全 文 ：[ 收稿日期] 　2005-01-19
[ 通讯作者] 　黄一平 , Tel:(025)85637809;E-mail:yipingh@163.
com
楮叶体外抗真菌作用的实验研究
黄一平＊ ,卞美广 ,朱黎明
(江苏省中医药研究院 江苏省现代中药制剂工程技术研究中心 ,江苏南京　210028)
　　[ 摘要] 　目的:研究楮叶提取物体外抗真菌作用 , 为进一步开发和利用楮叶资源提供依据。方法:采用试管药基法 , 进行
了楮叶的 5种提取物对 4 属 6种皮肤癣菌和白念珠菌的抑菌实验及MIC 测定。结果:5种提取物总平均最低抑菌浓度 MIC(g/
100mL)值范围在 2.68～ 6.67(g/100mL)之间 ,以 75%乙醇提取物抗菌作用最强 , 其次分别为残留水液 、乙醇提取物的正丁醇提
取部位 、醋酸乙酯提取部位和石油醚提取部位 。结论:楮叶可作为抗浅部真菌中草药 , 值得进一步研究开发和利用。
[ 关键词] 　楮叶;浅部真菌;抑菌实验
[ 中图分类号] 　R285.5　　[文献标识码] 　B　　[ 文章编号] 　1005-9903(2006)01-0049-02
　　楮叶为桑科植物构树 Broussonetia paapyrifera
(L.)Vent的干燥树叶。具有清热解毒 、凉血止痒功
效。由江苏省中医药研究院化学和资源研究室钱士
辉研究员鉴定 ,楮叶治癣作用古代本草方书早有论
述 , 《本草纲目》云:“去风湿肿胀…… ,癣疮” , 《圣惠
方》记载:“治癣湿痒不可忍 ,楮叶半斤 ,细切捣令极
烂 ,敷于癣上。”浅部真菌病在我国发病率比较高 ,耐
药菌株的出现和不良反应限制了化学药物的使用。
国内外学者对中草药的抗真菌作用进行了大量研
究 ,但尚无有关楮叶的抗真菌作用的相关报道 。我
们用试管药基法进行了楮叶的 5种提取物对 4属 6
种皮肤癣菌和白念珠菌的抑菌实验及MIC测定。
1　实验材料
1.1　试验用药品
1.1.1　试验用药材　所用楮叶于 2002 年 8月在武
进采集 ,经晒干而得 。
1.1.2　乙醇提取物样品 　取干燥楮叶 , 粉碎成粗
粉 ,加 75%乙醇渗漉提取 ,收集 8倍量的渗漉液 ,减
压回收乙醇至无乙醇味 ,加水至每 1mL含 2g生药的
浸膏 ,加3%吐温溶液制成每 1mL含 0.5g 生药的药
液 ,作为乙醇提取物样品 。
1.1.3　乙醇提取物的石油醚(60 ～ 90℃)提取部位 、
醋酸乙酯提取部位和正丁醇提取部位样品制备:取
1.1.2.“乙醇提取物样品”项下的浸膏 ,依次用石油
醚 、醋酸乙酯 、正丁醇萃取 ,每种溶剂分别萃取 4次 ,
每次用药液2倍量的萃取溶媒 ,合并萃取液 ,回收有
机溶剂 , 残渣分别加 3%吐温溶液制成每 1mL 含
0.5g 生药的药液 ,分别得楮叶乙醇提取物的石油醚
提取部位样品 、醋酸乙酯提取部位样品 、正丁醇提取
部位样品。
1.1.4　有机溶剂提取后残留液样品　取上述有机
溶剂萃取后的残留液 100mL ,加入 3g 吐温-80 , 摇
匀 ,备用 。
1.1.5　溶剂空白样品　取吐温-80 3g 加水 100mL
使溶解 ,作为溶剂空白样品 。
1.2　实验用菌种　选用中国微生物菌种保藏管理
委员会医学真菌中心提供的标准菌株 ,其分别为毛
癣菌属:红色毛癣菌(Thichophyton rubrum)菌号
(CCCCMIDT.1a)、须癣毛癣菌(T.mentagrophytes)菌号
(CCCCMIDT.5c)、断发毛癣菌(Thichophyton rubrum)
菌号(CCCCMIDT.4b);小孢子菌属:犬小孢子菌
(Microsporum canis)菌号(CCCCMIDM.3b);表皮癣菌
属:絮状表皮癣菌(Epidermophyton floccosum)菌号
(CCCCMIDE.1c);念珠 菌属:白念 珠菌(Candida
dlbicans)菌号(CCCCMIDC.1a)计 4属 6种常见浅部致
病真菌 。
1.3　培养基　以不含任何抗生素的沙堡琼脂作为
基础培养基 。
2　实验方法
采用试管药基法[ 1, 2] ,参照卫生部颁发的《新药
(西药)临床研究指导原则》中抗菌抗寄生虫药物药
效学指导原则抗真菌药所规定的实验方法 。药基浓
度(v/v)以无菌蒸馏水稀释(每个样品分别稀释成
1∶10 、1∶20 、1∶40 、1∶80 、1∶160 、1∶320 、1∶640等 7个浓
度),分别以溶剂(3%的吐温-80水)和基础基作对
·49·
第 12卷第 1 期
2006年 1 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol.12 , No.1
Jan., 2006
DOI :10.13422/j.cnki.syf jx.2006.01.021
照;接种菌量为 1.0×105cfu;培养条件及时间为皮肤
癣菌:26℃,7d和白念珠菌:30℃,48h 。
3　实验结果
以基础培养基和溶剂对照培养基上菌已生长为
参照 ,菌生长表示无抑菌作用 ,菌未生长表示有抑菌
作用 。菌未生长的药物培养基最低药物浓度为该样
品对该菌的最低抑菌浓度(MIC),以 v/v 换算成含生
药浓度为 g/mL。结果见表 1。
表 1　楮叶提取物样品对 4属 6种常见浅部致病
真菌 MIC均值(g/ 100mL)
样品 红色毛癣菌
须癣
毛癣菌
断发
毛癣菌
犬小
孢子菌
絮状表
皮癣菌
白念
珠菌
总平
均值
乙醇提取物 1.14 3.95 1.25 5.00 2.25 2.20 2.68
石油醚提取部位 3.35 5.00 20.00 5.00 2.00 5.00 6.67
醋酸乙酯提取部位 2.25 3.95 20.00 5.00 1.25 3.15 5.93
残留水液 3.10 5.00 2.50 5.00 2.25 5.00 3.85
正丁醇提取部位 4.45 5.00 3.15 5.00 2.25 5.00 4.18
　　实验研究结果表明 ,楮叶的5种提取物对 4属 6
种皮肤癣菌均有较强的抑菌作用 ,其总平均最低抑
菌浓度 MIC (g/100mL)值 范围 在 2.68 ～ 6.67
(g/100mL)之间;以 75%乙醇提取物抗菌作用最强 ,
其次分别为残留水液 、乙醇提取物的正丁醇提取部
位 、醋酸乙酯提取部位和石油醚提取部位。
4　结论
本实验表明楮叶对浅部真菌有较强的抑菌作
用 ,楮叶的5 种提取物对 4属 6种皮肤癣菌的 MIC
为国内首次测定 ,其中 75%乙醇提取物的平均 MIC
仅为 2.68g/100mL ,但究竟何种成分起作用 ,有待今
后进一步研究分析。
江苏省中医药研究院已开发出以楮叶为主要组
分的楮叶软膏 ,临床研究表明 ,楮叶软膏治疗浅部真
菌病的疗效与达克宁相当[ 3] 。楮叶不同溶剂提取物
体外抗浅部真菌试验显示具有明显的抗真菌作用 ,其
提取物的最低抑菌浓度低于目前公认的抗真菌中药
的最低抑菌浓度 ,而且 ,楮叶资源丰富 ,提示可作为广
谱抗浅部真菌中草药 ,以冀开发出新的抗真菌中药。
[参考文献]
[ 1] 　李影林 , 宋文纲 ,王艾琳 , 等.临床微生物学及检验[ M] .
长春:吉林科学技术出版社 , 1991.586.
[ 2] 　方玉复 ,魏玉平 , 于香安 , 等.陈皮对浅部真菌的试管内
抑菌实验及临床疗郊观察[ J] .中国皮肤性病学杂志 ,
1997 , 11(5):275.
[ 3] 　卞美广 ,黄一平 , 朱黎明 , 等.楮叶软膏治疗浅部真菌病
50 例临床观察[ J] .中医外治杂志 , 2003 , 12(3):19.
[ 收稿日期] 　2004-12-14
[ 通讯作者] 　周厚肾 , Tel:(0530)8312505
痔爽洗液的制备及临床应用
周厚贤＊
(山东省巨野县人民医院 ,山东 巨野　274900)
　　痔爽洗液是我院肛肠外科与药剂科研制的常用医院内
部制剂。具有抗菌 、消炎 、消肿止痛 、杀虫止痒的作用 , 临床
上用于各类痔 、瘘 、肛裂 、肛门湿疹等肛肠疾病的治疗及肛肠
疾病术前术后的治疗。经多年临床应用 , 疗效好 , 使用方便。
现将处方 、制备工艺 、临床应用介绍如下。
1　处方
生大黄 10g ,黄柏 15g ,苍术 30g , 苦参 60g ,赤芍 10g , 野菊
花 15g ,川乌 10g ,草乌 10g , 替硝唑 5g。共制成 500mL。
2　制备工艺
将生大黄 、黄柏 、苍术 、苦参 、赤芍 、野菊花 、川乌 、草乌加
水浸润 30min , 放入夹层锅内 , 煮沸 60min , 即可将药液滤出 ,
合并滤液至 500mL ,加入替硝唑。
3　临床应用
3.1　临床资料　我院自 2002 年 1 月 1 日至 2004 年 6 月 30
日 , 共收治病人 615 例 , 治疗组 419 例 , 对照组 196 例。 年龄
14～ 70 岁。临床症状主要表现患处疼痛 、有肿胀或肛缘嵌顿
水肿 、皮肤湿疹等症。治疗组 419 例用痔爽洗液坐浴;对照
组 196 例用 1∶5000高锰酸钾溶液坐浴。
3.2　给药方法　清创后 ,先熏洗后坐浴 , 每天 1 ～ 2 次 , 每次
约 15min , 如第 2次再坐浴 , 应当加温 , 5～ 7d 为一疗程。
3.3　疗效标准　显效:肿胀 、疼痛消失 , 嵌顿脱出物萎缩或
回纳。有效:肿胀 、疼痛基本消失 , 嵌顿或肛缘水肿缩小 2 3
以上。无效:肿胀 、疼痛无明显变化 , 嵌顿或肛缘水肿缩小变
化不大。
3.4　治疗结果　治疗组用痔爽洗液坐浴 419 例 , 显效 252
例 , 显效率60.14%, 有效147 例 ,有效率 35.08%,总有效率为
95.23%;对照组 196 例 , 显效 36 例 , 显效率 18.37%, 有效 11
例 , 有效率 5.61%, 总有效率为 23.98%。
4　讨论
痔爽洗液中大黄清热泻火 、凉血止血 , 泻实热破血瘀;黄
柏 、苍术 、苦参清热燥湿 , 治下焦湿热;赤芍 、野菊花清热凉
血 、解毒 、散瘀止痛;川乌 、草乌祛风除湿 , 温经止痛;替硝唑
对大多数厌氧菌具有较强的抗菌作用 , 对滴虫 、阿米巴原虫
等均有杀灭作用。诸药合用 , 共起抗菌 、消炎 、消肿止痛 、杀
虫止痒的作用。用 1∶5000 高锰酸钾溶液坐浴法由于对痔术
后皮肤刺激性较大 , 创愈合时间较长 , 效果不太理想。痔爽
洗液作为本院的自制外用方 , 具有较好的消炎 、收敛 、消肿止
痛 、去湿作用疗效好 ,值得进一步研究开发。
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第 12卷第 1 期
2006年 1 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol.12 , No.1
Jan., 2006