全 文 ：通讯作者:朱克俭，湖南省中医药研究院附属医院，邮编:410006，E-mail:zkjo0731@ 263． net
复方桐叶烧伤油对细胞性皮肤溃疡模型大鼠的影响
湛延风1，李勇敏2，朱克俭2
(1. 湖南省岳阳市二人民医院，湖南 岳阳，414000;
2. 湖南省中医药研究院附属医院，湖南 长沙，410006)
［摘要］ 目的:研究复方桐叶烧伤油对皮肤溃疡的作用。方法:切割大鼠背部皮肤造成缺损皮肤伤口，再涂粪水细菌感
染 3 天形成皮肤溃疡模型。然后经复方桐叶烧伤油治疗 14 天，测定大鼠创面面积，溃疡皮肤组织病理及 TGF － α、TNF － β含
量。结果:经复方桐叶烧伤油治疗 14 天后创面明显缩小，溃疡皮肤组织中的 TGF － α含量升高，TNF － β含量降低;溃疡皮肤
组织中肉芽组织厚度明显降低，炎症细胞数明显减少。结论:复方桐叶烧伤油对慢性皮肤溃疡有较好的治疗作用。
［关键词］ 复方桐叶烧伤油;皮肤溃疡;TGF － α;TNF － β;实验研究
［中图分类号］R285． 5 ［文献标识码］A ［文章编号］1003 － 7705(2012)04 － 0150 － 03
Effect of compound Aleurites fordii Hemsl． leaf burn ointment on rat model of cellular skin ulcer
ZHAN Yanfeng1，LI Yongmin2，ZHU Kejian2
(1． The Second People’s Hospital of Yueyang，Yueyang 414000，Hunan，China;2． Affiliated Hospital of Hunan Institute of
Traditional Chinese Medicine，Changsha 410006，Hunan，China)
Abstract:Objective:To study the effect of compound Aleurites fordii Hemsl． leaf burn ointment on skin ulcer． Methods:The
back skin of rats was cut to form wounds，and then excrement liquid was applied to infect the wounds with bacteria for 3 d and form a
skin ulcer model． The rats with skin ulcer were treated with compound Aleurites fordii Hemsl． leaf burn ointment for 14 d． The area of
wound surface as well as the pathology and TGF － α and TNF － β contents of ulcerative skin tissue were determined． Results:After
treatment with compound Aleurites fordii Hemsl． leaf burn ointment，the area of wound surface was decreased significantly;the TGF －
α content of ulcerative skin tissue was increased，while the TNF － β content was decreased;the thickness of granulation tissue and the
number of inflammatory cells in the ulcerative skin tissue were decreased significantly． Conclusion:Compound Aleurites fordii Hemsl．
leaf burn ointment has good therapeutic efficacy in treatment of chronic skin ulcer．
Key words:compound Aleurites fordii Hemsl． leaf burn ointment;skin ulcer;TGF － α;TNF － β;experimental study
复方桐叶烧伤油由桐叶、麻油等药物组成。功能为清
热解毒，消肿止痛，祛腐生肌。用于面积小于 29%的Ⅱ度烧
烫伤。笔者针对复方桐叶烧伤油治疗皮肤溃疡的药理作用
进行了研究，现将其实验结果介绍如下。
1 实验材料
1． 1 药物 复方桐叶烧伤油，由桐叶、麻油组成。每瓶
30mL。由湘西宏成制药有限责任公司提供，生产批号:
20080501;用法:用棉球将药涂于患处，或用浸透药液的纱布
敷于创面，每天 3 次。涂药以局部保持湿润状态，不流为度
(约 1． 5mL /1%体表面积)。创面暴露;或用浸透药液的单
层纱布覆盖创面，但不能包扎。赋形剂(基质) (麻油，市售，
用时高温消毒) ;凡士林;75%乙醇(医用) ;京万红，(由地
榆、地黄、当归、桃仁、黄连、木鳖子、罂粟壳、血余炭等 38 味
药组成。功能主治:活血解毒，消肿止痛，祛腐生肌。用于
轻度水火烫伤，疮疡肿痛，创面溃烂。规格:每支装 20g。用
法用量:用生理盐水清理创面，涂敷本品或将本品涂于消毒
纱布上，敷盖创面，消毒纱布包扎，每天换药 1 次。由天津达
仁堂京万红药业有限公司生产，生产批号:211619)。大鼠
表皮生长因子转化因子 α(TGF － α)定量酶联检测试剂盒 /
ELISA Kit for Rat TGF － α;大鼠肿瘤坏死因子 β(TNF － β)
定量酶联检测试剂盒 /ELISA Kit for Rat TNF － β，RD enz-
ymeliked immunosorbent assay，长沙维尔科技有限公司进口
分装，生产批号:090702。
1． 2 动物 SD系清洁级大鼠，雌雄各半，体重 180 ～ 200g，
合格证号:004532。由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提
供，许可证号:SCXK(湘)2009 － 004。
1． 3 仪器 ETI － Max3000 型酶标检测仪(美国 Diasotin)。
2 剂量设计
采用药物浓度来控制用药剂量，本品按体质量 60kg 人
的 1% 体表面积约为 162cm2 计算，则单位面积用量为
0． 028mL / cm2。200g大鼠的受伤创面约为 2cm2，则等效剂
量为 0． 2mL /只。将成品视为 100%浓度，依次用基质稀释
成 25%、50%、100%浓度作为动物用药的低、中、高剂量，大
鼠涂 0． 8mL计，分别相当于 1、2、4 倍等效剂量。阳性药京
·051·
第 28 卷第 4 期
2012 年 7 月 HUNAN JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 28 No. 4
Jul 2012
万红用凡士林配成 50%浓度，大鼠分别涂 0． 8g。
3 方法与结果
3. 1 方法 (1)动物模型制备:按参考文献［1］的方法，略
加改进。将大鼠用乙醚轻度麻醉，腹位固定于鼠板上，背部
向上，将脱毛剂(自制)均匀地涂在背部毛上，待鼠毛呈黄色
黏液状时，用清水冲净，纱布擦干，1 天后实验。麻醉大鼠
(腹腔注射 4%戊巴比妥钠麻醉) ，用一直径为 2． 0cm圆盖压
在背部无毛区中央作标记，沿标记线用剪刀剪下皮肤，整块
皮肤与肌肉层干净分离。随即在每个伤口周缘涂大鼠粪便
过滤液 2 次(每天上午、下午各 1 次)造成感染。3 天后伤口
均出现明显溃疡，表明模型成功。(2)分组与给药:取体重
180 ～ 200g清洁级 SD 大鼠，雌雄各半。按体重随机取同批
大鼠 10 只为空白对照组，其余动物造模后，按性别体重随机
分成模型对照组、京万红组、复方桐叶烧伤油低、中、高剂量
组。造模后第 4 天开始用药，用棉球于创面分别涂麻油、
50%京万红、25%复方桐叶烧伤油、50%复方桐叶烧伤油、
100%复方桐叶烧伤油，用量均为 0． 8mL，以不流为宜，可分
2 次，直到涂完。棉球先浸药物后挤干，再定量给药。常规
饲养，自由饮水、进食，治疗时间为 14 天。(3)观察指标:一
般状态观察:每天观察并记录各组动物的生理、行为特征，
创面形态，创面分泌物及动物死亡情况。创面愈合程度测
定:采用固定数码像机照像，photoshop 参比法得到溃疡面
积，结果见表 1。皮肤组织生化因子测定:摘眼球采血，取左
侧创面组织，用生理盐水在冰浴中 8000r /min匀浆 10min，制成
10%的匀浆，1000r /min离心得上清液，和血清一起按说明测定
皮肤组织匀浆和血清中的肿瘤坏死因子 β(TNF － β)和表皮生
长转化因子α(TGF －α)，结果见表2。溃疡区组织病理学观察:
剪取各组大鼠溃疡区右侧皮肤组织，迅速置入 10%福尔马林溶
液中固定，按常规方法石蜡包埋、石蜡切片，行 HE染色，光学显
微镜观察，测定肉芽增生厚度及炎症细胞数。
3． 2 统计学方法 所有观察资料均在 SPSS 16． 0 统计软件
中进行处理;并采用成对 t 检验;P ＜ 0． 05 表示差异有统计
学意义。
3． 3 结果 大鼠去皮损伤再涂粪水细菌感染 3 天后受伤皮
肤出现明显红肿、水肿与溃疡。给药治疗 1 天时，由于溃疡
皮肤被细菌感染，创面继续扩大，各组没有明显差异。给药
3 天后，由于创面处于炎症期，给药各组创面已基本无溃疡，
高剂量组结痂已出现上翻现象。5 天后治疗各组创面周围
可见肉芽甚至疤痕形成，溃疡面积缩小约 50%。7 天时高剂
量组大鼠的创面周围可见大量肉芽、疤痕形成，溃疡面积迅
速缩小。14 天后多数大鼠创面基本愈合。病理切片可见，
表层可见大量鳞状上皮细胞，下有明显肉芽组织形成，内有
大量胶原纤维等，少量炎性细胞，呈基本愈合状态。复方桐
叶烧伤油对大鼠慢性感染型溃疡创面的影响见表 1;对溃疡
皮肤组织和血清 TGF － α、TNF － β 的影响见表 2;对溃疡皮
肤组织病理的影响见表 3。
表 1 复方桐叶烧伤油对大鼠慢性感染型溃疡创面愈合的影响(x ± s，n = 10)
组 别
不同时间的创面面积(cm2)
0d 1d 3d 5d 7d 14d
空白对照组 － － － － － －
模型对照组 3． 08 ± 0． 32 3． 93 ± 0． 97 3． 03 ± 0． 57 2． 57 ± 0． 49 1． 45 ± 0． 36 0． 27 ± 0． 09
京万红组 2． 96 ± 0． 35 4． 25 ± 0． 57 2． 79 ± 0． 38 2． 28 ± 0． 32 1． 28 ± 0． 28 0． 22 ± 0． 06
25%复方桐叶烧伤油组 2． 97 ± 0． 18 4． 16 ± 0． 75 2． 85 ± 0． 45 2． 35 ± 0． 56 1． 35 ± 0． 21 0． 22 ± 0． 07
50%复方桐叶烧伤油组 2． 95 ± 0． 19 4． 16 ± 0． 54 2． 65 ± 0． 42 2． 28 ± 0． 40 1． 21 ± 0． 22 0． 21 ± 0． 05
100%复方桐叶烧伤油组 3． 00 ± 0． 14 4． 00 ± 0． 23 2． 62 ± 0． 44 2． 18 ± 0． 38 1． 12 ± 0． 22a 0． 19 ± 0． 03a
注:与模型对照组比较，aP ＜ 0． 05
表 2 对大鼠慢性感染型溃疡皮肤组织和血清 TGF － α、TNF － β的影响(x ± s，n = 10)
组 别
TGF － α(pg /mL)
组织 血清
TNF － β(pg /mL)
组织 血清
空白对照组 0． 0956 ± 0． 0361a 0． 2594 ± 0． 0384 0． 1020 ± 0． 0237b 0． 3505 ± 0． 0726a
模型对照组 0． 1586 ± 0． 0830 0． 2627 ± 0． 0566 0． 2212 ± 0． 0675 0． 4265 ± 0． 0563
京万红组 0． 3075 ± 0． 1489b 0． 2673 ± 0． 0378 0． 1644 ± 0． 0440a 0． 3739 ± 0． 0689
25%复方桐叶烧伤油组 0． 3047 ± 0． 1817a 0． 2662 ± 0． 0323 0． 1681 ± 0． 0435a 0． 3809 ± 0． 0515
50%复方桐叶烧伤油组 0． 3172 ± 0． 1335b 0． 2745 ± 0． 0302 0． 1581 ± 0． 0369a 0． 3737 ± 0． 0641
100%复方桐叶烧伤油组 0． 3243 ± 0． 0895b 0． 2811 ± 0． 0359 0． 1481 ± 0． 0726a 0． 3731 ± 0． 0571
注:与模型对照组比较，aP ＜ 0． 05，bP ＜ 0． 01
·151·第 4 期 湛延风，李勇敏，朱克俭:复方桐叶烧伤油对细胞性皮肤溃疡模型大鼠的影响
表 3 复方桐叶油对大鼠慢性感染型溃疡皮肤组织病理的
影响(x ± s，n = 10)
组 别 肉芽厚度(μm) 炎症细胞(个)
空白对照组 － －
模型对照组 1998． 0 ± 449． 7 55． 3 ± 18． 1
京万红组 1583． 0 ± 304． 0a 39． 0 ± 9． 8a
25%复方桐叶烧伤油组 1601． 5 ± 314． 6a 39． 9 ± 11． 9
50%复方桐叶烧伤油组 1320． 0 ± 203． 9bc 33． 8 ± 6． 5b
100%复方桐叶烧伤油组 1258． 5 ± 184． 8bd 28． 5 ± 6． 5bd
注:与模型对照组比较，aP ＜ 0． 05，bP ＜ 0． 01;与京万红
组比较，cP ＜ 0． 05，dP ＜ 0． 01
4 讨 论
慢性皮肤溃疡是一种常见的难治性疾病，其主要病因为
创伤和创伤后合并感染。一些保护剂、抗生素、维生素制剂虽
被广泛应用，但基本停留在等待创面自然愈合阶段，促进创面
愈合作用十分有限。一些生长因子虽有较强的促进细胞增殖
作用，能促进创面愈合，但由于创面愈合需要多种生长因子参
与，其安全性是人们关注的重点，细胞过度增殖有可能形成增
殖性疤痕，甚至引起癌变。慢性皮肤溃疡在发生到愈合的过
程中，各种生长因子起非常重要的作用，如炎症期的转化生长
因子 β(TGF － β)、肿瘤坏死因子(TNF － α)、血小板衍化生长
因子(PDGF)、表皮细胞生长因子(EGF)等，作为炎症细胞的
趋化剂而发挥重要作用。巨噬细胞分泌 TGF － β、TNF － α、
TGF － α、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、巨噬细胞衍化生
长因子(MDGF) ，刺激成纤维细胞、表皮细胞和血管内皮细胞
向伤口移动［2］。增生期时成纤维细胞分泌 IGF － 1、bFGF、
TGF － β、PDGF和角化细胞生长因子(KGF) ;内皮细胞合成
bFGF和 PDGF;角化细胞合成 TGF － β、TGF － α 和角化细胞
来源的自分泌因子(KAF) ，刺激细胞增殖、细胞间基质蛋白合
成和血管生成。疤痕形成期的 TGF、PDGF、TGF － β等在肉芽
组织转变为疤痕的过程中具有重要作用［3］。TNF2α 主要由
巨噬细胞产生，是具有多种生物学活性的炎性细胞因子，其含
量升高可能诱导 T细胞大量分化，对正常细胞产生直接杀伤
作用，因此TNF － α可作为组织炎症程度的灵敏指标［4］。本实
验中大鼠感染型溃疡(缺损皮肤加细菌感染)的皮肤组织中
的 TGF － α、TNF － β含量变化明显，而血液中变化不大，表明
溃疡皮肤组织为炎症及愈合的中心。此外，愈合面积的变化
与实际愈合程度有一定差别，这点可从肉眼观察溃疡周边情
况和病理切片结果得到验证。
参考文献
［1］ 董建勋，路广林，张美吉，等 . 回阳生肌脂质体凝胶促进慢性
皮肤溃疡愈合的实验研究［J］. 北京中医药大学学报，2008，
31(11) :752 － 753.
［2］ 韩旭，王新建，徐奇伟．蜂蜡软膏对治疗缺损性慢性皮肤溃疡大
鼠的实验观察［J］. 大连医科大学学报，2006，28(2) :109 －110．
［3］ 陈伟，付小兵，孙同柱，等． 表皮细胞生长因子及其受体在难
愈性溃疡组织中的表达特征［J］ ． 中国危重病急救医学，
2003，15(10) :600 － 602．
［4］ 付小兵．现代创伤修复学［M］．北京:人民军医出版社，1999:
173 － 185．
(收稿日期:2012 － 04 － 20
檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿
)
(上接第 138 页)
4 加强实践教学，强化学生的诊断技能，不断加深学生对
中医诊断的理解
《中医诊断学》本身的理论性、实践性很强，熟读内容不
如临证实际操作，实践教学在学习《中医诊断学》中具有的
重要意义。所以要鼓励学生多参加实践教学，早接触临床，
多接触患者，指导学生正规操作，反复练习。
实践教学是将学生带到实验室及医院进行强化训练，以
提高学生综合运用四诊及辨证分析病例的实际能力。在实验
室进行实践教学，根据教学内容的不同，可以预先设计完整的
实验教学实施方案，如四诊部分除采用多媒体课件和教学光
盘之外，还可以进行现场的问诊、望诊、舌诊、闻诊、切诊等模
拟训练。在舌诊部分教学中可以使用舌诊模型、幻灯片和录
像等;在脉诊部分的学习中可运用现代脉图实验操作、脉象模
拟仪和鼓励学生之间互相切脉进行训练;在按诊部分可采用
模拟患者模型进行教学，由教师示教，学生反复进行操作练
习;在问诊中结合临床病例加入见习、写病案等内容，以此进
行中医学术语和日常问诊技巧的综合训练。通过上述方案的
实施，使整个实验教学过程变得生动、直观。在临床见习的实
践教学中，我们主张要充分调动学生的主观能动性，着力加强
师生之间的沟通。安排一定数量的临床见习课去医院的相关
科室学习，让学生较早接触患者，培养诊断的技巧和中医辨证
的思维。临床见习主要选择常见病为主，如感冒、咳喘、腹泻
等，针对患者的具体情况四诊合参收集病情资料进行辨证，通
过书写病案给学生演示，待学生掌握操作步骤和方法后，再放
手让学生操作，观察他们诊断疾病的过程，发现不当之处及时
纠正。通过对临床病案的讨论，使学生的基础知识和临床思
维方式能够客观地反映出来，带教老师及时发现问题并立刻
指导、纠正。在带教过程中要求学生要多听、多看、多动手，鼓
励学生讲出他们各自的看法、思路，再对学生的见解进行分别
评讲，具体指导并对不正确的地方进行纠正，在每次临床见习
的最后，组织学生开展讨论和总结。这样不仅能加深学生对
书本知识的理解与掌握，而且还可以锻炼四诊、辨证和病案书
写的基本功，培养学生严谨的学风和高尚的医德。通过这些
实验和临床见习的实践，努力使学生的实际动手操作能力和
辨证思维能力得到提高，这样就可以弥补理论教学的不足，同
时能增加学生的兴趣和自信，为以后临床实践打好基础。
综上所述，《中医诊断学》的教学和其他的医学专业课
一样，是一个不断实践、探索的过程，作为专业课教师，我们
需要不断地更新自身的教育理念，努力地提高专业素质和
业务水平，不断改进并探索新的教学方法，采用各种教学手
段，着力提高学生的动手能力和中医诊断基本知识的灵活
应用能力，不断加强基本技能的训练，逐渐培养学生的中医
辨证思维能力和中医诊断的综合素质，为学生后期临床课
的学习，甚至以后的临床工作打下坚实的基础。
(收稿日期:2012 － 05 － 23)
·251· 2012 年第 28 卷第 4 期(总第 164 期)