全 文 ：增殖的淋巴细胞作为人活化 T 淋巴细胞 。 ②汉方药
提取物的制备 : 2 3 种汉方药 , 每种 15 9 加 3 0 0m山
蒸馏水煎至 15 0 n l L , 离心 , 滤纸过滤得上清 , 上清
调至 150 rnL 加 p ol y喇 al AT I , g5 , 室温振荡挥发靴酸
后冻干备用 。 ③ h s p 7 o 检测 : 24 孔板孵育人活化 T
淋巴细胞 ( 3 x or 6 / 平皿 ) , 加入筛选药物 (1 m g /mL )
孵育 ( 3 7 oC , 5% C O Z ) 18 h 后 , 4 2 oC 热休克 4 0而n ,
细胞继续孵育 ( 3 7℃ , 5% C 0 2 ) 3h 后收集 , 用 P B S
洗 3 次 , 置一 2 0℃冰箱过夜 , 多苯乙烯 E IL S A 法测
定处理后的细胞溶液中的蛋白含量 。
结果 : 包括上次实验 , 对人淋巴细胞和人神经
母细胞瘤 MI R 一32 细胞中 h s p 7 0 有诱导作用的生药
有: 蓬白、 艾叶、 红花 、 决明子 、 党参 、 慧该仁、 山茱英、
延胡索 、 山植 、 瞿麦、 淫羊蕾 、 甘遂 、 吴茱英 、 连翘 、 灵
芝 、 桅子 、 划旦、 牵牛子 、 乌药 、 龙眼肉、 厚朴 、 薄荷 、
莲肉、 芍药 、 芦根 、 赤小豆 、 蕾香 、 远志 、 夏枯草、 萝芙
木 、 金樱子 、 玄参 、 黄答 、 淡豆豉 、 槐花 、 三棱 、 伏龙肝 、
露蜂房 、 我术等 , 其中红花 、 山茱英、 山植 、 瞿麦、 甘遂 、
黄琴、 淡豆豉作用显著。 本次试验 、 价。表达增加 1 . 5 倍
以上的 7种生药为红花 、 山茱芙、 山植、 瞿麦、 甘遂 、 黄
琴 、 淡豆豉 , 其中 6种呈浓度依赖关系 。
上述结果表明 , 这些生药具有控制 h sP 表达的活
性 , 可用于治疗与 h sP 有关的各种疾病 。
( 翁小 刚摘译 )
02 7 紫玉替中 -F 吉托皂普刺激中性白细胞样细胞
的活性 〔日 〕 / 昌惠司… / N a ut ar l M ed iic en s 一20 么
5 6 ( 4 )
一 1 5 3~ 15 6
中性白细胞攻击进入体内异物的手段是释放活
性氧 , 衰老及服用药物可引起中性白细胞功能降低 ,
从而发生感染 。 在从食物中筛选中性白细胞活化因
子时 , 发现紫玉替 ( oH s at : ic bo lt f ia n a) 具有显著活
性 , 从其甲醇提取物中分离得到活性物质 。
材料与方法 : ①紫玉答中激活中性白细胞的活
性物质的分离 : 紫玉替的地上部分 (3 . s kg ) 冷冻干
燥后 ( 2 5 8 9 ) 在 3 L 甲醇中破碎 , 过滤回收提取液 ,
反复提取 5 次 , 提取液减压浓缩得提取物 30 . 89 。 提
取物用氯仿一甲醇 一蒸馏水 (4 : 4 二3 ) 分液处理 , 由
于水层含有活性物质 , 水溶部分减压浓缩后用水一正
丁醇 ( 1 : 1) 分液处理 , 回收水层及正丁醇层 。 正
丁醇部分减压浓缩后 (6 . 6 9 ) , 用少量的甲醇溶解 ,
上 s eP h ed ex L H 一20 柱层 析 。 回收的活性组 分
( 6 9
.
4m g ) 溶于 8 0% 甲醇 , 经 C o smo s i l 7 5 C 18
一
O NP
柱层析 , 用 80 % 甲醇洗脱 , 得到活性物质 I
( 57
.
m4 g )
。 ②细胞培养 : 人早幼粒细胞性白血病细
胞用含有抗生素及 10 % 胎牛血清的 R PM I一 16 40 培
养基培养 , H L 一6 0 细胞 (5 x l扩 细胞加工 , 10 n lL )
与 1林M 视黄酸 ( RA ) 共同培养 d4 , 使其向中性白
细胞分化 , 将这种 RA 诱导的 H L 一6 0 细胞作为中性
白细胞模型 。
结果 : ①中性白细胞活化物质的筛选 : 对 日本
秋田县的 37 种野菜 、 35 种海藻以及 24 种蘑菇的磷
酸缓冲盐溶液 ( P B S ) 、 热 P B S 、 甲醇 、 乙醇提取液
对中性白细胞样细胞刺激活性进行筛选 , 这些试样
中紫玉替的甲醇提取物具有显著活性 。 ②紫玉替中
活性物质 I 的化学结构 : 活性物质 I 为白色非晶形
物质 , Ia ] D一 4 2 . 7 。 ( e = o , 一2 , 氯仿一甲醇 ) , 被鉴定
为 F 一吉托皂普 , ( 25 )R 一 s a 一螺旋幽烷一 Z a , 3p一二醇 3一 o -
{ o
一
p
一
D
一毗喃葡糖基 (l 一 2) 一。 一 〔p一D 一毗喃木糖基
(1 ~ 3) 」一 o 一 p一D 一毗喃葡糖基一 (l ~ 4) 一p一D 一毗喃半乳
糖普 } 。 ③ F 一吉托皂昔对 R A 诱导的 H L 一 6 0 细胞的刺
激作用 : R A 诱导的 LH 一60 细胞用 .0 5~ 10林M F 一吉
托皂昔处理 , .0 5一 5林M 浓度时可刺激 H L 一60 细胞
的倪生成系 , .2 5林M 时仍 的生成量为未加入时的 7 0
倍 , 5林M 以上浓度时反而未检测到刺激功能。 活性
物质与已知化合物 F 一吉托皂昔的光谱数据一致 , 这
些 F 一吉托皂昔为螺旋幽烷型幽体皂昔 , 该化合物可
刺激 RA 诱导的 H L一6 0 细胞生成仪 。
(
,
}台 ,比摘译 )
028 穿心莲 中的新穿心莲内醋抑制活化 巨噬细胞
产生 N O 〔英〕 / B a t比 u u J…拐 i o l hP ~ B u l l一20() 2 ,
2 5 ( 9 )
一 1 1 6 9~ 1 17 4
观察穿心莲对卡介苗 ( B C G ) 诱导的小鼠腹膜
巨噬细胞经脂多糖 (LP S )刺激产生 N O 的抑制作用 。
材料与方法 : ①穿心莲提取物及成分分离 : 干
燥穿心莲叶用 甲醇室温浸泡 d3 , 过滤后滤液减压蒸
发 , 得到甲醇提取物 , 提取物在乙酸乙酷一水中分配 。
水溶部分用正丁醇抽提 , 得到正丁醇提取部分 。 过
滤乙酸乙酷提取部分的沉淀物 , 得到新穿心莲内酷
粗品 。 上硅胶柱 、 用氯仿一甲醇层析分离 , 得到纯化
的新穿心莲内酩 。 过滤正丁醇提取部分的沉淀物 ,