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赪桐根水提物抗炎作用研究



全 文 :2013年 第 16卷 第 2期 广西中医药大学学报
赪桐根水提物抗炎作用研究
陈 俊,唐云丽,梁 洁,秦祖杰,覃 祖,潘盈利
(广西中医药大学,广西 南宁 530001)
摘 要:[目的]评价赪桐根水提物的抗炎作用。[方法]建立二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加
及小鼠棉球肉芽肿等急慢性炎症模型,评价赪桐根水提物对急、慢性炎症的抗炎作用。[结果]在小鼠耳肿胀实验中,赪桐根水
提取物中、高剂量组(20,40 g/kg)与模型组比较有显著性差异(P <0.05),耳肿胀抑制率分别为51.0%、55.1%;在醋酸所致小鼠腹
腔毛细血管通透性实验中,赪桐根水提取物中、高剂量组(20,40 g/kg)与模型组比较有明显降低腹腔毛细血管通透性的作用
(P <0.05);赪桐根水提物各剂量组小鼠棉球肉芽肿质量显著低于模型组(P <0.05 或 P <0.01)。[结论]赪桐根水提物对急慢性
炎症均有明显的抗炎作用。
关键词:赪桐;水提物;抗炎;实验研究
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:2095-4441(2013)02-0011-03
赪桐来源于马鞭草科大青属植物赪桐 Clerodendrum
japonicum(Thunb.)Sweet.,又名红龙船、荷苞花、抽须红、木通
莲、珍珠梧桐[1]、“个朋被”(广西壮族语)[2]。全株均可入药,
其花可安神、止血,主治心悸失眠、痔疮出血;叶具有祛风散
瘀、解毒消肿等功效,主治偏头痛、跌打瘀肿、痈肿疮毒;根、茎
可清肺热、利小便、凉血止血,临床用于肺热咳嗽、热淋、小便
不利、咳血、尿血、痔疮出血、风湿骨痛的治疗[1]。目前国内外
对赪桐根化学成分的研究暂处于基础研究阶段,本实验首次
探讨了赪桐根水提物的抗炎作用,以明确其抗炎活性,为以后
的研究和开发利用提供依据。
收稿日期:2013-05-25
基金项目:广西自然科学基金项目(2010GXNSFA013196);广西中医药管理局中医药科技专项课题(GZKZ09-12)
作者简介:陈俊,讲师,在读博士生,研究方向:从事中药药理学研究
通讯作者:秦祖杰
样硬化具有显著的防治作用,并具有模拟缺血预处理样的心
肌保护作用[8-10]。但加味丹参饮化瘀清热解毒之力略显不足,
笔者在此基础上加入具有较好防治冠心病作用的中草药扶芳
藤、青蒿及黄连,组成行气活血、化瘀解毒的扶芳藤丹参合剂。
实验结果表明,心肌缺血再灌注时,扶芳藤丹参合剂预处理可
以很好地降低 TNF-α,NF-κB含量,减少心肌梗死面积面积,
提示扶芳藤丹参合剂预处理能够通过抑制炎症反应而减少心
肌缺血再灌注损伤。
参考文献
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(编辑 陈明伟)
11· ·
2013,Vol.16 No.2Journal of Guangxi University of Chinese Medicine
1 材 料
1.1 药物与试剂 赪桐根水提物由广西中医药大学药理教
研室制备;醋酸地塞米松片(安徽金太阳生化药业有限公司生
产,批号 1203082);冰醋酸(上海试一化学试剂有限公司生
产,批号 070127);二甲苯(武汉有机合成化工厂生产,许可证
编号 XK13-0011714-154);伊文思蓝(由上海化学试剂采购
供应站分装厂提供,批号 910518);注射用青霉素钠(山东抗
医药股份有限公司生产,批号 S070631);注射用硫酸链霉素
(山东抗医药股份有限公司生产,批号 070202)。
1.2 动物 清洁级昆明种小白鼠,雄性,体重 18~22 g ,适龄、
健康,由广西中医药大学实验动物中心提供,动物生产许可证
号:SCXK 桂 2009-0002。实验前在本实验室适应 3 d,实验室
温度 22~24 ℃,相对湿度 60% ,光照时间 12 h(7∶00~19∶00)。
动物饲料均由广西中医药大学实验动物中心提供。
1.3 仪器 Aeu-210型电子天平[梅特勒-托利多仪器(上
海)有限公司];723分光光度计(北京普析通用仪器有限责任
公司);移液枪[大龙医疗设备(上海)有限公司]。
2 方 法
2.1 二甲苯致小鼠耳肿胀实验[3-5] 小鼠 60只,随机分为模
型组、地塞米松组(0.0045 g/kg)、赪桐根水提物高、中、低剂量
组(40,20,10 g/kg),每组 12只。灌胃给药,给药容积 20 ml/kg,
模型组灌胃等体积蒸馏水。每日给药 1次,连续 7 d,末次给药
45 min后,各小鼠于右耳正反两面滴二甲苯 20 μl致炎,致炎
15 min后脱颈椎处死动物,沿耳根部剪下两耳,用 6 mm打孔
器在两耳同部位等面积打下耳片,用 Aeu-210型电子天平称
重,以右耳减去左耳的差值作为肿胀度,计算耳片重量系数,
计算肿胀抑制率。
2.2 醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验[3,6] 小鼠 60只,
随机分为模型组、地塞米松组(0.0045 g/kg)、赪桐根水提物
高、中、低剂量组(40,20,10 g/kg),每组 12只。灌胃给药,给
药容积 20 ml/kg,模型组灌胃等体积蒸馏水。每日给药 1次,连
续 7 d。末次给药 45 min后,各鼠尾静脉注射 0.25%伊文思蓝
溶液 0.1 ml/10 g,同时腹腔注射 0.6%冰醋酸溶液,每只 0.2 ml。
15 min后脱颈椎处死动物,腹腔注射生理盐水 6 ml冲洗腹腔,
轻揉腹部 1 min,剪开腹腔收集腹腔液,离心(1 000 rpm/min)
10 min,取上清液于 723分光光度计 590 nm处测定吸光度。
2.3 小鼠棉球肉芽肿实验[7] 取健康小鼠 65只,用水合氯
醛 4%进行腹腔注射麻醉,在无菌条件下,于小鼠两前肢中间
的胸部用弯剪剪掉毛发,75%酒精消毒皮肤,在消毒过的地方
用手术剪刀剪至皮下一小口,用直镊子从胸口皮下将棉球
(每粒 10 mg,高压灭菌)分别植入小鼠两侧腋下,缝合伤口并
用碘酒消毒。术后第二天将小鼠随机分为模型组、地塞米松
组(0.0045 g/kg)、赪桐根水提物高、中、低剂量组(40,20,
10 g/kg),每组 13只。灌胃给药,给药容积 20 ml/kg,模型组
灌胃等体积蒸馏水,每日给药 1 次,连续 14 d。末次给药 12 h
后脱颈椎处死小鼠,剪开皮毛将棉球及周围结缔组织一并取
出,剔去脂肪组织,经 60 ℃烘干至恒重,减去原棉球重,即为
肉芽肿重。
2.4 统计学方法 实验数据以 x± s表示,采用 SPSS 11.5 软
件包进行数据统计分析,组间比较采用单因素方差分析,以
P <0.05 为差异有统计学意义。
3 结 果
3.1 对小鼠耳肿胀度的影响 见表 1。
赪桐根水提取物中剂量组、高剂量组与模型组比较,均有
显著性差异(P <0.05),抑制率分别为 51.0%、55.1%。
3.2 对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 见表 2。
由表 2可见,与模型组比较,赪桐根水提物中、高剂量组
均能明显降低腹腔毛细血管通透性(P <0.05),提示赪桐根水
提物对醋酸引起的小鼠毛细血管通透性增加有明显的抑制作
用。
3.3 对小鼠棉球肉芽肿质量的影响 见表 3,表 4。
与模型组比较,赪桐根水提液各剂量组棉球肉芽肿质量
均明显降低(P <0.05或 P <0.01)。
4 讨 论
本实验通过建立二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠腹
腔毛细血管通透性增加以及小鼠棉球肉芽肿等急慢性炎症模
型,对赪桐根水提物的抗炎活性进行研究。
炎症是机体对损伤所产生的防御反应。这种反应主要由
血管与细胞的应答构成,其本质是清除引起损伤的各种致炎
因子和促进损伤的修复。致炎剂可使组织中肥大细胞释放组
表 2 赪桐根水提物对醋酸所致小鼠腹腔
毛细血管通透性的影响 (x± s,n=12)
组 别 剂量(g/kg) 腹腔液(OD值)
模型组 — 0.309±0.098
地塞米松组 0.0045 0.112±0.079②
赪桐根水提物高剂量组 40 0.219±0.077①
赪桐根水提物中剂量组 20 0.210±0.084①
赪桐根水提物低剂量组 10 0.239±0.102
表 1 赪桐根水提物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
(x± s,n=12)
组 别
剂量
(g/kg)
肿胀度
(mg)
抑制率
(%)
模型组 — 4.9±3.4 —
地塞米松组 0.0045 2.0±2.7① 59.2
赪桐根水提物高剂量组 40 2.2±1.9① 55.1
赪桐根水提物中剂量组 20 2.4±1.4① 51.0
赪桐根水提物低剂量组 10 3.4±2.1 30.6
注:与模型组比较,①P <0.05,②P <0.01,下同
12· ·
2013年 第 16卷 第 2期 广西中医药大学学报
织胺、5-羟色胺等血管活性胺类,引起局部组织中微血管扩
张和通透性升高,使其他细胞和血浆中的炎症介质(如白细
胞三烯、激肽、前列腺素、补体成分等)继续维持或强化对血管
的活性作用,使组织液外渗,引起急性渗出性炎症水肿。实验
结果表明,赪桐根水提物可抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀,
并能抑制由醋酸诱发的小鼠腹腔毛细血管通透性的增加,具
有一定剂量依赖性,实验结果提示赪桐根水提物对致炎物质
诱发的急性炎症有抑制作用。
在小鼠棉球肉芽肿实验中,植入小鼠体内的棉球是一种
不能被机体消化的异物,可长时间刺激植入部位,形成由多数
巨噬细胞质膜包围棉球的巨大吞噬体,属于慢性炎症模型。
研究发现,赪桐根水提物各剂量组均可明显抑制小鼠肉芽肿
的增长,表明赪桐根水提物对慢性炎症也有明显的抑制作用。
综上,赪桐根水提物对急慢性炎症模型均具有明显的抑
制作用,这为今后更加安全合理开发和应用赪桐提供了理论
和实验依据,其抗炎的作用机制还有待进一步研究。
参考文献
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(编辑 陈明伟)
表 3 赪桐根水提物对小鼠棉球肉芽肿的影响 (x± s,n=13)
组 别 剂量(g/kg) 平均体重(g) 肉芽肿湿重(mg) 肉芽肿重/体重 抑制率(%)
模型组 — 31.6 95.808±19.915 2.914 —
地塞米松组 0.0045 26.2 54.083±9.474① 1.919 43.55
赪桐根水提物高剂量组 40 32.6 67.715±13.072② 2.090 29.32
赪桐根水提物中剂量组 20 31.6 72.177±17.205② 2.359 24.66
赪桐根水提物低剂量组 10 32.3 78.831±15.515① 2.355 17.72
表 4 赪桐根水提物对小鼠棉球肉芽肿的影响 (x± s,n=13)
组 别 剂量(g/kg) 平均体重(g) 肉芽肿干重(mg) 肉芽肿重/体重 抑制率(%)
模型组 — 31.6 27.300±3.893 0.854 —
地塞米松组 0.0045 26.2 19.650±4.966② 0.660 28.02
赪桐根水提物高剂量组 40 32.6 23.083±3.381① 0.701 15.45
赪桐根水提物中剂量组 20 31.6 23.908±3.052① 0.704 12.42
赪桐根水提物低剂量组 10 32.3 22.477±3.819① 0.720 17.67
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