全 文 ：四川师范学院学报 19 0 2; 2 2 ( l ) : 2 0~ 2 2
5 i e h u a n T e a e h C o l l e g e
一
a一n一rUO了J
娱蚁草的组织培养丫
尹怀约
(生 物 系 )
【摘要】 本文报道 了用埃蛤草 ( P t。 下 i“ 叭 t at a ) 叶片 、 叶柄离体 培 养
成完整植株获得成功 . 诱导愈伤组织培养基为 N 。 + K T o . 2、 0 . 4 m g / L + 2 , 4
一 D o . 3 ~ 。 . 6 g m / L . 分化 出芽培养基为M S十 B A o . Z m g / L + N A A o . 3 m g / L
+ L H 50 。。 g / L . 生根培养基为士 *。 十 I B A O . 6m g / L + I A A o . Zm g / L . 试
管苗移栽成活率达到 78 肠 .
关越甸 娱给草 , 组织培养, 愈伤组织
中图分类号 Q 94 4 . 6
娱蚁草属凤尾蔗科药用抱子植物 , 具有祛风活血 、 解毒 、 杀虫等功能 . 它的外形秀
美 , 常用来装饰庭院假山 , 兼有药用和观赏的价值 . 其组织培养国内尚未见报道 , 我们
用娱蛤草的叶片 、 叶柄进行离体培养 , 取得了较好的效果 , 现将实验结果报道如下 .
1 材料和方法
l
,
1 材料 野生娱蛤草
1
.
2 方法 三月上旬采取新长出地面的娱蛤草幼叶 , 用自来 水 冲 洗 h3 , 用无菌 纸 吸
干水分后 , 放入 70 肠酒精中数秒钟 , 再放入。 . 1肠氯化汞溶液中8 ~ 10 m i n , 后用无菌水
冲洗 4次 , 在无菌条件下将叶片切成。 . 5 ~ 。 . sc m Z的小块 , 叶柄切成 0 . sc m长的小段 , 平
放于培养基表面 .
1
.
3 培养基 诱导愈伤组织培养基为N 6 + K T o . 2 ~ 0 . 4 1 9 / L ( 单位下同 ) + 2 , 4 一 D
0
.
3 ~ o
.
6 m g / L
, 蔗搪 4肠 , 琼脂 。 . 8帕 , p H S . 8 ~ 6 . 。 ; 丛芽分化培养基 为M S十 B A o . 2
m g / L 十 N A A O . 3 nI g / L 十 L H 5 0 0 o g / L ;生 根 培 养 基 为去M S 十 BI A O . 6 m g / L +
I A A o
.
Zm g / L
,
M S培养基的蔗糖为 3肠 , 琼脂 0 . 8 5肠 , P H S . 8 , 在 IK g / e m “压 力 下
灭菌 25 m i n .
1
. 连 培养条件 室温 15 ~ 2 5 O C下培养 , 每天 光照 1 0 ~ 12 h , 光照度 10 0 0 ~ 15 0 0 l x .
本文于 1 9 8 9年 9月 27 日收到 .
· 省料委资助项目 .
艺1
1
.
5 移栽 用腐殖土和细砂混合作为栽端基质 , 装入花钵中 , 试告苗 先终苗 Z d , 25 O C
左右移栽 .
2 试验结果
2
.
1 愈伤组织的诱导 娱蛤草幼叶 、 叶柄接种于诱导愈伤组织的培养基上 , d6 后 卷 曲
的叶体积增大 、 展开 , 产生愈伤组织 . 愈伤组织呈淡绿色 , 易散开 , 散开后细胞分裂很
快 , 25 d左右又成为块状 , 诱导频率为8 肠 . 如果诱导愈伤组织的激素配比不 适 当 , 则
产生的愈伤组织量少并呈微黄色 , 以后变褐死去 .
2
.
2 丛芽的产生 将淡绿色的愈伤组织转移到分化培养基上 , 能继续增殖 , 经几 次 转
接 ( 一月转接一次 ) 后变为深绿色 , 陆续长出很多丛芽 , 幼芽叶片形状变异很大 , 有羽
状 、 扇形 、 三裂 , 多数为羽状 , 出现与原植物遗传性状不一致的现象 . 从现有的研究报
道得知 , 外植体经脱分化形成愈伤组织 , 再由愈伤组织分化出幼苗发生变异 的 情 况 相
同 , 这在娱蛤草组织培养中也表现出来 . 不 同激素配比对芽分化的作用差别明显 ( 见表
l )
, 从表中看出 , 第 1组只附加细胞分裂素 , 未诱导出芽来 . 第 2 、 3组附加上细胞分
裂素和生长素 , 因配比溶度不适宜 , 虽然能诱导出芽 , 但诱导频率低 . 第4 、 5组附加成
表 1
编
M S附加成分 ( 二 g / L )
号
1 B A I
2 B A I 火 N A A O
不同激素配比对芽分化的作用
愈伤组 出芽 诱导频
织块数 块数 率 ( 肠 )
每块最多 生长
出芽数 情况
2 0 0 0 0
.
1 2 0 5 2 5 4
01勺9口0 5乙八,白自勺B A Z+ N A A o
.
2
B A O
.
2 + N A A O
.
2 + L H S OO
BA O
.
2 + N A A o
.
3+ L H S O。 2 0 1 0 0
细弱
细弱
较壮
粗壮
354
分相同 , 但浓度稍有差别 , 效果大不一样 , 其中第 5组生长素的浓度高于细胞分裂 素 则
有利于芽的诱导 , 诱导频率为 10 。帕 , 叶色深绿 , 长势粗壮 , 这个现象与一般 认 为高浓
度细胞分裂素低浓度生长素有利于芽的分化结论不同 .
2
.
3 根的诱导 叶片长至c2 二时 , 将芽转入生根培养基中 . 一月后 , 先从叶柄 基 部 生
出黄色毛状体 , 后长出比毛状体粗壮的根 , 或先长出根后长出毛状体 , 每苗能长出数条
根 .
2
.
4 移栽 当根 长 至 cI m左右时取出 , 洗净在气温 20 ~ 25 O C时移栽 , 注意保持阴湿的
环境条件 , 其成活率可达 78 肠 .
3 小结
娱蛤草叶片 、 叶柄诱导出愈伤组织 , 要适时转接 , 以一月转接一次为好 .
22
3
.
2 从愈伤组织分化出芽 , 需要高浓度生长素低浓度细胞分裂素相配合 , 才 有 利于分
化并形成粗壮的丛芽 , 与一般认为高浓度细胞分裂素低浓度生长素有利于分化的结论不
同 .
2
6
参 考 文 献
丁恒 山 . 中国药用抱子植物 . 上海科学技术 出版社 . 19 82 , 3 43
尹怀约等 . 贯众叶片愈伤组织 的诱导和植株再生 . 植物生理学通讯 . 1 9 8 9,
4 : 3 9
尹怀 约等 . 苦荞头的组织培养 . 植物生理学通讯 . 19 8 9 , 5 , 52 ~ 53
尹 怀约等 . 无花果的组织培养 . 植物生理学通迅 . 1 9 8 8 , 3 , 54
张王方等 . 植物组织培养与繁位上的应 用 . 上海教育 出 版 社 . 19 8 5 , 31 ~
1 8 2
江 苏省植物组织培养研 究协会 . 经济植物组 织培养实用技 术 . 江 苏科学
技术 出版社 , 19 8 8 , 1 0 7 ~ 1 9 4
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T IS S U E C U L T U R E O F P T E R I S V I T T A T A
Y i n H u a i y u e
( B i
o l o g y D e p a r t m e n t )
A B S T R A C T
T h i s p a P e r r e P o r t s o n t h e s u e e e s s o f t h e t i s s u e e u l t u r e a n d p l 一
a n t l e t s r e g e n e r a t i o n f r o m l e a v e s a n d p e t i o l e o f p t e r i s v i t t a t a
.
T h e
i n d u e e d e a l l
u s m e d i u , n w i t h N + 0
.
2 一 o . 4 in g / L K T + 0
.
3 一 o . 6 m g / L
2
,
4一D ; T h e b u d s d i f f e r e n t a t i o n n l e d i u m w i t h M S + o
.
Z lr g / L B A +
0
.
3 , g / L N A A s o o m g / L L H
; T h e r o o t s i n d u e e d i n e d i u : , , w i t h 士 -
M S + 0
.
6 m g / L I B A + o
.
Zm g / L IA A
.
T h e s u r v i v a l r a t e o f t h e t u b e
s e e d l i n g e u l t i v a t i o n r e a e h e d a s h i g h a s 7 5呱 .
K e y w o r d s
: P t e r i s v i t t a t a
,
t i s s u e e u l t u r e
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