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不同花期槟榔花槟榔碱的含量分析



全 文 :第 3 0卷第3期
2 0 1 3 年 3 月
精 细 化 工
FINE CHEMICALS
Vol . 3 0,No . 3
Mar. 2 0 1 3
中药现代化技术
收稿日期:2012 - 10 - 30;定用日期:2013 - 01 - 09
基金项目:海南省中药现代化专项(2011ZY008) ;海南省自然科学基金(311094,310109) ;“十二五”国家科技支撑计划项目
(2011BAI01B07)
作者简介:战晴晴(1984 -) ,女,硕士。联系人:周亚奎,男,助理研究员,硕士,E - mail:zhouyakui163@ 163. com。
不同花期槟榔花槟榔碱的含量分析
战晴晴1,周亚奎1* ,刘洋洋1,卢丽兰1,甘炳春1,秦以国2
(1.中国医学科学院 北京协和医学院 药用植物研究所 海南分所,海南省南药资源保护与开发重点实验室,海南 万宁
571533;2.定安翰林绿果槟榔专业合作社,海南 定安 571228)
摘要:利用热回流法提取不同花期的槟榔花中的槟榔碱,通过高效液相色谱法,以氢溴酸槟榔碱的含量为指标,
测定样品中槟榔碱的含量。结果显示,初花期、盛花期和末花期的槟榔花中槟榔碱含量分别为(4. 96 ± 0. 067)
mg /g、(4. 26 ± 0. 14)mg /g、(2. 02 ± 0. 16)mg /g;结果表明,在槟榔花的不同花期,槟榔碱的含量随着槟榔花不断
成熟而不断降低,为槟榔花的采收加工提供理论参考。
关键词:槟榔花;不同花期;槟榔碱;高效液相色谱法;中药现代化技术
中图分类号:O652. 1 文献标识码:A 文章编号:1003 - 5214(2013)03 - 0285 - 03
Content Analysis of Arecoline of Areca Inflorescence at Its
Different Flowering Period
ZHAN Qing-qing1,ZHOU Ya-kui1* ,LIU Yang-yang1,LU Li-lan1,GAN Bing-chun1,QIN Yi-guo2
(1. Hainan Branch Institute of Medicinal Plant,Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College;
Hainan Provincial Key Laboratory of Resource Conservation and Development of Southern Medicine,Wanning 571533,
Hainan,China;2. Dingan Hanlin Green Betel Nut Special Cooperatives,Dingan 571228,Hainan,China)
Abstract:Arecoline was extracted from areca inflorescence at its different blossoming stage by heat
reflux. With the yield of arecoline as index,the samples were determined by HPLC. The results show
that the yield of arecoline was (4. 96 ± 0. 067)mg /g,(4. 26 ± 0. 14)mg /g and (2. 02 ± 0. 16)mg /g
in the initial flowering stage,full blossom stage and later flowering stage of areca inflorescence
respectively. The results indicate that the arecoline content was decreasing with the maturing of areca
inflorescence at its different flowering period. This study is expected to provide reference for the
harvesting and processing of areca inflorescence.
Key words:areca inflorescence;different blossoming stage;arecoline;HPLC;modernization technology
of traditional Chinese medicines
Foundation items:Supported by the Special Fund of Modernization of Traditional Chinese Medicine of
Hainan Province(2011ZY008) ,Natural Science Foundation of Hainan Province(311094,310109)and
the National Science and Technology Support Project of the“12th Five-Year Plan”(2011BAI01B07)
槟榔花为槟榔的花絮,海南道地药材,其味淡,
性凉。归胃、肺经。据《本草纲目》和《植物志》记
载,槟榔花具有调节免疫系统、止咳祛痰、消除疲劳
和防止衰老等功效,素有“微型营养品”和“长寿食
品”的美誉[1]。槟榔花自古以来在民间广泛用于胃
病食疗和保健,民间常用槟榔花泡水喝,用于治疗胃
病、痢疾、痔疮等;在台湾,人们常用槟榔花煲汤,治
疗咳嗽[2]。目前,市场上出现了以槟榔花为原料生
DOI:10.13550/j.jxhg.2013.03.003
产的槟榔花茶、槟榔花酒、槟榔花口服液等新型食品
和保健品。
槟榔碱属于生物碱的一类,因其主要存在于槟
榔中,故被命名为槟榔碱,是槟榔的主要保健和药理
活性成分之一[3 - 6]。槟榔碱能刺激 M 受体以补偿
乙酰胆碱的不足,促进机体兴奋,提高学习和记忆能
力[3,7];槟榔碱在一定剂量下有增加唾液腺分泌的
作用,利于消化,促进肠胃运动正常化[8];槟榔碱还
具有抗动脉粥样硬化和抗血栓形成的作用[9 - 10];另
外,槟榔碱也具有抗炎症和抗氧化的作用[11 - 12]。
目前,针对槟榔花的研究主要集中在酚类化合
物的提取及其抗氧化性的分析。黄玉林等[13]利用
响应面分析法优化了槟榔花总酚提取条件;张春梅
的研究表明,槟榔花提取物对抑制脱氧核糖降解和
清除 DPPH自由基的作用较强,而自由基在人体内
大量聚集会导致机体衰老和多种疾病发生[14]。关
于槟榔花中槟榔碱含量的研究尚鲜见报道。本实验
以初花期、盛花期和末花期的槟榔花为试材,利用高
效液相色谱,测定样品中槟榔碱的含量。
1 实验部分
1. 1 材料与试剂
初花期、盛花期和末花期的槟榔花均采自中国
医学科学院药用植物研究所海南分所的槟榔园。
氢溴酸槟榔碱对照品(批号:111684 - 200401)
由中国药品生物制品检定所提供;乙腈为色谱纯
(Fisher Scientific) ;水为去离子水;其他试剂、试药
均为 AR。
1. 2 主要仪器
大连依利特高效液相色谱仪(配有 UV - 230 紫
外检测器,P230 恒流泵和 EC -2000 色谱工作站)。
1. 3 方法
1. 3. 1 色谱条件
色谱柱:Agilent HC - C18(4. 6 mm × 150 mm,5
μm) ;流动相:乙腈-十二基烷基硫酸钠溶液[15](0. 1
mol /L,磷酸调节 pH = 3. 2,体积比 60 ∶40) ;流速:1
mL /min;进样量 10 μL;检测波长:215 nm。如图 1
所示,在上述色谱条件[16]下,供试品中氢溴酸槟榔
碱色谱峰与其他成分的色谱峰能达到较好的基线分
离,氢溴酸槟榔碱保留时间为 4. 19 min。
1. 3. 2 样品制备
准确取槟榔花药材粉末(过 2 号筛)0. 500 g,置
具塞锥形瓶中,加乙醚 40 mL,再加碳酸盐缓冲液 3
mL(取碳酸钠 1. 91 g 和碳酸氢钠 0. 56 g,加水 100
mL使其溶解) ,放置 30 min,时时振摇;加热回流 25
min,残渣再加乙醚 40 mL,加热回流提取 2 次,每次
25 min,合并乙醚液置同一盛有磷酸溶液(5→1000)
1 mL的蒸发皿中,挥去乙醚,残渣加体积分数 60%
乙腈溶液溶解,转移至 25 mL 量瓶中,加体积分数
60%乙腈至刻度,摇匀,过滤,取滤液[16 - 17]。
A—对照品;B—槟榔花;1—氢溴酸槟榔碱
图 1 样品与对照品的 HPLC 色谱图
Fig. 1 HPLC profiles of sample and reference substance
1. 3. 3 对照品制备
取氢溴酸槟榔碱对照品(五氧化二磷减压干燥
12 h 以上) ,精密称取对照品102. 280 0 mg,加体积
分数 60% 乙腈定容至 100 mL 容量瓶中,制成
1. 022 8 g /L的溶液。
1. 3. 4 标准曲线绘制
分别精密量取对照品溶液(1. 022 8 g /L)0. 25、
0. 5、1、2、4、8、10 mL,分别置于 20 mL 量瓶中,加体
积分数 60%乙腈稀释至刻度,摇匀。按照以上色谱
条件,分别进样 10 μL,以氢溴酸槟榔碱的进样量
(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标,得标准曲线,其回
归方程为:
Y = 3095. 3X + 192. 99(R = 0. 9996)
结果表明,氢溴酸槟榔碱进样量在0. 127 5 ~ 5. 114
μg内线性良好。
2 不同花龄槟榔花中槟榔碱的含量比较
采自中国医学院药用植物研究所海南分所槟榔
园的初花期、盛花期和末花期的槟榔花,按照上述槟
榔碱提取方法,以氢溴酸槟榔碱为标准品,通过高效
液相色谱法测定,其结果如表 1 所示。
表 1 不同花期槟榔花中槟榔碱的含量
Table 1 Comparison of arecoline contents of areca inflorescence
at different flowering stage
含量观察值 /(mg /g)
1次 2次 3次
均值 /(mg /g) 标准差
初花期 4. 941863 4. 911156 5. 040125 4. 964381 0. 067369
盛花期 4. 312361 4. 102058 4. 357623 4. 257347 0. 136375
末花期 1. 886021 2. 205344 1. 976545 2. 022636 0. 164575
由表 1 可知,初花期的槟榔花槟榔碱含量为
(4. 96 ± 0. 067)mg /g,盛花期的槟榔花槟榔碱含量
·682· 精 细 化 工 FINE CHEMICALS 第 30 卷
为(4. 26 ± 0. 14)mg /g,末花期的槟榔花槟榔碱含
量为(2. 02 ± 0. 16)mg /g。通过 SAS8. 0 duncan 统
计分析发现,不同月份采集的槟榔花中槟榔碱的含
量的差异极显著(P < 0. 01)。说明不同花期的槟榔
花其槟榔碱的含量是不断变化的。
3 结论
本实验利用高效液相色谱对不同时期槟榔花中
的槟榔碱含量进行测定,获得初花期、盛花期和末花
期的槟榔花中槟榔碱的含量分别为(4. 96 ± 0. 067)
mg /g、(4. 26 ± 0. 14)mg /g、(2. 02 ± 0. 16)mg /g,证
明槟榔碱含量在槟榔花的不同花期是一个变化的过
程,随着时间的推移,槟榔碱含量不断降低。
参考文献:
[1] 何和明.槟榔、益智、绞股蓝的生理生态[M].上海:同济大学
出版社,1996:240 - 257.
[2] 赵国祥,岳建伟,张光勇.槟榔的研究开发状况及市场发展前
景[J].中国热带农业,2006(6) :17 - 19.
[3] Sun Y P,Liu Q,Luo J,et al. Systemic administration of arecoline
reduces ethanol-induced sleeping through activation of central
muscarinic receptor in mice[J]. Alcohol Clin Exp Res,2009,34
(1) :150 - 157.
[4] 王 光,胡 弼.槟榔碱的研究进展[J].国际病理科学与临床
杂志,2010,30(2) :171 - 175.
[5] 张 春,吕飞杰,陶海腾.槟榔活性成分及其功能作用的研究
进展[J].中国食物与营养,2008(6) :50 - 53.
[6] 申秀丽,段亮亮.槟榔的化学成分及药理研究进展[J].宜春学
院学报,2009,31(2) :95 - 97.
[7] Wang S W,Hwang G S,Chen T J,et al. Effects of arecoline on
testosterone release in rats[J]. Am J Physiol Endocrinol Metab,
2008,295(2) :497 - 504.
[8] 周绪正,张继瑜,赵成莹,等.氢溴酸槟榔碱对小鼠小肠推进的
时效及量效关系的影响[J].中国兽药杂志,2007,41(11) :28
- 30.
[9] 唐 菲,王 豪,刘维俊. 氢溴酸槟榔碱抗血栓作用的研究
[J].中国医院药学杂志,2009(10) :791 - 793.
[10] 段智变,汪 海.高糖致内皮细胞粘附分子基因的过度表达
以及槟榔碱的调节作用[J]. 中国临床药理学与治疗学,
2006,11(1) :27 - 32.
[11] 张 伟,周寿红,凌红艳,等. 槟榔碱抑制氧化型低密度脂蛋
白诱导的小鼠巨噬细胞炎症因子表达及其机制[J]. 中国动
脉硬化杂志,2009,17(4) :269 - 272.
[12] Lai Y L,Lin J C,Yang S F,et al. Areca nut extracts reduce the
intracellular reactive oxygen species and release of
myeloperoxidase by human polymorphonuclear leukocytes[J]. J
Periodont Res,2007,42(1) :69 - 76.
[13] 黄玉林,陈洋平,陈卫军,等. 响应面法优化提取槟榔花总酚
的研究[J].热带作物学报,2011,32(6) :1158 - 1164.
[14] 张春梅.槟榔花提取物抗衰老作用研究[D].湖南:湖南农业
大学,2011.
[15] 赵陆华.高效液相色谱法分析中药成分手册[M].北京:中国
医药科技出版社,1994:479 - 482.
[16] 闫志英,陈国彪. 槟榔花药材质量标准研究[J]. 中药材,
2011,34(7) :1052 - 1054.
[17] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].一部.北京:中国
医药科技出版社,2010:342 - 342.
(上接第 284 页)
参考文献:
[1] Kaneko T,Sakamoto M,Ohtani K,et al. Secoiridoid and flavonoid
glycosides from Gonocaryum calleryanum[J]. Phytochemistry,
1995,39(1) :115 - 120.
[2] Chan Y Y,Leu Y L,Lin F W,et al. A secoiridoid and other
constituents of Gonocaryum calleryanum[J]. Phytochemistry,
1998,47(6) :1073 - 1077.
[3] 中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志[M]. 北京:
科学出版社,1994.
[4] Moon J,Shibamoto T. Antioxidant assays for plant and food
components[J]. Journal of Agricultura and Food Chemistry,2009,
57(5) :1655 - 1666.
[5] 许琼情,时 杰,李恒颜,等.广南天料木茎的抗氧化活性[J].
精细化工,2012,29(1) :30 - 32,40.
[6] 刘平怀,汪春牛,陈德力,等. DPPH 法测定青皮加速溶剂萃取
提取物的抗氧化活性[J]. 中国实验方剂学杂志,2011,17
(21) :69 - 73.
[7] 陈德力,肖 曼,刘平怀.海南核果木抗氧化活性[J]. 精细化
工,2011,28(11) :1103 - 1106.
·782·第 3 期 战晴晴,等:不同花期槟榔花槟榔碱的含量分析