶中，加入三氯甲烷 30 ml，超
声处理 30 min，滤过，残渣挥去三氯甲烷，精密加入
50%甲醇 50 ml，称定质量，超声处理 30 min，放冷，
再称定质量，用 50%甲醇补足减失的质量，摇匀，滤
过，取续滤液，即得。
2． 3 系统适应性试验及专属性考察 分别精密吸
取对照品溶液、样品溶液各 10 μl，注入 HPLC 仪，按
上述色谱条件测定，此色谱条件下，儿茶素与其他组
分峰基线分离。理论塔板数以儿茶素峰计不得低于
4000，儿茶素与其他杂质峰分离度不得低于 1． 5。
样品中儿茶素的理论塔板数为 4517，见图 1。
A:对照品溶液;B:供试品溶液;1:儿茶素
图 1 儿茶素 HPLC图
2． 4 线性关系的考察 精密量取 2． 2(1)项下贮备
液适量，加甲醇分别稀释成浓度为 10． 05、20． 10、
30． 15、60． 30、90． 45 μg·ml －1的溶液，按 2． 1 项下色
谱条件，分别进样 10 μl，测定，以峰面积(Y)为纵
坐标，儿茶素质量浓度(X，μg·ml －1)为横坐标，进
行回归分析，得回归方程:
Y = 31 007 X － 3707，r = 0． 9998
表明儿茶素浓度在 10． 05 ～ 90． 45μg·ml －1范围
内线性关系良好。
2． 5 精密度试验 取儿茶素对照品溶液，按 2． 1 项
下色谱条件，依法测定，重复进样 5 次，测定色谱峰
面积，ＲSD值为 0． 11%，表明仪器精密度良好。
2． 6 稳定性试验 取同一样品溶液(批号:
20130301) ，在 0、2、4、6、8、12、24 h 分别进样，依法
测定，结果峰面积 ＲSD 值为 0． 73%，表明样品溶液
中儿茶素含量在 24 h内稳定。
2． 7 重复性试验 取同一批号样品 6 份(批号:
20130301) ，按 2． 2(2)项下制备供试品溶液，按 2． 1
项下色谱条件，依法测定，结果儿茶素平均含量为
1． 688 mg·g －1，ＲSD 为 1． 14%，表明本测定方法重
复性好。
2． 8 加样回收率试验 取已知含量(1． 688
mg·g －1)的同一批样品(批号:20130301)6 份，每份
0． 5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 2． 2
(1)项下儿茶素贮备液 0． 8 ml，挥去甲醇，按 2． 2(2)
项下供试品溶液制备方法制备，分别注入 HPLC 仪，
按 2． 1 项下色谱条件测定儿茶素峰面积，计算回收
率，结果见表 1。
表 1 薜荔加样回收率试验结果
取样量 /
g
样品量 /
mg
加入量 /
mg
测得量 /
mg
回收率 /
%
珋x /
%
ＲSD /
%
0． 5001 0． 8442 0． 8040 1． 6403 99． 02 99． 17 1． 01
0． 5016 0． 8467 0． 8040 1． 6503 99． 95
0． 5033 0． 8496 0． 8040 1． 6591 100． 68
0． 5013 0． 8462 0． 8040 1． 6333 97． 90
0． 5007 0． 8452 0． 8040 1． 6406 98． 93
0． 5012 0． 8460 0． 8040 1． 6384 98． 56
2． 9 含量测定 取薜荔 8 批，按上述方法测定，不
同时间及不同产地采集的薜荔中儿茶素的含量在
0． 10% ～ 0． 25%，结果见表 2。相关数据表明，不同
采集时间及不同地域，儿茶素含量有差异，在 3 月至
10 月间采集无显著性差异。因此本研究建议薜荔
的采集时间为夏季，按干燥品计算，本品含儿茶素不
得少于 0． 15%。
表 2 样品含量测定结果
批号 茎叶比
含量 /
mg·g － 1
含量 /
%
珋x /
%
20130301 1∶ 2． 67 1． 679 1． 668 0． 168 0． 167 0． 17
20130401 1∶ 2． 31 1． 993 2． 001 0． 199 0． 200 0． 20
20130501 1∶ 2． 34 2． 459 2． 466 0． 246 0． 247 0． 25
20130601 1∶ 2． 41 1． 868 1． 879 0． 187 0． 188 0． 19
20130801 1∶ 2． 37 1． 916 1． 902 0． 192 0． 190 0． 19
20131001 1∶ 2． 44 1． 354 1． 335 0． 135 0． 133 0． 13
20131101 1∶ 2． 52 1． 022 0． 999 0． 102 0． 100 0． 10
20131201 1∶ 2． 61 0． 958 0． 966 0． 096 0． 097 0． 10
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本研究对 3 批中试量生产的舌下含片进行质量
标准研究。对其建立相应的质量控制标准，且测定
方法简便准确，重复性好，专属性强。通过处方验
证，各项指标数据均符合《中国药典》项下规定，为
证实该制剂质量稳定提供了依据。
下一步将 LMWH舌下含片作为军用制剂开发，
为战时军队大量战伤病员的术中、术后提供一种装
备性制剂，使其适应战时之需，携带方便，可随时给
药或停药，具有高效、速效作用。作为军用特需药品
列装，用于大规模的预防和治疗，具有重要意义。
［参考文献］
［1］ 刘 章，姬胜利，王凤山．低分子肝素的药理作用和临床应用
研究进展［J］．药物生物技术，2014，21(6) :573 － 578
［2］ 崔慧斐，李 华，曹 超，等．低分子肝素口服制剂的降血脂作
用研究［J］．中国生化药物杂志，1998，19(1) :22 － 24
［3］ 谢继青，牛爱军，方喜峰，等． 低分子肝素舌下含片处方筛选
及药效学观察［J］．中国医院药学杂志，2004，24(10) :590 －
592
［4］ 徐银祥，王凤山，李小羿． 低分子量肝素钙口服制剂的研究
［J］．中国生化药物杂志，2008，29(6) :403 － 405
［5］ 诸 敏，李立安，王根宝．低分子肝素口服制剂的国内外研究
进展［J］．中国现代应用药学，2010，27(2) :105 － 108
［6］ 国家药典委员会． 中华人民共和国药典(二部) ［S］． 北京:中
国医药科技出版社，2010:366
(收稿日期:2014-12-24;修回日期:2015-02-09)
(本文编辑 殷 萌)
( 上接 334 页)
3 讨论
样本采集后的干燥、储存、采用自然条件下的日
光晒干，然后装袋置阴凉处储存的方式，也是对应药
材收购的条件。
3． 1 流动相的选择 参考文献［5-7］，预试验中选
择了 3 种流动相系统进行试验:乙腈-0． 4%磷酸溶
液系统;甲醇-水-冰醋酸系统;枸橼酸溶液-N，N 二
甲基甲酰胶-四氢呋喃系统。结果以乙腈-0． 4%磷
酸溶液系统的分离效果最好。
3． 2 提取条件的选择 参考文献［4-7］，结合薜荔
叶多、杂质多的特点，增设三氯甲烷去杂质步骤，并
与 50%甲醇超声提取进行对比，结果三氯甲烷去杂
后，供试品溶液中儿茶素能更好的与其他成分分离。
见图 2。
A:除杂前;B:除杂后;1:儿茶素
图 2 供试品溶液色谱图
3． 3 提取时间的考察 对 50%甲醇提取超声处理
时间进行了(0． 5、1、2 h)的考察，结果提取 0． 5、1、
2 h基本无差异，为节省试验时间，故选择 0． 5 h。
3． 4 药材 薜荔作为药材收载于江西和湖南药材
标准，其中江西药材标准中收薜荔为桑科植物薜荔
(Ficus pumila Linn．)干燥带叶不育幼枝，湖南药材
标准中为络石藤为桑科植物薜荔(Ficus pumila
Linn．)干燥带叶的茎枝。本文研究的是江西省药材
标准收载的薜荔药材。
［参考文献］
［1］ 国家中医药管理局《中华本草》编委会． 中华本草(第二册)
［M］．上海:上海科学技术出版社，1999:499 － 500
［2］ 张 峰，张俊清，孔令仪． 薜荔化学成分研究［J］． 中草药，
2009，40(10) :942 － 945
［3］ 徐先祥．儿茶素的药理作用研究综述［J］．郑州轻工业学院学
报(自然科学版) ，2012，27(4) :60 － 64
［4］ 贾智若，李 兵，李耀华，等． 反相高效液相色谱法测定杜仲中
儿茶素的含量［J］．中国实验方剂学杂志，2013，19(5) :117 －
119
［5］ 邹 兵，刘玉强，才 谦． 不同地区锁阳药材及饮片中儿茶素的
含量测定［J］．中国实验方剂学杂志，2011，17(6) :68 － 70
［6］ 徐金蓉，王清章． 莲藕中儿茶素的含量分布［J］． 湖北农业科
学，2011，50(1) :156 － 158
［7］ 国家药典委员会． 中华人民共和国药典(一部) ［S］． 北京:中
国医药科技出版社，2010:9 － 10
(收稿日期:2014-09-04;修回日期:2015-05-11)
(本文编辑 狄亚敏)
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