全 文 ：野牡丹止痢片的薄层鉴别研究
王 岩1，陈沛玲1，白玉春2，贺登科2，符 健2
(1． 广东药学院，广东 广州 510006;2． 广东南国药业有限公司，广东 湛江 524017)
摘要:目的 建立野牡丹止痢片的薄层鉴别方法。方法 通过对吸附剂、展开剂、显色剂、点样量的优化和对相对湿度、温度等影响因素
的考察，确定最佳的薄层色谱条件。结果 最佳条件为:以硅胶 H为吸附剂，二氯甲烷 －甲酸乙酯 －甲酸(6∶ 3∶ 1)为展开剂，1% FeCl3
乙醇溶液为显色剂，点样量为供试品溶液与对照药材溶液 4 μl、对照品溶液 2 μl;相对湿度、温度对实验结果无明显不良影响。结论
所建立的方法操作简便、分离快速、专属性强、耐用性好，可用于该制剂的质量控制。
关键词:野牡丹止痢片;薄层鉴别;条件优化
中图分类号:R284． 1 文献标志码:A 文章编号:1673 － 4610(2011)01 － 0030 － 03
作者简介:王 岩，副教授，Tel:020 － 39352169，E-mail:gdpuwy@ 126． com
Study on TLC Differentiation of Yemudan Zhili Tablets
WANG Yan1，CHEN Pei-ling1，BAI Yu-chun2，HE Deng-ke2，FU Jian2
(1． Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou，Guangdong 510006，China;
2． Guangdong Nanguo Pharmacy Limited Company，Zhanjiang，Guangdong 524017，China)
Abstract:Objective To establish a differentiation method of Yemudan Zhili tablets by thin layer chromatography (TLC)．
Methods Through the optimization of developing solvent，chromogenic agent，sorbent，dropping amount and investigation of
relative humidity and temperature，the optimum conditions of TLC were confirmed． Results The optimum conditions were as
follow:silica gel H was used as sorbent，methylene dichloride-ethyl formate-formic acid (6∶ 3∶ 1)as developing solvent，and
1% FeCl3 ethanol solution as chromogenic agent． The optimum dropping amounts of the sample，control medicinal
materials，and the control were 4，4，and 2 microlitres，respectively;relative humidity and temperature had no evident
bad influence to the results． Conclusion The method is simple，rapid，specific，and durable． It can be used for the quality
control of the preparation．
Key words:Yemudan Zhili tablets;TLC;condition optimization
野牡丹止痢片是由野牡丹药材制成的单方制剂，
具有清热利湿，收敛止血的功效，用于腹泻、腹痛、疾
痢、便血、消化不良等［1］。野牡丹止痢片收载于部颁药
品标准中药成方制剂第五册。原标准中采用盐酸镁粉
和三氯化铁显色法进行鉴别，专属性不强。为了有效
控制其质量，本研究以其活性成分没食子酸和野牡丹
对照药材为薄层对照，建立了野牡丹止痢片的薄层鉴
别方法。
1 仪器与材料
939 型全自动薄层制板器(重庆市南岸贝尔德仪器
技术厂) ;HH-6 型恒温水浴锅(江苏金坛市宏华仪器
厂) ;定量毛细管(美国 Drummond公司) ;硅胶 G、H(青
岛海洋化工有限公司) ;羧甲基纤维素钠(天津市福晨
化学试剂厂) ;野牡丹对照药材(中国药品生物制品检
定所，批号:121426 － 200601) ;没食子酸对照品(中国
药品生物制品检定所，批号:110831 － 200302) ;野牡丹
止痢片(广东南国药业有限公司，批号:090701、
090801、090901) ;所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2． 1 供试品溶液的制备
取本品 10 片，除去薄膜衣，研细，取 0． 5 g，加水
20 ml，50℃水浴搅拌使溶解，放冷，滤过，滤液用乙酸
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Pharmacy Today ·2011 01 Vol． 21 No． 01·
乙酯 20 ml提取，提取液蒸干，残渣加乙酸乙酯 1ml使
溶解，即得。
2． 2 对照品溶液的制备
取没食子酸对照品 1 mg，加乙酸乙酯制成浓度为 1
mg /ml的溶液，摇匀，即得。
2． 3 对照药材溶液的制备
取野牡丹对照药材 1 g，加水煎煮 1 h，放冷，滤过，
滤液浓缩至约 20 ml，用乙酸乙酯 20 ml提取，提取液蒸
干，残渣加乙酸乙酯 1 ml使溶解，即得。
2． 4 薄层色谱条件
2． 4． 1 展开剂与显色剂的选择 采用硅胶 G薄层板，
考察不同展开系统的分离效果，展距约为 7 ～ 8 cm。考
察的展开剂有:甲苯 －甲酸乙酯 －甲酸(6∶ 3∶ 1;4∶ 3∶ 3)、
正丁醇 －冰醋酸 －水(7∶ 1∶ 2;8∶ 1∶ 1)、三氯甲烷 －丙酮 －甲
酸(7∶ 2∶ 1)、三氯甲烷 －乙酸乙酯 －甲酸(5∶ 4∶ 1;6∶ 4∶ 1)、
1，2 －二氯乙烷 －乙酸乙酯 －甲酸(6∶ 4∶ 1)、石油醚(30
～ 60℃)－ 乙酸乙酯 － 甲酸(6 ∶ 4 ∶ 1)、石油醚(60 ～
90℃)－乙酸乙酯 －甲酸(5∶ 4∶ 1)、二氯甲烷∶乙酸乙酯
∶甲酸(6∶ 4∶ 1)、二氯甲烷 －甲酸乙酯 －甲酸(6∶ 4∶ 1) ，
结果以三氯甲烷 －乙酸乙酯 －甲酸(5∶ 4 ∶ 1)与二氯甲
烷 －甲酸乙酯 －甲酸(6∶ 4∶ 1)的分离效果较好。
考虑到三氯甲烷的毒性问题，确定选用二氯甲烷
－甲酸乙酯 －甲酸系统。并进一步对该系统的比例进
行了优化，考察的比例有6∶ 4∶ 1、6∶ 3∶ 1、10∶ 5∶ 2、11∶ 6∶ 2。
结果表明，展开剂比例为6∶ 3 ∶ 1时，主成分没食子酸斑
点的 Rf值适中(0． 3 ～ 0． 4) ，且分离效果最佳。同时比
较了1% FeCl3乙醇溶液喷雾与氨气熏蒸15 min 2种显
色方法，结果表明为1% FeCl3乙醇溶液显色清晰，特征
斑点丰富，干扰较少。
2． 4． 2 吸附剂与点样量的选择 以 0． 4% CMC-Na 溶
液为黏合剂，分别制备硅胶 G 板、硅胶 H 板，在选定的
薄层条件下，考察斑点的分离度和拖尾情况;并采用定
量毛细管，分别吸取各样液 2、3、4 μl，以圆点状接触式
点样，比较薄层展开效果。结果表明，最佳点样量确定
为:供试品溶液和对照药材溶液 4 μl，对照品溶液 2 μl;
硅胶 G板重现性不佳，且斑点不集中，除主斑点外的
其余斑点不清晰，而硅胶 H 板 Rf 值适中，斑点较集
中，主斑点无拖尾情况，分离效果明显好于硅胶 G 板
(见图 1)。
图 1 不同吸附剂 TLC图
A．硅胶 G板;B．硅胶 H板;1 ～ 3．样品;4．对照药材;5．对照品
2． 5 影响因素考察
利用不同浓度(68%、34%、10． 8%)硫酸溶液制造
不同的相对湿度(32%、65%、88%)环境，即在双槽层
析缸的一侧槽中加入硫酸溶液，将点样后的薄层板放
入另一侧槽中，密闭放置 30 min，再加展开剂于不含硫
酸溶液的槽中展开，环境温度为 20℃，观察展开剂在 3
种不同相对湿度下的展开情况。另外分别在相对湿度
65%环境中，考察不同温度(4、20 和 35℃)对分离效果
的影响。结果斑点的 Rf 值随着相对湿度与温度的升
高而略有增加，没食子酸的 Rf 值在 0． 33 ～ 0． 42 间波
动，但对各成分的分离度影响不大，表明本法对实验条
件具有良好的耐用性(见图 2)。
图 2 影响因素考察 TLC图
A． 4℃、RH 65%;B． 20℃、RH 65%;C． 35℃、RH 65%;D． 20℃、RH 32%;E． 20℃、RH 88%;1 ～ 3．样品;4．对照药材;5．对照品
2． 6 专属性试验
按制备工艺制成不含野牡丹药材的样品，再按供
试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。分别吸取供
试品溶液 4 μl、对照药材溶液 4 μl、对照品溶液 2 μl、阴
性对照溶液 4 μl，点样，展开，喷以 1% FeCl3 乙醇溶液
显色。结果在供试品色谱中，在与对照药材、对照品色
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·2011 年 01 月第 21 卷第 01 期· 今日药学
谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干
扰。表明本法具有良好的专属性(见图 3)。
图 3 专属性试验 TLC图
1 ～ 3．样品;4．对照药材;5．对照品;6．阴性对照
3 讨论
野牡丹的止泻活性物质主要为鞣质类成分［2］，而
没食子酸为鞣质的水解产物，故以其为鉴别指标成分。
没食子酸的极性较大，易溶于甲醇、乙酸乙酯，实验中
曾采用上述 2 种溶剂对样品超声提取，结果发现，以甲
醇为溶剂提取时，供试品溶液的黏性太强，点样困难。
而用乙酸乙酯直接提取，供试品溶液斑点出现拖尾，分
离不佳。故先将样品用水溶解，再用乙酸乙酯进行提
取。结果表明，本文建立的方法操作简便、分离快速、
专属性强、耐用性好，可用于该制剂的质量控制。
参考文献
［1］卫生部药品标准［S］． 中药成方制剂(第五册) ，1992:
159．
［2］刘慧，符健． 野牡丹的研究进展［J］． 中医药导报，2008，
14(12) :90 － 91．
(收稿日期 2010 － 10 － 14
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参考文献
［1］ Serajuddin AT． Solid dispersion of poorly water-soluble
drugs:early promises，subsequent problems，and recent
breakthroughs［J］． J Pharm Sci，1999，88(10) :1058 －
1066．
［2］Hancock BC，Parks M． What is the true solubility advantage
for amorphous pharmaceuticals［J］． Pharm Res，2000，17
(4) :397 － 404．
［3］ Schultheiss N，Newman A． Pharmaceutical cocrystals and
their physicochemical properties ［J］． Cryst Growth Des，
2009，9(6) :2950 － 2967．
［4］Seefeld K，Miller J，Alvarez-Nunez F，et al． Crystallization
pathways and kinetics of carbamazepine-nicotinamide co-
crystals from the amorphous state by in situ thermomicrosco-
py，spectroscopy and calorimetry studies ［J］． J Pharm
Sci，2007，96(5) :1147 － 1158．
［5］Rodríguez-Spong B，Zocharski P，Billups J，et al． Enhan-
cing the pharmaceutical behavior of carbamazepine through
the formation of cocrystals［J］． AAPS Pharm Sci，2003，5
(51) :M1298．
［6］Vasconcelos T，Sarmento B，Costa P． Solid dispersions as
strategy to improve oral bioavailability of poor water soluble
drugs［J］． Drug Discov Today，2007，12(23 － 24) :1068
－ 1075．
［7］ Ugaonkar S，Nunes AC，Needham TE． Effect of n-scCO
(2)on crystalline to amorphous conversion of carbamaz-
epine［J］． Int J Pharm，2007，333(1 － 2) :152 － 161．
［8］Grzesiak AL，Lang M，Kim K，et al，Comparison of the
four anhydrous polymorphs of carbamazepine and the crystal
structure of form I［J］． J Pharm Sci，2003，92(18) :2260
－ 2271．
［9］ Porter WW，Elie SC，Matzger AJ． Polymorphism in car-
bamazepine cocrystals ［J］． Cryst Growth Des，2008，8
(1) :14 － 16．
［10］Chieng N，Hubert M，Saville D，et al． Formation kinetics
and stability of carbamazepine-nicotinamide cocrystals pre-
pared by mechanical activation ［J］． Cryst Growth Des，
2009，9(5) :2377 － 2386．
［11］ Suzuki H，Sunada H． Comparison of nicotinamide ethyl-
urea and polyethylene glycol as carriers for nifedipine solid
dispersion systems ［J］． Chem Pharm Bull，1997，45
(1) :1688 － 1693．
［12］Suzuki H，Sunada H． Influence of water-soluble polymers
on the dissolution of nifedipine solid dispersions with com-
bined carriers［J］． Chem Pharm Bull，1998，46(3) :482
－ 487．
(收稿日期:2010 － 09 － 15)
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