全 文 ：收稿日期:2005-08-24原稿;2005-11-08修改稿
基金项目:上海市农发基金项目“种子资源保存”的部分研究内容
作者简介:蔡令仪(1954-),女 , 1977年毕业于安徽农业大学植保系 ,高级农艺师 ,主要从事食用菌菌种保藏和新品种
驯化等工作 ,发表主笔论文 5篇 ,出版著作 1部。
　食用菌学报　2005.12(4):50 ～ 52
　Acta Edulis Fungi
文章编号:1005-9873(2005)04-0050-03
活化处理双孢蘑菇液氮菌种对产量的影响
蔡令仪 , 郭　倩 , 曹　晖 , 陈明杰 , 汪　虹 , 杨　刚 , 冯爱萍 , 贺冬梅 , 楚鹰
(农业部食用菌遗传育种重点开放实验室;
上海市农业遗传育种重点开放实验室;上海市农业科学院食用菌研究所 ,上海 201106)
摘　要:分别采用液氮和 4℃冰箱保藏双孢蘑菇(Agaricus bisporus)菌种 , 并对液氮菌种进行
活化处理 ,通过栽培试验比较各处理对双孢蘑菇产量的影响。结果表明 , 液氮法保藏双孢蘑菇菌
种的产量较理想;液氮菌种经活化处理后的产量明显提高。
关键词:菌种保藏;双孢蘑菇;液氮保藏;冰箱保藏;活化处理
中图分类号:S646.110.93　　　　文献标识码:A
我国食用菌产业的持续发展与菌种资源的收集 、保藏和利用有密切的关系 。菌种资源的
采集与保藏是开发自然界微生物资源的必要途径。许多发达国家都把微生物资源的收集 、保
存和利用作为产业竞争的一个重要举措[ 1] 。菌种是开展食用菌研究和开发工作的重要基础 ,
品种改良依赖于遗传资源的保护[ 2] ,因此 ,菌种保藏具有十分重要的意义 。
液氮法是长期保藏食用菌菌种的理想方法[ 2 , 3] 。但菌种从液氮中取出后 ,如何处理才能
保持其菌种特性和蘑菇产量是一项具有实际意义的工作。我们对双孢蘑菇液氮保藏菌种进行
了这方面的研究 ,并对其进行比较栽培试验。现将结果报道如下 。
1　材料和方法
1.1　供试菌株
供试双孢蘑菇菌株 U3和 2796均来自上海市农业科学院食用菌研究所 。
1.2　菌种保藏方法
1.2.1　4℃冰箱保藏　将 2个菌株的菌丝斜面纯培养物置 4℃冰箱保藏 ,每半年转管 1次。
1.2.2　液氮保藏　将2个菌株的菌丝移入安瓿管 ,采用程序降温仪先以 1℃/min的速度降至
-40℃,后以 10℃/min降至-90℃,然后放入液氮罐(-196℃～ -156℃)保藏。
1.3　液氮菌种的活化处理
将菌种从液氮中取出 ,移入 PDA 斜面试管接活(恢复菌丝为 N处理)后 ,移管使菌丝体得
以恢复 ,转管复壮 1次为活化处理 N-1 ,在 N-1处理的基础上进一步转管复壮 ,使其进一步恢
复即为活化处理 N-2 ,以此类推为活化处理 N-3 、活化处理 N-4和活化处理 N-5。
DOI :10.16488/j.cnki.1005-9873.2005.04.011
1.4　试验设计
第一批试验于 2003年进行 ,6月份将 4℃冰箱保藏菌种和液氮保藏菌种取出移入 PDA斜
面试管 ,7月份制备栽培种 ,培养基为麦粒 。9月份进行栽培。每个菌株 2个处理(4℃冰箱保
藏和液氮保藏),每个处理栽培面积 1m2 ,湿料 40kg ,菌种 1瓶(750mL 蘑菇瓶),12d后用泥炭
土覆土。
第二批试验于 2004年进行 。制种过程基本同第一批试验 。每个菌株 7 个处理(4℃冰箱
保藏 、液氮保藏 、活化处理 N-1 、活化处理 N-2 、活化处理 N-3 、活化处理 N-4和活化处理 N-5),
每个处理 2个重复 ,每个重复 0.4m2 ,湿料 20kg ,每个重复菌种 250g ,用泥炭土覆土 ,小区随机
排列 。
2　结果与分析
2003年的试验结果表明 ,液氮保藏菌种的双孢蘑菇产量和单菇重比 4℃冰箱保藏菌种的
略高 。2个菌株液氮保藏菌种的双孢蘑菇产量分别比 4℃冰箱保藏的高 7.30%和 6.77%,单
菇重分别高3.99%和 13.75%, PLSD(pro tected least significant difference)分析表明 ,产量差异
不显著(表 1)。
表 1　不同方法保藏菌种的双孢蘑菇产量(2003年)
Table 1　Yields of Agaricus bisporus with spawn preserved by different methods(2003)
供试菌株
St rains tested
处理
Treatments
产量
Yield(g/m2) 平均单菇重Average weigh t per f ruitbody(g)
U3 4℃冰箱保藏 Preserved in refg.at 4℃ 9380 13.77
液氮保藏 Preserved in liquid nit rogen 10065　 14.32
2796 4℃冰箱保藏 Preserved in refg.at 4℃ 4875 11.13
液氮保藏 Preserved in liquid nit rogen 5205 12.66
表 2　活化处理双孢蘑菇液氮菌种对产量的影响(2004年)
Table 2　Effect of activation treatment of the spawn after preserved in liquid ni trogen on the yield of Agaricus bisporus(2004)
供试菌株
St rains tested
处理
Treatments
产量
Yield(g) 平均单菇重Average weigh t per f ruitbody(g)
U3 4℃冰箱保藏 Preserved in refg.at 4℃ 5650 11.80
液氮保藏 Preserved in liquid nit rogen 5945 13.89
N-1 6969 15.28
N-2 7365 13.63
N-3 8510 15.59
N-4 7060 13.63
N-5 5895 15.72
2796 4℃冰箱保藏 Preserved in refg.at 4℃ 3730 13.61
液氮保藏 Preserved in liquid nit rogen 3810 15.55
N-1 4875 14.42
N-2 6120 14.50
N-3 5720 16.39
N-4 5385 16.99
N-5 4970 17.75
上述试验表明 ,双孢蘑菇菌种用液氮保藏比 4℃冰箱保藏效果好 ,既可保证菌种的产量和
514 期　　　　　　　　　蔡令仪等:活化处理双孢蘑菇液氮菌种对产量的影响
质量 ,又可避免 4℃冰箱保藏定期移管可能造成的菌种退化和污染 ,并可节省 4℃冰箱保藏菌
种的翻种用工 ,因此液氮保藏是较理想的保藏双孢蘑菇菌种的方法。
2004年的试验在 2003年试验的基础上 ,增加了对液氮菌种的活化处理。试验结果表明 ,
活化处理的双孢蘑菇液氮菌种 ,其产量比未经活化的液氮菌种的高 。在活化处理中 , 2个双孢
蘑菇菌株的产量不完全一致(表 2),但总的趋势一致 ,即活化处理 N-2 、N-3 、N-4的产量和单菇
重均较高 。PLSD分析表明 ,活化处理 N-2 、N-3与 4℃冰箱保藏 、N 处理比较 ,产量均达到极
显著水平 。综合来看 ,活化处理 N-3最佳 ,其次是活化处理 N-2 ,活化处理 N-4位于第三 。
3　讨论
从本试验结果来看 ,液氮保藏的双孢蘑菇菌种 ,其产量和单菇重比 4℃冰箱保藏的略高 ,
因此 ,液氮是保藏双孢蘑菇菌种较理想的方法 。菌种从液氮中取出后经活化处理 ,其产量有明
显的提高 ,菇体亦大 ,这可能是液氮冷冻对双孢蘑菇菌丝有一定的损伤 ,经过活化处理后 ,菌丝
的活性得到一定的恢复 ,使其有较好的产量表现[ 4] 。此外 ,液氮保藏双孢蘑菇菌种可节省每
年收孢子筛选菌种和 4℃冰箱保藏菌种转管的大量重复劳动 ,避免由于保藏和筛选不当而引
起的菌种退化等问题 。
参　考　文　献
[ 1] 边银丙.食用菌菌种质量问题与菌种管理对策的商榷[ J] .中国食用菌 , 1999 , 18(4):12 ～ 14.
[ 2] 张金霞.食用菌的品种菌种质量及其保持[ J] .中国食用菌 , 1996 , 15(2):11～ 12;(3):16 ～ 17;(5):18 ～ 19.
[ 3] 张金霞 , 张树庭.草菇菌种保藏效果鉴定的研究[ J] .中国食用菌 , 1992 , 11(4):3～ 6.
[ 4] 蔡令仪 , 谭　琦 , 曹　晖 , 等.不同菌种保藏方法对香菇产量的影响[ J] .食用菌学报 , 2003 , 10(4):
52 ～ 54.
Effect of Activation Treatments of the Spawn after
Preserved in Liquid Nitrogen on the Yield of Agaricus bisporus
CAI Ling-yi , GUO Qian , CAO Hui , CHEN Ming-jie ,
WANG Hong , YANG Gang , FENG Ai-ping , HE Dong-mei , CHU Ying
(Key Lab.of Edible Fungus Gene tics and Breeding , Ministry of Ag riculture , P.R.China;
Key Lab.of Ag riculture Genetics and Breeding o f Shanghai;
Institute of Edible Fungi , Shanghai Academy of Ag ricultural Sciences , Shanghai 201106 , China)
Abstracts:Liquid nitrogen preserv ation and 4℃ refrig era tor preservation method were adopted to preserve
Agaricus bisporus spawn , and the activation treatment w as carried out on the spawn after preserved in liquid nitro-
gen.The effect of the different treatments on the yield of A .bisporus was compared through cultiva tion test.The
results showed that the y ield of A.bisporus with spawn after preserved in liquid nitrogen was higher than that of
4℃ refrigerator preservation , especially the spawn which w as activ ated after preserved w ith liquid nitrog en.
Key words:Spaw n preservation;Agaricus bisporus;Liquid nitrog en preservation;Refrigerato r preserv ation;
Activ ation treatment
52 食　用　菌　学　报　　　　　　　　　　　　　　 　12 卷