全 文 ：第 35 卷 第 6 期 曲 靖 师 范 学 院 学 报 Vol. 35 No. 6
2016 年 11 月 JOUＲNAL OF QUJING NOＲMAL UNIVEＲSITY Nov． 2016
收稿日期:2016 － 09 － 09
基金项目:上海师范大学资源化学省部共建教育部重点实验室;曲靖师范学院资源与环境化学重点实验室
(SYS2010BX01)．
作者简介:刘明研，广西百色农业学校讲师，主要从事非特异性免疫和动物临床研究．
* 通讯作者:刘品华，曲靖师范学院化学与环境科学学院教授，主要从事食品化学、分析研究．
小黑药水溶性成分吸附胆酸盐、胆固醇的研究
刘明研1，余丽访2，杨 芬2，刘品华2*
(1. 广西百色农业学校，广西 百色 533000;2. 曲靖师范学院化学与环境科学学院，云南 曲靖 655011)
摘 要:小黑药在民间有悠久的药食两用历史，为此研究其水溶性成分吸附胆酸盐、胆固醇的能力．
试验结果表明水溶性成分在低浓度时对胆酸盐的吸附能力较小，但随浓度的增加吸附能力提高较快，
在试验范围最大浓度时吸附能力只略低于对照样考来烯胺，而吸附胆固醇的力能较好，说明水溶性成
分有较好的降血脂作用．小黑药食药安全性较高，在降血脂方面有潜在的开发应用价值．
关键词:小黑药;水溶性成分;胆酸盐;胆固醇
中图分类号:TS201. 2 文献标识码:A 文章编号:1009 － 8879(2016)06 － 0037 － 05
小黑药(Sanicula astrantiifolia Wolff)生长在
海拔 1500 ～ 3000 m 的河边杂木林、山坡草地等
阴湿处，主要分布在云南、贵州、四川等地，其根
茎叶均可入药也可烹调食用． 具有补肺益肾、抗
氧化、抗菌抑菌、治疗肺结核、肾虚腰痛、头昏、止
咳、镇痛、增强机体免疫力等功效［1 － 2］．小黑药中
黄酮含量为 2． 52%，多糖含量为 2． 3 g /100g，且
具有较好的抗氧化活性［3 － 4］．
胆酸盐是指人体和动物胆汁中由胆固醇衍
生而来的具有甾核结构的一类两性大分子，对脂
肪和胆固醇的消化吸收和脂溶性维生素的代谢
起重要作用［5］．胆固醇是血脂的成分之一，参与
形成细胞膜，是合成胆汁酸、维生素 D 以及甾体
激素的原料［6 － 7］． 血脂水平与冠心病、动脉粥样
硬化等心血管疾病的形成密切相关，高胆固醇是
冠心病的主要危险因素，总胆固醇的水平每升高
1 mol /L，冠心病死亡的几率就增加 35%［8］，保
持胆固醇处于正常水平对降低患冠心病的风险
具有重要意义［9 － 10］．
小黑药水溶性成分中含有糖类、黄酮等药用
组分和营养素，在肠道内能与胆酸盐结合，一方
面影响脂类的消化和吸收，另一方面介入胆汁酸
的肠肝循环，将胆酸盐排出体外，促使肝脏中胆
固醇不断转化为胆酸盐，以维持胆汁酸池的动态
平衡，从而促进胆固醇降解代谢． 人体中约 40%
～50%的胆固醇是通过合成胆汁酸而被代谢分
解［11］． 任何胆汁酸的去除都会促使肝脏中胆固
醇氧化分解，从而起到降血脂的作用［12 － 13］．寻找
天然、安全、疗效好、无副作用、能调节血脂平衡
的降脂食品具有重要意义，为此我们探索了小黑
药水溶性成分对胆酸盐、胆固醇吸附能力，证明
其降血脂作用，并为进一步研究小黑药中降血脂
的功能性成分提供参考依据．
1 材料与方法
1. 1 仪器
电热鼓风恒温干燥箱(DHG － 9145A，上海
一恒科学仪器有限公司);分析天平(AL204 －
IC，梅特勒 －托利多仪器(上海)有限公司);紫
外分光光度计(TU － 1810，北京普析通用仪器有
限责任公司);超级恒温水浴(HH － 501，常州国
华电器有限公司);往返水浴恒温振荡器(WHY
－2，江苏省金坛市大地自动化仪器厂);低速离
心机(4000r /min，常州国华电器有限公司);旋涡
混合器(GL － 88B，海门市其林贝尔仪器制造有
·73·
限公司)等．
1. 2 材料及试剂
小黑药全株(来自陆良农贸市场，洗净、晒
干)经植物粉碎机粉碎后得小黑药粉末备用;胆
酸钠;甘胆酸钠;牛黄胆酸钠;脱氧胆酸钠;考来
烯胺散(南京厚生药业有限公司);浓硫酸(重庆
川东化工集团);冰乙酸(天津市化学试剂三
厂);糠醛(广州化学试剂厂);胰酶(四川贝奥生
物制药有限公司);胆固醇(上海润捷化学试剂
有限公司)，胆酸盐均为 98%纯度，上海阿拉丁
生化科技股份有限公司出品，其他试剂均为分
析纯．
1. 3 实验方法
我们参考了文献［7，14 － 15］设计了试验胆酸盐
的吸附方法．由于胆汁酸是随胆汁分泌进入肠道
参加代谢的，故做了模拟肠道环境的吸附试验．
下述试验方法精密度均取重复平行试验三
次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均
值的 10%的数据计入计算结果．
取 200 g 小黑药干粉，置于烧杯中，加入适
量水浸没固体，加热煮沸 2 h，100 目滤网过滤，
重复提取两次，合并滤液，然后离心取清液，于电
热鼓风干燥箱中 80℃干燥至恒重，研细置于干
燥器中得备用水溶性成分固体试样．
1)时间对胆酸钠吸附率影响试验．准确称取
固体试样 0. 6008 g，加入 pH = 6. 3 的磷酸缓冲溶
液 54. 4 mL，加入 10 mg /mL的胰酶 35. 0 mL，置于
37 ℃水浴中振荡 1 h，于每只 10mL离心管中各取
3 mL，共 20只，分为 5 组(每组平行实验 3 管，空
白 1管)，其每组的 3只管中分别加入 0. 5 mmol /L
胆酸钠溶液2 mL，空白管加入缓冲溶液2 mL代替
胆酸钠溶液．在 37 ℃水浴中分别振荡 10，20，40，
60，80 min后，4000 r /min离心20 min，取上层清液
2 mL，加入 1%的糠醛(新蒸)1 mL，冰浴 5 min，加
入 75%的硫酸 10 mL，70 ℃水浴 10 min，冰浴 2
min，于波长为 517 nm处测其吸光度．样品吸光度
记为 A．试验同时另取三份加缓冲溶液 3 mL代替
样液，两份加入 0. 5 mmol /L 胆酸钠溶液 2 mL，另
一份加入缓冲溶液 2 mL(空白)，方法同上，测定
吸光度为 A0(平行试验 3次)，实验结果见图 1．吸
附率(%)计算公式为:
吸附率(%)=
A0 － A
A0
× 100
2)浓度对胆酸盐吸附率影响试验．分别准确
称取固体试样 0. 30，0. 40，0. 50，0. 60，0. 70 g，补
充 pH = 6. 3 的磷酸缓冲溶液至 18. 00 g，分别加
入 10 mg /mL的胰酶 15. 0 mL，在 37 ℃水浴中振
荡 1 h．不同浓度的各个试样分别于 4 只 10 mL
离心管中各取出 3 mL(平行试验 3 管，空白 1
管)，其中 3 只管中分别加入 0. 5 mmol /L胆酸钠
溶液 2 mL，空白试样用 2 mL 缓冲溶液代替 0. 5
mmol /L胆酸钠溶液，试验方法及 A0 测试同 1)．
考来烯胺试验方法同试样． 甘胆酸钠、牛黄胆酸
钠、脱氧胆酸钠的试验方法同胆酸钠． 试验结果
见表 1．
3)胆固醇标准曲线的绘制．胆固醇检测参照
GB /T 5009. 128，作适当修改．吸取 100 μg /mL的
胆固醇标准使用液 0. 0，0. 5，1. 0，1. 5，2. 0，2. 5
mL分别置于 10 mL 试管内，在各管内加入冰乙
酸使总体积皆达 4 mL．沿管壁加入铁矾显色液 2
mL，混匀，放置 20 min，在 564 nm 波长下测定吸
光度(在 500 nm至 600 nm波长范围内扫描得出
在 564 nm处有最大吸收)．以胆固醇质量浓度为
横坐标，吸光度值为纵坐标做标准曲线，得回归
方程．
4)时间对吸附胆固醇影响试验．准确称取固
体试样 0. 25 g加水 20 mL溶解得样品溶液．取样
品溶液 10 mL，1 mg /mL 的胆固醇无水乙醇溶液
50 mL混匀．另取样品溶液 5 mL，加入无水乙醇
25 mL混匀作为空白使用．于 37 ℃水浴振荡，分
别于 20，40，60，80，100，120 min 时取出 3 mL 于
10 mL的离心管中(平行试验 3 次，同时取空白
试样)，在 4000 r /min下离心 15 min，取上清液 2
mL置于 15 mL 的离心管中，加入水 3 mL，氯化
钠 0. 7 g，10 mL石油醚，在漩涡振荡器上振荡 2
min，静止萃取 1 h，取萃取液 2 mL，吹干，加入冰
乙酸 4 mL，铁矾显色液 2 mL，混匀，静止放置 15
min，在 564 nm 波长下测吸光度值，计算剩余胆
固醇质量及吸附量．试验结果见图 2．
5)试样浓度对吸附胆固醇影响试验．准确称
取固体试样 1. 00 g用水定容到 25 mL容量瓶中，
分别取出 0. 1，0. 2，0. 3，0. 4，0. 5 mL于 10 mL的
离心管中，用水补充至 0. 5 mL(试样浓度为 4，8，
12，16，20 mg /mL)，依次加入 2. 5 mg /mL的胆固
醇无水乙醇溶液 2. 5 mL，加入无水乙醇 2. 5 mL
代替胆固醇溶液的作为空白，于 37 ℃水浴振荡
100 min，4000 r /min离心 15 min，取上清液 2 mL
置于 15 mL离心管中，然后按 4)方法显色及测
·83·
第 6 期 曲靖 师 范 学 院 学 报 第 35 卷
吸光度，计算吸附量．试验结果见图 3．
6)胆固醇浓度对吸附影响试验．准确称取样
品 1 g用水定容到 25 mL 容量瓶中，于 5 只离心
管中各取出 0. 5 mL，并分别加入 2. 5 mg /mL 的
胆固醇无水乙醇溶液 0. 5，1. 0，1. 5，2. 0，2. 5 mL，
用无水乙醇补充至 3 mL(胆固醇浓度为 0. 42，
0. 83，1. 25，1. 67，2. 08mg /mL)，同时用无水乙醇
代替胆固醇无水乙醇溶液作为空白，于 37 ℃水
浴振荡 100 min，4000 r /min离心 15 min，取上清
液 2 mL置于 15 mL离心管中，然后按 4)方法显
色及测吸光度计算吸附量．试验结果见图 4．
被吸附胆固醇(mg)=加入的胆固醇(mg)
－ 残余的胆固醇(mg)
吸附量(mg /g)=被吸附胆固醇(mg)
试样(g)
2 结果与讨论
水溶性成分主要含有水溶性糖类、蛋白质
类、黄酮类、生物碱类等药效和营养成分，对胆酸
盐及胆固醇的吸附试验更符合药用或食用时的
情况，也为进一步的探索降血脂的功能成分指明
方向．
图 1 时间对胆酸钠吸附率的影响
由图 1 可知，试样对胆酸钠的吸附作用随时
间的延长吸附率逐渐提高，在 40 min 后提高幅
度变小，为此我们把吸附时间设计为 60min 进行
等温吸附试验．
表 1 浓度对胆酸盐的等温吸附率
用量 /g
胆酸钠
考来烯胺 试样
甘胆酸钠
考来烯胺 试样
牛黄胆酸钠
考来烯胺 试样
脱氧胆酸钠
考来烯胺 试样
0. 3 70. 09 22. 29 74. 58 45. 45 70. 10 6. 88 74. 58 23. 64
0. 4 72. 43 36. 25 76. 25 65. 99 72. 43 34. 86 76. 25 30. 36
0. 5 76. 84 45. 88 76. 73 73. 32 76. 84 48. 62 76. 73 41. 07
0. 6 80. 26 58. 80 79. 85 75. 42 80. 27 65. 09 79. 85 58. 33
0. 7 85. 05 71. 21 87. 50 77. 89 85. 05 75. 84 88. 02 70. 24
表 1 说明，小黑药水溶性提取物在低浓度时
吸附胆酸盐的能力较小，但随浓度的增加吸附能
力有较快的提高．试验的最大浓度时已接近对照
样考来烯胺，表现出较强的吸附能力． 试验结果
表明小黑药水溶性成分吸附胆酸盐的作用官能
团为支链离子基团． 对牛黄胆酸钠、甘胆酸钠的
吸附高于胆酸钠和脱氧胆酸钠，与支链基团的离
子电荷强度一致． 磺酸基的极性比羧基、酰胺基
的更大，解离性更强［16］．而甘胆酸钠中的羧基受
酰胺基及孤对电子的影响解离性大于胆酸钠中
的羧基从而产生较强的吸附．
以胆固醇质量浓度(μg /mL)为横坐标，吸光
度值为纵坐标，得回归方程为:y = 0. 0234x +
0. 0190，相关系数为 Ｒ2 = 0. 9993，由回归方程可
计算残余的胆固醇量(mg)，进一步计算出吸
附量．
图 2 时间对试样吸附胆固醇的影响
由图 2 可知试样吸附胆固醇随着时间的延
长吸附作用增强，80 min后试样对胆固醇吸附增
加量变小，为此笔者把考察试样对胆固醇吸附能
力的其它试验时间确定在 100 min．
·93·
刘明研，余丽访，杨 芬，等:小黑药水溶性成分吸附胆酸盐、胆固醇的研究
图 3 试样浓度对吸附胆固醇的影响
由图 3 可知，随着试样浓度的增加 对胆固
醇的吸附能力反而下降，可能因试样浓度的增加
试样中可结合胆固醇的基团被自身相互作用消
耗掉［17］．
图 4 不同胆固醇浓度对吸附的影响
由图 4 可知，随着胆固醇浓度增加试样对其
吸附量也增大，可看出吸附量还没有达到最大
值，表明对胆固醇有较强的吸附能力．
3 结 论
试验说明小黑药的水溶性成分有较好的吸
附胆酸盐和胆固醇作用，且富含氨基酸、维生素、
黄酮、多糖等药效及营养成分，作为食药两用的
植物在药用、食用及保健功能方面有较高的研究
和开发价值．其降血脂的具体有效成分有待深入
研究．
参考文献:
［1］云南省卫生局革命委员会． 云南中草药［M］． 昆明:
云南人民出版社，1971:98 － 99．
［2］刘品华，杨光红，田雪莲，等． 小黑药抗油脂氧化
及抑菌效果研究［J］． 食品工业科技，2011(10):
187 － 189．
［3］杨涛，韩磊，冯国强，等． 小黑药总黄酮抗氧化性
研究［J］． 现代农业科技，2015 (17):311 － 316．
［4］杨涛，刘婷婷，杨芬，等． 小黑药多糖含量及其抗
氧化性研究［J］． 粮油食品科技，2016(3):55 － 58．
［5］Kahlon T S，Smith G E． In vitro binding of bile acids
by blueberries (Vaccinium spp) ，plums (Prunus
spp) ，pruness (Prunus spp) ，strawberries (Fragaria X
ananassa) ，cherries (Malpighia punicifolia) ，cranber-
ries (Vaccinium macrocarpon)and apples (Malus syl-
vestris) ［J］． Food Chemistry， 2007，100:1182
－ 1187．
［6］Kobayashi M，Ikegami H，Fujisawa T，et al． Preven-
tion and treatment of obesity，insulin resistance，and
diabetes by bile acid － binding resin［J］． Diabetes，
2007(1) :239 － 247．
［7］［17］刘品华，王俊，汪帆，等． 臭参地上部分水溶
性成分吸附胆酸盐、胆固醇及脂肪的研究［J］． 食品
科技，2016(4)) :81 － 85．
［8］尹军霞，沈国娟，沈蓉，等． 酸菜汁中降胆固醇乳
酸菌的分离鉴定［J］． 中国食品学报，2008(2):47
－ 51．
［9］李瑛． 高脂血症的中医研究进展［J］． 光明中医，
2009(7):1412 － 1414．
［10］邓雪，黄惠华． 茶花浸提液及其功能性成分结合
胆酸盐的效果探讨［J］． 食品科技，2013(1):199
－ 205．
［11］Marlett J A，Cho S S，Dreher M L． Dietary fiber and
cardiovascular disease［M］． New York:Marcel Dek-
ker Inc，2001:663 － 667．
［12］ Thongngam M，Mclements D J． Isothermal titration
calorimetry study of the interactions between chitosan
and a bile salt (sodium taurocholate) ［J］． Food
Hydrocolloids，2005，(5) :813 － 819．
［13］吴继美，吴清楠，李任强． 粮食水溶性蛋白组成特
点及体外结合胆酸盐能力比较［J］． 中国粮油学
报，2013(10):26 － 30．
［14］Nawitska A，Monika K M． Dietary fibre fractions from
fruit and vegetable processing waste［J］． Food Chem-
istry，2005(2) :221 － 225．
［15］王娟，余锐，黄惠华． 茶树花萃取物降血脂及抗氧
化性能研究［J］． 食品工业科技，2014(5):79
－ 82．
［16］Hofmann A F，Hagey L Ｒ． Bile Acids:Chemistry，
Pathochemistry，Biology，Pathobiology，and Thera-
peutics［J］． Cellular and Molecular Life Sciences，
2008，65:2461 － 2483．
·04·
第 6 期 曲靖 师 范 学 院 学 报 第 35 卷
Study on the Adsorption of Bile Salts and Cholesterol by
Water Soluble Constituents from Sanicula Astrantiifolia
Liu Mingyan1，Yu Lifang2，Yang Fen2，Liu Pinhua2
(1． Baise Agriculture School，Baise Guangxi 53300;2． School of Chemistry and
Environmental Science，Qujing Normal University，Qujing Yunnan 655011，P． Ｒ． China)
Abstract:The adsorption ability of Bile salts and cholesterol by water soluble constituents from Sanicula as-
trantiifolia was studied because of its long medicine and edible history． The results showed that the adsorp-
tion capacity for Bile salts by water － soluble constituents was lesser at low concentration，which increased
rapidly with the increasing concentration that was slightly?lower than cholestyramine at maximum concentra-
tion，and the adsorption capacity for cholesterol was better． The water soluble constituents showed better a-
bility of reducing blood lipids． The security in medicine and edible of Sanicula astrantiifolia was higher，
which had potential development value of reducing blood lipids．
Key words:Sanicula Astrantiifolia;water soluble constituents;Bile salt;Cholesterol
［责任编辑:崔 萍］
(上接 9 页)
Pullback Attractor for the Nonlinear
Ginzburg － Landau Equation
Zhang Feng，Jiang Jinping，Wang Yan，Yan Jianjun
(School of Mathematics and Computer Science，Yanan University，Yanan Shanxi 716000，P． Ｒ． China)
Abstract:The existence of the pullback D － attractor in the nonlinear Ginzburg － Landau equation is studied
by proving that it satisfies the pull － back absorption set and the pull － back condition C is used to prove the
existence of pullback attractor for the Ginzburg － Landau equation．
Key words:Ginzburg － Landau Equation;pull － back condition C;Pullback attractors
［责任编辑:崔 萍］
·14·
刘明研，余丽访，杨 芬，等:小黑药水溶性成分吸附胆酸盐、胆固醇的研究