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2%假蒟微乳剂对几种病、虫的毒力测定



全 文 :植物源农药以其易降解、 对环境友好的特点,
近年来成为生物农药中研究最多的一类, 已取得了
较大进展, 研制开发出了一系列新型无公害杀虫、
杀菌的新型农药。 但在植物源农药开发过程中, 既
2 %假蒟微乳剂对几种病、 虫的毒力测定①
毕仁军1,2)② 韩冬银1) 李 敏1) 郑凌燕1,2) 胡美娇1 ) 符悦冠1)③
中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
(1农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室 海南儋州 571737;
海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室
2海 南 大 学 环 境 与 植 物 保 护 学 院 海南儋州 571737)
摘 要 利用2%假蒟微乳剂对几种供试菌和试虫进行室内毒力测定。 生长速率法进行杀菌剂毒力测定的试验结
果表明: 假蒟微乳剂对弯孢霉属的抑制效果最好, 其EC50仅为3.26 mg/L, 远低于对照药剂多菌灵的50.71mg/L;
胶孢炭疽菌对多菌灵表现极强的耐药性, 而假蒟微乳剂则对胶孢炭疽菌抑制效果较好, 其EC50仅为14.40mg/L。
浸渍法进行杀虫剂毒力测定的试验结果表明, 假蒟对蚜虫的活性最高, 其LC50为7.110mg/L, 对斜纹夜蛾、 小菜
蛾、 菜青虫、 橡副珠蜡蚧和椰心叶甲, 均表现较好的杀虫活性。
关键词 假蒟微乳剂 ; 微乳 ; 抑菌 ; 杀虫
中图分类号 S48
Toxicity of 2% Piper Sarmentosum Roxb. Microemulsion to Several
Pathogens and Insects
BI Renjun HAN Dongyin LI Min ZHENG Lingyan HU Meijiao FU Yueguan
(1 College of Environment and Plant Protection, Hainan University, Ministry of Agriculture Key Laboratory
for Monitoring and Control of Tropical Agricultural and Forest Invasive Alien Pests, and Hainan Key
Laboratory for Detection and Control for Tropical Agricultural Pests, Danzhou, Hainan 571737;
2 Environment and Plant Protection Institute, CATAS, Danzhou, Hainan 571737)
Abstract The 2 % Piper Sarmentosum Roxb. Microemulsion was tested against several pathogens and in-
sects in the laboratory. The result of fungistasis by the method of growth rate shows that the P. Sarmento-
sum microemulsion had best inhibitory effect on Curvularia sp. with the EC50 being at 3.26 mg/L which is
far lower than that of the control, carbendazim (50.71 mg/L). Colletotrichum gloeosporioides showed a
strong resistance to the control, carbendazim, but was effectively inhibited by the P. Sarmentosum mi-
croemulsion that had an EC50 of only 14.40 mg/L. Pest insects were controlled by dipping method, and the
result showed that the P. Sarmentosum microemulsion controlled the aphids most effectively with the LC50
being at 7.110 mg/L and also produced better control effect on oriental leafworm moth (Spodoptera litura),
diamondback moth [Plutela xylostella (L.)], cabbage moth, nigra scale [Parassaisetta nigra (Neitner)], and
coconut beetle [Brontispa longissima (Gestro)].
Key words Piper sarmentosum Roxb ; microemulsion ; fungistasis ; insecticide
① 基金项目: 公益性行业(农业)科研专项; 热带果树重大病虫害防控技术研究(NO.2007BAD48B05-03)
收稿日期: 2009-01-24责任编辑/白 净 E-mail: rngcrngc3@gmail.com
② 毕仁军(1975~), 男, 在读硕士。 研究方向: 植物源农药及制剂研究。
③ 通讯作者。
2009年4月
TROPICAL AGRICULTURAL ENGINEERING Vol.33, No.2
热 带 农 业 工 程 第33卷第2期
Apr. 2009
7- -
2009年4月 第33卷第2期热带农业工程
有杀虫活性又有抑菌活性的植物源农药并不多见[1~4],
假蒟(Piper sarmentosum Roxb.)为胡椒科(Piperaceae)
植物, 含有丰富的生理活性物质, 但是其研究大多
仅局限于其化学成分和药理学方面[5,6]。 对假蒟提
取物的杀虫[7]、 杀菌活性[8]研究较少。 为此, 本研
究测试了实验室自制的2%假蒟微乳剂对几种植物
病原菌的抑制毒力和对几种试虫的触杀毒力, 为推
广应用假蒟微乳剂提供依据。
1 材料与方法
1. 1 供试材料
1. 1. 1 供试药剂
2%假蒟微乳剂(中国热带农业科学院环境与植物保护研
究所昆虫多样性与生物防治课题组制备); 对照药剂: 50%
多菌灵可湿性粉剂(江苏省江阴农药厂生产)。
1. 1. 2 供试菌种
芭蕉炭疽菌(Colletotrichum musae); 芒果炭疽菌
(Colletotrichum gloeosporioides)、 辣 椒 炭 疽 菌(Col-
letotrichum capsici)、 胶孢炭疽(Colletotrichum gloeospo-
rioides)、 可可球二孢菌(Botryodiplodia theobromae)、
柱隔孢属(Ramularia sp)、拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis
sp), 芒果拟茎点霉(Phomopsis mangiferae)、 镰刀菌
属(Fusarium sp)、 弯孢霉属(Curvularia sp); 以上菌
种均由中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
果蔬采后病理组从番木瓜、 香蕉、 芒果和龙眼中分
离。
1. 1. 3 供试昆虫
斜纹夜蛾(Spodoptera litura Fabricius)、 小菜
蛾(Plutella xylostella L.)、 菜青虫(Artogeia rapae
(Linnaeus))和蚜虫(plant louse)采自中国热带农业
科学院环境与植物保护研究所试验基地, 采回的幼
虫进行饲养, 橡副珠蜡蚧(Parasaissetia nigra)和椰
心叶甲(Brontispa longissima Gestro)由本实验室饲
养, 实验所选试虫的虫龄分别为斜纹夜蛾、 橡副珠
蜡蚧、 小菜蛾和菜青虫3龄, 蚜虫和椰心叶甲为成虫。
1. 2 方法
1. 2. 1 2%假蒟微乳剂对几种病原菌的毒力测定
采用生长速率法[9]分别测定2%假蒟微乳剂对芒
果炭疽菌、 辣椒炭疽菌、 芭蕉炭疽菌、 胶孢炭疽
菌、 可可球二孢菌、 柱隔孢属、 拟盘多毛孢属、 芒
果拟茎点霉、 镰刀菌属和弯孢霉属的抑制作用。 供
试浓度分别为 : 2 000、 1000、 600、 400、 200、
100、 20mg/L, 多菌灵根据不同试菌设置不同浓
度, 辣椒炭疽菌和镰刀菌属浓度设置为: 5、 2、 1、
0.5、 0.35、 0.1mg/L; 芭蕉炭疽菌、 拟盘多毛孢
属、 芒果炭疽菌、 可可球二孢菌、 柱隔孢属为1、
0.5、 0.2、 0.1、 0.05、 0.02 mg/L, 胶孢炭疽菌
250、 150、 100、 50、 20、 10、 5 mg/L, 芒果拟茎
点霉、 和弯孢霉属为: 100、 50、 20、 10、 5、 1mg/L。
制成含药PDA培养基平板, 以加无菌蒸馏水的PDA为
对照 ; 平板中央接种对应的10种病原真菌菌块
(D=0.5cm), 每个菌株每浓度重复3次, 试验重复2次。
置于(28±1)℃、 相对湿度(80±10)%、 光周期为L:D=12:
12的人工气候箱中培养, 可可球二孢菌培养48h,
其它菌株培养96h后, 用十字交叉法量菌落直径,
取平均值。 算出抑制菌落生长率(A), 并计算抑制菌丝
体生长的有效抑制中浓度EC50值及相关系数R。
1. 2. 2 2%假蒟微乳剂对几种试虫的毒力测定
用浸渍法[10]测定2%假蒟微乳剂对斜纹夜蛾、
小菜蛾和菜青虫3龄幼虫的触杀活性, 供试浓度为
50、 25、 10、 5、 2mg/L, 对椰心叶甲成虫的供试
浓度为200、 150、 50、 25、 12.5mg/L, 选择发育
整齐一致的健康试虫, 将之在供试样品的稀释液中
浸泡5s, 然后用滤纸吸干多余药液, 放入9cm培养
皿内, 斜纹夜蛾以新鲜蓖麻叶饲养, 小菜蛾和菜青
虫以新鲜甘蓝菜饲养, 椰心叶甲用新鲜的椰树嫩叶
饲养。 用涂抹法测定橡副珠蜡蚧3龄幼虫的触杀活
性, 供试浓度为100、 50、 20、 10、 5mg/L。 选取
发育整齐一致的3龄幼虫(在南瓜上活体接种饲养), 将
配好的药剂均匀涂抹在含虫的南瓜表面, 自然风
干。 用喷雾法测定对蚜虫成虫的触杀活性, 供试浓
度为100、 50、 25、 10、 5 mg/L, 用小型喷雾器对
带有蚜虫的叶片喷雾, 再将蚜虫挑到有新鲜叶片的
养虫盒中进行饲养。 每处理重复3次, 每重复10头
虫。 置于温度为(24±1)℃、 相对湿度为(80±10)%、
光周期为L:D=12:12的人工气候箱中饲养。 斜纹夜
蛾、 小菜蛾、 菜青虫和蚜虫在24h后检查试虫的存
活和死亡头数, 椰心叶甲在72h后检查试虫的存活
(CK菌落直径-0.5) -(处理菌落直径-0.5)
CK菌落直径-0.5
= ×100A(%)
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毕仁军 等 2%假蒟微乳剂对几种病、 虫的毒力测定
和死亡头数, 橡副珠蜡蚧在7d后检查试虫的存活
和死亡头数。
2 结果与分析
2. 1 假蒟微乳剂对几种病原菌的毒力测定结果
假蒟微乳剂不同浓度对辣椒炭疽菌、 芭蕉炭疽
菌、 胶孢炭疽菌等的毒力测定结果见表1。
由表1可见, 假蒟微乳剂对几种供试菌均有明
显的抑制效果。 其中, 假蒟微乳剂对弯孢霉属和胶
孢炭疽菌的抑制效果较好, EC50胶孢炭疽菌和弯孢
霉属分别为3.260和14.400mg/L, 远高于多菌灵的
50.711和5 386.724mg/L, 抑制效果达极显著, 尤
其是对胶孢炭疽菌, 解决了对多菌灵的高抗问题;
而假蒟微乳剂对拟盘多毛孢属的抑制效果差别不
大, EC50分别为9.138和13.470mg/L; 对其它试菌
的效果都远低于多菌灵, 效果不太理想。
2. 2 假蒟对几种试虫的毒力测定结果
假蒟微乳剂不同浓度对斜纹夜蛾、 小菜蛾、 橡
副珠蜡蚧、 蚜虫、 菜青虫和椰心叶甲6种试虫的触
杀毒力测定结果见表2。
序号 菌株名称 毒力方程 R/相关系数 EC50/(mg·L-1)
假蒟 辣椒炭疽菌 y=0.9531x+6.0495 0.9781** 79.220
多菌灵 CoLLetotrichum capsici y=8.1188x+5.9956 0.9995** 0.754
假蒟 芭蕉炭疽菌 y=0.8015x+6.5481 0.9828** 11.710
多菌灵 coLLetotrichum musae y=2.3191x+7.8132 0.9687** 0.061
假蒟 胶孢炭疽菌 y=0.8359x+6.5394 0.9948** 14.400
多菌灵 CoLLetotrichum gLoeosporioides y=0.3009x+3.2816 0.8777** 51386.724
假蒟 可可球二孢菌 y=1.2631x+6.9851 0.9821** 26.820
多菌灵 BotryodipLodia theobromae y=0.4047x+5.9887 0.9674** 0.004
假蒟 柱隔孢属 y=1.0660x+5.4042 0.9746** 417.660
多菌灵 RamuLaria sp y=1.7497x+6.2794 0.9645** 0.186
假蒟 拟盘多毛孢属 y=0.7313x+6.3679 0.9950 13.470
多菌灵 PestaLotiopsis sp y=1.7088x+3.3581 0.9655 9.138
假蒟 芒果拟茎点霉 y=1.0369x+6.7446 0.9550** 20.770
多菌灵 Phomopsis mangiferae y=2.7289x+8.4108 0.9862** 0.056
假蒟 镰刀菌属 y=0.9324x+6.1355 0.9137** 60.560
多菌灵 Fusarium sp y=3.0359x+5.5388 0.9817** 0.665
假蒟 弯孢霉属 y=0.7012x+6.7434 0.9950** 3.260
多菌灵 CurvuLaria sp y=1.3642x+2.6739 0.9458** 50.711
假蒟 芒果炭疽 y=1.0124x+4.5030 0.9565** 309.230
多菌灵 CoLLetotrichum gLoeosporioides Penz. y=8.7900x+2.8387 0.9500** 0.058
表 1 假蒟微乳剂对几种病原菌毒力测定结果
表 2 假蒟微乳剂对几种试虫的毒力测定结果
试虫 直线回归方程 相关系数/r LC50 /(mg·L-1)
斜纹夜蛾3龄幼虫 y=2.2452x+4.5131 0.9868 16.476
橡副珠蜡蚧3龄幼虫 y=2.3867x+4.6446 0.9766 14.090
蚜虫成虫 y=1.7671x+5.2617 0.9698 7.110
椰心叶甲成虫 y=3.1560x+2.0667 0.9211 78.030
小菜蛾3龄幼虫 y=11.7082x+4.0270 0.9716 37.121
菜青虫3龄幼虫 y=1.7860x+4.8950 0.9812 11.450
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2009年4月 第33卷第2期热带农业工程
由表2可知, 假蒟微乳剂对不同试虫的触杀活
性随浓度的增大而增加。 几种试虫中以对蚜虫的活
性最高, LC50为7.110mg/L; 其次以菜青虫、 橡副
珠蜡蚧和斜纹夜蛾的活性较好, LC50分别为11.450、
14.090和16.476mg/L; 最差的是椰心叶甲, 其LC50
为78.030mg/L。
3 结论与讨论
3. 1 本试验中假蒟微乳剂对弯孢霉属的抑制效果
最好, 其EC50仅为3.260mg/L, 远低于对照药剂多
菌灵的50.711mg/L, 比已报道的苦皮藤素的活性
都高[11], 与其他商品药百菌清、 福美双相比, 其抑
菌活性也要高[12]。 但胶孢炭疽菌对于对照药剂多菌
灵, 有极强的耐药性, EC50为51386.724mg/L, 而
假蒟微乳剂则对胶孢炭疽菌抑制效果较好, 其EC50
仅为14.400mg/L。 假蒟微乳剂的对弯孢霉属和胶
孢炭疽菌的杀菌效果明显, 对拟盘多毛孢属的抑制
效果与多菌灵相差不大, 杀菌谱广, 具有很高的推
广价值。
3. 2 假蒟微乳剂对几种试虫的触杀效果表明: 假
蒟微乳剂对斜纹夜蛾、 介壳虫、 蚜虫和菜青虫的室
内防治效果较好, 其LC50分别为16.475、 14.090、
7.110、 11.450mg/L, 与已报道的黄花蒿和雷公藤
非生物碱相比, 活性更强[13,14]; 略低于苦皮藤素[4],
但对小菜蛾和椰心叶甲的室内防治效果一般。
3. 3 假蒟微乳剂对弯孢霉属、 胶孢炭疽菌、 拟盘
多毛孢属和斜纹夜蛾、 介壳虫、 蚜虫和菜青虫均有
明显活性。 目前市面上植物源农药大都只是单一的
杀虫或杀菌, 而假蒟微乳剂作为一种即能杀虫又能
杀菌的植物源农药, 不仅可以减少用药次数, 又能
降低农业生产成本和达到保护环境的目的, 具很好
的市场前景和很高的实用价值。
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