全 文 ：中　国　药　科　大　学　学　报
Journal of China Pharmaceutical University　2003 ,34(3):257 ～ 260
黄花倒水莲总皂苷对凝血系统及血栓形成的影响
寇俊萍 , 李景峰 , 闫　瑾 , 朱丹妮
(中国药科大学中药复方研究室 , 南京 210038)
【摘　要】　目的:本文观察黄花倒水莲总皂苷(PTS)对凝血系统和炎症血栓的影响 ,为其临床应用于血栓性
疾病提供一定依据。方法:采用体外家兔血浆复钙时间 、凝血酶原时间 、抗凝血酶时间 、部分凝血活酶时间及小
鼠凝血时间的测定 ,考察 PTS 对内 、外凝血系统指标的影响 ,并通过角叉菜胶致小鼠体内血栓及足跖肿胀实验 ,
观察 PTS 对炎症血栓的影响。结果:PTS 可明显延长体外家兔血浆复钙时间;显著延长凝血酶所致纤维蛋白凝固
时间;显著延长部分凝血活酶时间;对血浆凝血酶原时间无明显影响。预先 ig 给予 PTS 显著延长小鼠凝血时间;
减小角叉菜胶所致尾部形成血栓的长度 , 同时明显抑制其足跖肿胀。结论:PTS 可能通过影响内源性凝血系统
发挥抗凝血及抗血栓作用。
【关键词】　黄花倒水莲总皂苷;凝血;血栓
【中图分类号】　R285　　【文献标识码】　A　　【文章编号】　1000-5048(2003)03-0257-04
　　黄花倒水莲为远志科远志属植物(Polygala
fallax Hesml., PFH), 是我国南方少数民族地区应
用广泛的一味民间药物[ 1] 。其味甘 ,微苦 ,具有补
益气血 ,健脾祛湿 ,活血化瘀等功效 ,现代研究证
明:其根含有皂苷 、多糖 、有机酸 、氨基酸等 ,具有抗
衰老 、改善心肌缺血 、免疫调节等作用[ 2-7] 。我室自
1998年以来对该药材进行系统化学和药理研究 ,
发现PFH 水煎剂具有降低血瘀模型大鼠全血粘
度 ,扩张小鼠耳廓微循环等活血作用[ 8-10] ,黄花倒
水莲总皂苷(total saponin of PFH , PTS)是否亦具有
活血化瘀作用 ,尚未见文献报道 。本文通过观察
PTS对凝血系统及血栓模型的影响 ,为阐明其新活
性及临床治疗血栓性疾病提供药理学依据。
1　实验材料
1.1　药品与试剂
黄花倒水莲药材采自广西 ,经中国药科大学中
药标本馆宋学华副教授鉴定为远志科远志属植物
黄花倒水莲(Polygala fallax Hesml.)的干燥根 。黄
花倒水莲总皂苷 ,本研究室自制 ,有效部位经高氯
酸-香草醛比色法测定总皂苷含量 56%。
丹参注射液(上海通用药业股份有限公司 ,批
号01112908 ,每毫升含 500 mg 生药 ,以下简称 DS);
人纤维蛋白原(法布莱士 Fibroraas ,中美合资上海莱
士血制品有限公司 , 批号 2001121AO);凝血酶
(Thrombin ,珠海生物化学制药厂 ,批号 2001070116);
乙酰水杨酸肠溶片(Asa , 南京第二制药厂 ,批号
20011001);角叉菜胶(Carrageenan , Type I , Sigma ,
C1013);柠檬酸(上海兴达化工试剂厂 , 批号
980501);三(羟甲基)氨基甲烷(中国医药公司北京
采购供应站)。
1.2　实验动物
昆明种小鼠 ,18 ～ 22 g ,白色家兔 , 2.0 ～ 3.0 kg ,
雌雄兼用 ,由中国药科大学新中新药研究中心动物
室提供。
2　方法与结果
2.1　对家兔体外血浆复钙时间的影响
参考文献[ 11]家兔心脏取血分离血浆 ,取试管 5
支 ,每管加入混合血浆 0.1 ml ,分别加入 NS , PTS
0.75 ,1.5 ,3.0 mg/ml ,丹参注射液各 0.1 ml ,随即放
入37℃水浴中温育 1 min ,分别加入 0.025 mol/L
CaCl2溶液 0.1 ml ,混匀 ,仍放入 37℃水浴中 ,开始
记时 。1min后每隔 15秒缓慢倾斜试管 1次 。记录
自加 Ca2+至纤维蛋白形成 ,液面不动所需时间 ,即
血浆复钙时间 ,重复 8次。由表 1可见 ,PTS 终浓
度为 0.5 ,1.0 mg/ml可显著 、极显著延长家兔血浆
复钙时间 。
257
【收稿日期】　2002-09-12　　【＊通讯作者】　Tel:025-5391042　E-mail:shlingao@jlonline.com
Tab 1.Effect of PTS on the plasma recalcifi catic time(PRT)in rabbits
(x±s , n=8)
Group Concentration(mg/ml) PRT(s)
Control - 66.25±8.46
PTS 1.00 93.88±18.24＊＊
0.50 76.35±15.15＊
0.25 69.88±13.17
DS 167.0 148.38±31.98＊＊
＊P<0.05, ＊＊P<0.01 vs control
2.2　对凝血酶所致纤维蛋白凝固时间的影响
参考文献[ 11] ,取试管 5 支 , 分别加入 1.8 ml
0.1%人纤维蛋白原液和上述浓度药液 0.1 ml ,混
匀后 , 37℃水浴预温 2 min ,再加入 4 U/ml凝血酶
0.1 ml ,加毕立即混匀计时 ,在 37℃下观察纤维蛋
白原凝固情况 ,记录凝固所需时间 。重复 11次 。
由表 2可见 ,PTS 终浓度为 0.075 , 0.150 mg/ml可
显著 、极显著延长凝血酶所致纤维蛋白凝固时间。
Tab 2.Effect of PTS on the fibrin coagulation time induced by thrombin
(x±s , n=11)
Group Concentration(mg/ml) PRT(s)
Control - 98.75±14.89
PTS 0.1500 129.50±20.06＊＊
0.0750 114.80±11.96＊
0.0375 110.30±14.55
DS 25.00 162.90±33.09＊＊
＊P<0.05, ＊＊P<0.01 vs control
2.3　对家兔部分凝血活酶凝血时间的影响
参考文献[ 11]制备家兔部分凝血活酶悬液 ,并
分离家兔贫血小板血浆。取试管 5支 ,加入部分凝
血活酶悬液和血浆各 0.1ml , 然后分别加入 PTS
1.5 ,3.0 ,6.0 mg/ml 、丹参注射液各 0.1 ml ,混匀后
于37℃水浴中预温 2 min ,随即加入 0.025 mol/L
CaCl2溶液0.1 ml ,记录凝固时间 。由表3可见 ,PTS
终浓度为 0.375 ,0.75 , 1.50 mg/ml可显著 、极显著
延长家兔部分凝血活酶凝血时间。
2.4　对凝血酶原时间的影响
参考文献[ 11]取试管 5支 ,加入凝血活酶 、CaCl2
溶液各 0.1 ml ,分别加入上述药液 0.1 ml ,再加入
兔血浆 0.1 ml。混匀后放入 37℃水浴 ,开始记时 。
每隔 2 ～ 3秒缓慢倾斜试管 1次 。记录纤维蛋白凝
固 ,液面不动所需时间 。结果表明 , PTS 对血浆凝
血酶原时间无明显影响 ,各组平均值均在 8 s左
右。
Tab 3.Effect of PTS on partical thromboplastic time(PTT)in rabbits
(x±s , n=11)
Group Concent ration(mg/ml) PRT(s)
Control - 72.55±10.24
PTS 1.500 102.27±12.36＊＊
0.750 93.27±14.92＊＊
0.375 83.09±9.05＊
DS 125.0 108.73±15.63＊＊
＊P<0.05 , ＊＊P<0.01 vs control
2.5　对小鼠凝血时间的影响
18 ～ 22 g 雌性昆明种小鼠 50 只 , 禁食 12 h
后 ,随机分为 5组 ,每组 10只 ,分别 ig 给予阳性对
照药 Asa 5.0 mg/kg , PTS 12.5 , 25.0 , 50.0 mg/kg 及
等容量蒸馏水(0.2 ml/10 g),给药 1 h后采用毛细
管法测定凝血时间[ 11] 。由表 4 可见 , PTS 25.0 ,
50.0 mg/kg极显著延长小鼠凝血时间 。
Tab 4.Effect of PTS on the clotting time(CT)in mice(x±s , n=10)
Group Dose(mg/ kg) CT(s)
Control - 70.3±14.8
PTS 50.0 108.4±27.7＊＊
25.0 117.4±33.9＊＊
12.5 81.1±18.2
Asa 5.0 108.7±11.2＊＊
＊＊P<0.01 vs control
2.6　对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀及血栓[12]形成的影
响
PTS 50mg/kg可显著抑制注射角叉菜胶 1 h的
足跖肿胀 , 3个剂量组对注射角叉菜胶 3 ,5 h的足
跖肿胀均有显著或极显著的抑制作用(见表 5 ,6)。
小鼠注射角叉菜胶后 24 h左右 ,尾部出现淤血 ,变
黑 ,形成暗红色血栓区。对照组黑尾率 90 %,并维
持至 72 h ,PTS 50.0 mg/kg 对血栓形成率无明显影
响 ,但对已形成血栓长度有显著抑制作用 , PTS
12.5 ,25.0 mg/kg 亦有抑制趋势 。
Tab 5.Effect of PTS on the footpad swelling induced by carrageenan in mice
(x±s , n=10)
Group
Dose
(mg/ kg)
Footpad swelling(mm)
1 h 3 h 5 h
Control - 0.707±0.100 0.924±0.134 0.819±0.177
PTS 50.0 0.552±0.160＊ 0.563±0.144＊＊ 0.499±0.078＊＊
25.0 0.639±0.095 0.597±0.189＊＊ 0.511±0.151＊＊
12.5 0.649±0.253 0.602±0.100＊＊ 0.623±0.142＊
Asa 50.0 0.605±0.203 0.527±0.139＊＊ 0.463±0.134＊＊
＊P<0.05 , ＊＊P<0.01 vs control
258 中 国 药 科 大 学 学 报 　 J Chin Pharm Univ 34卷
Tab 6.Effect of PTS on the thrombosis induced by carrageenan in mice
(x±s , n=10)
Group
Dose(mg/ kg)
Thrombus
formation(%)
Length of
thrombosis(mm)
Inhibition(%)
Control - 90 22.78±8.06
PTS 50.0 90 15.11±6.37＊ 45.6
25.0 70 17.57±4.72 36.8
12.5 80 18.25±6.30 34.4
Asa 50.0 90 11.56±7.49＊＊ 54.8
＊P<0.05, ＊＊P<0.01 vs control
3　讨　论
本研究采用先从体外后到体内筛选活血化瘀
药的一系列系统实验 ,通过对体外家兔血浆复钙时
间 、凝血酶原时间 、抗凝血酶时间 、部分凝血活酶时
间及小鼠凝血时间的测定 ,考察黄花倒水莲总皂苷
(PTS)对内 、外凝血系统指标的影响 ,结果表明 ,PTS
可明显延长体外家兔血浆复钙时间 ,显著延长凝血
酶所致纤维蛋白凝固时间及部分凝血活酶时间 ,体
内给药可显著延长小鼠凝血时间 ,而对血浆凝血酶
原时间无明显影响。提示 PTS可能通过对抗凝血
通路的关键酶—凝血酶作用 ,影响内源性凝血系统
从而发挥抗凝血作用 。PTS具有上述活血作用 ,在
能否用于防治血栓形成上 ,本文采用致炎剂角叉菜
胶所致小鼠体内血栓模型进行观察 ,结果发现 PTS
50 mg/kg 对小鼠血栓形成率无明显影响 ,但对已形
成血栓长度有显著抑制作用 , PTS 12.5 , 25 mg/kg
亦有一定抑制趋势 ,同时具有明显抗炎作用 ,二者
之间是否具有一定相关性尚需进一步研究。
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Effect of Total Saponin from Root of Polygala fallax Hesml.
(PTS)on Coagulation and Thrombosis
KOU Jun-Ping , LI Jing-Feng , YAN Jin , ZHU Dan-Ni
Department of Complex Prescription of Chinese Materia Medica ,China Pharmaceutical University , Nanjing 210038 , China
【ABSTRACT】　AIM:To observe the effects of total saponin from root of Polygala fallax Hesml.(PTS)on coagula-
tion and thrombosis.METHOD:A series of experiments were performed to study the action of PTS , including in vitro
plasma recalcification time (PRT)in rabbits , fibrin clotting time(FCT)induced by thrombin , partial thromboplastin
time(PPT)and thrombin time(TT), in vivo clotting time(CT)in mice and thrombosis in mice induced by car-
rageenan.RESULT:PTS in vitro could significantly prolong PRT , FCT induced by thrombin , PPT.However , PTS in
vitro had no obvious effect on thrombin time.Meanwhile PTS in vivo could markedly prolong CT in mice , decrease
length of thromb and inhibit inflammation induced by carrageenan in mice , and it didn t affect thrombus formation.
CONCLUSION:Such results suggested that PTS had the action of anti-coagulation and anti-thrombosis , possibly
through endogenous coagulation system.There is still a lot in studing its mechanism further.
【KEY WORDS】　Total saponin;Polygala fallax Hesml.(PTS);Coagulation;Thrombosis
259　3 期 寇俊萍等:黄花倒水莲总皂苷对凝血系统及血栓形成的影响