全 文 ：— 27 —现代中药研究与实践2010年第24卷第4期Chin Med J Res Prac,2010 July,Vol.24 No.4
黄蜀葵 Abelmoschus manihot(L.)Medic.系锦葵科
秋葵属植物，全草入药，具有清热，凉血，解毒功效。
其花性味甘寒滑，无毒，具有清利湿热，消炎解毒
之功效，内服主治五淋，水肿；外用治疗痈疽肿毒，
汤水烫伤 [1]。现代药理学研究表明，黄蜀葵花具有明
显的抗炎、抗菌、镇痛等作用 [2-4]。近年来，黄蜀葵
花及其提取物制剂主要用于治疗感染性疾患如慢性
肾炎、尿路感染等 [5]。黄蜀葵花中黄酮类化合物主要
有：金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮素 -3′-葡萄糖苷、槲
皮素 -3′-葡萄糖苷、杨梅素等 [6]，其中金丝桃苷为主
要活性成分 [7] 。目前，有关黄蜀葵的研究主要集中
在药理作用、成分分析与测定、栽培及繁育 [3,8]方面，
有关黄蜀葵组织培养的研究尚属空白。本实验旨在通
过组织培养技术，建立黄蜀葵组织快繁体系，为进一
步优良其品种选育工作奠定基础。
1 材料和方法
1.1 材料
供试黄蜀葵种子采于江苏泰州，经南京中医药
大学谈献和教授鉴定。
1.2 仪器与试剂
仪器：YXQ-LS-50SⅡ立式压力蒸汽灭菌器（上
海博讯实业有限公司医疗设备厂），SW-CF(BL)洁净
工作台（上海博讯实业有限公司医疗设备厂），PHS-
3C pH计 (上海康宜仪器有限公司 )。
试剂：吲哚乙酸（南京赛吉科技有限公司）、6-
糠基氨基嘌呤（国药集团化学试剂有限公司）、a-萘
乙酸（中国国药集团上海化学试剂公司）、6-卞氨基
嘌呤（上海精析化工有限公司）。
1.3 方法
1.3.1 种子的消毒 取种子 50粒，流水冲洗 30
min，放入 75％的酒精消毒 10 s，无菌水冲洗 1次，
而然后放入 0.1％的升汞溶液中 5 min，最后用无菌
水冲洗 5~7次，放置于灭菌滤纸上吸干水分，进行
接种。
1.3.2 种子的接种 种子培养基为 1/2 MS培养基，
附加蔗糖 30 g•L-1，琼脂 5 g•L-1，调 pH值 5.7~5.8。
每瓶接种 5粒。待种子子叶刚刚冒出时，以无菌苗的
子叶和下胚轴为材料进行组织培养。
1.3.3 愈伤组织的诱导、分化和继代培养 剪取无菌
苗的子叶和下胚轴，将子叶和下胚轴分别切成 2段，
黄蜀葵组织培养的初步研究
朱华云 1，谈献和 1*，李 建 2，张 媛 2，王康才 2
(1. 南京中医药大学，江苏 南京 210046 ; 2. 南京农业大学，江苏 南京 210095）
摘要 : 目的 以黄蜀葵子叶和下胚轴为外植体进行组织培养，寻找适宜诱导黄蜀葵子叶和下胚轴愈
伤组织发生和分化的激素配比。方法 采用不同激素配比 MS 培养基对黄蜀葵子叶和下胚轴分别培养。结
果 适宜下胚轴愈伤组织诱导的培养基为 MS+IAA0.5 mg/L+KT1.0 mg/L，MS+IAA0.7 mg/L+KT1.0 mg/L 可
诱导愈伤组织产生丛生芽，同时还可诱导下胚轴直接产生幼苗。适宜生根培养基为 1/2MS+NAA0.1 mg/L，
植株粗壮，主根少，须根多。结论 本实验初步建立了以黄蜀葵子叶和下胚轴为外植体的组培快繁体系。
关键词 ： 黄蜀葵 ；组织培养 ；植株再生
中图分类号 ：S336 文献标识码 ：A 文章编号 ：1673-6427(2010)04-0027-02
A Primary Study of Plant Tissue Culture of Abelmosehus manihot
ZHU Huayun1,TAN Xianhe1,LI Jian2,ZHANG Yuan2,WANG Kangcai2
( 1. Nanjing University of Traditional Chinese Medicine, Nanjing 210046, China;
2. Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China）
Abstract: Objective To study plant tissue culture of Abelmosehus manihot. Methods The cotyledon and
hypocotyl of A. Manihot were cultured in MS media with different proportionings of hormones. Results The
inducement of callus in hypocotyl was obtained in the medium MS+IAA0.5mg/L+KT1.0mg/L, the inducement of
callus to adventitious bud and hypocotyl to seedling were obtained in the medium MS+IAA0.7mg/L+KT1.0mg/L.
Conclusion A system of plant tissue and rapid propagation based on the explant of the cotyledon and hypocotyl
was set up .
Key words: Abelmosehus manihot (L.) Medic; plant tissue culture; plant regeneration
收稿日期：2009-11-03
*通讯作者：谈献和
DOI:10.13728/j.1673-6427.2010.04.011
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接种于不同激素配比的培养基上，附加蔗糖 30 g•L-1，
琼脂 5g•L-1，调 pH值 5.7~5.8。每瓶接种 4个外植体，
重复 10瓶。于 25 ℃，2 000 Lx条件下培养。观察统
计愈伤组织的诱导、不定芽的诱导和分化情况，最后
筛选出适宜的愈伤组织诱导培养基和不定芽诱导分
化的培养基（不同激素配比培养基浓度见表 1）。
1.3.4 生根培养 将初代培养和继代培养的丛生苗
转接到 1/2 MS+NAA 0.1 mg•L-1和MS+NAA 0.1 mg•L-1
的生根培养基上进行生根培养。
2 结果与分析
2.1 愈伤组织及不定芽的诱导
培养 30 d，下胚轴较子叶先形成愈伤组织。在
培养基 MS+IAA 0.5 mg•L-1+KT 1.0 mg•L-1上，以下
胚轴为外植体，有浅绿色质地致密的愈伤组织出现，
同时，愈伤组织块上有不定根产生。以子叶为外植
体，切口处有少量愈伤组织出现，同时有不定根产
生。在培养基MS+IAA 0.7 mg•L-1+KT 1.0 mg•L-1上，
以下胚轴为外植体的愈伤组织上有丛生芽出现，但稍
显玻璃化。同时，该培养基还可诱导下胚轴直接出
苗。培养 45 d，苗体产生根系。培养 60 d，各培养基
愈伤组织及不定芽的诱导情况见表 1。从整体上看，
KT+IAA激素组合对黄蜀葵愈伤组织的诱导较好，愈
伤组织生长快，颜色浓绿，尤其是MS+IAA 0.5 mg•
L-1+KT 1.0 mg•L-1，诱导的愈伤组织块粗大致密。下
胚轴愈伤组织的平均诱导率及高于子叶，说明下胚轴
易诱导产生愈伤组织，其脱分化能力比子叶强。以下
胚轴为外植体，不定芽平均诱导率为 28％，以子叶
为外植体的愈伤组织未诱导出不定芽。说明下胚轴的
再分化能力也高于子叶。
2.2 生根培养
将子叶和下胚轴直接诱导产生的不定苗接种至
生根培养基 1/2 MS+NAA 0.1 mg•L-1和MS+NAA 0.1
mg•L-1上，MS+NAA 0.1 mg•L-1培养基诱导的主根
多，无须根，植株粗壮，1/2MS+NAA0.1 mg•L-1培养
基诱导的主根根数少，须根多，各培养基的生根情况
见表 2。本实验初步确定适宜黄蜀葵幼苗生根的培养
基为 1/2 MS+NAA 0.1 mg •L-1
3 讨论
近年来组织培养技术已广泛运用于锦葵科植物
的研究中，如棉花 [9]和苘麻 [10]的研究。黄蜀葵的组
织培养方面的研究尚属空白，但锦葵科其他植物的研
究成果，为本实验提供了可靠的参考依据。目前锦葵
科植物，如棉花、苘麻的组织培养研究，多采用子叶
和下胚轴为外植体。采用子叶和下胚轴作为外植体是
多数学者在研究中总结的宝贵经验，也是本实验中选
择外植体的依据。
实验发现，黄蜀葵组织培养再生周期长，30 d
后才有愈伤组织出现，可能与锦葵科植物的特殊的生
物学特性有关。本实验以子叶为外植体的处理组中，
愈伤组织没有被诱导出不定芽，而以下胚轴为外植体
的处理组出现诱导愈伤组织的有不定根的出现，还可
直接诱导出植株，这是由于下胚轴较被易诱导出胚性
愈伤组织，还是培养基激素配比的因素所致，有待进
一步研究。
参考文献
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58-59．
表1 不同激素配比对外植体的诱导情况
Tab.1 Result of explants induced with different hormone proportion
培养基（mg/L）
MS+IAA0.3+KT1.0
MS+IAA0.5+KT1.0
MS+IAA0.7+KT1.0
1/2MS+6-BA3+NAA0.05
1/2MS+6-BA3+NAA0.1
1/2MS+6-BA3+NAA0.3
愈伤组织
形成率
37.5%
50.0%
25.0%
0.0%
12.5%
0.0%
下胚轴
愈伤组织
生长情况
－
＋＋＋
＋＋
／
－
／
不定芽
诱导率
0.00%
0.00%
25.00%
18.75%
25.00%
41.60%
愈伤组织
形成率
12.0%
46.0%
23.0%
15.0%
0.0%
35.0%
愈伤组织
生长情况
－
＋
－
＋
／
＋
子叶
注：＋＋＋表示愈伤组织长势良好，＋＋表示长势较好，＋表示长势
一般，－表示长势较差，／表示无愈伤组织形成。
表2 不同培养基对黄蜀葵生根的影响
Tab.2 Effect of different medium for the root formation of A. maniho
培养基（mg/L）
1/2MS+NAA0.1
MS+NAA0.1
生根率%
76
72
主根数
3
10
须根数
23
0