全 文 ：收稿日期: 2000-05-24;　修订日期: 2000-07-05
作者简介: 王进红 ( 1962-) ,女 (汉族 ) ,云南思茅人 ,现任云南思茅
地区民族传统医药研究所中药士 ,主要从事黑节草集约化栽培研
究 .
●资源开发●
黑节草茎段直接诱导丛生芽
王进红 , 张雪梅 , 付开聪
(云南思茅地区民族传统医药研究所　 665000)
摘要: 介绍利用黑节草茎节作外殖体获得丛生苗的方法: 黑节草茎节段在 1 /2 ms+ 6-BA 2 mg /L+ N AA 0. 2 mg /L
的培养基上 ,先诱导形成愈伤组织 ,然后出许多绿色小芽。进一步移至 1 /2 ms+ NAA 0. 5 mg / L培养基上产生大量的
丛生芽。 丛生芽培养于 1 /2 ms+ IBA 0. 5 mg /l+ N AA 0. 5 mg /L培养基上 ,可诱导生根形成完整植株。
关键词:黑节草 ;　组织培养 ;　植株再生
中图分类号: R282. 2　　文献标识码: A　　文章编号: 1008-0805( 2000) 11-1052-01
Rosette Bud Induction from Stem Segments of Dendrobium candidun
WAN G Jin-hong , ZHAN G Xue-mei , FU Kai-cong
( Inst itut of Ethnic Tradit ional Chinese Medicine in Simao , Yunan Prov ince 665000, China )
Abstract: Callus was induced on modified m s medium supplemented with 6-BA 2 mg / L and N AA 0. 2 mg /L from the
stem segments o f Dendrobium candidun. Ther ea fter a substantia l amount of g r een bud apices we re produced. Wh en
they we re tr ansplanted into 1 /2 ms with NAA 0. 5 mg /L ba sic medium, a la rg e amount o f ro sette buds w ere fo rmed.
Roo ts w er e induced on modified 1 /2 ms with N AA 0. 5 mg /L medium supplemented with IBA 0. 5 mg / L and N AA 0.
5 mg /L and intact plantlets w ere th us r egenera ted.
Key words: Dendrobium;　 Tissue cultur e;　 Plantlet reg enevation
　　黑节草兰科石斛属植物 ,是我国传统的名贵中药材 ,早在《本
草纲目》就列为药用 ;《神农本草经》列为上品。 具有生津、止渴、镇
痛、消除水肿之功效。 主治热病、胃弱、阴虚、目暗、声喑嘶哑等疾
病 ,是演说家、歌唱家、播音员、教师的高级护嗓保健品。 经现代药
理实验证明黑节草对提高人体白细胞 ,增强体内免疫力 ,消除肿瘤
有较好的疗效。 有人预测黑节草将来也许是人们用来增强体内免
疫力 ,消除肿瘤的最佳保健品之一。
黑节草有关利用茎尖、腋芽和种子作外殖体进行组织培养的
已有报道 [1, 2, 3]。 但应用黑节茎节作外殖体成功获得丛生苗 ,目前
未见相关报道 ,此方法具有取材方便 ,不受季节限制 ,再生率高等
优点。
1　材料与方法
黑节草 Dendrobium candidum wa ll. ex Lindl.植物种子源于
云南文山州广南县。
应用张治国等人在 1 /2 ms+ 20%马铃薯提取液+ 2 mg /BA
+ 0. 2 mg /NAA中培养原球茎获得无菌苗 [4 ] ,待苗茎长有 6～ 7个
节段时 ,剪取其带节茎段 ,去掉叶片 ,作为外殖体 ,进行诱导培养 ,
培养基为 1 /2 ms+ 6-B A 2 mg /L+ NAA 0. 2 mg / L的培养基上 ,
培养温度为 ( 25± 3)℃ ,光照 15 000～ 2 000 LX。光照 10～ 20 h /d,
诱导生根培养基为 1 /2 ms+ IBA 0. 5 mg /L+ NAA 0. 5 mg /L。
2　结果与讨论
黑节草用茎节作外殖体 ,接种于分化培养基 , 15 d左右 ,在茎
节处开始萌发 ,并形成愈伤组织 ,呈现质地疏松 ,黄绿色状。 长至
28 d左右 ,愈伤组织表面出现绿黄色斑点 ,随后绿黄色斑点逐渐
变绿长大。转移至 1 /2 ms+ NAA 0. 5 mg /L培养基上 , 15 d左右 ,
形成绿色鱼籽状突起。 1个带茎节段可产生芽 5～ 10个左右 ,继续
培养 , 40 d左右长到 1 cm高 ,转于 1 /2 m s+ IBA 0. 5 mg /L+
NAA 0. 5 mg / L的生根培养基 , 15 d左右开始生根 ,继续培养 30 d
左右苗长至 5～ 7 cm, 4～ 6片叶 , 3～ 5条根时使可以出瓶栽培。
本实验中我们也同样条件下用无节茎段作外植体作对照实
验 ,结果有部分分化形成愈伤组织 ,但生长很慢。 说明带节茎段在
愈伤化的同时 ,保持有强烈的分生能力 ,产生丛生芽。因此 ,该方法
繁殖黑节草幼苗具有快速、高效、省时、省工 ,不受季节和外界条件
限制等的优点 ,能在较短的时间内繁殖出较大数量的苗 ,同时也能
为优质快速育苗打下了坚实的实验基础。
参考文献:
[1 ]　张治国 ,刘　骅 ,王　黎 ,等 .铁皮斛原球茎增殖的培养条件研究 [ J] .
中草药 , 1992, 23( 8)∶ 431- 433.
[2 ]　唐雪梅 ,陈　红 .激素对曲茎石斛试管生长影响 [ J ].中药材 , 1993, 16
( 8)∶ 12- 13.
[3 ]　王光远 ,刘　培 ,蔡南海 ,等 .石斛离体培养中 ABA对诱导花芽形成
影响 [ J ].植物学报 , 1995, 37( 5)∶ 374- 378.
[4 ]　张治国 ,王　黎 ,刘　骅 ,等 .铁皮石斛原球茎分化适宜培养基研究
[ J ].中国中药杂志 , 1993, 18( 1)∶ 16- 19.
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时珍国医国药 2000年第 11卷第 11期 L ISHIZHEN M EDICIN E AND M ATERIAM EDICA RESEARCH 2000 V OL. 11 NO. 11