全 文 ：第 39卷第 11期
2005年 11月
上 海 中 医 药 杂 志
SHANGHAIJOURNALOFTRADITIONALCHINESEMEDICINE
Vol.39No.11
Nov., 2005
麻油提取紫草工艺条件优选
OptimizationofExtractionTechniqueofRadixArnebiaeseuLithospermibySesameOil
上海中医大学附属龙华医院中医外科
LonghuaHospitalAfiliatedtoShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine
(上海 200032)
王春丽
WANGChun-li
唐汉钧
TANGHan-jun
上海中医药大学附属龙华医院药剂科
LonghuaHospitalAfiliatedtoShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine
(上海 200032)
余敏英
YUMin-ying
杨 铭
YANGMing
摘要:优选麻油提取紫草的工艺参数。以紫草素提取量为指标 ,应用 L
9
(34)正交试验设计 , 筛选紫草素的最
佳制备条件。最佳工艺条件为:麻油浸渍紫草 6 h, 提取温度 120℃,提取时间 1 h。提取温度对紫草素的溶出量影
响较大 , 浸渍时间和提取时间对其影响较小。
关键词:紫草;质量控制;紫草素;提取工艺;正交试验
中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1007 1334(2005)11 0058 02
[基金项目 ]上海市中医外科临床医学中心学科开放经费项
目资助课题(03XK05)
[作者简介 ]王春丽(1971 ),黑龙江阿城人 , 医学博士 , 主要
研究方向为中药促进创面愈合研究及方剂配伍规律研究。
紫草为紫草科多年生草本植物新疆紫草 (软紫草)
Arnebiaeuchroma(Royle)Johnst、紫草(硬紫草)Lithospermum
erythrorhizonSieb.etZucc.或内蒙紫草 ArnebiagutataBunge.
的干燥根。始载于 《神农本草经》 , 味苦 , 性寒 , 功效以凉血
活血 、解毒透疹见长 , 乃愈创要药 , 对疮疡 、水火烫伤 [ 1]等创
面有独特疗效。紫草主要成分为紫草素 , 具有抗炎 [ 2] 、促进
肉芽组织生成 [ 3]等药理作用。本课题组所研制的复黄膏即
以紫草为主要成分 , 临床取得较好的疗效 [ 4～ 7] 。本研究采用
正交设计法 , 优化复黄膏中麻油提取紫草的工艺条件。
一 、 仪器与材料
UV-2450型紫外分光光度计(日本岛津公司);左旋紫草
素标准品(由中国药品生物制品检定所提供);紫草原药材
(上海德华国药制品有限公司 , 批号 2003090906);麻油(上
海三添食品有限公司 ,批号 031027);其余试剂均为分析纯。
二 、 实验方法
1.正交试验设计 通过考察原工艺 , 确定紫草的浸渍
时间 、提取时间 、提取温度三个因素 , 每因素确定三个水平 ,
按照正交设计表 L9(34)进行试验 , 正交试验因素水平。 (表
1)
表 1 正交试验因素水平表
水平
因素
A
浸渍时间(h)
B
提取温度(℃)
C
提取时间(h)
1
2
3
6
12
24
60
90
120
1
2
3
2.样品中紫草素提取量测定
(1)样品溶液制备 称取紫草药材 75g并切碎成 1 cm
的小段 ,加入 8倍量的麻油 , 按 L
9
(34)正交表安排提取 , 滤
过 ,收集合并麻油提取液 。
(2)标准曲线的绘制 精密量取左旋紫草素标准品
5.1 mg, 加麻油定容于 25 ml, 再分别精密吸取 0.3 ml、
0.8 ml、1.2 ml、1.6 ml、2 ml分别加麻油定容于 10 ml, 配制
成以麻油为溶剂 , 浓度为 6.12 μg/ml、 16.32 μg/ml、 24.48
μg/ml、32.64μg/ml、40.80 μg/ml的标准品溶液。按分光光
度法 ,在 516 nm处测定吸收度 , 用麻油作空白 , 以吸收度为
纵坐标(Y), 左旋紫草素的浓度(μg/ml)为横坐标(X), 绘制
标准曲线 , 得回归方程为 y=0.02237x+0.02656 r=
0.9999。表明左旋紫草素浓度在 6.12 μg/ml～ 40.8 μg/ml
的范围内有良好的线性关系。
(3)精密度试验 精密量取一定浓度的样品溶液 , 连
续测定 7次 , RSD为 1.16%(n=7), 表明精密度良好。
(4)样品提取量测定 各批次样品 , 分别精密量取
0.5 ml,用麻油定容于 25 ml, 按分光光度法 , 在 516 nm处测
定吸收度 ,用麻油作空白 , 根据标准曲线计算左旋紫草素的
提取量。
(5)加样回收率试验 精密量取已知提取量的样品溶
液和一定量的对照品溶液 ,采用分光光度法 ,在 516 nm处测
定吸收度 ,用麻油作空白 ,并计算左旋紫草素的提取量 , 得平
均回收率为 100.80%, RSD为 1.98%(n=5)。
(6)稳定性试验 日内稳定性:精密量取一定浓度的
样品溶液 ,每隔 1 h测定 1次 , 连续 6 h, RSD为 0.63%(n=
7)。日间稳定性:精密量取一定浓度的样品溶液 , 每隔 24 h
测定 1次 ,连续 10 d, RSD为 0.46%(n=10)。 表明测试样
品稳定性良好。
3.统计方法 正交试验资料用方差分析处理。
三 、 实验结果
紫草素提取量的正交试验结果与方差分析结果见表 2、
DOI :10.16305/j.1007-1334.2005.11.026
表 3。
表 2 紫草素提取量的正交试验结果
实验号
因素
1
浸渍时间
h(A)
2
提取温度
℃(B)
3
提取时间
h(C)
误差
(Dl)
结果
生药提取量
(mg/g)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
K1
K2
K3Ri
1
1
1
2
2
2
3
3
3
6.129
6.479
6.588
0.459
1
2
3
1
2
3
1
2
3
4.964
6.419
7.813
2.849
1
2
3
3
1
2
2
3
1
6.121
6.612
6.463
0.491
1
2
3
2
3
1
3
1
2
6.560
6.350
6.286
0.275
4.579
6.314
7.495
5.060
6.108
8.268
5.254
6.834
7.676
从表 2直观分析可知 , 极差最大的为 B因素 , 其次为 C
因素 、A因素 , 说明麻油提取紫草素对提取量影响最大的因
素为提取温度 , 其次分别为提取时间和浸渍时间。
表 3 紫草素提取量的方差分析表
方差来源 离差平方和 自由度 F值 P值 显著性
A
B
误差
C
总和
0.344
12.174
0.124
0.380
13.023
2
2
2
2
8
2.781
98.321
3.071
P>0.1
0.01
P>0.1
不显著
显著
不显著
从表 3方差分析结果可知 , B因素三个水平之间有显著
性差异(0.01
水平 3均可选择 , 从节省能源角度 , C因素提取 1 h为宜;A
因素以浸渍 6 h为宜。综上分析 , 为更有效地用麻油提取紫
草素 , 最佳提取工艺应为:A1B3C1 , 即最佳浸渍时间为 6 h, 提
取时间为 1 h,提取温度为 120℃。
四 、讨论
1.紫草主含紫草素 , 紫草素不溶于水 , 但溶于醇 、有机
溶剂和植物油。麻油与紫草素结构相似 , 作为提取溶剂 , 不
仅可以得到较高的溶出量 , 也是良好的成型基质 , 具有润泽
肌肤 、抗氧化等作用 [ 8] 。
2.紫草为复黄膏的主要成分之一 , 既往工艺加 8倍量
麻油 , 浸渍 36 h, 紫草与大黄同熬枯 , 提取 1 h, 提取过程复
杂。本研究考察原工艺条件 , 确定紫草的浸渍时间 、提取时
间 、提取温度三个因素 , 每因素确定三个水平按照正交设计
表 L
9
(34)进行试验。该试验结果将浸渍时间缩短为 6 h, 确
立了提取温度和提取时间 , 简化了紫草的工艺过程 , 为合理
改进复黄膏提取工艺奠定了基础。
3.实验中 ,曾按照《中国药典》 2000版一部的方法测定
左旋紫草素的提取量 ,药典中对紫草素含量测定采用乙醇为
溶剂 ,结果回收率较差;并考虑到皮肤溃疡慎用乙醇的用药
特殊性 ,改用复黄膏制剂的麻油为溶剂 ,并按线性回归测定 ,
结果所测左旋紫草素的提取量稳定 , 回收率也较好。
4.有文献报道 [ 9] , 不同种类的紫草其紫草素的含量有
较大的差异 , 紫草素提取量从 0.13% ～ 6.73%。 本课题选
用紫草的紫草素提取量大致在 0.45% ～ 0.83%。
5.文献报道 [ 10]紫草素有不稳定性 , 含紫草素的成品和
中间产品在储藏过程中要注意避光。本文所用 9个样品从
制备到测试共历时 7 d, 实验中 , 各样品均避光贮存。 经考
察 ,各样品紫草素提取量在 10d内是稳定的 , 不存在时间上
的差异性 ,测试数据可靠 。其长期稳定性有待进一步考察。
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编辑:季春来
收稿日期:2005 04 27
KeyWords:
RadixArnebiaeseuLithospermi;qualitycontrol;Shiconin;
extractiontechnique;orthogonaltest
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