全 文 ：［收稿日期］ 20100714(007)
［基金项目］ 《陕西省中药饮片标准》研究课题项目
［第一作者］ 康阿龙，副主任药师，研究方向中药资源、鉴定及
分 析，医 院 药 学，Tel:029-84734159，E-mail:
kalong1900@ 163. com
HPLC测定祖师麻药材及不同炮制品中祖师麻甲素
康阿龙1，汤迎爽2，张苏蘅2，孙成荣1，张娴1
(1. 解放军第四五一医院，西安 710054;2. 解放军第三二三医院，西安 710054)
［摘要］ 目的:测定祖师麻及其不同炮制品中祖师麻甲素的含量。方法:采用 RP － HPLC，C18柱(4. 6 mm × 250 mm，5
μm)，流动相为甲醇-0. 5%磷酸水溶液(20∶ 80)，检测波长 327 nm。测定 18 批祖师麻药材及炮制品中祖师麻甲素含量。结果:
祖师麻甲素在 0. 102 ～ 0. 510 μg(r = 0. 999 9)与峰面积值呈良好的线性关系，平均加样回收率为 98. 09%(n = 6)，RSD 0. 92%。
各样品中祖师麻甲素含量差异较大(0. 01% ～ 1. 11%)，但炮制前后含量变化不大。结论:该分析方法快速、准确、重复性好，为
祖师麻药材及炮制品综合质量评价体系的建立提供理论和实验依据。
［关键词］ 祖师麻;炮制品;祖师麻甲素;HPLC
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ B ［文章编号］ 1005-9903(2010)16-0039-03
Measurement of Daphnetin Contents in Cortex Daphnes and
Different Processed Drugs by HPLC
KANG A-long1，TANG Ying-shuang2，ZHANG Su-heng1，SUN Cheng-rong1，ZHANG Xian1
(1. No. 451 Hospital of PLA，Xian 710054，China;2. No. 323 Hospital of PLA，Xian 710054，China)
［Abstract］ Objective:To compare the contents of daphnetin in the raw medical material and the different
processed products of Cortex Daphnes. Method:The contents of daphnetin in 18 samples of Cortex Daphnes and its
processed drugs were determined by HPLC. Chromatographic conditions included Hypersil C18 column and the
mobile phase consisted of a mixture of methanol 0. 5% phosphoric acid (20 ∶ 80). Daphnetin was detected at 327
nm. Result:Daphnetin was linear in the range of 0. 102 ～ 0. 510 μg with correlation coefficient 0. 999 9. The average
recovery was 98. 09% with RSD 0. 92% (n = 6). The contents of daphnetin in 18 samples was big difference
(0. 01% ～ 1. 11%). But the change of contents was small before and after processed. Conclusion:The method of
analysis was fast，accurate and practicable. The study would provide theoretical and experimental data in order to
evaluate the quality of Cortex Daphnes and its processed drugs systematically.
［Key words］ Cortex Daphnes;processed drugs;daphnetin;HPLC
祖师麻 Cortex Daphnes 为瑞香科植物黄瑞香
Daphne giraldii Nitsche、陕 甘 瑞 香 D. tangutica
Maxim.和凹叶瑞香 D. retusa Hemsl. 的干燥根皮与
茎皮。始载于《陕西中草药》，辛、苦，温;有小毒;归
肝经。具祛风除湿，活血止痛的功能。用于风湿痹
痛，关节疼痛，跌打损伤，关节炎，类风湿性关节
炎［1］。祖师麻主要含有香豆素类、黄酮类、二萜类、
木脂素等成分［2］，以祖师麻甲素为代表的香豆素类
成分具有抗炎、镇痛、抑菌、抗血栓、抗凝等药理作
用［3］，为祖师麻的主要活性成分，其含量测定方法已
有文献报道［4-5］，祖师麻炮制品饮片主要有祖师麻咀
和姜祖师麻，前者为祖师麻经切制后直接入药的饮
片，后者是用姜汁进行加工后的饮片，增强了散寒止
痛的功能。这 2 种炮制品饮片中祖师麻甲素的含量
未见报道，本文对此建立了操作简便、准确可靠的
HPLC 测定法，测定了 18 个批次的祖师麻药材及炮
制品中的含量，考察了炮制过程对有效成分产生的
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2010 年 11 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 16，No. 16
Nov.，2010
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2010.16.021
影响，为祖师麻药材及其炮制品饮片的综合质量评
价体系建立提供理论和实验依据。
1 仪器与试药
美国热电 P4000 高效液相色谱仪，UV1000 检测
器，SEPU3000 数据工作站(杭州普惠)。
祖师麻甲素对照品 (供含量测定用，0900-
200001，中国药品生物制品检定所);从不同产地和
饮片厂收集的 18 批祖师麻药材、饮片和炮制品，均
经西安市药品检验所谢志明主任药师鉴定，甲醇为
色谱纯，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱 DiamonsiLTM C18(4. 6 mm ×
250 mm，5 μm);流动相甲醇-0. 5%磷酸(20∶ 80)，检
测波长 327 nm，柱温室温，流速 1 mL·min － 1，进样量
10 μL。对照品及祖师麻药材和炮制品饮片色谱图
见图 1。
图 1 祖师麻 HPLC 色谱图
A. 对照品;B. 祖师麻药材;C. 祖师麻咀;
D. 姜祖师麻;1. 祖师麻甲素
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取祖师麻甲素对
照品 2. 04 mg，置 10 mL 量瓶中，加 85% 乙醇使溶
解，即得。
2. 3 供试品溶液的制备 取本品粗粉约 0. 5 g，精
密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 85% 乙醇 50
mL，称定质量，回流 2. 5 h，放冷，再称定质量，用
85%乙醇补足减失的质量，摇匀，滤过，即得。
2. 4 线性关系考察 精密称取祖师麻甲素对照品
5. 10 mg，置 100 mL 量瓶中，加 85%乙醇至刻度，摇
匀，分别精密吸取 2，4，6，8，10 μL，注入液相色谱
仪，记录色谱图，测定峰面积，并以峰面积对进样量
进行回归，得回归方程 Y = 7. 50 × 104X + 1. 30 × 104，
r = 0. 999 9，以上结果表明在 0. 102 ～ 0. 51 μg 祖师
麻甲素峰面积值与进样量呈良好的线性关系。
2. 5 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液 10
μL，重复进样 6 次，测定，结果仪器精密度 RSD
0. 9%。
2. 6 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别放置
0，2，4，6，8 h，各精密吸取 10 μL，注入液相色谱仪，
测定，祖师麻甲素 RSD 1. 0%，表明其在 8 h 内测定，
结果稳定。
2. 7 重复性试验 取同一批样品适量，精密称取 6
份，每份约 0. 5 g，按 2. 3 项下制备供试品溶液，在上
述色谱条件下分析测定。祖师麻甲素平均含量为
0. 31%，RSD 1. 8%。
2. 8 加 样 回 收 率 试 验 精 密 称 取 已 知 含 量
(0. 308%)的样品共 6 份，分别置具塞锥形瓶中，各
精密加入对照品溶液(155. 3 mg·L － 1)5 mL，按供试
品制备方法制成加样回收供试品溶液，按上述色谱
条件分析测定，计算，祖师麻甲素平均回收率为
98. 09%，RSD 0. 92%(见表 1)。
表 1 祖师麻甲素加样回收率测定
取样量
/ g
样品含量
/mg
对照品加
入量 /mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
/%
0. 251 2 0. 773 7 0. 776 5 1. 540 4 98. 74
0. 252 9 0. 778 9 0. 776 5 1. 536 7 97. 59
0. 250 8 0. 772 5 0. 776 5 1. 532 0 97. 81
98. 09 0. 92
0. 248 3 0. 764 8 0. 776 5 1. 515 2 96. 64
0. 257 6 0. 793 4 0. 776 5 1. 559 8 98. 70
0. 254 2 0. 782 9 0. 776 5 1. 551 9 99. 03
2. 9 含量测定 分别精密吸取对照品溶液和供试
品溶液各 10 μL，进样，测定，计算，18 批药材及炮制
品(祖师麻咀、姜祖师麻)中祖师麻甲素的测定结果
见表 2。
3 讨论
本文比较了不同提取溶剂(95% 乙醇、85% 乙
醇、65%乙醇、甲醇、85%甲醇、65%甲醇)和不同提
取方法(超声和加热回流)的提取效率，并对回流提
取时间(1. 0，1. 5，2. 0，2. 5，3. 0 h)进行了考察，结果
显示最佳溶剂为 85%;回流提取比超声可提高
20%，最佳回流时间为 2. 5 h。
我们近年来对祖师麻药材主产地和市场商品药
材调查发现，陕西秦岭地区的太白山有较大的缊藏
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量，3 个主要品种均有分布，其中以主流品种黄瑞香
的分布较多，含量较高，而市场商品药材以黄瑞香和
陕甘瑞香为主。
表 2 18 批祖师麻药材及炮制品饮片中
祖师麻甲素质量分数(n = 3) %
No. 样品名称 批号或采集时间 产地 祖师麻甲素质量分数
1 祖师麻药材 20050915 陕西 0. 31
祖师麻咀 20050917 陕西 0. 35
姜祖师麻 20050917 陕西 0. 41
2 祖师麻药材 20050930 宝鸡 0. 65
祖师麻咀 20051002 宝鸡 0. 63
姜祖师麻 20051002 宝鸡 0. 73
3 祖师麻咀 20080312 陕西 0. 54
姜祖师麻 20080312 陕西 0. 52
4 祖师麻咀 20080410 陕西 1. 11
姜祖师麻 20080410 陕西 0. 98
5 祖师麻药材 20080515 眉县 0. 48
6 祖师麻药材 20090608 眉县 0. 31
7 祖师麻咀 051001-1 汉中 0. 01
姜祖师麻 051001-1 汉中 0. 01
8 祖师麻咀 20071216 陕西 0. 02
姜祖师麻 20080105 陕西 0. 02
9 祖师麻咀 20070829 陕西 0. 02
姜祖师麻 20070829 陕西 0. 01
注:每一组为同批样品的不同炮制品饮片。
18 个批次样品测定结果显示，不同饮片厂提供
的药材或饮片，含量差异很大，最高的达 1. 1%，最
低于只有 0. 01%，其原因一是药材品种不同，文献
显示有瑞香属多个品种的药材当祖师麻使用［6］，可
见其品种之混乱，所以很有必要对其品种进行考证
与研究，规定其药材来源。另一方面与其产地及采
收期有关。不同的产地，气候土壤不同，对植物次生
代谢产物的生成有直接的影响，采收期不同，植株生
长状态不同，成分肯定存在差异;再者，本品的药用
部位是根皮或茎皮，药材中根皮与茎皮所占的比例
不同，含量也会有所不同。
炮制品饮片主要有祖师麻咀和姜祖师麻 2 种，
前者是将其除去杂质及非药用部位，洗净，稍润，切
成小段，干燥即得。后者是将饮片祖师麻，照姜汁炙
法炒至姜汁被吸尽即得。测定结果显示，同批药材
与其加工后的 2 种炮制品饮片含量略有差异，但相
差很小，可见饮片加工过程对祖师麻甲素未产生严
重破坏，说明炮制工艺较为合理。
［参考文献］
［1］ 国家中医药管理局 .中华本草［M］.第 5 册 . 上海:上海
科学技术出版社，1999:407.
［2］ 李书慧，吴立军，殷红英 . 祖师麻化学和药理活性研究
进展［J］.中国中药杂志，2002，27(6):401.
［3］ 张文亮，李荣亨 .瑞香素药理作用研究现状［J］.实用中
医药杂志，2007，23(6):402.
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麻甲素的含量［J］.陕西中医，2006，27(6):734.
［5］ 位海强，袁才英，杨金凤，等 .祖师麻质量标准研究［J］.
广东药学，2004，14(3):1.
［6］ 蒋以号，杨武亮，陈海芳，等 . HPLC 测定不同基源及不
同产地祖师麻中祖师麻甲素［J］. 中草药，2008，39
(7):109.
［责任编辑 顾雪竹］
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