全 文 ：雪莲花醇提物对大鼠组织和红细胞的抗氧化活性
高湘 ’ ,张振明 ’ ` ,许爱霞’ ,雷晓燕2 (1 . 甘肃省人民医院药剂科 , 甘肃 、 州 73 议朋 ; 2 }}一肃省人民医院小儿科 , }j肃 、川玉7 3似”
摘要 : 目的 研究雪莲花醇提物 ( 】):51工I M )的抗氧化活性 、 方法 用 · HO 生成 系统 F声十 + 维生素 C 诱导大鼠心 、肝 、 肾组织匀
装脂质过氧化 , 用 BT A 比色法测定 MDA 含量 ; 用 NBT 还原法测酵母 多糖 A 刺激 大鼠中性粒 细胞产生的 (坛 用分光光度法测
线伍诱发的 大鼠红细胞溶血度 。 结果 对照组 大鼠心 、 肝 、 肾匀浆经 卜产十 十 维生素 C 溶液诱 发后 MI )A 含 量较空 白组 升高
( 尸 < 0
.
01 )
, 中性粒细胞受酵母 多糖 A 刺激后 街 生成较空 白组升高 ( I, < 0 , 01 ) , 红细胞 经 H Z姚 诱 发后溶血度较 空白组升高
(P
< 0
,
01 )
。 而 6 . 3 , 12 . 5 , 25 , 5 0 , 10 , o2 咫
·
I
一 ’
E SI 卫 M 能不 同程度抑制 F护` + 维生素 C 诱导的大鼠心 、肝 、 ’牙脂质过氧化产物
M D A 生成 ,其抑制心 、肝 、 肾 M DA 生成的 I嘶分别 为 29 . 4 , 32 . 9 , 31 . 4 ,罗 I 一 ’ , 其量效关系均呈 负相关 , 相关系数分别为 一 0 . 90 5 ,
一
0
.
91 2
, 一 0
.姗 ,相关性检验 尸值均 < 0 , 01 ;能不 同程度抑制 酵母多糖 A 刺激 中性粒细胞生成 街 , 其抑制 中性粒细胞 生成 恤
的 IC 、 为 24 . 6 拜g’ L 一 ’ , 其量效关系呈 负相关 , 相关系数为 一 0 . 8 87 ( p < 0 01 ) ; 能不 同程度抑制 H Z姚诱发的红细胞氧化溶血 , 其
抑制红细胞氧化溶血的 I与为 57 . 6 鸿 · L一 ’ ,其量效关 系呈 负相关 , 相关系数 为 一 0 . 叩5 ( p < 0 . 01 丸 结论 雪莲花醇提物通过
清除 · H O ,街及 H Z q 发挥杭氧化活性
关键词 : 雪莲花醇提物 ; 丙二醛 ; 自由基 ;溶血度 ;红细胞 ; 中性粒细胞 ;杭氧化活性
中图分类号 : 2H 85 文献标识码 : A 文章编号 : 10 卜 24 94 (2 0 5) 14 一 l肠 2 一 以
A n t i丽d a t ion of e t h a n o li c ex t r a c t fr o m 撇us “ ear 勿n ic esP on tiS u eS a nd e yr t h r oc y t es in r a ts
( ; AO X i
乃阴心nce ,
an g l
,
五份此服〕u
Z l lANG Z ll e n
7 3 (I X )
,
hC ian ;
一
m in g ,
` ,
x u A i
一 x ia ,
,
x王 x x i ao 一 y a ;产( 一 )elI a lr me n , 可瓶~
,
z
,le()
l e
’ `
2
.场脚材厅卿叹 of eP澎 i“ l二 , 八叨 , le ,、 l(I 叩 12`, l `犷汰 ,。 ` , 乃 1” 泛,、 e . 肠尹配尹川 。 7 3X( ” ) , 橄` ; ,、`
伪胡 i t` 21 `少肠 , is : 之
)
A侧刃卫 ACT : O B J E C l l V E oT s t u d y a n t io x id a t , o n 。 ,f e rh a n o l , 〔 e x t ar `
·
t 于。 , m 交。 s `, er ` , 人切汉咧 H a n ol Mas s ( E S I月 M ) . M E lT l o 瑞 科1。
详 or x i叙 io n o f h .朋。扩ant e s of art haert , l i v e r a n 、 1 k id n e , w a s , n `lu 、 · e 、 l }, , · t一( ) 罗 n e ar , l o n s y s r e m (汀附 十 a n d v i t a m in c
.
M a l` 〕: 101】a一d e卜y、一e
( M D A ) w as d
e t e二 n o d u s in g BT A e o lo n m e t ir ( m e th司 . S u伴 l o x id。 ( O j ) i , l olu ; `。 d h y z” 1 1,) san 一 s t i m ul a t e d n e u t r( , p h l ls w a s m 。 , L. er d 玩 N g l’ 。 、 -
d
u e t io n m e tl l川」. 姚伙 一 e a u s e d h e l l lo ly s i s of e l尹】u翔 y te s * as me a s u。 。 1 5详 。 tor m e t r i (!al ly R ES U L铭 Co m paer d w i th e o n to lg 、 ), l p , M D A 。 。) n -
t e n t 5 1加 6 o an rly in e o ase d i n th e h o m o罗n at e , of h e art , l iv e r 。 n d 拓〔如e 、 〔 , l、 art 、 ,, 1` l ;」〔、 e d l , , · 110 罗 n e ar t . o。 、 y s t e m 。 r附 十 。 n o l v l r~ , , ( ;( 尸 <
0
.
0 1 )
. 街罗 n e art io n 5 1脚 if e a n rl y o s e i n z” l l O S a n 一 St ,m Ld a t e ,」n e o t (r , P h il、 `汀 ar t、 ( p < 0 . 0 1 ) , he m o ly s l s e x t e n : 5 1卿 if c a n *一y l f l 〔· r e a s 。 。l , n H Z仆-
e a u蒯 e尔卜n 目 yt e s of art s ( p < 0 . 0 1 ) . 1 1洲℃ V e r , M l) A of arm t l o n i n h`)m o g e n a r。 * w a 、 i ,击 ibi t e d b、 6 . 3 , 一2 . 5 , 2 5 , 50 , 10 an ol珊 工堪一 ’ E s -
LH M an d l与 in h e art , l sv e r a n d ki俪 y er s伴 e t iv e l y we 二 2 9 . 4 , 3 2 . 9 a o l 3 1 . 4 ;笔 · l 』一 ’ , *h e er l a t io n 抚 t w o e n 卿an t iry a n d 。伍。 : e n ( · y 0 5 ,l e邵 -
t iv e an d th
e er la t iv e C , 佑 e i e nt s we er 一 0 .叩 5 , 一 0 . 9 12 a n d 一 () .叩 8 ( 沮l p < () . 0 1 ) 二、 伴e t i v e ly . 街 g e n e ar *10 。 fI’O m yz m o sa n 一 , t in l u l a t e d n 。 ,卜
加甲h ils in ar r s was ihn ib i
t e d hy E S I J IM an d l与 w as 抖 6 ,, g · I J 一 ’ , th e 二 la r ,、 , n 圣犯 lw e 。 ,1 明an t i ty a n ol 。 m e l e n 。 , w邵 。 e邵 t i、 。 。 n 《1 th、、 er la rsv。
e , if e ie n t aws
一 0 . 58 7 ( p < 0
.
0 1 )
.
ZH OZ
一 e
au蒯 h e om ly s l、 。 r 。川卜n 、 y t e、 * , Ihn i h i,。 ( 1 1洲 E s l月M an d l (毛。 w , 5 7 . 6碍 · r 一 ’ , t一: 。 、 一a rio l l
晚twe e n 卿 an t i t y a n d e if e ie n e y was n e g a t i v e 洲d rh e re la t iv e 。 , if 。
·
i。 ; l r w a s 一 0
.叩 5 ( p < 0 . 0 1 ) . C O N C L t JS10 N ES LH M e x h i},i t o d an a r卜
t ioxj d
a t io n l,y cs va
e n g i n g
·
HO an d街 a n d 姚侠 i n bi o lo邵 e习 s y s t e l二
K E Y WO IR粥 : e ht an ol io e x tacr t fm m 撇 su auer 伍
n从 5eI 巧 H a n d M努 s : r n a l`〕 n di a ld e h y d e : fer e ar 山 e a ls ; h e m o l y s i s e x t e n t: 。翔 t }z n、 、 y ty ; n o u t (r , p hi l :
an t i
o石d a t io n
雪莲花 ( sa o su er a 阮 n 汉ye1 ” Hadn M as 。
,
s LH M )系
菊科植物绵头雪莲花的带花全株 ,有除寒壮阳 ,调经
止血的传统功效 。 近年国内研究资料表明 ,雪莲花
水提物有抗辐射损伤作用 ,其机制可能与清除经自
由基及防止染色体畸变有关 t`〕 。 本实验将对雪莲花
醇提物 ( e t hano li e e x tr ac t 介o n l s a ,” s o er 。 za n uelt ,、 H an d
M as
s , E SL HM )的抗氧化活性进行探讨 , 旨在为开发
中药类抗氧化剂提供理论依据
1 材料和方法
1
.
1 材料
基金项 目 :甘肃省自然科学基金计划项目 ( 3 2夕) 41一 2A 5一 07 3 )
作者简介 :高湘 , 女 , 主管药师 ` 通讯作者 : 张振明 ,男 , 副 卜任药师
·
10 6 2
·
hC 讲 卿故 n J , 2〔涅巧拟下 , 饰2. 40 肠 . 14
『介 1: ( 〔冷3 ! )8 28 17 54 E一 n 一掀l : 即 bz l l l9 65 @ * 一I一:通 一、 ) r丫】
中国药学杂志 2侧巧年 7 月第 40 卷第 14 期
硫代巴比妥酸 (BT A ,上海试剂二厂 ) ,氯化硝基
四氮哇蓝 ( N B T ,上海前进试剂厂 ) ,酵母多糖 (A 51 9 -
anI 公司 ) ,其他试剂均为进 口或国产分析纯级产品 。
普通级 iW s atr 大鼠 (兰州 医学院实验动物中心
医学实验动物合格证编号 : 4 8 2 ) , 早舍不拘 , ( 2 10 士
20 ) g
,雪莲花购自药房 , 经甘肃省药品检验所宋平顺
主任药师鉴定为绵头雪莲花的带花全株 , 雪莲花醇
提物用 5% 二甲亚矾 ( DM So) 溶解 。
1
.
2 雪莲花醇提物的制备
用回流提取法 。 药材适度粉 碎 , 体积分数为
80 % 乙醇浸泡 24 h ,装人瓶内约为容量的 12/ ,溶剂
浸过药材表面约 2 C m ,水浴中加热回流 ,放冷过滤 ,
第 1 次回流 l h ,第 2 及第 3 次各约 o . s h , 回收乙醇 ,
60 ℃干燥即得 。 光谱法定性结果表明样品含有黄
酮 、黄酮昔和雪莲鞘胺醇等。
1
.
3 酵母多糖 A 悬浮液的制备z[]
酵母多糖 A 用大鼠血清悬浮为 5% 质量浓度 ,
3 7 ℃温育 30 m i n , 4 ℃ , 3 (联 ) x g 离心 10 m i n , 弃上
清 ,沉淀用 4 倍量 0 . 巧 仙 l lO I . L 一 `磷酸 盐缓冲液
( BP S
,州 7 . 4) 冲洗 , 同法离心后弃上清 , 洗 3次后用
BP S悬浮 ,低温贮存备用 。
1
.
4 中性粒细胞的制备 z[]
大鼠 i p 液状石蜡 10 mL , 20 一 2 h 断头处死 ,用
4 ℃ Hank s ( p H 7
.
4
, 内含 1 . 3 nmor x
·
L
一 ` e aZ 十
,
0
.
5
~
l
·
L
一 ’ M扩` , 10 ~ 1
·
L
一 ’葡萄糖 )分 3 次抽洗出
腹腔渗出液 , 4 ℃ , 5 0 x g 离心 10 m in , 弃上清 ,沉淀
用 4 倍量 H a l l k S 液洗涤及同法离心 , 洗 3 次后 用
Han k S液悬浮 ,调中性粒细胞计数为 1 x l护个 · L 一 ’ ,
低温贮存备用 。
1
·
5 红细胞的制备图
大鼠断头取肝素抗凝全血 , 2 仪 x〕 x g 离心 6
而 n , 弃血浆 ,所剩红细胞用 4 倍量生理盐水洗涤及
同法离心 ,洗 3 次后用生理盐水悬浮 ,调红细胞质量
浓度为 O , 5 % ,贮存备用 。
1
.
6
·
OH 生成系统诱发大鼠心 、 肝 、 肾匀浆产生丙
二醛 ( MD A )的测定 [’]
取大鼠心 、 肝 、 肾用 知 s 缓冲液 (州 7 . 4 , 0 . 01
mo l
·
L
一 1
irT
s 一H C I
,
O J XX ) 1 r n 0 1
.
L
一 1 E lyT A
一
ZaN
,
0
.
0 1
mo 卜 L 一 `蔗糖 , 0 . 8% Na CI )制备成 5% 匀浆 ,组织匀浆
l
mL 与药液 (对照及空白管加 2 . 5 2之n l o l . L 一 ’二 甲亚
枫 ) , 37 ℃ 温育 10 而 n , 除空 白管外各管加人 eF “ +
( 5 0脚 l · L 一 ’ ) + 维生素 C溶液 ( 50 2丈mo l . L 一 ’ ) ,继续孵育 30 而 n ,用 BT A 比色法测定 MDA 含量 s[] 。
1
.
7 酵母多糖 A 刺激大鼠中性粒细胞生成坏 的测
中国药学杂志 2《X巧年 7 月第 40 卷第 14 期
定
取中性粒细胞悬浮液 l fnL ,按 NB T 还原法 6[] 测
定 街 ,用毗咙作参比 , 5巧 nI 波长处测定吸光度 , 以
N B T 还原物甲腊的量反映优 的变化 。
1
.
8 玩 O: 诱发大鼠红细胞氧化溶血 的测定阎
取红细胞悬浮液 l rnL , 加人 10 ~ 1
·
L
一 ’ 姚仇
(空白管不加 姚 0 2 )及药液 , 37 ℃孵育 l h ,加 4 倍量
生理盐水稀释 , 3 姗 x g 离心 6 m in , 上清液于 41 5
nI 波长处测定吸光度 , 溶血度 = (测试管 A 一 空 白
管 A ) / (对照管 A 一 空白管 A ) x l o % 。
1
.
9 统计学处理
实验数据用 无 士 、 表示 ,组间实验数据显著性
差异用单因素方差分析 ,受试药量效相关显著性差
异用相关性检验分析 ,用半对数回归法求算 CI 50 , 统
计软件用 s SP s lo . 0 。
2 结 果
2
.
1 ESLH M 对 · OH 生成系统诱发大 鼠心 、 肝 、 肾匀
浆 M DA 的影响
空白组大鼠心 、肝 、 肾匀浆不加诱发剂 F矛+ 十
维生素 C 溶液 , 对照组加诱发剂 。 对照组大 鼠心 、
肝 、 肾匀浆经 ezF 十 十 维生素 c 溶液诱发后 M DA 含
量较空 白组显 著升高 ( 尸 < 0 . 01 ) , 而 6 . 3 , 12 . 5 , 25 ,
50
,
10
,
2 0 滩 · L 一 ’ Es LH M 能不 同程度抑制 F矛十 十
维生素 C 诱导的大鼠心 、肝 、 肾 MDA 生成 ,其抑制
心 、 肝 、 肾 M以 生成的 x与分别为 2 9 , 4 , 32 . 9 , 3 1 . 4
雌 · L 一 ’ ,见表 1。
2
.
2 E s川M 对大鼠中性粒细胞生成优 的影响
空 白组大鼠中性粒细胞不加诱发剂酵母多糖
A
,对照组加诱发剂 。 对照组中性粒细胞受酵母多
糖 A 刺激后 , 咙生成较空白组显著升高 ( 尸 < 0 . 01 ) ,
而 6 . 3 , 12 . 5 , 2 5 , 50 , 10 ,姗 拼g · L 一 ’ E S I月 Nl 能不同
程度抑制酵母 多糖 A 刺激中性粒细胞生成 优 , 其
IC 50 为 24 . 6 拌g · L 一 ` ,见表 2 。
2
.
3 E s LH M 对 H Z姚 诱发大 鼠红细胞氧化溶血的
影响
空白组大 鼠红细胞不加诱发剂 H Zq ,对照组加
诱发剂 。 对照组红细胞经 玫姚 诱发后 ,溶血度较空
白组显著升高 ( P < 0 . 0 1 ) , 而 6 . 3 , 12 . 5 , 25 , 50 , l X() ,
20 滩 · L 一 ’ sE m M 能不 同程度抑制 氏仇诱发大鼠
红细胞氧化溶血 ,其 I与为 57 . 6 腮 · L 一 ’ ,见表 3 。
.2 4 E SLH M 抑制 · OH 生成系统诱发大鼠心 、 肝 、 肾
匀浆 MDA 含量升高的量效关系
大鼠心 、 月干、 肾匀浆经 ezF + 十 维生素 C 溶液诱
hc 。 产从淞刀况 了, 2优巧弄为 , Vol .刃 No . 4] · 10 6 3 ·
表 1
T a b l
正3 月 M 对 · O H 生成系统诱发大鼠心 、肝 、 肾匀浆 M D A 的影响 . n = 5 , x 士
Efl砚c t of E SLH M o n M DA in d u e ed by
·
OH 罗 n e ra t io n s y s t e m in t h e h O l l l” g e n at e s o f heart
,
li
v e r a ll
d ki dn
e y of ar t
.
n 二
5
,
x 士 `
E S I J IM M DA n , l’s (湿组织 )一 ’ 抑制率 /%
/雌 · L一 1 心 肝 肾 心 肝 肾
写了眨J 62 2士 4 . 9 4 2士 5 . 1 88 3土 5 . 0
对照 1 5 9 0土 2 9 ] ) 146 . 1土 4 8 . ) 193 2士 9 . 7 1 )
2以 l 印 I士 3 . 7 3〕 47 . 8士 4 . 13 ) 如 6士 6 . 83, l m l % 5 97 8
1田 78 2 土 4 . 3 3 ) 65 4 士 s t护 ) 川 5 士 4 . 3 3 ) 83 t 5 79 . 2 7 7 9
5() 97 0 士 3 93 ) 87
.
4 士 6 93 ) 13 1 3士 4
`妒 ) 以 0 57 . 6 59 0
25 1 15
.
4 士 5
.
3 3 ) l沮 5 士 9 . 03 〕 14 7 4 士 9 . 9 3 ) 45 0 如 . 8 4 3 6
1 2 5 134 4 士 4 3 3 ) 1 18 2 士 7 13 ) 162 3 士 6
.
5气 ) 25
`
4 27 4 29 5
6
.
3 14 9
.
4 土 4 13 ) 136 , 5 土 10 92 ) 182 7 土 9 7 2 ) 9
.
9 9
.
4 、0 1
右位 3叨 . 7 12 5 2 川 . 6
P 值 0 t l ” ) 0 “ 划 0 1班l )
注 ’ ) p ( 0 . m ,空白组 ’ j 对照组 比较卿 尸 < 让肠 , 3) 尸 < 0 . 01 ,试药组与对照组比较 ; 抑制率% 二 (对照管 A 一 测试管 A )(/ 对照管 A 一 空管 A ) xl o %
N。卜 : l )尸 < 0 . 0 1 v s l粗 s之 l ;2) 尸 < 0 05 3中 ( 0 01 、 S 。 0 11吐们卜Iinh 以iot 。 % 二 ( A〔 , 耐 一 魂、 1 )(/ A lt 。 }一 山、 护刘印%
0气0飞乙,
ǎ一
心J八U`
戴州侧洲一à望out口ùvo芝
表 2 邓LH M 对大鼠中性粒细胞 生成街 的影响 . 。 = 5 , 无 土 S
T a b 2 E fe
c t ,f ES I月 M o n :OZ for m Z” l l o as n一 s t i m u lal e d n e u tm ph i ls
o f m t s
.
n =
5
, 无 士 s
用月树阵 · L 一 注 甲暗七巧 。 『、 抑制率 / 吸
空白 0 . 1 88 士 0 . 〕〕8
对照 0 . 4 +0 土 0 t 02 1 1 )
ZJ ) 0
.
1阴 士 0 . 0 12 2 ) 103 4
10 0
t
2邓 士 O . J 心2 ) 82 1
父 0 . 267 士 0 乃 l护 〕 翻 . 3
25 0
. 之刀 士 0 0 粥2 ) 53 0
12
.
5 0
.
327 士 0
. 〕 班产 ) 37 4
6 3 0 3叨 土 0 0 2石2 ) 13 7
F 值 14 7 . 7
P 值 O J洲〕
注 : p < 以 01 , ’ )宁白组 与对照组 比较 , 幼试药组与对照组 比较
Noet
: 尸 < 0 0 2 , 1 ) v s l璐日 , 2 , v s 仪川 t m l
表 3 Es LH M 对 H Z仇诱发大鼠红细胞氧化溶血的影响 . n =
5
, x 士 s
T a b 3 E伍王e t of E S I月M o n 伙 q 一 in d u e e d h e m o ly s i s in ar t s e理 -
th
ll 洲: yt e s
.
n 二 5 , j 士 s
四妇M / I省 L一 蓄 红细胞溶血度 / % 抑制率 / %
空自 3 1士 0 . 7 一
对照 l印 士 0刀 一
2洲 ) 27 2 士 4 . 11 ) 75 1
l田 42 4 士 5 . 7 3 ) 59 4
印 54 5 士 4 . 6 3 ) 47 0
25 67
.
0 士 6
.护 ) 叭 1
12
.
5 80 1
士 2 7 3 ) 加 . 5
6 3 92 6 士 3
.
8 2 ) 7 6
F 值 14 . 1
尸值 0 仪幻
注 : J ) p < 住 01 ,空自组与对照组比较 , 2 )尸 < 住 05 , 3 )P < 0 . 01 ,试药组 与对照组
比较
No et : l )尸 < 0 0 1 v s l旧 s a l ; 卫) 尸 < o 伍 , 3 )尸 < o 刀一v , e on 加 l
发后 MDA 含量显著升高 , E SLH M 可显著抑制时 十
+ 维生素 C 溶液诱发大鼠心 、 肝 、 肾匀浆 MDA 含量
升高 ,其量效关系均呈负相关 , 相关系数分别为 -
0
. 以)5 , 一 0 . 91 2 , 一 0 . 90 8 , 相关性检验 尸 值均 <
0
.
0 1
,见图 1。
·
10 6 4
· 品 i r ; 产V限阴 , J , 2超泪乏5川下 , Vo l . 4 O 肠 . ] 4
10 0 15 0 2 0 0
Es L H M剂里小g L ,
图 1 E s LH M 抑制 · oH 生成系统诱发大 鼠心 、 肝 、 肾匀浆
M DA 含量升高的量效关系
月卜 一 心 ; 月阵 一 月卜占 一 ’肾
R g 1 R e la ti o n he t w
e e n 卿 an ti ty a n d 确 e ie cn y ESLH M th a r 职、 15卜
e d M DA e o n r e n t icn er , idn
u e e
d by
·
O H罗 n e ar ti o n s y s r e m in h o -
nr o g e n a re s Of h
o
art
,
liv e r an d 如d n e y of ar t s
闷卜 一 卜州 Ml )A ; 书卜 一 il* ; 姻 A ; 春 一 k ldne y MD A
2
.
5 Es川 M 抑制大鼠中性粒细胞生成 。窗及红细胞
氧化溶血的量效关系
大鼠中性粒细胞受酵母多糖 A 刺激后 衡 显著
升高 ,红细胞经 H Z仇 诱发后溶血度显著升高 , SE -
川M 可显著抑制酵母多糖 A 刺激大鼠中性粒细胞
生成 优 ,可显著抑制姚 q 诱发红细胞氧化溶血 , 其
量效关系均呈负相关 , 相关系数分别为 一 0 . 887 和
一 0
.
90 5
,相关性检验 尸值均 < 0 . 01 ,见图 2 。
3 讨 论
近年国内有实验探讨了雪莲花水提物的抗辐射
损伤机制 ’ , 水煎剂 (水提物 )是我国传统 中药的常
用剂型 , 除含有一定的有效成分外 , 常含有较多无效
的水溶性杂质 , 如蛋白质 、 赫液质 、 果胶 、 淀粉 、 靴质
等 。 明确中药有效部位 ,提取分离其有效成分 , 对提
高中药疗效 ,发展祖国医药有重要意 义 。 用 乙醇提
取中药是除掉其水溶性杂质 ,精化中药剂型的有效
方法 、 中药中水溶性成分除蛋白质 、 赫液质 、 果胶 、
淀粉 、靴质不溶于乙醇外 , 大多数都能溶于乙醇 。 难
溶于水的脂溶性成分 ,在乙醇中亦有较大的溶解度 。
、和垂享瘾忑泛i刃如砰币丁舀言不i 春第万万再)
504 32150仓o众住0让
呼,
1 0 0 1 50 2的
E s L l lM剂量乍片 L 一 ,
ǐ一J飞 .J,,JI
34
1,`ù一ì厂Lf厂IL
图 2 E SLH M 抑制酵母多糖 A 刺激大 鼠中性粒细胞生成 q 二
及 H Z姚诱发红细胞氧化溶血的量效关系
闷卜 一 白细胞生成甲月瓷 刁卜 一 红细胞溶血
R g 2 R e la rio n 挽h 训℃ n 甲 ant i ty an d ief e i e n e y o f ES LH M hat t er -
s i s r e d 街 fo mr a t io n in d u e e d b y 乃 , 11os an 一 st im u lal e d n e u t哪 h i ls a rl d
姚仇一 in d u e e d h e m o ly s i s in art e yrt h , yt e s
闷卜 一 6爪 .曰别田 of~ ion 6 n
ll l
~ 以神水 ; 月卜 一 }l e n加刀 Ivis s in e l犷 11 n洲尹 e s
E SLH M化学成分的实验研究国内已有报道 〔 7〕。
eF Z
+ 十 维生素 C产生 · O H是基于 eF nt on 反应
原理进行的 : 8〕。 维生素 e + ZH+ 十 2 02 一 ZH o : 十 脱
氢维生素 e , e2F + + ZH o Z~ e3F + + 0 11 一 + · O H 。 可
见少量维生素 c 可清除 优 , 对机体有保护作用 。
践姚 和 街 均为正常组织中氧的代谢产物 , 大量维
生素 c 存在时组 织中 姚。 : 形成 反而增多 , 它与
F矛+ 反应生成毒性更大的 · OH , 引起脂质过氧化 。
氧自由基包括羚 自由基 ( · O H )和超氧阴离子 自由基
(O户不断产生于生物体 。 适量自由基对细胞的分
裂 、 生长 、 消炎 、解毒等起积极作用 ,但过剩会损伤细
胞膜 ,使 DNA 断裂 、 蛋白质变性及酶失活 ,最后导致
细胞解体和死亡 。 脂质过氧化是氧自由基损伤组织
的重要方式 ,其损伤途径为 : 氧自由基 + 细胞膜脂质
~ 脂质过氧化反应~ 过氧化脂质~ 丙二醛 。 可见 ,
脂质过氧化与氧自由基密切相关刚 。 若设法清除氧
自由基 ,就可抑制脂质过氧化 。 已证明 ,氧自由基可
诱发炎症 、 免疫失调 、 恶性肿瘤等〔’ “ 〕 , 也是导致肝 、
肾缺血性损伤及心脑组织缺血 一再灌注损伤的关键
因素〔” 〕。 研究和开发抗氧化剂及 自由基清除剂对
防治与自由基有关的疾病有重大意义 。
本实验结果表明 : 对照组大鼠心 、肝 、 肾匀浆经
eF Z
` + 维生素 C 溶液诱发后 M DA 含量较空白组升
高 ( 尸 < 0 . 01 ) , 中性粒细胞受酵母多糖 A 刺激后 优
生成较空白组升高 ( 尸 < 0 . 01 ) , 红细胞经 姚仇 诱发
后溶血度较空 白组升高 ( 尸 < 0 . 01 ) 。 而 6 . 3 , 12 . 5 ,
25
,
50
,
10
,
20 雌 · L 一 ’ sE LH M 能不 同程 度 抑制
F夕+ 十 维生素 C诱导的大鼠心 、肝 、 肾脂质过氧化产
物 M DA 生成 ,其抑制心 、 肝 、 肾 M D A 生成 的 CI 50 分
别为 29 . 4 , 32 . 9 及 31 . 4 滩 · L 一 ’ ,其量效关系均呈负
相关 ,相关系数分别为 一 0 . 90 5 , 一 0 . 91 2 , 一 0 . 90 8 ,相
关性检验 尸 < 值均 0 . 01 ,提示 E SLH M 具有清除 · O H
的显著作用 ;能不同程度抑制酵母多糖 A 刺激中性
粒细胞生成 仿 ,其抑制中性粒细胞生成 优 的 CI * 为
24
.
6 滩 · L 一 ’ , 其量效关系呈负相关 ,相关系数为 -
0
.
8 7( 尸 < 0 . 01 ) , 提示 E s LH M 具有清除 街 的显著
作用 ;能不同程度抑制 珑姚 诱发 的红细胞氧化溶
血 ,其抑制红细胞氧化溶血 的 cI 50 为 57 . 6 滩 · L 一 ’ ,
其量效关系呈 负相关 , 相 关系 数为 一 0 . 9 05 ( 尸 <
0
.
01 )
,提示 ES 川M 具有清除玩姚 及对抗生物膜过
氧化 的显著作用 。 可见 , E s LH M 通过清除 · o H , 优
及 H Z仇 而发挥抗氧化活性 。 结果提示 ES川M 是一
种有效的氧自由基清除剂 ,可能用于与自由基相关
的疾病的防治 。
参考文献
[l] 高博 ,梁中琴 , 顾振纶 . 天 山雪莲水提物的抗辐射损伤机制
[ J]
. 江苏医药 , 2(X玛 , 29 ( 1 ) : 17 .
[ 2 ] 饥 YJ , b xr . E压 , t s of 蒯 i u m 18一 gl i c )” 11e t i n i e ac id o n t he onr -
du e t ion Of ac t i
v e o科 g e n s ep c i邢 an d ht e c o n e e n t ar t i o n of i n t ar e e l lu lar
fer e aZ
+ I n
art
n
eu
t哪 hi l s [ J〕 . A以 a l , ld 口刀 d m l is 几 , 19 1 , 12 ( 3 ) :
280
,
冯立明 . 麦芽醇抗人红细胞膜氧化的研究「J 〕. 中国药理学通
报 , 19男) . 6 ( 4 ) : 224 .
路雪雅 . 抗坏血酸和硫酸亚铁诱导鼠肝线粒体损伤的实验研
究 [ J〕. 生物化学与生物物理学进展 , 19 89 , 16 (5 ) : 372 .
T田 l iazw AH
,
Sazu k
a Y厂卜永 i n o Y . M i e份 d e ternu
n a t ion of l ipe l洲: ioxr d
e
i n t he
~
se
ll l y以耐 ium by ht i o b习 11) i t u ` e ac i d fl uorn h ot orne t厅【J ]
门记爪 月刁召 n B日11 , 19 8 1 , 29 : 29 10
.
Bae hn e r RL
,
N at han 民 . uQ an t it at i v e n i t or blu e t e t r a z o i ; l m t es t i n
c卜m n i e g r a n u l
onar
tou s id se ase [ J ]
.
N nE g l J M`才, 196 8 , 27 8 ( 18 ) :
9’7 1 .
任玉琳 ,杨俊山 , 陈建 民 . 雪莲鞘胺醇的结构鉴定 [ J」. 中国药
学杂志 , 2以 )2 , 37 ( 6) : 41 3 .
H叔 r F , W e i s J . hT e e at al yt l e dce o ll l l洲, s i t i o n Of hy d or g e l l 伴or 石 d e by
ion sal t
s 【J ] . J 开叹兀 R叙 A , 1934 , 147 : 33 2 .邓柯玉 ,辛洪波 , 张宝恒 . 云南干草总皂贰清除氧自由基 和抗
脂质过氧化作用 [ J] . 中国药理学通报 , 19 3 , 9 (5 ) : 3 50 .
M axr LJ
.
o x ,琶e n 伍 , 三 adr i司 h kn 司 ot I l lan y id~ 「J〕
.
&
~
,
19 87
,
23 5 ( 47 88 )
:
52 9
.
eH s M L
,
M an son N H
.
M ol ec ul ar
o x ,孚 11 : Fir e dn or 阮 . 尹 1l l e 闹 e of ht e
o翔 g e l】 lh 斑 耐 i e al s y st em i n ht e e』e i u m l〕 ar a d ox , ht e O x y g e n p a r a d o x
an
`1 1、 he而盯 re 详而 s i o n inj 衅【J ] , J OM I eC l l ca n五。 l , 19 84 , 16
( 11 ) :% 9
.
(收稿日期 : 2 X( 砰一 1 一03 )
列创州10U
必令 ( ( 专专专中令专令令专令令中专专专专专令中中专份 ( 专中令专专令专令 ( 专专专令专中中令卜
: 欢迎投稿 欢迎订阅 欢迎刊登广告 :伙争于净净净于于于争净于净今净于净净净净净净今净净净净净净净净净净 ) 净净今净净净净净净净书
中国药学杂志 2(X巧年 7 月第 4D 卷第 14 期 hC in 例u l n 刀 了, 2伏巧 力峨》 , Vo l 40 oN . 4] · 10 65 ·