全 文 ：［收稿日期］ 20110212(003)
［第一作者］ 刘燕，硕士，副教授，研究方向:药物分析，Tel:
0758-2857607，E-mail:liuyan630117@ 163． com
野牡丹中槲皮素的测定
刘燕，唐铁鑫
(肇庆医学高等专科学校，广东 肇庆 526020)
［摘要］ 目的:建立野牡丹主要成分的含量测定方法。方法: 样品加入甲醇-25%盐酸溶液(4∶ 1)混合溶液进行水解，采
用 RP-HPLC 方法测定水解后产生的槲皮素。色谱柱为 Shimpack VP-ODS(4. 6 mm × 150 mm，5 μm)C18，以甲醇-0. 4%磷酸水
溶液(50∶ 50)为流动相，流速为 1. 0 mL·min －1，检测波长为 360 nm。结果:槲皮素在 21. 2 ～ 169. 6 μg·mL －1线性关系良好(r =0. 999 5)，
平均回收率为 96. 3%，RSD 1. 54%。结论: 方法简便、准确，可靠，可用于野牡丹中槲皮素的含量测定。
［关键词］ 野牡丹;槲皮素;反相高效液相色谱;含量测定
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2011)12-0085-00
Assay of Quercetin in Melastoma candidum
LIU Yan，TANG Tie-xin
(Zhaoqing Medical College，Zhaoqing 526060，China)
［Abstract］ Objective:Established a assay method for the content of active component in Melastoma
candidum ． Method:The raw materials was hydrolyzed by adding methanol-25% hydrachloride aqeous solution (4∶ 1)
mixture and the result quercetin in the solution was assayed RP-HPLC method． Shimpack VP-ODS(4. 6 mm × 150
mm，5 μm) C18 column was used，the mobile phase was methanol-0. 4% phosphoric acid aqueous solution
(50∶ 50)，the flow rate was 1. 0 mL·min － 1，and the detection wavelength was 360 nm． Result:The calibration curve
of quercetin was linear in 21. 2-169. 6 mg·L － 1(r = 0. 999 5)． The average recovery is 96. 3%，and its RSD was
1. 54% ． Conclusion:The method was convenient，accurate and of good recovery and was effective for the assay of
quercetin in M． candidum．
［Key words］ Melastoma candidum;quercetin;RP-HPLC;assay
野牡丹 Melastoma candidum D． Don 性凉、味酸
涩，具有清热解毒、利湿消肿等功效，主治肠炎、痢疾
等疾病［1］，是野牡丹止痢片和野牡丹颗粒的原
料［2-3］;抗菌实验、药效学实验表明野牡丹口服液体
外对痢疾杆菌和大肠杆菌均有抑制作用，对离体兔
肠的蠕动有明显抑制作用，对蓖麻油和番泄叶引起
的刺激性腹泻均有抑制作用［4-5］。野牡丹中槲皮苷、
异槲皮苷、槲皮素、芦丁等黄酮类成分有明显的单胺
氧化酶 B 拮抗作用和自由基清除活性［6］。野牡丹
药材没有国家质量标准，不利于药材的质量控制，本
法为野牡丹质量控制提供一定依据。
1 仪器与试药
LC-10AT vp 高效液相色谱泵，SPD-10A vp 紫
外-可见检测器，Shimpack VP-ODS(4. 6 mm × 150
mm，5 μm)C18色谱柱，日本岛津公司;N2010 色谱工
作站(浙江大学智达信息工程有限公司);FA1104 电
子天平(上海精密科学仪器有限公司);25 μL 微量
注射器(澳大利亚 Hamilton 公司);野牡丹药材采自
肇庆北岭山下，经唐铁鑫鉴定为 M． candidum;槲皮
素(中 国 药 品 生 物 制 品 检 定 所，批 号 100081-
200406)，色谱纯甲醇(天津市四友生物医学技术有
限公司)，水为重蒸水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 Shimpack VP-ODS C18色谱柱(4. 6
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2011 年 6 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 17，No． 12
Jun．，2011
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2011.12.061
mm × 150 mm，5 μm)，流动相甲醇-0. 4% 磷酸水溶
液(50∶ 50)，流速 1. 0 mL·min － 1，检测波长 360 nm。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取槲皮素对照品
适量，置 50 mL 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，制成每
1 mL 含 212 μg 的溶液作为对照品贮备液。再精密
吸取 0. 5，1. 0，1. 5，2. 0，3. 0，4. 0 mL 至 5 mL 的量瓶
中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得到系列对照品溶液。
2. 3 样品溶液和空白溶液的制备 取野牡丹药材
粗粉约 0. 5 g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲
醇-25%盐酸溶液(4∶ 1)混合溶液 50 mL，称定质量，
加热回流 1 h，放冷，再称定质量，用甲醇-25% 盐酸
溶液(4∶ 1)混合溶液补足减失的质量，摇匀，用 0. 45
μm 微孔滤膜滤过，即得。另外，取溶剂甲醇-25%盐
酸溶液(4∶ 1)混合溶液做空白。
2. 4 专属性和系统适应性试验 取对照品溶液、样
品溶液、空白溶液按 2. 1 色谱条件分别进样5 μL，记
录色谱图，见图 1。空白溶液色谱在样品色谱图槲
皮素峰位置处无干扰，理论塔板数达 7 000 以上，与
前后峰的分离度大于 2，拖尾因子为 1. 170。
图地 1 野牡丹中槲皮素 HPLC
A． 对照品;B．供试品;C．空白溶液;1. 槲皮素
2. 5 线性关系考察 精密吸取 2. 2 对照品溶液，按
2. 1 色谱条件进样，测定峰面积积分值，以浓度(Y)
为纵坐标，以峰面积(X)为横坐标进行线性回归，得
回归 方 程 为 Y = 1. 046 1 × 104X － 2. 60 × 105
(r = 0. 999 5)。槲皮素在 21. 2 ～ 169. 6 mg·L － 1呈良
好的线性关系。
2. 6 精密度 取样品溶液连续进样 6 次，按上述色
谱条件测定峰面积，结果峰面积的 RSD 1. 83%，表
明仪器的精密度良好。
2. 7 稳定性试验 取同一份样品溶液，分别在第
0，1，2，4，6，8 h 按上述色谱条件分别测定峰面积，并
计算含量，结果 RSD 2. 29%，表明样品液在 8 h内
稳定。
2. 8 重复现性试验 取同一批样品 6 份，按样品溶
液制备方法制备供试品溶液，按上述方法测定，结
果，样品中槲皮素质量分数 0. 443 3%，RSD 2. 46%，
表明方法重复性良好。
2. 9 加样回收率试验 精密称取药材粉末(测得槲
皮素含量为 4. 427 mg·g － 1)6 份，置锥形瓶中，精密
加入槲皮素对照品贮备液(212 mg·L － 1，5 mL)，减
压干燥器中挥去溶剂，精密加入甲醇-25%盐酸溶液
(4∶ 1)混合溶液 25 mL，称定质量，加热回流 1 h，放
冷，再称定质量，用甲醇-25% 盐酸溶液(4 ∶ 1)混合
溶液补足减失的质量，摇匀，用 0. 45 μm 微孔滤膜滤
过，同样品溶液方法测定。结果见表 1。
表 1 槲皮素加样回收率试验
No．
称样量
/ g
样品中含量
/μg
加入量
/μg
测得量
/μg
回收率
/%
平均值
/%
RSD
/%
1 0． 248 2 1 098． 8 1 060 2 107． 7 95． 18
2 0． 249 1 1 102． 8 1 060 2 131． 5 97． 05
3 0． 249 5 1 104． 5 1 060 2 118． 6 95． 67
96． 3 1． 544 0． 252 2 1 116． 5 1 060 2 129． 7 95． 58
5 0． 248 7 1 101． 0 1 060 2 108． 4 95． 04
6 0． 248 9 1 101． 9 1 060 2 151． 7 99． 04
2. 10 样品测定 取不同地点的 3 批野牡丹样品，
按前面的样品制备和含量测定方法测定，含量分别
为 0. 381 5%，0. 354 2%，0. 437 8%。
3 讨论
芦丁、槲皮苷都是槲皮素的衍生物。在前期试
验中，直接测定野牡丹中芦丁、槲皮苷，杂质峰的峰
高和峰面积很大，芦丁和槲皮苷不能与杂质分离;直
接测定槲皮素，含量太低，只有 0. 017%。这几个成
分不能单独代表野牡丹的活性成分含量。因此参考
《中国药典》的质量标准［7］测定它们水解后产生的
苷元槲皮素。水解溶剂类型和用量、加热条件均参
照文献［9］，对提取时间进行了考察，分别回流 30，
45，60，85，90 min，结果回流 60 min 组含量最高，确
定回流时间为 1 h。槲皮素的高效液相色谱条件较
成熟，因此直接参照文献，系统适应性试验结果表明
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中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 17，No． 12
Jun．，2011
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方法的分离效果良好。
野牡丹水解后测定槲皮素，测得含量较高，色谱
分离效果好，方法学验证结果符合要求，因此该方法
适用于野牡丹的含量测定评价。
［参考文献］
［1］ 国家医药管理局《中华本草》编委会 ． 中华本草 ． 第 5
卷 ．［M］．上海:上海科技出版社，2000:675.
［2］ 中华人民共和国卫生部药品标准 ． 中药成方制剂 ． 第
14 册［S］． 152. WS3-B-2779-97.
［3］ 中华人民共和国卫生部药品标准 ． 中药成方制剂 ． 第 5
册［S］． 159. WS3-B-1022-91.
［4］ 林丽英，湛文青，饶春意 ． 野牡丹止痢片微生物限度检
查法的建立［J］． 中药材，2006，29(3):299.
［5］ 黄国栋，吴怡，黄荣林，等 ．野牡丹口服液的抗菌抗腹泻
作用研究［J］．中药材，1994，17(10):36.
［6］ Lee Mei-Hsien，Lin Rong-Dih，Shen Lee-Yen，et al．
Monoamine oxidase B and free radical scavenging
activities of natural flavonoids in Melastoma candidum D．
Don［J］． J Agricul Food Chem，2001，49 (11):5551.
［7］ 中国药典 ．一部［S］． 2005:6，49，149.
［责任编辑 蔡仲德］
［收稿日期］ 2010-12-13
［基金项目］ 广西自然科学基金项目(2010GXNSFA013050)
［通讯作者］ * 苏秀芳，副教授，硕士，研究方向:天然产物活性成分的提取、分离、分析及药理活性，Tel:13471121425，E-mail:suxiufang_88
@ sina． com
细叶黄皮各器官挥发油的化学成分
苏秀芳1* ，梁振益2
(1．广西民族师范学院化学与生物工程系，广西 崇左 532200;
2．海南大学材料与化工学院，海口 570228)
［摘要］ 目的:分析研究细叶黄皮植物挥发油的化学成分。方法:采用水蒸气蒸馏法从细叶黄皮各器官中提取挥发油，用
气相色谱-质谱联用技术对挥发油化学成分进行分析。结果:细叶黄皮茎、根、叶、果实及花挥发油的共有化合物为 4-甲氧基-6-
(2-丙烯基)-1，3-苯并二恶茂，质量分数分别为 32. 89%，38． 09%，28． 97%，58． 40%，100. 00%。化合物的主要类型为芳香类、
烯类、烷烃类及酸类。结论:研究了细叶黄皮各器官挥发油的化学成分，为合理开发和利用细叶黄皮资源提供了依据。
［关键词］ 细叶黄皮;挥发油;气相色谱-质谱联用技术
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2011)12-0087-03
Chemical Constituents of Essential Oil of
Different Organs from Clausena anisum-olens
SU Xiu-fang1* ，LIANG Zhen-yi2
(1 ． Department of Chemistry and Biological Engineering，Guangxi Normal Universty for Nationalities，Congzuo
532200，China;2 ． Hainan University，Science and Technology College，Haikou 570228，China)
［Abstract］ Objective:To analyze the chemical constituents of essential oil from the plant of Clausena
anisum-olens． Method:The essential oil was extracted from C． anisum-olens by steam distillation and analyzed by
GC-MS． Result:Essential oil from stems，roots，leaves，fruits and flowers contain 4-methoxy-6-(2-propenyl)-1，3-
benzodioxole，which respective accounted of the essential oil for 32. 89%，38． 09%，28． 97%，58． 40% and
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2011 年 6 月
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