全 文 ：第 4期 河北林业科技 1 , 9 3年 1 2 月
技大学的舍利默尔校园进行的 。 1 9 8 8年 2 月
份 , 采集大小一致的插穗 (9 英寸 ) 分成 19
组 , 每组 48 根 。 第一组作为对照 ; 第 2~ 4 组
的插穗基部分别削成单斜面 、 双斜面和倒 V
字形切 口 ; 5~ 1 9 组分别用浓度 2 0 0 、 4 0 0 、
60 0
、
8 0 0
、
10 0 0 p p m 的 p引噪乙酸 ( I A A ) 、 蔡 」
乙酸 ( N A A ) 和 p引噪丁酸 ( IB A ) 处理 2 4h ;
对照组和基部不同切 口处理的插穗用蒸馏水
处理 24 h 。 3 月份将插穗插于苗床 , 间距为
2 c0 m X 2 c0 m
。 两个 月后调查记载插穗愈伤组
织 ; 6个 月后记载生根率 、 生根量和根系长
度 。
结果
处理之间插穗愈伤组织有显著差异 。 除
用 10 0 o p p m 的 BI A 及 N A A 处理的插穗没
有生根和 I O 0 0P p m 的 I A A 处理的插穗有极
少量生根外 , 其它各项处理与对照相比 , 生
根率都高的多 。 插穗的平均生根量及根系长
度 和 生 根 率 的情 况 相 似 。 用 2 0 0 、 4 0 0 、
1 0 o o p pm 的 I A A , 8 0 0 p pm 的 N A A , 2 0 0 、 4 0 0
和 6 o 0P p m 的 I B A 以及用三种基部切 口类型
处理的插穗 , 其平均生根量都比对照高 。 其
余处理对生根量有抑制作用 。 用 I Oo 0P p m 的
I A A 和 Zo 0P pm 的 BI A 处理 的插穗平均生
根量最高 ; 用 s o 0P pm 的 I B A 处理的插穗平
均根系最长 (附表 ) 。
讨论
榆树生根困难 。 然而 , 基部削成双斜面
的插穗生根率达 1 6 . 6 % 。 H al * 19 ( 1 9 72 ,
19 7 9) 曾报道根细胞分裂的起动依赖外源或
内源生长素 。 外用生长素象 I A A 、 玲 A 和
N A A
, 在浓度为 2 0 0 p p m 时 , 可使生根率分
别达到 3 7 . 5 0 % 、 3 1 . 2 5%和 2 0 . 8 3 % 。 P r ; d -
h a m ( 1 9 6 4 ) 曾报道美国榆嫩枝插穗适宜用
5 0 p p m 的 IB A 处理 2 4h 。 而 W h a l l e y ( 1 9 7 5 )
曾用 1 5 0 0 p p m 的 IB A 处理采于晚秋 的 U I -
m u : h al la
n dt’ ca 硬枝插穗也获得了 比较好的
结果 。 外用生长素对大部分阔叶树都有促进
生根的作用 。 现在 , 插穗生根受外源或内源
生长素调节已是非常确实的事实 , 生长素对
根系质量包括生根量和根系长度的促进作用
也有记载 , 然而 , 要搞清生长素处理后这些
插穗的变化过程还需要更多的研究 。
参考文献 (略 )
曹书敏译自 《 T h e I n d ia n F r e s t e r 》 一 1 9 9 1 ,
1 1 7 ( 8 )
。
美国榆和榔榆的组织培养
M
a r k G
.
B o l y a r d C
.
S r i n iv a s a n
J i
a n p i n g C h e n g M
a r i a m S t ie k l e n
摘要 将温室栽培的美国榆的叶切片培
养在含有 0 . 1拌m T D Z 的改良 M S 少杏养基上 。
两个月后 , 有 73 % 士 4写的外植体产生 了芽 ,
每个外植体产生 5 . 5士 3 ` 5 个芽 。 在供试实生
苗中 , 其再生潜力没 有差异 。 另外 , 榔榆的
叶外植休有 8 0% 以上也产生 了茶。 T D Z 的化
学名称为 : N 一 苯基一 N ,一 1 , 2 , 3一唾重氮
一 5 `基服 。
在北美 , 美国愉 (lU m u s a m e r i c a n a L · )
几 乎 被 真 菌 病 原 体 你 h ,’rs t, m a “ lm i
( B u t’s m . ) N a n r.lf 引起的榆荷兰病 ( D E D )所
毁灭 。 为预防由榆小蠢传播的这种病害 , 可
用遗传工程导入抗虫基因或把存在于抗性偷
体内的组成未明的 、 内源的抗性组合基因导
入到易感病的愉树体内 。这条途径特别重要 ,
因为美国愉与 D E D 一抗性榆杂交不亲和 。 因
第 4期 河北林业科技 19 9 3年 1 2月
而采用传统育种法至今未把 D E D抗性特征
导入到美国榆体内 。 此外 , D ED 一抗性愉例
如榔愉 ( U lm .vu 尸a 二 ,’of l l’a aJ cq )也遭到其它
天然植食性昆虫 ,象愉绿叶甲 (巧 , .hr al at L “ -
t e o l a lM’ il er ) 的危害 。 植物的遗传工程要求
有离体再生系统 , 例如 , 从叶培养物再生芽 。
对美国榆来说 , 虽然已从未分化培养物中再
生出芽 , 例如细胞悬浮液 、 胚轴引发愈伤组
织培养以及低温冷藏愈伤组织 , 但是 , 目前
还未见从叶组织培养物再生芽的报道 。
T D Z ( N 一苯基一 N , 一 1 , 2 , 3一唾重氮
一 5 ,基脉 )是一种苯脉化合物 , 已被证明呈现
细胞激动素的活性 。 可用于矮牵牛 (尸et “ n t’a
妙乙犷护己口 L . ) 和烟草 ( N I’c o t .la n a r a ba c u m L . )
的叶外植体芽的再生和苹果 (aM坛 , d o m et i-
ca B o r k h) 的枝梢培养物芽的起动 。 与嗦岭基
的细胞分化素类相比 , T D Z 对植物还具有稳
定的长期作用 。 因此 , 本项研究的目的在于
检验 T D Z 对美国榆和榔榆的叶外植体再生
芽的效果 。
从温 室栽培的美国榆或榔愉实生苗上
(6 月龄 , 苗高 15 ~ 2 c0 m ) 采集完全展开的叶
子 ( 自顶端分生组织的第二或第三片叶子 ) ,
在含有 0 . 1%吐温 2 0 的 l , 0 5% N a O C I溶液
中表面消毒 Z o m in 。 把叶切片 (横切到中脉的
sm m 宽的长条 ) 培养在 M a g e n t a G A 一 7 容
器内 (每个容器内 6~ 8 个外植体 ) 。 容器内
盛有附加 (每升 ) 3 0 9 蔗糖 、 Zm g 硫胺素 H C I 、
l o o m g 肌醇 、 0 . 6%的琼脂 、 p H 调至 5 . 6 以
及 0 . 1 、 0 . 5 、 l 或 5拌m T D Z 的 M S ( 1 9 6 2 ) 基
本培养基 。 培养物放在摄氏 25 度 、 平均辐照
度为 3 7u m ol · m 一艺 · s 一 ’ 、 光周期为 16 h 的条
件下培养 , 每 4 个星期转换一次新鲜培养基 。
在初 步 试验 中 , 培养在 含有 0 . 1 ~
1拌m T D Z 培养基上的外植体再生了芽 , 含有
5拼m T D Z 培养基上 的外植体两个星期内死
亡 , 而不含 T D Z 培养基上的外植体没有产生
芽 。 随后 , 用 。 . 1拌m T D Z 做进一步的试验 。 培
养 2 个月后 , 在 3 60 份培养物中 , 有 73 % 士
4%的再生了芽 , 每个叶切片再生 5 . 5士 3 . 5
个芽 . 在分开的试验中 , 从同龄的 10 株实生
苗上采集自茎尖分生组织的第二片叶子 . 培
养在含有 0 . 知 m T D Z 的培养基上来检验 实
生苗间的变异性 。 从每个叶切片再生芽的情
况看 , 在实生苗之间 , 其再生芽的能力方面 了
没有可见变异性 。 而变异性更多地取决于叶
外植体在叶片上的位置 。 叶脉区的外植体再
生芽的能力最强 。 此外 , 再生能力还受叶外
植体被培养的时间以及植株活力的影响 。 当
把 芽子转移到 含有 3 或 5“ m 赤霉素的 M S
培养基上时 , 芽子会迅速伸长 。 在这些完全
伸展的芽子中 , 注意到没有体细胞无性繁殖
系的变异 。 另外 . 在初步试验中 , 培养在含
有 0 . l m g / l 的 I H一引噪一 3一丁酸的 M S 培
养基上的几个芽子生了根 。
培养在含有 0 . 卜m T D Z 的 M S 培养基
上的 7 0 个榔愉叶切片 , 有 84 %的再生了芽 ,
每个外植体产生 20 . 7士 15 个芽 。 对这些芽还
没做生根试验 。
我们已有试验证明 , 从美国榆叶切片可
以再生植株以 及用榔榆叶外植体可 以再生
芽 。 这个系统对于选择的抗 D E D 的美国愉
无性 系的繁殖以及从树龄至少 60 年的树木
上再生芽也是有效的 。 从其它多年生木本植
物的叶培养物中再生芽也有报道 . 例如 : 已
被用于遗传工程的杨树 (银白杨又大齿杨 )和
苹果 (材山l I’s d o m e .fl ic “ B o kr h ) 。 在这里介绍
愉树再生 系统可以促进 D E D 抗性组合基因
导入易感病偷树体内的推广 。 有助于减少愉
荷兰病的传播 。 这个程序对于过去测定的抗
真菌病原体的体细胞无性系变异体的离体选
择和繁殖也是有效的 。
, 书敏译自 《 H o r t cS i e n e e ) 1 99 1 , 2 6 ( 1 2 )
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