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7 40
· 中国新药与临床杂志 (C hi n J N e w Dur gs C li n Re m ) , 200 7 年 10 月 ,第 2 6 卷 第 10 期
床药动学研究 。
氨氯地平具有光不稳定性 , 整个操作过程需
避光进行 。 血清样品处理过程 中 , 乙睛沉淀蛋白
后 , 取上清加水重组进样 , 目的是将样品的有机
相比例调节至与流动相中有机相比例一致 , 其优
点是能够获得较理想的峰形 , 噪音也能有所降低 。
[参考文献 ]
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a m p e r o m e t ir o d e t e o t io n [刀. J Pharn B io m e d
A n a l
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19 8 9
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m a t o asr p h y
一 t a n d e m m a s s s p e o t ro m e t仃 in d ru g an d b i o m e d io a l
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C l in Ch i m A o t a
,
2X() l
,
3 1 3 ( l 一 2 ) : 14 7 一 1 50
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74 6
.
[文章编号 ]10 7一76 69 ( 2007) 10一0 740 一0 3
胆木注射液的部分毒理观察
李 备 ,
(海南省药
朱 毅 , 赵毓梅 , 郑 霞 , 刘 春
品检验所 , 海南 海 口 57 0 2 16)
[关键词 」 急性毒性试验 ; 溶血 ; 过敏反应 ; 胆术注射液 ; 异常毒性检查 ; 血营刺激性试验
[摘要 1 目的 : 评价胆木注射液的安全性 。 方法 : 对胆木注射液进行急性毒性 、 异常毒性 、 溶血性 、 血管
刺激性 、 过敏性试验 的毒理学研 究 。 结果 : 胆木注射液小鼠静脉注射的 L D * 为 4 .9 2 7 m g’ k g 一 , , 乙D二 95 %
可信限为 4 . 16 ~ 5 .5 42 m g’ k g 一 , ; 异常毒性实验显示注射给药后观察 4 8 h , 未 见小鼠死 亡 ; 对兔红细 胞没
有致溶血和凝集作用 ; 血管刺激性试验显示该药给药后给药部位可见轻微充血 , 未见其他明显异常 ; 该
药亦未致豚 鼠出现过敏反应 。 结论 : 胆木注射液具有较好 的安全性 。
【中图分类号 〕 R 965 〔文献标识码」 A
S t u dy
o n P a r it c i a l t o 对e o l o g y o f L ig n u m Na u e le a e inj e e it o n
L l B e i
,
Z H U Y i
,
Z H A O Y u
一
m e i
,
Z H EN G X ia
,
L IU C h u n
(H瓜 n an snI t i t u t e fo r D r u g oC n t or l
,
H瓦k o u AH I瓜月N 5 7 0 2 1石
,
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「K E Y WO RD S 〕 a e u t e t o x i e i t y t e s t s ; h e m o ly s i s ; a n a p h y lax i s : L咖 u m 刀d“ c l e ae inj e c ti o n ; a b n o mr a l to x ic i t y
te s t s ; v a s e u l a r s t im u la r i o n t e s t s
IA B S T R A C T 」 A IM : oT e v a l u a t e th e to x i e i t y o f L ign u m 刀山z c le 肥 inj e e t i o n . M E T H O D S : T h e a e u t e t o x i e i t y ,
a b n o mr
a l t o x i e i t y
,
h e m o l y s i s
, v a s e u l a r s t im u la t i o n
, a n d a n a Ph y l a x i s w e r e t e s t e d
.
R E SU LT S
:
Th e i n t r a v e n o u s
inj
e e ti o n L D
S。 o f L i邵研m Na uc le ae inj e e t i o n i n m io e w a s 4 9 . 2 7 m g · k g 一 , a n d 95 % e o n if d e n e e li m i t w a s 4 . 16 -
一【收稿 日期」 2 0 7一 02一 07 【接受日期 ] 2 007一0 7一 07
l作者简介 ] 李 备 ( 19朽一 ) , 男 , 四川绵阳人 , 主管药师 , 药理学硕士 , 主要从事药理毒理研究 。
[联系人 ] 李 备 。 P h n : · 86一89 8一6 6 23一 334 3 ; 86一 1320 890 20 30 。 E一m a i l : “ q l ib@ y a h 0 0 , o m · c n
中国新药与临床杂志 (C hi n J N e w D ru gs C li n R e m), 2 007 年 10 月 , 第 26 卷 第 10 期
55
.
4 2 m g
·
k g
一1. T h e a b n o rm
a l t o x i e i ty te s t s h o w e d t h a t n o m i e e d i e d
.
N o e v id e n e e s o f h e m o ly z a t i o n a n d a g g r e g a t i o n
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e r g i e r e a e ti o n o n g u i n e a p i g i n : i: 0 w e r e o b s e vr e d
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s tim u lat i o n te s t s h o w e d i t h a d 而 ld e o n g e s t i o n i n th e l o e a l p o s i t i o n aft e r a dm i n i s t r a ti o n , b u t n o o t h e r e v id e n e e s
o f a b n o r m i t y
.
CO N CL U S IO N : Lign
u m N duC le ae inj
e e ti o n 15 s afe
t y a n d er l i a b l e
·
中药胆木 ( Lig n u m e t R a d i x N a u e l e a e ) , 又名
乌檀 、 药乌檀 、 黄羊木 , 为茜草科乌檀属乔木乌
檀 (从狄〕l e a 雌 e in 以15 几 e cr e x 只 tadr ) 干燥的茎 、
枝 、 树皮和根 。 主要分布于海南 、 广东和广西 。 胆
木性味苦 、 寒 , 有清热解毒 、 消肿止痛之功效 。 以
胆木为原料生产的胆木注射液已在临床上应用多
年 , 用于急性扁桃腺炎 、 急性咽喉炎 、 急性结膜炎
及上呼吸道感染 , 疗效确切 .1[ 2] 。 然而 , 胆木注射
液的毒理学研究未见文献报道 。 本文通过对胆木注
射液的急性毒性 、 溶血性 、 血管刺激性 、 异常毒性 、
过敏性试验的测试 , 观察动物在接受胆木注射液
后 的反应情况 , 为制剂及临床提供安全性评价 。
材料与方法
药品 胆木注射液 , 规格 : 每支 Z m L : 6 m g (胆
木提取 物 ) , 由海南制药厂有 限公司提供 , 批号
0 6 0 8 01
。 氯化钠注射液 , 河北天成药业有限公司
产品 , 批号 0 5 062 3 1。
动物 昆明种小白鼠 , SP F (无特定病原体 ) 屏障
系统级 , ( 2 .0 0 士 5 .2 0 ) g , 雌雄兼用 , 购 自广东
省医学实验 动物 中心 , 动 物合格证 S CX K (粤 )
2 0 0 3一0 002 。 大耳 白兔 , ( 2 . 4 0 土 0 . 20 ) k g , 雌雄兼
用 , 由湖南农业大学动物科技学 院实验动物养殖
场提供 , 动物合格证 S C X K (湘 ) 2 0 0 3一0 0 03 。 荷
兰豚 鼠 , 25 0 一 3 0 0 9 , 湖南农业大学动物科技学
院实验动物养殖场提供 。 动物实验前 , 昆明种小
鼠预 先饲养 3 d , 大耳 白兔 、 荷兰豚 鼠预先饲养
1 w k
, 以观察动物表现 , 实验时剔除不合格动物 。
动物室温度 2 2 ℃ 一 2 5 ℃ , 湿度 4 0 % 一 75 % 。
急性毒性实验 静脉注射 , 取 ( 2 .0 0 士 .2 0) 9 的小
鼠 7 0 只 , 雌雄各半 , 随机均分为 7 组 , 据预试结
果确定剂量分组 , 按 lB is s 法设立公 比为 .0 85 , 剂量
组 分别设 为 7 5 . 0 0 、 6 3 . 7 5 、 5 4 . 19 、 4 6 . 0 6 、 3 9 . 15 、
3 3
.
2 8
、
2 .8 2 9 m g
·
k g
一 , , 胆木注射液以氯 化钠注射
液稀释成浓度分别为 3 . 0 0 、 2 . 5 5 、 2 . 17 、 1 . 84 、 1 . 5 7 、
1
.
3
、
1
.
13 9
·
L
一 , 时溶液 。 一次给药量为每 2 0 9 体
重 .0 5 m L , 3 0 5 内缓慢注射完毕 , 给药后立即观
察动物反应情况 , 观察 14 d l3] 。
异常毒性检查 据预试结果 , 确定异常毒性检查
的剂量 为 12 . 0 0 m g · k g 一 , 。 取胆木 注射液 , 以氯化
钠注射液配成浓度为 .0 4 8 9 · L一 , 的溶液 , 按每 20 9
体重 .0 5 m L 给予 。 按中国药典 2005 年版一部附录
“ 异常毒性 检查法 ” 项 , 取小 鼠 20 只 , ( 19 .0 士
1
.
0) 9
, 雌雄各半 , 尾静脉注射每只 .0 5 m L , 4 -
5 5 注射完毕 , 给药后观察 48 h 。
溶血试验14 制备体积分数 2 %兔红细胞混悬液 。
取试管 14 支 (每剂量 2 支平行管 ) , 分别编号为 1
至 7 号 , 依次加人 2 %兔红细胞混悬液 .2 5 m L 和
氯化钠注射液 ( 1 一 5 号管分别加人 .2 4 、 .2 3 、 .2 2 、
2
.
1
、
2
.
0 m L
,
6 号管 2 . 5 m L , 7 号管 0 m L ) , 混
匀 , 置于 3 7 ℃恒温箱中 .0 5 h , 然后 1 一 5 号管分
别加入胆木注射液 0 . 1 、 0 . 2 、 0 . 3 、 0 . 4 、 0 . 5 m L , 6
号管为阴性对照 , 7 号管加人蒸馏水 .2 5 m L 作为阳
性对照 , 摇匀 , 置于 37 ℃恒温箱中 , 分别于 .0 25 、
0
.
5
、
l
、
2
、
3
、
4
、
5
、
6
、
24 h 观察是否有溶血及
凝聚现象 。
血管刺激性试验 14 取健康家兔 7 只 , 于一侧耳缘
静脉注射胆木注射液原液 , 另一侧耳缘静脉注射
等量 的氯化钠注射液 。 药物剂量按 .0 5 m L · k g 一 , ,
q d x 3 d
。 末次给药后 24 h 处死动物 , 以耳缘静脉
注射点至向心方向 , 连续取 3 段长约 1 c m 的血管
连 同周 围组织 , 4 % 甲醛溶液 固定 , 常规石蜡切
片 , H E 染色 , 观察组织病理变化 。
过敏性试验 取豚 鼠 27 只 , 随机均分为 3 组 , 分
别设为阴性对照组 、 阳性对 照组 、 受试药组 , 各
组豚 鼠隔 日分别腹腔注射氯化钠注 射液 .0 5 m L 、
10 %鸡蛋清 .0 5 m L 、 胆木注射液原液 .0 5 m L , 连续
3 次 。 于首次给药后 14 d 、 Z l d 、 2 8 d , 各组均取豚
鼠 3 只 , 阴性对照组 、 阳性对照组 、 受试药组分别
静脉注射氯化钠注射液 1 m L 、 10 %鸡蛋清 1 m L 、 胆
木注射液原液 1 m L , 观察 3 组动物有无搔鼻 、 喷
嚏 、 竖毛 、 蜷缩 、 抽搐 、 大小便失禁 、 死亡等过
敏反应症状 。
结 果
急性毒性 实验 结果见表 1。 给药后 , 死亡小鼠可
中国新药与临床杂志 (C h in J N e w D ru g s C l in R e rn ) , 200 7 年 10 月 , 第 2 6 卷 第 10 期
见耳充血 、 眼分泌物增多 、 呼吸困难 、 躁动不安 、
蹬足 、 惊厥死亡 , 死亡 出现在 给药后 30 5 之 内 ,
尸检解剖肉眼观察未见明显病变组织 。 存活小鼠
在 3 h 内恢复正常进食 。 胆木注射液小鼠静脉注射
的 LD 、 为 4 9 . 27 m g · k g ` , , 其 9 5 %可信限为 4 4 . 16 -
55
.
42 m g
·
k g
一 l 。
表 1 胆木注射液静脉注射对小鼠的毒性影响 n = 10
对数剂
量 m g
卜旦
吸X
死亡 死亡黔 / 只 率 / % DL
50 及 95 % 可信
限 / m g · kg 一 ’
机位)归单Y加率(机位)验单Y实率(
7 5
.
0() 1
.
8 75 1 10 1X()
一 6
.
45 1 4
4 9
.
2 73 ( 9 5 % 的可
6 3
.
75 1
.
5以 5 7 7 d 5 . 5 24 5 . 5 59 9 信限 : 科 . 157 -
55
.
4 22 )
5 4
.
19 1
.
7 33 9 6 6 0 5
.
2 52 9 5
.
32 8 6
4 6
,
06 1
.
6 6 3 3 4 4 0 4
.
74 7 1 4
.
7 6 7 1
39
.
15 1
.
59 2 7 3 30 4
.
47 6 4
.
2 0 5 5
33
.
2 8 1
.
52 2 2 1 10 3
.
7 18 3 3
.
6 4 3
2 8
.
2 9 1
.
4 5 1 6 0 0 一 3
.
0 8 3 1
异常毒性检查 给药后观察 48 h , 未见动物死亡 ,
检查剂量 12 .0 0 m g · k扩约相当于 L D 、 的 1/ 4 。
溶血试验 在 .0 25 一 6 h 及 2 4 h 内 , 未见 1 一 6 号
管出现溶血及红细胞凝集现象 , 而 7 号管出现溶
血 。 表明胆木注射液无溶血和凝集反应 。
血管刺激性试验 给药后给药部位可见轻微充血 。
光镜下病理组织学检查结果表明 , 注射氯化钠注射
液和胆木注射液原液的 14 条耳缘静脉均未见变性 、
坏死 、 内皮细胞损伤 、 炎症细胞浸润 , 亦未见其他
异常改变 。 见图 1 。
过敏性试验 受试药组首次给药后 14 d 、 lZ d 、 28 d
再次用药 , 在 lZ d有 1 只动物短暂搔鼻 , 其他动
物均无过敏反应症状 。 阴性对照组动物无过敏反应
症状 。 而阳性对照组动物有明显过敏反应症状 , 观
察指标均为阳性 , 并在 巧 m in 内全部死亡 。
图 1 血管刺激试验的病理组织学结果 ( x 4 0 ) A : 氯
化钠注射液 ; B : 胆 木注射液
验 、 血管刺激性 试验 、 过敏性试验检测胆木注射
液均未出现 阳性结果 , 说明胆木注射液对家兔血
管没有 明显刺激作用 、 对红细胞无溶血和凝集作
用 、 对豚 鼠无过敏反 应 。 目前 , 胆木注射液在 临
床上的应用途径 为肌内注射 , 本实验研究提示 ,
可进一步研究胆木注射液静脉用药的安全性 , 开
发此产品 以增加静脉用药途径 , 解决重症病人 临
床需要 。
〔参考文献」
讨 论
本研究按照 国家食品药品监督管理局注射剂
研制指导原则有关安全性 试验项 目要求进行 , 试
验所采用的方法简便 、 准确 、 可靠 。 胆木注射液小
鼠静脉注射的 LD 。 为 4 .9 2 7 m g · k g 一 , , 其 95 %可信
限为 4 . 16 一 5 5 . 4 2 m g · k g 一` ; 异常毒性 的检查剂量
12
.
0 m g
·
k g
一 , 约相当于 L D * 的 1/ 4 、 临床常用剂量
0
.
1 m g
·
k g
一 , 的 120 倍 , 未 发现异常毒性 ; 溶血试
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