全 文 ：·药学研究·
收稿日期:2014 － 06 － 05
作者单位:右江民族医学院 a. 临床学院，b. 药学院，广西
533000
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81360684) ;广西自然
科学基金资助项目(2011GXNSFA018046) ;广西中医药科技专项
资助课题(GZKZ 10-128) ;广西中医药管理局课题(gzzc1047) ;广
西医学科学实验中心开放基金专项资助项目(KFJJ2011-04)
* 通信作者
DOI:10． 14053 / j． cnki． ppcr． 201501017
广西壮药薏苡叶甲醇提取物抗氧化活性研究
黄 莹a，程世嘉a，李芸达a，马忠丽a，韩光顺a，李兆叠a，黄锁义b*
［摘 要］ 目的 探究薏苡叶甲醇提取物的抗氧化活性。方法 通过采用清除 O2-·、清除 DPPH·和 Fe3 +还
原力的不同体外抗氧化模型，评价薏苡叶甲醇提取物的抗氧化活性。结果 不同的体外抗氧化模型显示薏苡叶
甲醇提取物具有较强的抗氧化活性。其中当自由基清除率为 50%时，薏苡叶甲醇提取物的浓度(IC50)均接近
0. 6 mg /mL，且清除率与浓度均有一定的正相关性;普鲁士蓝法测定也提示其对 Fe3 +具有较强的还原能力。结
论 薏苡叶甲醇提取物具有较强的抗氧化性，且在一定的浓度范围内，其抗氧化能力与浓度呈现良好的量效关
系，可为薏苡药品的临床应用和开发新型功能食品提供实验依据。
［关键词］ 薏苡叶;甲醇提取物;抗氧化活性
Antioxidation activities of methanol extracts from Guangxis zhuang medicine coix
leaves HUANG Yinga，CHENG Shi-jiaa，LI Yun-daa，MA Zhong-lia，HAN Guang-shuna，LI Zhao-diea，HUANG
Suo-yib* (a. College of Clinical Medicine，b. College of Pharmacy，Youjiang Medical College for Nationalities，Guangxi
533000，China)
［Abstract］ Objective To study the antioxidation activities of methanol extracts from Coix leaves．Methods
Several different in vitro antioxidant models，which included scavenging of DPPH·，O2 -·and Fe3 + reducing power，had
been used to evaluate the antioxidant activity of methanol extracts from Coix leaves． Ｒesults The different in vitro an-
tioxidant models showed that methanol extracts from Coix leaves had strong antioxidation activities． When the free radi-
cal scavenging rate was 50%，the concentration of methanol extracts from Coix leaves(IC50)was close to 0. 6 mg /mL，
and the scavenging rate was positively correlated with the concentration;The result of Prussian blue method also showed
that methanol extracts from Coix leaves had strong ability to reduce Fe3 + ． Conclusion Methanol extracts from Coix
leaves have strong antioxidant activity． The antioxidization effect and the concentration show good concentration-re-
sponse relationship in a certain range． The result can provide experimental basis to the clinical application of Coix medi-
cines and the development of new functional food．
Key words:Coix leaves;Methanol extracts;Antioxidation activities
0 引言
薏 苡 (Coix lacryma-jobi L. var. ma-yuen
Stapf)为禾本科(Gramineae)薏苡属(Coix L)草本
植物，其干燥成熟种仁称为薏苡仁(Coix seed) ，具
有健脾补肺、清热透湿、利尿消炎、镇痛排脓等功
效［1］。目前研究表明，薏苡中含有三酰甘油、薏苡
内酯、薏苡多糖、甾醇类化合物、茚化合物、三萜类
化合物、生物碱类化合物及多种氨基酸和微量元
素等［2］。薏苡仁具有抗肿瘤、免疫调节、降血糖血
钙、降压、抗病毒及抑制胰蛋白酶等多方面的药理
活性［3］，且其抗肿瘤活性物质主要在甲醇提取物
中［4-5］。经文献调研，目前国内外对于薏苡的研究
主要集中于薏苡仁，对薏苡非种子部位的相关研
究很罕见，限制了薏苡的深度开发和利用。由此，
本试验采用超氧阴离子、DPPH 自由基和 Fe3 +还
原力的不同体外抗氧化模型，以其还原力和清除
自由基能力为指标，评价薏苡叶甲醇提取物的抗
氧化活性，以期进一步优化薏苡的综合利用价值，
为加快薏苡药品的临床应用和开发新型功能食品
提供实验依据。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
1. 1. 1 仪器 高速万能粉碎机(FW100) (天津泰
斯特仪器有限公司) ，电子天平(上海民桥精密科
学仪器有限公司) ，电热式恒温水浴锅(箱) (江苏
金坛宏凯仪器厂) ，循环水真空抽气泵(上海嘉鹏
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科技有限公司) ，架盘药物天平(HC·TP12A-1)
(北京医用天平厂) ，台式离心机(上海安亭科学仪
器厂) ，755B 紫外可见分光光度计(上海精科) ，
722N 可见分光光度计(上海精科) ，旋转蒸发器
(ＲE-52AA) (上海安亭实验仪器有限公司)。
1. 1. 2 试药 广西壮药薏苡叶，采集于广西百色
市西林县。甲醇、邻苯三酚、三羟甲基氨基甲烷、
盐酸、无水乙醇、十二水合磷酸氢二钠、磷酸二氢
钠、三氯乙酸(TCA)、三氯化铁、铁氰化钾及七水
合硫酸亚铁等试剂均为分析纯;DPPH(美国 Signa
公司) ;试验用水为蒸馏水，所用仪器均经自来水
清洗后蒸馏水润洗晾干备用。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 提取物的制备 称量薏苡叶干品粉末80 g
置于蒸馏烧瓶中，按料液比 1 ∶ 80 加入甲醇，恒温
70 ℃下水浴加热 1. 5 h，抽滤 2 次，合并 2 次滤液。
滤液利用旋转蒸发仪减压浓缩后制成浸膏备用。
1. 2. 2 清除 O2
-·能力 采用邻苯三酚自氧化法［6］
进行测定。具体方法如下:取 0. 5 mol /L、pH 8. 2
的 Tris-HCl缓冲液 4. 5 mL 于干燥具塞比色管中，
置于 25 ℃水浴中预热 20 min，分别加入不同浓度
的待测品 0. 2 mL，后均加入 0. 3 mmol /L 邻苯三
酚(由 10 mmol /L HCl制)0. 3 mL，混匀后 25 ℃水
浴中准确反应 4 min，立即加入 10 mmol /L HCl 2
滴终止反应，缓冲液调零，在 320 nm 处测定吸光
度 A。其清除率计算公式:清除率(%)=［1 －
(A1 － A2)/A0］× 100%(其中 A0 为加邻苯三酚但
不加样品时的吸光度;A1 为加样品和邻苯三酚时
的吸光度;A2 为加样品不加邻苯三酚时的吸光度)。
1. 2. 3 清除 DPPH·能力 按照文献［6］方法进行
测定。DPPH·是一种稳定的自由基，与抗氧化剂
发生反应，颜色发生变化，由深紫色变为淡黄色，
可以用紫外可见分光度法定量测定。取 0. 5 mL
新配置的 DPPH 溶液［c(DPPH)= 6 × 10 －4 mol /
L］置于 10 mL 的具塞比色管中，然后加入不同浓
度的样品溶液 1 mL，无水乙醇定容至 5 mL，室温
暗光下反应 30 min，以无水乙醇调零，在 517 nm
处测定其吸光度 A。以高浓度逐渐稀释的方式检
测不同浓度样品对自由基的清除率，以自由基清
除率为 50%时，样品的浓度(IC50)来衡量样品对
自由基的清除能力。IC50越小，表明样品清除 DP-
PH·的能力越强。其清除率计算公式:清除率
(%)=［(A1 － A2)/A1］× 100%(其中 A1 为反应
时间 t = 0 min时空白吸光度，A2 为反应时间 t = 30
min时的吸光度)。
1. 2. 4 还原 Fe3 +能力 抗氧化剂的还原力与其
抗氧化活性之间存在联系，抗氧化剂是通过自身
的还原作用给出电子而清除自由基的，还原力越
强，抗氧化性越强，药物还原力的大小在一定程度
上反映了其预防性抗氧化功能的强弱［7］。因此，
可通过测定还原力来说明抗氧化活性的强弱。采
用普鲁士蓝法［7］进行测定。取 1 mL 样液于试管
中，依次加入 2. 5 mL 0. 2 mo1 /L pH 6. 6 的磷酸缓
冲溶液和 2. 5 mL 1%铁氰化钾［K3Fe(CN)6］溶
液，于 50 ℃水浴中保温 20 min 后快速冷却，再加
入 2. 5 mL 10%三氯乙酸溶液，以 3 000 r /min 离
心 10 min，取上清液 2. 5 mL，依次加入 2. 5 mL 蒸
馏水、0. 5 mL 0. 1%三氯化铁溶液振荡摇匀，静置
10 min后在 700 nm 下检测其吸光度。
2 结果与分析
2. 1 清除 O2
-·能力 见图 1。从图 1 中可知，当
O2
-·清除率为 50%时，样品的浓度(IC50)接近 0. 6
mg /mL，浓度较小，说明薏苡叶甲醇提取液对 O2
-·
具有较好的清除活性，且在试验设置浓度范围内，
随着提取液浓度的增加，薏苡叶甲醇提取液对 O2
-·
的清除作用增强。
图 1 超氧自由基清除率
2. 2 清除 DPPH·能力 见图 2。从图 2 中可知，
在试验设置浓度范围内，随着提取液浓度的增加，
对 DPPH·的清除率呈上升趋势，当 DPPH·清除率
接近 50%时，样品的浓度(IC50)仅为 0. 6 mg /mL，
浓度很小，表明薏苡叶甲醇提取物清除 DPPH·的
能力比较强。
2. 3 还原 Fe3 + 能力 见图 3。由图 3 可知，在
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700 nm 处，随着薏苡叶甲醇提取物浓度的增加，吸
光度值呈递增趋势，对 Fe3 +还原能力增强，且在试
验设置的浓度范围内薏苡叶甲醇提取物还原力与
其浓度大小呈正相关。
图 2 DPPH自由基清除率
图 3 还原 Fe3 +能力吸光度值
3 讨论
人体的许多疾病和组织损伤等与体内的氧化
应激反应有关，大量资料显示，炎症、肿瘤、衰老、
血液病，以及心、肝、肺、皮肤等各方面疑难疾病的
发生机制与体内自由基产生过多或清除自由基能
力下降有着密切的关系［8］。众多研究表明，自由
基的清除是抗氧化剂发挥抗氧化作用的主要机
制［9］。因此，从天然产物中寻找高效、稳定、低毒
的抗氧化剂成为目前研究的一个热点，其中药用
植物提取物是天然抗氧化剂的一个重要来源;而
良好的抗氧化剂同样具有良好的还原能力，因此
可以通过测定抗氧化物质的还原能力来间接评价
其抗氧化活性。在测定样品的抗氧化活性时，需
要采用多种方法来综合评价分析样品的抗氧化活
性［10］。因此，本研究采用清除 O2
-·、清除 DPPH·和
Fe3 +还原力的不同体外抗氧化模型对薏苡叶甲醇
提取物的抗氧化活性进行研究。
本研究结果表明，当 O2
-·和 DPPH·清除率为
50%时，薏苡叶甲醇提取物的浓度(IC50)均接近
0. 6 mg /mL，浓度较小，说明薏苡叶甲醇提取物对
两种自由基具有较强的清除能力;普鲁士蓝法测
定也提示其对 Fe3 +具有较强的还原能力;因此说
明薏苡叶甲醇提取物具有较强的抗氧化活性，且
各抗氧化模型均提示，在一定的浓度范围内，薏苡
叶甲醇提取物的抗氧化能力与其浓度呈现良好的
量效关系。体外抗氧化活性试验结果虽不一定能
完全代表体内清除自由基的作用，但对薏苡叶药
物功效的初步筛选仍具有重要参考价值，可为优
化薏苡非种子部位的资源利用提供实验依据，也
可为加快薏苡药品的临床应用和开发新型功能食
品提供线索。目前研究发现，植物提取物的抗氧
化活性成分主要有多糖类化合物、黄酮类化合物、
多酚类化合物、生物碱类、皂苷类、维生素类、多肽
类等［11］，薏苡叶甲醇提取物的抗氧化活性可能与薏
苡中含有薏苡多糖、生物碱类化合物等活性成分有
关，但有关薏苡叶甲醇提取物抗氧化作用的具体有
效活性成分及详细作用机制还有待进一步研究。
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