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矮杨梅槲皮素的种内差异



全 文 :文章编号:1004—5570(2000)04—0037—02
矮杨梅槲皮素的种内差异

刘 宁 ,乙 引
(贵州师范大学 生物科学技术系 ,贵州 贵阳 550001)
摘要:采用 HPLC法测定了贵州矮杨梅 5 个类型植物叶中槲皮素含量 , 结果表明:游离槲皮素 、总槲皮素含量以
及营养期 、果期槲皮素含量均与矮杨梅的类型有关 , 腊质杨>白果型>花脸果型>大红果型>鸡素果型。 因此 ,
将矮杨梅划分为 4 大类 ,其中 , 大红果型和鸡素果型属于一个大类。
关 键 词:矮杨梅;槲皮素;种内差异
中图分类号:Q946.83+3  文献标识码:A
Intraspecific difference of quercetin content among Myrica nana Cheval
LIU Ning , YI Yin
(Department of Biological Seience and Technology , Guiyang 550001 , China)
Abstract:Quercetin contents in leaves of five types of Myrica nana Cheval are determined by
HPLC.in this paper The results show e that f ree and total quercetin contentin contents during both
g row th period and fruit period are relative to the types of the species.According to the dif ference of
quercetin content , the five types of the species are divided into four groups.
Key sords:Myrica nana;quercetin;int raspecific dif ference
  杨梅属植物在我国有 4 个种[ 4] , 青杨梅
(Myrica adcnophora)、毛杨梅(M .esculenta)、矮
杨梅(M .naan)和杨梅(M .rubra)。其中 ,矮杨梅
为我国特有种 ,分布于我国云南 、贵州西部 、西藏察
隅以及四川西昌 、会东一带[ 2] 。民间有将其叶用
于治疗烫伤 、痛肿 、胃腹痛等症的入药史 ,是一个具
有综合开发利用前景的药用野生植物。
由于杨梅属在植物系统演化中的地位并不重
要 ,同时 ,矮杨梅在分布上具稀有性和局限性 ,分类
未受到重视 ,其系统位置仍是一个悬而未决的问
题。笔者等[ 3 、4] 在对贵州西部地区矮杨梅进行开
发利用的研究基础上 ,发现同一生境下的矮杨表现
出形态特征的多态性 ,其果形 、果色 、叶形及株形等
性状存在很大差异 ,且能够稳定遗传。因此 ,提出
矮杨梅种下还存在新的分类等级。谷晓明等[ 5] 也
发现几个形态类型矮杨梅中过氧化物酶同工酶酶
谱存在差异。本文采用 HPLC法测定了贵州矮杨
梅 5个变异类型植物叶中槲皮素含量 ,从植物化学
的角度对其分类进行探讨 ,以期获得更深入的认识。
1 材料与方法
1.1 材料:材料来源见表 1 ,5 种矮杨梅叶均采摘
于当年 7月果期和 10月营养期植株的果轴中部成
熟叶 。鉴定标本存于贵州师范大学种子植物标本
室(HGN)。
37
收稿日期:2000-06-03
基金项目:贵州省自然科学基金资助项目(953026)
 第 18卷 第 4期
2000 年 11月        
贵州师范大学学报(自然科学版)
Journal of Guizhou No rmal University(Natural Science)        
Vo l.18.No.4
Nov., 2000
表 1 材料来源
编号
Number
名 称
Name
产地及论证标本
Origion and specimen number
1
花脸果型杨梅
M.nana Cheval.Var.Humi fusa N.Liu et Z.F.Li;var.nov.nom ined 水城杨梅乡弯子林  No.0016
2
大红果型杨梅
M .nana Cheval.var.typleaN.Liu et Z.F.Li , var.nov.nom ined 水城杨梅乡弯子林  No.0030 , 95022
3
白果型杨梅
M , nana Cheval.var.alba N.Niu et Z.F.Li;var nov.nom ined 水城杨梅乡弯子林  No.95009 , 0006
4
鸡素果型杨梅
M.nana Cheval var.ShuichengneseN.Niu et Z.F.Li;var nov.nom ined          No.0031
5
蜡质杨梅
M .nana Cheval.var.Cerca N.Liu et Z.F.Li;var nov.nom ined 水城杨梅乡弯子林  No.0032 , 95007
1.2 槲皮素含量测定
精密称取 1.00 g 各发育期 、各类型矮杨梅叶
干粉 ,置于 60 mL 索氏提取器中 ,加适量甲醇 ,回
流提取 12 h。将甲醇液浓缩 ,定溶至 50 mL。过
滤 ,过 C18预处理柱 ,进样 ,测定游离槲皮素 。精密
吸取上述提取液 10 mL ,加 5 mL 甲醇和 0.6 mL
浓硫酸 ,置圆底烧瓶中 ,加热回流3 h ,放冷 ,转移至
25 mL 容量瓶中 ,用甲醇稀释至刻度 ,过滤 ,过 C18
预处理柱 ,进样 ,测定水解后的总槲皮素。每个数
据共测定 3次 ,每次至少 3个重复 。槲皮素标准样
品购自中国生物制品药品检定所。所用仪器为岛
津 LC-5A高效液相色谱仪 , C-R2AX 数据处理
机和 SPD -2AM 紫外检测器。色谱柱:YWG -
C18(5 um)1504.6 mm 。流动相:甲醇:0.4%磷酸
=5∶5 。柱温为 35℃,流速为 0.8 mL/min ,检测波
长是 368 nm ,进样量为 10 μL 。所有数据均经过 t
值检验。
2 结果与分析
分布于贵州西部地区的矮杨梅在形态特征上
存在很大差异 。刘宁等根据果形 、果色 、叶形及株
形等性状将其划分为多种类型[ 3 , 4] ,但是 ,以形态
学差异确定矮杨梅种下分类等级需要进一步证实 。
槲皮素(Quercetin)是广泛存在于植物中的黄
酮类化合物 ,其在植物体中的含量可作为化学分类
的依据。由表 2可知 ,游离槲皮素和总槲皮素在 5
种形态类型矮杨梅中的含量呈相关性 ,即总槲皮素
含量高的 ,游离槲皮素的含量也相应较高。根据统
计分析 ,鸡素果型和大红果型槲皮素含量无显著差
异(P <0.05),相比之下 ,其他 3种类型间槲皮素
含量存在显著差异(P >0.05)。表明在矮杨梅种
下可能存在分类阶元 ,它可以划分成 4 个大类 ,即
花脸果型 、白果型和蜡质果型各属一类 ,鸡素果型
和大红果型同属一类。这一结果与谷晓明等[ 5] 用
过氧化物酶同工酶分析的结果基本一致 ,只是后者
将花脸果型与鸡素果型划为一类 。从槲皮素含量
来看 ,花脸果型介于鸡素果型和白果型之间 ,这也
说明该果型矮杨梅与鸡素果型矮杨梅在进化上较
为接近 。目前 ,作为植物分类的参数很多 ,从形态
学 、同工酶酶谱 、植物次生代谢物到 DNA 差异 ,但
是 ,如果只以某一种参数作为植物分类的唯一依
据 ,都将可能得到片面的结果。因此 ,要彻底弄清
矮杨梅种下的分类等级 ,还需要做进一步深入的研
究。
表 2 几种矮杨梅槲皮素含量
矮杨梅类型
Type of Myrica nana
鸡素果型 大红果型 花脸果型 白果型 蜡质果型
游离槲皮素含量(%)
F ree quercetin content
0.0009±0.0002 0.0011±0.0002 0.0051±0.0010 0.0095±0.0012 0.0328±0.0032
总槲皮素含量(%)
Total quereetin content
0.0041±0.0006 0.0060±0.0012 0.0610±0.0034 0.0860±0.0061 0.2140±0.0099
  表 3表明矮杨梅 5 种类型营养期和果期叶中
槲皮素含量的差异。结果显示 ,虽然营养期槲皮素
含量均高于果期 ,但不同类型间槲皮素含量的顺序
不变 ,即营养期和果期槲皮素含量顺序均为腊质杨
梅>白果型>花脸果型>大红果型>鸡素果型。这
(下转第 45页)
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                  贵州师范大学学报(自然科学版)               第 18 卷 
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(上接第 38页)
与表 2数据相吻合 ,因此 ,只要采集的材料处于同
一发育阶段 ,不同类型矮杨梅槲皮素含量的差异是
稳定的 ,它可作为矮杨梅种下等级分类的依据。
表 3 不同时期矮杨梅总槲皮素含量
矮杨梅类型
Type of Carica nana
鸡素果型 大红果型 花脸果型 白果型 腊质果型
营养期
Flower period
0.094±0.005 0.140±0.009 0.190±0.011 0.220±0.015 0.630±0.023
果期
F ruit period
0.004±0.001 0.006±0.001 0.061±0.005 0.086±0.005 0.214±0.018
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 第 4 期        华黎明 ,杨志明:在酸性氯化钠溶液中铜阳极恒电位电流振荡的研究