全 文 ：收稿日期:2009-02-27;　修订日期:2009-10-15
基金项目:贵州省中医药管理局资助项目
作者简介:吴大梅(1979-),女(汉族),贵州织金人 ,现任贵阳中医学院基
础部中医基础实验室讲师 ,硕士学位 ,主要从事中医基础理论与实验研究
工作.
＊通讯作者简介:俞昌琪(1949-), 女(汉族),浙江绍兴人 , 现任贵阳中医
学院生化教研室副教授 ,硕士研究生导师 ,主要从事心血管疾病的防治研
究工作.
野葡萄根 、猕猴桃根对高脂血症大鼠
血脂等影响的实验研究
吴大梅 ,万安霞 ,杨长福 ,张小容 ,樊同涛 ,徐中贵 ,俞昌琪＊
(贵阳中医学院 ,贵州 贵阳　550002)
摘要:目的 观察高脂血症大鼠应用野葡萄根 、猕猴桃根治疗后血清中血脂的变化及一氧化氮(NO)和内皮素(ET)的水
平 , 以探讨野葡萄根 、猕猴桃根治疗高脂血症的机理。方法 将 55只雄性 Wistar大鼠随机分为正常对照组 ,高脂模型组 ,
野葡萄根 、猕猴桃根组 [ 8 g/(kg· d)] 、复方葡猕汤组 [ 11 g/(kg· d)]和辛伐他汀组 [ 0.1 mg/(kg· d)] , 每组 11只 ,观察
6周。实验中监测各组大鼠血脂及血清中 NO和 ET的含量。结果 野葡萄根 、猕猴桃根治疗组的血脂水平较高脂模型组
明显降低(P< 0.05);血清中 NO明显升高 , 而 ET含量明显降低(P<0.05, P<0.01)。结论 野葡萄根 、猕猴桃根能明
显降低血脂 , 提高血清中的 NO水平并降低 ET的水平。 NO和 ET的变化可能是其保护高脂血症大鼠血管内皮功能的重
要机制之一 , 证实野葡萄根 、猕猴桃根在治疗高脂血症及高血压病过程中起到一定的作用。
关键词:野葡萄根;　猕猴桃根;　高脂血症;　一氧化氮;　内皮素
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2010)01-0083-02
ExperimentalStudyontheEffectofWildGrapeRoot、KiwiRootonNitricOxideandEn-
dothelininHyperlipidemiaRats
WUDa-mei, WANAn-xia, YANGChang-fu,ZHANGXiao-rong,FANTong-tao,XUZhong-gui, YUChang-qi＊
(GuiyangColegeofTraditionalChineseMedicine, Guiyang550002)
Abstract:ObjectiveToevaluatethechangesofserumlipids、 nitricoxide(NO)andendothelin(ET)aftertreatmentwithwild
graperootandKiwirootinratsfedwithhypercholesterolemulsion.Methods 55 maleWistarratswererandomlydividedinto
controlgroup(n=11 , normaldiet), hyperlipidemiagroup(n=11 , high-cholesterolemulsion)andChinesemedicine
group(everygroupn=11, high-cholesterolemulsionpluscorrespondingChinesemedicine:(8g/kg/d, 11g/kg/d, ).West-
ernmedicinegroup(n=8 , high-cholesterolemulsionplussimvastatin).During6weeksoftheexperiment, serumlipidswere
comparedamongthe5 groups., thelevelsofNOandETinserumwerealsomeasured.ResultsAfter6 weeksoftreatmentwith
YePutaorootandKiwiroot, thelevelsofserumlipidswerealldecreasedascomparedwithhyperlipidemiagroup(allP<
0.05);theNOlevelinserumwasincreasedsignificantly, whiletheETlevelwasmarkedlydecreasedascomparedwithhyperlip-
idemiagroup(P< 0.05, 0.01).Conclusion Wildgraperoot、Kiwirootcouldefectivelydecreasethelevelofserumlipids,
increaseNOanddecreaseET.ThechangesofNOandETmayplayaroleintheprogressofhyperlipidemia.Itconfirmedthat
wildgraperootandKiwiroothavecertainefectonthehyperlipidemiaandhypertension.
Keywords:Wildgraperoot;　Kiwiroot;　Hyperlipidemia;　Nitricoxide;　Endothelin
　　据调查 , 民间用野葡萄根 、猕猴桃根 、葛根治疗高脂血症及高
血压病 , 并取得一定疗效。葛根为常用中药 , 具有扩血管 、促进微
循环作用 , 而野葡萄根 、猕猴桃根为贵州苗药 ,它们在治疗过程中
有何作用尚未见报道。为探索这两味药材治疗高脂血症的机理 ,
我们对高脂血症大鼠用相关的各种药物进行治疗 ,并观察治疗后
大鼠血清中 TC、TG浓度的变化 ,比较治疗前后各组大鼠血清中
ET、NO的含量。现报道如下。
1 　材料与方法
1.1　药物 、试剂 、仪器 复方葡猕汤为民间验方 , 由野葡萄根 、猕
猴桃根 、葛根等组成;葡猕汤组成:野葡萄根 、猕猴桃根。 药材均
购于贵阳市药材公司 , 按传统方法煎煮过滤 , 4℃冰箱保存备用。
胆固醇(上海山浦化工有限公司);三号胆盐(杭州微生物试剂有
限公司);丙硫氧嘧啶片(上海复星朝晖药业有限公司);吐温 -
80(重庆川江化学试剂厂);总胆固醇(TC)试剂盒(温州津玛生
物科技有限公司);甘油三脂(TG)试剂盒(温州津玛生物科技有
限公司);一氧化氮试剂盒(南京建成生物工程研究所);内皮素
试剂盒(上海卓康生物科技有限公司)。 全自动生化分析仪
(GLAMOUR1600),阿根廷 S.A公司;分光光度计(721B), 上海精
密仪器仪表公司;普通离心机(TDL-5A), 湖南星科科学仪器有
限公司;低速自动平衡微型离心机(LD24-0.8A),北京医用离心
机厂;自动酶标读数仪(ELx808IU), 美国 BioTek;二氧化碳培养
箱(LRH-250A), 广东医疗器械厂;鼓风干燥箱(型号:101-1),
上海实验仪器总厂;恒温水浴锅(HH-S), 江苏振兴仪器厂;电
子天平(JA5003), 上海天平仪器厂。
1.2　动物来源 、分组 、给药 健康雄性 Wistar老龄大鼠 55只 , 体
质量(300±20)g, 由贵阳中医学院实验动物研究所提供。适应性
饲养 1周后 , 随机分为 5组 ,每组 11只 ,分别为:正常空白对照组
(简称正常对照组), 高脂乳剂模型组(简称高脂模型组),野葡萄
根 、猕猴桃根组 [ 8g/(kg· d), 简称葡猕组 ] , 复方葡猕汤组 [ 11g/
(kg· d), 简称复方组 ] , 辛伐他汀组 [ 0.1mg/(kg· d), 简称西药
组 ] 。除正常对照组外 , 余各组造模。造模成功后 , 给药组每天
分别灌胃相应浓度药物 3ml/300g;正常对照组 、模型组灌胃 3ml/
(300g· d)的生理盐水。 6周后做各项指标检测。在实验过程
中 , 有 7只大鼠因灌胃不当及腹泻原因死亡 , 高脂模型组 、复方组
各 2只 , 葡猕组 、对照组及辛伐他汀组各 1只。
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.1 时珍国医国药 2010年第 21卷第 1期
1.3　造模方法 参照文献 [ 1]方法制备高脂乳剂 ,即 6%胆固醇 、
15%猪油 、 2%胆盐 、 0.2%甲基硫氧嘧啶 、 20%吐温 -80加水至
100%制成脂肪乳。除正常对照组外 , 其余各组均以高脂乳剂
[ 10ml/(kg· d)]灌胃 , 1次 /d, 连续灌服 2周 , 建立高脂血症模
型。在明确造模成功后 , 给药组分别灌服相应浓度药物 3ml/
(300g· d);正常对照组 、模型组灌胃 3ml/(300g· d)的生理盐
水。 6周后 ,各组动物股动脉取血 ,依据所测指标作不同的处理 ,
分离血清 , 分别测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、一氧化
氮(NO)、内皮素(ET)的含量 。
1.4　实验室检测
1.4.1　血液样品的采集与处理 灌药 4周 ,各组大鼠末次给药后
禁食 12h,股动脉取血 , 分别装入 10 ml塑料离心管中 , 用离心机
3 000r/min离心 10 min,分别吸取血清 ,做好标记 , -20℃保存待
测。
1.4.2　检测方法 血脂的检测:TG、TC检测采用酶法。
血清 NO、ET的检测:NO含量的检测采用硝酸还原酶法;ET
含量的检测采用酶联免疫法;血清 NO、ET的检测严格按照试剂
盒说明书操作。
1.5　统计学处理 用 SPSS11.5统计软件进行数据处理 , 实验结
果以 x±s表示 , 组间比较采用单因素方差分析(经检验 , 符合正
态分布和满足方差齐性 ,选用 LSD法), 以 P<0.05为有统计学
意义。
2 　结果
2.1　实验大鼠造模前后体质量的变化情况 见表 1。从表 1中
可以看出造模前对照组与各组之间无明显差异(P﹥ 0.05);造
模后对照组与其余各组均有明显差异(P<0.05)。说明给大鼠
灌服高脂乳剂后体质量明显增加。
表 1　实验大鼠造模前后体质量的变化情况( x±s)
组别 例数 体质量 /g造模前 造模后
正常对照 10 270.3±11.24 278.37±21.53
高脂模型 9 283.1±11.25■ 334.57±61.11﹡
西药 10 290.5±10.43■ 325.83±42.16﹡
葡猕 10 295.7±10.32■ 327.28±16.76﹡
复方 9 287.7±10.41■ 330.23±24.25﹡
　　造模前与对照组比较 , ■P﹥ 0.05;造模后与对照组比较 , ＊P<
0.05
2.2　实验大鼠血脂各指标变化情况 见表 2。 由表 2统计分析
表明 , 实验 2周时与同期对照组比较 ,模型组 、西药组 、复方组 、葡
猕组血清 TC、TG值均明显升高(P<0.05)。实验结束(6周)时 ,
与同期高脂组比较正常对照组 、西药组 、复方组 、葡猕组血清 TC、
TG明显降低(P<0.05, P<0.01);西药组 、复方组 、葡猕组 3组
比较 , 治疗前后血清 TC的差值为:葡猕组﹥西药组﹥复方组 ,血
清 TG的差值为:西药组﹥葡猕组﹥复方组 , 但均无差异(P﹥
0.05)。由此可以看出 , 中药葡猕组和复方组均能使血清 TC、TG
明显降低。西药组也能使血清 TC、TG明显降低 , 与葡猕组无差
异。
表 2　实验大鼠血脂各指标变化情况( x±s)mmol· L-1
组别 TC
2周 6周
TG
2周 6周
对照 1.17±0.13 1.27±0.06 0.24±0.07 0.30±0.05
高脂模型 1.90±0.08﹡﹡ 1.98±0.25﹡﹡ 0.51±0.08﹡﹡ 0.58±0.15﹡﹡
西药 1.61±0.19﹡﹡ 1.54±0.50■■ 0.37±0.10﹡﹡ 0.32±0.07■■
葡猕 1.75±0.20﹡﹡ 1.63±0.09■ 0.35±0.11﹡ 0.32±0.13■■
复方 1.52±0.53﹡ 1.48±0.33■■ 0.35±0.07﹡ 0.33±0.09■■
　　造模前与对照组比较 , ■P﹥ 0.05;造模后与对照组比较:＊P<0.05
2.3 　实验大鼠血清中 NO和 ET含量变化 见表 3。从表 3中可
以看出 , 高脂组血清一氧化氮(NO)的含量低于对照组和治疗组 ,
但除了与葡猕组有明显差异(P<0.05), 其余各组之间两两比较
均无统计学意义;与高脂组比较 , 葡猕组 ET含量显著降低(P<
0.01), 西药组 、复方组 ET含量明显降低(P<0.05)。葡猕组能
明显升高 NO含量 ,还能显著降低 ET含量 , 西药组也能有效降低
ET含量。
表 3　实验大鼠血清中 NO和 ET含量( x±s)
组别 例数 NO/μmol· L-1 ET/ng· ml-1
正常对照 10 20.60±5.19 540.98±116.10
高脂模型 9 19.18±1.67 641.56±87.81＊
西药 10 22.55±4.66 498.60±83.57■
葡猕 10 25.00±6.61■ 463.80±0.09■■
复方 9 19.90±2.72 526.35±60.75■
　　与对照组比较:＊P< 0.05, ＊＊P< 0.01 ;与高脂组比较 , ■P<
0.05, ■■ P< 0.01
3　讨论
本研究观察到在给大鼠灌高脂乳剂 14 d后 , 与正常组相比 ,
其余各组大鼠体质量及大鼠血清中 TC、TG都明显升高(P<
0.05), 与文献报道 [ 2]基本相符 , 证实高脂血症大鼠模型制作成
功。
经进一步的实验研究证实:野葡萄根 、猕猴桃根不仅能降低
高脂血症大鼠血清中的 TC和 TG(P<0.01)。同时 , 还能明显降
低血清中 ET的含量(P<0.01)和提高血清中的 NO水平。
现已证实 ,许多疾病的发生 、发展与血脂过高及 NO和 ET水
平变化有关。如:杨斌等 [ 3]曾报道高脂血症 、原发性高血压 、糖
尿病是冠状动脉粥样硬化的危险因素 , NO和 ET与冠状动脉粥
样硬化的形成和发展有着密切的关系;赵玉芳等 [ 4]认为 NO、ET
在脑梗死的发生 、发展中具有一定作用 , 并与高血脂 、高血压病 、
冠心病 、糖尿病存在一定关系 , ET含量变化与病情有关。陈颖
等 [ 5]认为 , NO、ET的平衡失调是引起和加重高血压病的主要原
因。因此观察 NO和 ET在病程中的变化尤为重要。
近年众多研究表明 ,高脂血症是血管内皮结构功能损伤的根
本因素 ,而血管内皮损伤后 , 一方面 , 可导致血中 ET增高 、NO降
低。 ET和 NO是一对重要的血管舒缩物质 , 它们的平衡失调是
引起和加重高血压的主要因素。 ET是迄今为止发现的作用最强
的缩血管多肽 ,可以使血流减慢 , 促进血栓的形成。 NO是血管内
皮细胞分泌的血管活性物质 , 具有很强的舒血管及抗血小板聚
集 、抗血栓形成的作用 , 可保护血管内皮细胞;另一方面 , 引发脂
质浸润 ,导致动脉粥样硬化(AS)。 NO作为一种抗细胞增殖因
子 , ET作为促细胞增殖因子参与了多种疾病的发生 、发展 。
本研究发现应用野葡萄根 、猕猴桃根治疗后 , 血脂水平明显
下降 , 血清中 NO明显升高 , 而 ET含量明显降低。可见野葡萄
根 、猕猴桃根除有降脂作用外 , 还能提高血清 NO水平并降低 ET
的水平 , 从而证实野葡萄根 、猕猴桃根在治疗高脂血症及高血压
病过程中起到一定的作用。
参考文献:
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比较 [ J] .中国药理学通报 , 2007, 23(9):1254.
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研究 [ J] .中国实验方剂学杂志 , 2007, 13(5):24.
[ 3 ] 　杨　斌 ,赵宝珍 ,江时森 ,等.冠状动脉粥样硬化与脂质过氧化损伤
和血管内皮功能之间的关系 [ J] .医学研究生学报 , 2004, 15(1):
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[ 4 ] 　赵玉芳 ,江晓津 ,张　英 ,等.急性脑梗死患者血中一氧化氮 、内皮
素 、 6-酮 -前列腺素浓度测定及意义 [ J] .卒中与神经疾病 , 2005,
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时珍国医国药 2010年第 21卷第 1期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.1