全 文 ：四川 大 学 学 报 (医 学版 )
J Sichuan Un iv (Med Sci Edi)
　 2006; 37( 6): 908 912　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　
藏药结血蒿水提物的免疫抑制作用研究
王聚乐 1 , 李长山 1 , 顿　珠 2 , 周惠英 1
1. 西藏大学医学院 西藏 (拉萨 850002) ; 2. 西藏藏医学院
　　【摘要】　目的　研究结血蒿水提取物 ( AV-ex t)对小鼠免疫反应的抑制作用。方法　运用淋巴细胞增殖反应、
混合淋巴细胞反应观察 AV-ex t体外应用和口服给药对小鼠脾细胞增殖的影响 ;运用小鼠脾细胞增殖试验 ,观察
AV-ex t体外应用对小鼠活化脾细胞分泌 IL-2的影响 ;用明胶酶谱法和粘附分析法 ,观察 AV-ex t对小鼠活化 T淋
巴细胞移动和粘附能力的影响。结果　 AV-ex t在 1μg /m L～ 100μg /m L剂量范围内对脾细胞无明显的细胞毒性 ,
但对刀豆蛋白 A( ConA)诱导的小鼠脾细胞增殖反应、混合淋巴细胞反应具有明显的抑制作用 ,对小鼠活化脾细胞
分泌 IL-2、小鼠活化 T淋巴细胞分泌基质金属蛋白酶 9( M MP-9)及粘附能力有显著的抑制作用 ;连续 7 d每日口服
给予 150 mg /kg和 300 mg /kg的 AV-ex t,能明显抑制小鼠脾细胞增殖及活化脾细胞分泌 MM P-9。结论　 AV-ex t能
显著抑制小鼠的细胞免疫反应。
【关键词】　免疫反应　结血蒿　细胞增殖　粘附　白介素 2
【中图分类号】　 R291. 4
Immunosuppressive Ef f ect of Tibetan Medicine, Artemisia vestita Wall Extract　WANG Ju -l e , LI Chang -shan ,
DUN Zhu , ZHOU Hui -ying .　Medical College of Tibet Universit y , Lasa 850002, China
【Abstract】　 Objective　 To assess the immunosuppressiv e effect of Artemisia vestita Wall Ex trac t( AV-ex t )
on mice. Methods　 The prolifer ativ e r eac tion o f lymphocyte and th e mixed lymphocy tes reaction were used to de-
termine the effects of AV-ex t on the pro lif eration o f mouse splenocy te in vitro and in vivo; Pro liferativ e reac tion of
mouse splenocyte wa s used for detecting the effects o f AV-ex t on the lev el o f IL-2 secre ted by mouse ac tiv a ted
splenocy te in v itro. Gelatin enzymog ram me thod and adherence analy tica l method we re employed to disclo se the ef-
fects of AV-ex t on mouse activ ated T-lymphocyt es mobility and adher ence. Results　 1-100μg /m L AV-ex t exer ted
no obvious tox icity to mouse splenocy te, but it had obv ious inhibito ry effec t on prolifer ativ e reaction of mouse
splenocy te and mixed lymphocy tes reaction induced by ConA. It a lso had obv ious inhibito ry effect on th e lev el of
IL-2 secreted by mouse ac tiv a ted splenocyte , on the production o f M MP-9 by mouse activ ated T-lymphocy tes, and
on adherence. 150 mg /kg and 300 mg /kg o f AV-ex t, giv en to mouse pe r os for 7 day s, could inhibit the pr olifer a-
tion o f splenocy te and the secr etion o f MM P-9 by activ ated splenocy te of mouse. Conclusion　 AV-ex t can inhibit
the cellula r im mune reaction o f mouse obviously .
【Key words】　　 Immuno reaction　　 Artemisia vestita Wall　　 Celluar pro life ration　　 Adherence　　 IL-2
　　藏药结血蒿 ( Artemisia vestita Wall)为西藏地
区常用的藏药之一。其味苦、辛、性寒 ,功能主要为清
热解毒 ,杀虫利湿。《蓝琉璃》记其“抗菌解毒 ,治肿块
及疮疡”。 《新编藏医学》记其“治疗脑炎等炎症及寄
生虫引起的肠绞痛、疮疡等症” [1 ]。 现代也用其治疗
妇科疾病如乳腺炎、慢性附件炎、痛经等以炎性为主
的疾病。我们的初步研究 [ 2]发现 ,结血蒿水提物
( AV -ex t )对 2, 4, 6三硝基氯苯 ( PCL)诱导的小鼠接
触性皮炎及绵羊红细胞 ( SRBC)诱导的小鼠足趾肿
胀有显著的抑制作用。 本次实验试图探讨其抑制迟
发型变态反应的机理及免疫抑制作用的靶点。
1　对象与方法
1. 1　实验材料
1. 1. 1　实验动物及细胞株　 ICR小鼠 ,雌性 , 210
只 ,体质量 18～ 22 g ,购自中国药科大学动物中心 ;
C57BL /6、 BALB /c小鼠购自上海西普尔 -必凯实验
动物有限公司 ,雌性 ,各 10只 ,体质量 18～ 22 g;人白
血病 T淋巴细胞瘤 Jurkat细胞株 ,购自中科院上海
细胞所。
1. 1. 2　药物　结血蒿 ( Artemisia vestita)购自西藏
自治区藏医学院藏药厂 ,经西藏自治区藏医学院藏
药教研室顿珠老师鉴定为 Artemisia vest ita干燥的
地上部分 ;水煮提取、浓缩、干燥 ,每 kg结血蒿得灰
黑色提取物 ( AV-ex t ) 181 g;试验中所用剂量均以
该粉末计算 ,细胞培养时以 RPM I1640培养液溶解
成所需浓度 ,过滤除菌。
1. 1. 3　主要试剂　 2, 4, 6三硝基氯苯 ( picryl chlo-
ride, PCL, Nacalai tesque IN C, Kyo to , Japan) ;刀
豆蛋白 A( concanavalin A, Con A, Sigma ) ;噻唑蓝
( M T T, Sigma) ; RPM I1640培养基 ( Gibco) ;新生牛
血清 ( new born bov ine serum , NBS,杭州四季青 ) ;
胰蛋白酶 ( t rypsin, Sigma) ; Triza base ( Sigma) ;十
二烷基硫酸钠 ( sodium dodecyl sulfate, SDS,日本进
口分装 ,上海化学试剂采购供应站 ) ;明胶 ,考马司亮
蓝 R-250 ( Sigma ) ;鼠尾 Ⅳ型胶原 ( Co llabo ra tive
Biomedical Products, MA, U SA) ;结晶紫 (上海远航
试剂公司 ) ; 佛波酯 ( pho rbol 12, 13-dibuty ra te,
PDBu, Wako Pure Chemical Indust ry L td. ,
Japan) ,小鼠 T细胞富集柱 ( R& D systems, USA) ,
96孔培养板 ( Nunclon ) ,牛血清白蛋白 ( bovine
serum a lbumin, BSA, 上 海 中 科 院 生 物 化 学
所 )。　　　　　　
1. 2　方法
1. 2. 1　小鼠脾细胞增殖试验　参见文献 [3 ] ,取 ICR
小鼠 ,无菌制备小鼠脾细胞 ,调细胞浓度为 5× 106 /
m L。取 5× 105 /孔置 96孔培养板中 ,设阴性对照组、
阳性对照组、给药组 (分 100μg /mL、 10μg /m L、 1
μg /mL 3个剂量组 ) ,每组设 3复孔 ,重复试验 2次 ,
阴性对照组不加 ConA( contro l) ,其余每孔加入 50
μL ConA(终浓度为 5μg /mL) ,给药组各剂量组每
孔加入 50μL 100μg /mL、 10μg /mL、 1μg /mL的
AV-ex t溶液 (阳性对照组不加 AV -ex t溶液 , ConA
control ) ,置 37℃ , 50 mL /L CO2 ,培养 68 h后 ,每孔
加入 5 mg /mL的 M T T 20μL,继续培养 4 h后 , 1500
r /min离心 7 min,吸去上清 ,每孔加入 200μL二甲
基亚砜 ,振荡 ,使沉淀完全溶解 ,用酶标仪于 540 nm
处测定吸光度 ( A)值。结果以刺激指数 ( stimula tion
index , SI,即含 ConA孔的 A值与不含 ConA孔的 A
值之比 )表示。
1. 2. 2　正常小鼠脾细胞的细胞毒性试验　取 ICR
小鼠 ,无菌制备小鼠脾细胞 ,调细胞浓度为 5× 106 /
m L。取 5× 105 /孔置 96孔培养板中 ,设阴性对照组、
给药组 (分 100μg /mL、 10μg /mL、 1μg /mL 3个剂
量组 ) ,每组设 3复孔 ,重复试验 2次 ,阴性对照组不
加 AV-ex t溶液 ,给药组按组每孔加入 50μL 100
μg /mL、 10μg /mL、 1μg /mL的 AV-ex t溶液 ,置 37
℃ , 50 mL /L CO2 ,培养 68 h后 ,每孔加入 5 mg /mL
的 MT T 20μL,继续培养 4 h后 , 1500 r /min离心 7
min,吸去上清 ,每孔加入 200μL二甲基亚砜 ,振荡 ,
使沉淀完全溶解 ,用酶标仪于 540 nm处测定 A
值。　　　　　　
1. 2. 3　 ConA体内活化小鼠脾细胞增殖试验　取
正常 ICR小鼠 ,以 20 mg /kg尾静脉注射 ConA的
PBS溶液 , 8 h后常规制备小鼠脾细胞 ,调细胞浓度
为 5× 106 /mL。取 5× 105 /孔置 96孔培养板中 ,分为
4组 ,每组 3孔 ,分组处理同 1. 2. 2,置 37℃ , 50 m L /
L CO2 ,培养 72 h后 , M T T法测定细胞活力。重复作
2次。
1. 2. 4　口服 AV-ex t对小鼠脾细胞增殖反应的影响
　参见文献 [4 ]并加以改良 ,将 ICR小鼠 12只均分为
3组 ,一组为对照组 ,只灌胃给予生理盐水 ,另两组
分别口服给予 AV-ex t水溶液每日 150 mg /kg和 300
mg /kg ,连续给药 7 d,常规制备小鼠脾细胞悬液 ,调
细胞浓度为 5× 106 /m L。按 5× 105 /孔置于 96孔培养
板中 ,对照组小鼠脾细胞培养孔加 50μL /孔 ConA
为阳性对照组 ,不加 ConA为阴性对照组。给药组小
鼠脾细胞培养孔同样也分别分为加 ConA的孔和不
加 ConA的孔 ,每组各做 4复孔。按 1. 2. 2方法 ,进行
脾细胞增殖试验 ,重复实验 2次。
1. 2. 5　混合淋巴细胞反应试验　参见文献 [4 ]并加
以改良 ,常规分别制备 BALB /c及 C57BL /6小鼠脾
细胞悬液 ,分别配成 1× 107 /mL。种 96孔板 ,每组设
3复孔 ;阴性对照组单种 BALB /c或 C57BL /6小鼠
脾细胞悬液 50μL/孔 ;阳性对照组混种 BALB /c及
C57BL /6小鼠脾细胞悬液各 50μL /孔 ;给药组混种
BALB /c及 C57BL /6小鼠脾细胞悬液各 50μL /孔 ,
再分别加入 50μL /孔 100μg /mL或 10μg /mL或 1
μg /mL的 AV-ex t溶液 ,置 37℃ , 50 mL /L CO2 ,培
养 96 h后 , M TT法检测细胞增殖情况。 重复试验 2
次。
1. 2. 6　 IL-2生成与检测　常规制备小鼠脾细胞悬
液 ,配成 1× 107 /mL,用 ConA(终浓度 25μg /m L)预
处理 2 h。洗涤两次 ,配成 1× 107 /mL,加入 24孔培养
板中 ,每孔细胞悬液 1 mL,同时每孔分别加入 100
μg /mL或 10μg /mL或 1μg /mL的 AV -ex t溶液 1
mL,置 37℃ , 50 mL /L CO2培养箱培养 48 h, 3000
r /min离心 10 min,取上清测 IL-2活性。 IL-2活性的
测定采用活化小鼠脾细胞法 [ 5] ,同时用 IL-2标准品
做对照绘制标准曲线 ,查 IL-2的浓度。
1. 2. 7　小鼠脾细胞中 T细胞的分离纯化　无菌制
备小鼠脾细胞悬液 ,用小鼠 T细胞富集柱分离纯化 ,
操作参照试剂盒的说明进行。得到的 T细胞经流式
细胞仪检测纯度为 0. 88左右。
1. 2. 8　基质金属蛋白酶 9( MM P-9)活性的测定　
制备 PCL诱导的小鼠接触性皮炎 ( PCL-CS)模型
(取 ICR小鼠剃去腹毛 ,涂 0. 01 g /mL PCL的无水
乙醇溶液 100μL致敏 ) ,取致敏 5 d但尚未攻击的小
909　 J Sichuan Univ ( Med Sci Edi) Vo l. 37 No. 6 2006
鼠 ,常规制备脾细胞悬液 ,分离纯化脾 T细胞 ,纯化
的 T细胞与 100μg /mL、 10μg /mL、 1μg /mL浓度的
AV-ex t参照文献 [3 ]试验的要求进行培养 ,取上清液
测定 MMP-9的活性。取 ICR小鼠 24只 ,其中 6只为
正常对照组 ,其余造 PCL-CS小鼠模型 ,模型小鼠分
为 3组 ,每组 6只 ,其中一组作为阳性对照组 ,另外两
组为给药组 ,分别口服给予 AV-ex t水溶液 ,每日 150
mg /kg和 300 mg /kg,连续给药 7 d,常规制备脾细
胞悬液 ,采用小鼠 T细胞富集柱纯化分离脾 T细胞
参照文献 [3 ]试验的要求进行培养 ,取上清液测定
MM P-9的活性。用 UV P成像系统拍照 ,用软件
LABWORK ( UV P) 4. 0进行相对定量。
1. 2. 9　粘附能力分析 [6 ]　取 ICR小鼠 8只 , 4只为
正常对照组 , 4只造 PCL-CS小鼠模型 ,取正常组小
鼠及致敏 5 d但尚未攻击的小鼠各 1只 ,分别常规制
备脾细胞悬液。另各取 1只分别常规制备脾细胞悬
液 ,然后采用小鼠 T细胞富集柱纯化分离脾 T细胞 ,
分别调细胞浓度 1× 106 /mL。取对数生长期的 Jurkat
细胞株 ,悬于 RPM I-1640中 ,调细胞浓度 1× 106 /
m L。 鼠尾Ⅳ型胶原用 0. 02 mo l /L冰醋酸稀释为 50
μg /mL,按 50μL /孔加入酶标板 , 4℃放置过夜 ,用
PBS洗 3次后加 2 g /L BSA室温封存 2 h,再用 PBS
洗 3次。分别加入上述处理好的脾细胞、脾 T细胞及
Jurkat细胞株悬液 50μL /孔 ,正常组及模型组加入
RPM I1640液 50μL /孔 ,给药组分别加入 100μg /
m L、 10μg /mL、 1μg /m L的 AV-ex t溶液 50μL /孔 ,
同时加入佛波酯 (终浓度 100 ng /mL) ,各组各浓度
分别各设 3复孔 ,置 37℃ , 50 mL /L CO2培养箱中
孵育 45 min后 ,用 RPM I1640洗 3次以除去非粘附
细胞 ,粘附细胞用甲醛 /丙酮 ( 1∶ 1)液室温固定 10
min,用 PBS洗 3次 ,加 5 g /L结晶紫甲醇溶液染色 10
min,用水洗 3次 ,每孔加入 10 g /L SDS 100μL,振
荡 10 min,在 540 nm处测定 A值。将未洗涤而直接
固定的总细胞产生的吸光度值作为总细胞粘附值
( Ato tal ) ,以只用 BSA包被的孔作为对照孔 ,数据表
示为粘附细胞占总细胞的百分数。 重复实验两次。
粘附细胞百分数 (% ) = ( A测定孔 - A对照孔 ) / Atotal× 100%
1. 2. 10　统计学方法　数据采用 x-± s表示 , t检验
分析组间差异 ,以 P < 0. 05为差异有统计学意义。
2　结果
2. 1　 AV-ext对 ConA体外刺激的小鼠脾细胞增殖
反应的影响
结果见表 1, AV-ex t能够抑制 ConA所致小鼠
脾淋巴细胞增殖反应并呈浓度依赖性 ( P < 0. 01)。
2. 2　 AV-ext对正常小鼠脾细胞的细胞毒性
结果见表 1,在 1μg /mL～ 100μg /mL浓度范围
内 AV-ex t对小鼠脾细胞的存活无明显影响。
2. 3　 AV-ext对 ConA体内活化小鼠脾细胞增殖的
影响
结果见表 1, ConA体内活化小鼠脾细胞增殖较
正常小鼠脾细胞增殖明显增加 , AV-etx浓度依赖性
的抑制了脾细胞的增殖。
表 1　 AV-ext对小鼠脾细胞增殖反应的影响 (x-± s )
Table 1　 Effect of AV-ext on lymphocyte prolif eration induced by ConA (x-± s )
Group n
Stimulation index ( SI)
In vitro In vivo
A540
Negat ive con t rol 3 - -
Posit ive con t rol 3 10. 029± 0. 549 1. 862± 0. 041 0. 237± 0. 0220
AV-ex t 100μg /m L 3 1. 645± 0. 674* * 0. 815± 0. 142* * 0. 230± 0. 0272
10μg /m L 3 3. 192± 0. 389* * 1. 733± 0. 035* * 0. 256± 0. 0457
1μg /m L 3 6. 902± 2. 254* * 1. 828± 0. 104 0. 229± 0. 0700
　　* * P < 0. 01, vs posi tive cont rol group
2. 4　口服 AV-ext对小鼠脾细胞增殖反应的影响
AV-ex t口服给药对小鼠脾细胞自发增殖反应
及 ConA诱导的脾细胞增殖反应都具有显著的抑制
作用 ,见表 2。
2. 5　 AV-ext体外应用对混合脾淋巴细胞增殖反应
的影响
混合淋巴细胞的增殖反应明显强于未混合淋巴
细胞 , AV -ex t在所观察的浓度范围内对混合淋巴细
胞反应具有剂量依赖性的抑制作用 ,见表 3。
2. 6　 AV-ext对 ConA诱导小鼠脾细胞 IL-2分泌的
影响
　　 ConA刺激过的淋巴细胞培养液上清中 IL-2水
平明显上升 , AV-ex t剂量依赖性地抑制了 ConA诱
导的小鼠脾细胞分泌 IL-2,结果如图 1所示。
2. 7　 AV-ext体外及体内给药对活化脾 T细胞分泌
MMP-9的影响
910 四川大学学报 (医学版 ) 2006年第 37卷第 6期　
表 2　口服 AV-ext对小鼠脾细胞增殖反应的影响 (x-± s )
Table 2　 Eff ect of AV-ext adminis tered oral ly on the splenocyte
prolif eration response form mice (x
-± s )
Group n ConA A540
Normal 4 - 0. 326± 0. 0925
Cont rol 4 + 0. 936± 0. 0648*
AV-ex t 150 mg /kg 4 - 0. 154± 0. 0108*
300 mg /kg 4 - 0. 127± 0. 0104*
150 mg /kg 4 + 0. 461± 0. 0565* *
300 mg /kg 4 + 0. 190± 0. 0521* *
　　* P < 0. 01, vs n ormal group; * * P < 0. 01, v s cont rol group
表 3　AV-ext体外应用对混合脾淋巴细胞增殖反应的影响 (x-± s )
Table 3　 Effect of AV-ext on mixed lymphocyte reaction in vit ro
(x
-± s )
Group n A540
BALB /c 3 0. 336± 0. 0351* *
C57BL /6 3 0. 209± 0. 0219* *
BALB /c+ C57BL /6 3 0. 862± 0. 111
BALB /c+ C57BL /6 AV-ext　 100μg /m L 3 0. 259± 0. 0705* *
BALB /c+ C57BL /6 AV-ext　 10μg /m L 3 0. 354± 0. 3530*
BALB /c+ C57BL /6 AV-ext　 1μg /m L 3 0. 765± 0. 3100
　　* P < 0. 05, * * P < 0. 01, vs BALB /c+ C57BL /6 group
　　结果见图 2, AV-ex t剂量依赖性的抑制了
MMP-9的分泌。
2. 8　 AV-ext对 PCL-CS小鼠致敏脾淋巴细胞、脾 T
细胞及 Jurkat细胞粘附能力的影响
致敏小鼠脾细胞的粘附能力明显高于正常小
鼠 , AV -ex t体外能剂量依赖性地抑制佛波酯刺激的
脾细胞、脾 T细胞粘附上升。 结果见表 4。
图 1　AV-ext对 ConA诱导小鼠脾细胞 IL-2分泌的影响
Fig 1　 Effect of AV-ext on ConA induced interleukin-2( IL-2) re-
l ease from splenocytes
* P < 0. 05, * * P < 0. 01 vs Cont
表 4　AV-ext对 PCL-CS小鼠致敏脾淋巴细胞及脾 T细胞 , Jurkat细胞粘附能力的影响 (x-±s )
Table 4　 Effect of AV-ext on the adhesion of spleen cel ls、T cells from PCL-CS mice and Jurkat cel ls to typeⅣ col lagen activated by PDBu(x-
± s )
Group n Spleen cells (% ) T cell s(% ) Jurkat cell s(% )
Normal 3 12. 15± 3. 53* * 19. 15± 4. 63* * 16. 72± 5. 17* *
Cont rol 3 68. 52± 14. 66 56. 78± 20. 82 54. 79± 18. 82
AV-ex t 100μg /m L 3 9. 03± 3. 40* * 25. 17± 9. 89* * 21. 34± 6. 24* *
10μg /m L 3 22. 51± 4. 19* * 26. 55± 8. 06* * 24. 16± 6. 18* *
1μg /m L 3 31. 06± 7. 98* * 38. 12± 11. 57 35. 56± 9. 75*
　　* P < 0. 05, * * P < 0. 01 vs con trol group
图 2　 AV-ext体外及体内给药对活化脾 T细胞分泌 MMP-9的影响
Fig 2　 Eff ect of AV-ext on MMP-9 production by spleen T cel ls from PCl-s ensi tized mice in vivo and in vitro
A: In vit ro ef fect of AV-ex t on MM P-9 production; B: In vivo ef fect of AV-ext on M MP-9 p roduction
3　讨论
本研究结果表明 , Av-ex t在 1～ 100μg /mL剂
量范围内体外应用对正常小鼠脾细胞增殖反应、混
合淋巴细胞反应具有明显的剂量依赖性抑制作用 ,
对 ConA体内活化的脾细胞亦有抑制其增殖作用 ,
而在该剂量范围内 ,不影响正常小鼠脾细胞的存活 ,
表明 AV-ex t不具有直接细胞毒作用 ,其对免疫的抑
911　 J Sichuan Univ ( Med Sci Edi) Vo l. 37 No. 6 2006
制作用不是通过细胞毒产生的。ConA主要是刺激 T
淋巴细胞的分化增殖 ,所以 AV-ex t的免疫抑制作用
主要是作用于活化 T细胞。 T淋巴细胞活化增殖过
程中会有 IL-2分泌的增多 ,并会产生正反馈机制 ,
进一步促进细胞增殖。 AV-ex t能抑制 T细胞的增
殖 ,应该使 IL-2的分泌减少 ,我们的实验验证了这
一点 , AV-ex t剂量依赖性地抑制了 ConA诱导的脾
细胞产生 IL-2。
我们前期的研究证明 , AV-ex t对 PCL诱导的
接触性皮炎及 SRBC诱导的小鼠足趾肿胀具有明显
的抑制作用 ,这一结果提示 , AV-ex t不但能影响 T
细胞的增殖 ,可能对 T细胞的移动和粘附也会有一
定影响。在迟发型变态反应的过程中 ,首先 ,淋巴细
胞与血管内皮细胞相互作用 ,穿过细胞壁 ;然后与基
底膜和细胞外基质接触 ,穿过它们到达反应部位。在
迁移的过程中会分泌更多的基质金属蛋白酶
( MMP) ,以降解基底膜和细胞外基质 ,使得细胞的
迁移更加容易。细胞的移动和粘附密切相关 , T淋巴
细胞在向炎症部位移动的过程中 ,穿越基膜需要一
系列的粘附 -释放步骤和基质降解过程 ,并且 T淋巴
细胞与细胞外基质相互作用的过程中需要整合素分
子介导 [7 ]。有文献报道当 T细胞或 Jurkat细胞表面
的整合素分子与其在内皮细胞表面的或细胞外基质
成分中相应配基结合后 , MMP的分泌明显增
高 [8, 9 ]。所以我们观察了 AV-ex t对 PCL体内活化 T
细胞分泌 MMP和粘附的影响。结果 , AV-ex t体外、
体内给药对活化 T淋巴细胞分泌 MMP和粘附能力
具有剂量依赖性抑制作用。
我们从小鼠脾细胞中分离纯化得到的 T细胞是
总 T细胞 ,包含有表型 CD4+和 CD8+ 的 T细胞。由于
Jurkat细胞表面的抗原表达与 T淋巴细胞十分相
似 ,所以我们取 CD4+分子高表达的人白血病 T淋巴
细胞瘤 Jurkat细胞株进行 AV -ex t的体外试验 ,结果
Jurkat细胞在佛波酯的刺激下粘附胶原水平明显上
升 , AV -ex t能明显抑制 Jurkat细胞粘附的上升 ,故
AV-ex t对 T细胞活性的抑制可能主要表现在 CD4+
的细胞上。
AV-ex t的免疫抑制作用主要体现在细胞免疫
上 ,能抑制 T淋巴细胞的活化、增殖、迁移和粘附 ,其
抑制的机制和作用环节尚需进一步研究。
参 考 文 献
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( 2005 12 08收稿 , 2006 04 12修回 )
编辑　汤　洁
912 四川大学学报 (医学版 ) 2006年第 37卷第 6期