全 文 ：现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2013, Vol.29, No.9
2141

枇杷花不同花期醇提物抗氧化活性的比较

芦艳，鲁周民，樊美丽
（西北农林科技大学林学院，陕西杨凌 712100）
摘要：以不同花期（花蕾期、露白期、初放期、盛开期）枇杷花为对象，研究枇杷花开放过程抗氧化性变化规律。采用 70%乙
醇二次回流提取以及 Folin-Ciocalteu比色法、硝酸铝比色法、Fenton体系法、普鲁士蓝法和ABTS法分析评价枇杷花在不同花期的黄
酮、总酚含量和总抗氧化能力。结果表明：枇杷花从花蕾期到盛开期，黄酮和总酚含量、抗氧化性能整体呈先上升后下降的趋势，其
中在露白期的黄酮、总酚和Vc含量最高，分别为 13.39±0.45 mg/g、76.06±1.18 mg/g和(2.73±0.28)10-2 mg/g，差异性显著高于其他花
期（P<0.05）；露白期枇杷花对羟基自由基的清除率、总抗氧化能力、总还原力和DPPH自由基清除率达到最高，分别为 49.91±0.34%、
61.50±0.21 mmol/g、0.67±0.01、74.28±0.73%。枇杷花具有较好的抗氧化性能，以露白期的抗氧化性最好，枇杷花采摘时期及开发利
用时期应以露白期为佳。
关键词：枇杷花；抗氧化性；不同花期；黄酮；总酚
文章篇号：1673-9078(2013)9-2141-2146
Antioxidant Activity of Ethanol Extracts of Loquat Flowers at Different
Flowering Phases
LU Yan, LU Zhou-min, FAN Mei-li
(College of Forestry, Northwest A & F University, Yangling 712100, China)
Abstract: The changes of flavonoids and the total phenolics contents and antioxidant activity in four different stages of loquat flowers (the
budding, the bud swelling and white petals forming , the petals spreading and the petals opening stages) were studied using twice reflux
extraction (70% ethanol as solvent) for extraction of loquat flower. Results showed that antioxidant materials contents and antioxidant activity of
the extracts of flower sampled from the bud stages to the petals opened of loquat flowers exhibited an initial increase and a final decrease.
Compared with the samples at other three flowering phases, the flowers samples at the stage of the bud swelling and white petals forming
showed the highest flavonoids, the total phenolics and Vc contents, being of 13.39±0.45 mg/g, 76.06±1.18 mg/g and (2.73±0.28)10-2 mg/g,
respectively. In this phase, the flower extracts also showed the highest scavenging ability on·OH free radical, reducing power, total antioxidant
capacity and scavenging ability on DPPH free radical, indicating that loquat flower at the phase of bud swelling can be used for further
development.
Key words: loquat flower; antioxidant activity; different stages; flavonoids; the total phenolic

枇杷（Eriobotrya japonica L.）为蔷薇科枇杷属
植物，原产于中国亚热带地区，在日本、意大利、巴
西、西班牙、印度等地有广泛栽培[1~2]，是一种秋冬
季开花、果实成熟于初夏的亚热带常绿果树[3]，中国
和西班牙年产量分别达到 20万 t和 4.2万 t[1]。在中
国，枇杷已有 2200年的栽培的历史，主要分布于秦
岭以南的陕南、四川、浙江、江苏、广东、福建等
19个省区[4]。地处汉江流域的陕南安康等地，是中国
收稿日期：2013-05-19
基金项目：国家林业局重点科技成果推广项目（2012-68），财政部“以大
学为依托的农业科技推广模式建设”（XTG2013-17）
作者简介：芦艳（1988-），女，硕士，主要从事枇杷花茶加工利用研究
通讯作者：鲁周民（1966-），男，研究方向为经济林果品加工利用
枇杷自然生长的北缘地区，特殊的气候条件赋予了枇
杷果实浓郁的风味和独特的口感。枇杷开花的花期较
长，一般从九月中旬到次年一月都有枇杷花，每个花
絮上有花 60~150朵，多的可超过 200朵[5]。为了提高
枇杷产量及质量，减少生长过程中对营养的消耗，在
枇杷种植管理过程中，需要进行大量的疏花。据《本
草纲目》记载，枇杷花具有“止渴下气、利肺、止吐
逆、去焦热、润五脏”以及“治头风、鼻涕清涕”等
功效。研究表明枇杷花含有人体所需的 18种氨基酸以
及维生素 C、抗衰老素等营养物质和黄酮类、酚类物
质、三萜类等多种药用成分，具有提神养气、清肺润
喉、化痰止咳等功效[6]。
近年来国内对枇杷花的研究主要集中在生物活性
DOI:10.13982/j.mfst.1673-9078.2013.09.009
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成分的研究[6~10]，功能性成分的提取[11~12]，枇杷花的
开发利用[13~14]等，这些研究多以南方地区的某个花期
的枇杷花为对象的研究结果。本文以生长于陕南安康
的枇杷为对象，采用 70%乙醇二次回流提取以及利用
Folin-Ciocalteu比色法、硝酸铝比色法、Fenton体系法、
普鲁士蓝法和 ABTS 法研究评价枇杷花开放过程在花
蕾期、露白期、初放期以及盛开期的抗氧化成分含量
和总抗氧化能力，旨在为枇杷花的适时采摘、开发利
用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
枇杷花：品种为长崎早生，于 2012 年 10 月 16
日上午采于西北农林科技大学安康北亚热带经济林果
树试验示范站，采摘后运回实验室，根据图 1所示的
花蕾期（苞片完全包裹）、露白期（苞片微张、有白色
花瓣裸露）、初放期（白色花瓣微张）、盛开期（花瓣
基本张开）分为 4个花期，于室内荫凉处阴干备用。
花蕾期（Ⅰ） 露白期（Ⅱ） 初放期（Ⅲ） 盛开期（Ⅳ）
图1 不同花期的枇杷花
Fig.1 Loquat flowers in different stage
2,2-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS+·)
美国 Sigma公司；没食子酸、芦丁、钨酸钠、钼酸钠、
浓盐酸、硫酸锂、碳酸钠、水杨酸、30%过氧化氢、
硫酸亚铁、邻苯三酚、亚硝酸钠、无水乙醇、硝酸铝、
过硫酸钾、氯化铁，均为国产分析纯。
1.2 仪器与设备
UV-1240紫外-可见分光光度计，日本岛津公司；
SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵，郑州长城科工贸有限公
司；R200D 型电子分析天平，德国 Sartorious公司；
DGG-9140A型电热恒温鼓风干燥箱，上海森信实验仪
器有限公司；科伟 HH-S4型水浴锅，北京科伟永兴仪
器有限公司；中兴 FW-200高速万能粉碎机，北京中
兴伟业仪器有限公司。
1.3 样品处理
把不同花期的枇杷花分别放入粉碎机中粉碎 15 s
后关闭，停 15 s后再次开启循环两次，粉碎成 40~200
目的粉末。取该粉末 2 g，加入 70%的乙醇 40 mL，在
60 ℃条件下水浴回流 2 h，提取两次，过滤后合并滤
液，定容至 250 mL，用于成分及抗氧化性测定。共 3
次重复。
1.4 指标测定
1.4.1 总酚的测定
参照文献[15]，采用 Folin-Ciocalteu比色法测定总
酚含量。称取没食子酸标准品 10 mg，用蒸馏水溶解
定容至 100 mL容量瓶中，得 0.1 mg/mL的对照品标
准溶液。分别吸取没食子酸标准品溶液 0.0（1号管）、
0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL置于 10 mL比色管中，依
次分别加入 5.5、5.3、5.1、4.9、4.7、4.5 mL蒸馏水，
各加入 0.5 mL FC显色剂，最后加入 4 mL 7.5%碳酸钠
溶液混匀，置于 75 ℃水浴加热 15 min，冷却至室温，
以 1号管溶液做参比并分别在 765 nm测得吸光度。
以吸光度 y 对食子酸质量浓度进行回归。标准曲线
y=0.9815x+0.0012，R2=0.9998。取上述提取液 0.2 mL，
0.2 mL 70%乙醇(空白对照)、0.2 mL蒸馏水（参比）
代替标准液按上述方法进行测定，计算结果。
1.4.2 总黄酮的测定
采用硝酸铝比色法测定总黄酮化合物含量[16]。取
250 mg芸香叶苷，于 109 ℃烘箱中干燥至恒重，称取
干燥品(即芦丁）100mg标准品，70%酒精超声波溶解
定容至 100 mL，得 1 g/mL芦丁标准品溶液，分别量
取 0.0(1号管）、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL芦丁标准
液于 10 mL比色管中，各加入 5%的亚硝酸钠溶液 1
mL，6 min后，各加入 10%的硝酸铝溶液 1 mL，6 min
后，加入 5 mL 4%的氢氧化钠溶液，最后各加入 3.0、
2.8、2.6、2.4、2.2、2.0 mL蒸馏水混匀，放置 15 min
后，以 1号管溶液作参比，在 510 nm处分别测定吸
光值。以吸光值 y对质量浓度进行回归。标准曲线为
y=1.3097x-0.0005，R2=0.9995。取上述提取液 0.5 mL，
0.5 mL 70%乙醇（空白对照）、0.5 mL蒸馏水（参比）
代替芦丁标准液按此方法测定，计算结果。
1.4.3 维生素 C含量的测定
采用 2,4-二硝基苯肼比色法。
1.4.4 总抗氧化能力的评价
参照文献[16~18]，用VCEAC法测定总抗氧化能力。
用去离子水配制 14 mmol/L 的 ABTS+·和 4.9
mmol/L的过硫酸钾溶液，二者以 1:1混合并过夜，得
ABTS+·贮备液。使用期用水稀释至吸光度为 0.7±0.02。
称取 0.0176 g抗坏血酸，蒸馏水溶解定容至 100
mL，得到 1 mmol/L的维生素 C标准液。吸取 0.0、
1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL维生素 C标准液于 10 mL
容量瓶中，蒸馏水定容，得到 0.0（1号管）、0.1、0.2、
0.3、0.4、0.5 mmol/L浓度梯度的维生素 C标准液。
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吸取各浓度梯度的标准液哦。1 mL于 10 mL比色管
中，加入 2.9 mL稀释后的 ABTS+·溶液，混合，室温
避光翻译 5~10 min，在 734 nm测定吸光度。1号管测
定值为 A0，其他测定值为 A，计算清除率。
0
0
% 100%
A A
S
A
 
ABTS+·的清除率 y对不同质量浓度的维生素 C x
进行回归。总抗氧化能力则表示为一定量测试物质相
当的抗氧化能力所需的维生素 C的质量浓度。以清除
率 y 对 Vc 质量浓度进行回归。y=141.78x+0.2884，
R2=0.9990。将提取液稀释 10倍后，吸取样液 0.1 mL，
0.1 mL 70%乙醇(空白对照)、0.1 mL蒸馏水（参比）
按上述步骤操作，计算实验结果。
1.4.5 羟基自由基清除率测定
参照文献[19]，利用 Fenton反应产生羟基自由基，
加入水杨酸作为羟基自由基捕捉剂，能提高反应的灵
敏度，分光光度计能够较准确的测定羟基自由基的产
生。分别吸取 0.5 mL样液、0.5 mL 70%乙醇、0.5 mL
蒸馏水（作参比）于 10 mL比色管中，用 70%乙醇补
足 2 mL，依次加入 6 mmol/L的亚硫酸铁 2 mL，6
mmol/L的H2O2 2 mL，摇匀、静置 10 min，在加入 6
mmol/L水杨酸 2 mL，摇匀静置 30 min，在 510 nm处
测定吸光值 A，以蒸馏水代替样液测得吸光值 A0，计
算清除率。
0
0
% 100%
A A
S
A
 
1.4.6 总还原力的测定
按文献[16]的方法测定，有改动。吸取 0.2 mL样液、
0.2 mL 70%乙醇(空白对照)、0.2 mL蒸馏水（作参比）
于 25 mL比色管中，各加入用 70%乙醇补足 2.5 mL，
依次加入 2.5 mL 0.2 mol/L的磷酸缓冲液（pH=6.6），
2.5 mL 1%的铁氰化钾溶液，50 ℃水浴加热 20 min后
急速冷却，依次加入 2.5 mL 10%的三氯乙酸溶液，2.5
mL 0.1%的三氯化铁溶液，用蒸馏水定容至 25 mL，
混匀后静置10 min，以1号管作为参比溶液，于700 nm
处测定吸光值。计算结果。
1.4.7 对 DDPH自由基清除能力的测定
按文献[20]的方法测定，分别吸取 2 mL样液、2 mL
0.2 mmol/L DPPH溶液加入 10 mL比色管中混匀，静
置 30 min后，在 517 nm测得试样吸光度（Ai），取 2 mL
蒸馏水代替样液测得空白吸光度（A0），以 2 mL样液
中加入 2 mL蒸馏水测得样液吸光度（Aj），按下列公
式计算清除率。
 
%100%
0
 
A
AAAS jiO
1.5 数据统计
采用 Excel，SPSS18.0 对所得数据进行差异性分
析。
2 结果与分析
2.1 枇杷花不同花期黄酮、总酚和维生素C的
含量变化



图 2 不同花期枇杷花中黄酮、总酚和Vc的含量
Fig.2 The contents of flavonoids , total phenolics and Vc in
different stages of loquat flowers
由图 2可知，枇杷花从花蕾到盛开的整个开放过
程中，黄酮和总酚含量呈先上升后下降的趋势，枇杷
花蕾中黄酮和总酚含量分别为 10.85±0.33 mg/g 和
61.05±1.76 mg/g，在露白期黄酮和总酚含量分别达到
13.39±0.45 mg/g和76.06±1.18 mg/g，显著高于花蕾期、
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初放期和盛开期（P0.05），之后又呈下降趋势。
枇杷花从花蕾到盛开的整个开放过程中，维生素
C 含量呈先上升后下降的趋势，枇杷花花蕾中 Vc 含
量为(1.83±0.05)10-2 mg/g，在露白期维生素 C含量达
到(2.73±0.28) 10-2 mg/g，显著高于花蕾期、初放期和
盛开期（P0.05），之后又呈下降趋势。
2.2 枇杷花不同花期抗氧化性能的变化

图3 不同花期枇杷花的总抗氧化能力
Fig.3 Total antioxidant capacity of loquat flower in different
stages
由图 3可知，枇杷花开放过程中，总抗氧化能力
呈先上升后下降趋势。花蕾期枇杷花的 VCECA值为
54.46±0.25 mmol/g，到露白期 VCECA值达到最大，
为 61.50±0.21 mmol/g，显著高于其他三个时期
（P<0.05)，之后随着枇杷花的不断开放，总抗氧化能
力逐渐下降，到盛开期时降至最低，以 VE为阳性对
照，其 VCECA值为 12.45±0.23 mmol/g，VE总抗氧
化能力小于枇杷花的抗氧化性强度。

图4 不同花期枇杷花对羟基自由基的清除率
Fig.4 Scavenging rate of loquat flowers in different stages
由图 4可知，不同花期枇杷花对羟基自由基均有
不同程度的清除能力，从花蕾期到盛开期过程中，对
羟基自由基的清除率呈先上升后下降的趋势。花蕾期
枇杷花对羟基自由基的清除率为 42.97±0.05%，到露
白 期 的 枇 杷 花 对 羟 基 自 由 基 的 清 除 率 为
49.91±0.34%，显著高于其他三个花期的枇杷花（P<
0.05)，之后在不断开放中，对羟基自由基清除率有
不断下降。

图5 不同花期枇杷花提取液的总还原力
Fig.5 Reducing power of extracts of different stages loquat
flowers
由图 5可知，枇杷花的总还原力在开放过程中呈
先上升后下降趋势，花蕾期枇杷花还原力的吸光值为
0.57±0.0036，到露白期总还原力值最高，达到
0.67±0.01，显著高于其他三个时期（P<0.05)。之后随
着枇杷花的开放又不断下降，至盛开期为最低。

图6 不同花期枇杷花的DPPH自由基的清除率
Fig.6 Scavenging rate of loquat flowers in different stages
由图 6可知，不同花期枇杷花对 DPPH自由基均
有不同程度的清除能力，从花蕾期到盛开期过程中，
对 DPPH自由基的清除率呈先上升后下降的趋势。花
蕾期枇杷花对DPPH自由基的清除率为 56.07±2.17%，
到露白期的枇杷花对羟基自由基的清除率为
74.28±0.73%，显著高于其他三个花期的枇杷花
（P<0.05)，之后在不断开放中，对 DPPH自由基清除
率有不断下降。
3 结论
3.1 本试验结果表明，枇杷花在从花蕾到盛开的过
程中，黄酮、总酚和 Vc 含量及其抗氧化性能总体上
呈先上升后下降的趋势，其中露白期相比于其他三个
时期，黄酮和总酚物质含量最高，这与周春华[8]对枇
杷花三个阶段的抗氧化性物质的研究结果一致；露白
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期枇杷花的总抗氧化性、总还原力最强，对羟基自由
基的清除率，DPPH 自由基清除率最高，都显著高于
其他三个花期。
3.2 近年来，植物性来源的多酚类物质成为人们关
注的热点。多酚类物质是抗氧化性物质中最大的一
类，普遍存在于植物界，对人体健康有重要作用。大
量流行病学研究表明，多酚类化合物与一些疾病的预
防有密切关系，如各种癌症，心血管和神经性疾病以
及衰老引起的相关疾病[22]等。其中黄酮类物质在抗
氧化反应中，不仅可以清除引发链反应的活性自由基
和起催化作用的金属离子，还能直接捕捉链传递阶段
的过氧自由基，阻断链反应，是很好的预防型和阻断
型抗氧化剂[23]。天然来源的生物黄酮分子质量小，
能被人体迅速吸收，能通过血脑屏障，能进入脂肪组
织，具有消除疲劳、保护血管、预防动脉硬化、扩张
毛细血管、疏通微循环、抗脂肪氧化、活化大脑及其
他脏器细胞的功能[24]。酚酸类化合物可以促进 SOD
酶活力间接发生抗氧化作用，具有抗血栓形成、溶纤
和抗脂质过氧化的作用是治疗心肌缺血、心绞痛、心
肌梗死等心血管疾病的有效成分，同时还具有抗诱
变、抗菌、抗病毒等作用[25]。
3.3 我国是枇杷的原产地，约占世界枇杷产量的
70%，枇杷花资源丰富。在枇杷生产管理中，为实现
优质高效的目的，大量枇杷花会被疏除，这也为枇杷
花的开发利用提供了大量的原材料。本研究结果表
明，露白期枇杷花的黄酮、总酚含量最高，具有较强
的抗氧化能力，因此，在枇杷花的利用中应以露白期
为最佳的采摘时期。
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