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桑白皮的鉴别及蜜炙炮制对其主要成分桑根酮C含量的影响



全 文 :《四川蚕业》 2009年2期
摘 要:研究桑白皮的各种理化鉴别方法,蜜炙炮制后分离和精制有效成分桑根酮C,并分析
蜜炙炮制对其的影响。方法:对桑白皮性状、显微结构、主要的化学成分进行鉴别,采用传统工艺和干
燥箱蜜炙炮制法分别炮制桑白皮,利用桑白皮的特性分离并纯化桑根酮C,用红外光谱和紫外光谱分
析有效成分的组成。结论:鉴别结果证明实验用桑白皮为正品桑白皮,干燥箱蜜炙炮制法优于传统工
艺法,通过分析光谱,纯化后药物中含有葡萄糖,蜜炙炮制对有效成分桑根酮C没有影响。
关键词:桑白皮 鉴别 薄层色谱法 炮制 桑根酮C
桑白皮的鉴别及蜜炙炮制对其主要成分
桑根酮 C含量的影响
郑尚永 1,2 姚海军 2 毛积芳 1
(1.第二军医大学生化教研室,上海 200433;
2 .淮阴工学院生化学院,江苏 淮安 223200)
近年来,市售桑白皮中出现有混淆品种,主要有
蒙桑、鸡桑、华桑、构树和小构树的根皮,只有根据桑
白皮自身的理化性质才能对其进行鉴别,分辩真伪。
蜜炙炮制可以增强药物补益脾胃、润肺止咳等功用,
并有解毒、矫味及缓和药性作用。蜜炙还能起协同作
用,可以增强补益中气之功效。因此,本文采用蜜炙
药物的传统方法和远红外线烘箱烤制蜜炙药物的方
法,以期找到更适合的桑白皮炮制方法,并对蜜炙炮
制后桑白皮中的有效成分进行分析,判断蜜炙炮制
是否影响其有效成分。
1 材料和方法
1.1原材料
市售桑白皮原料药材,南京医药(淮安)天颐有
限公司。
1.2主要试剂和仪器
三氯甲烷(AR级)乙醚(AR级)、镁粉,上海久
亿化学试剂有限公司;丙酮(AR级),国营南京化学
试剂一厂;冰乙酸(AR级),无锡市亚盛化工有限公
司正己烷(AR级),上海清析化工科技有限公司;聚
酰胺层析柱、UV-2407PC紫外光谱仪、Fourier(傅立
叶)变换红外光谱仪。
1.3实验方法
1.3.1性状鉴别
本品呈扭曲的卷筒状、槽状或板片状,大小不
等,长30~100cm,宽1~4cm,厚1.5~6mm。外表面
黄白色或乳白色,略平坦,不光滑,具细纵纹;栓皮
未除尽者,外表面呈橙黄色或红棕色,粗糙,鳞片
状,有时可见横长的皮孔及纵、横皱纹。内表面淡黄
白色至灰黄色,平坦,有细纵纹。体轻,质柔韧,不易
横向折断,但易纵向撕裂,撕裂时有粉尘飞扬;断面
粗纤维性,不平整,片裂性,易成层剥离。气微,味微
甜。以皮厚、色白、质柔韧、粉性足者为佳。
1.3.2显微鉴别
横切面(厚2.3mm):木栓组织偶有残留,多不完
整,木栓细胞长方形;皮层约占横切面的1/4~1/3,散
有石细胞和含晶厚壁细胞群,并散有单个纤维及少
试验研究
收稿日期:2009- 05- 03
作者简介:郑尚永(1970-)男,博士,从事教育工作,研究方向,药物分子机理。
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《四川蚕业》2009年2期
数乳管;韧皮部占横切面的绝大部分,散有较多的类
圆形乳汁管,壁稍厚,韧皮纤维单个或成束,非木化
或微木化;射线明显,宽2~6列细胞,至末端呈微波
状弯曲;薄壁细胞内含有众多的草酸钙棱晶(皮层较
多)和淀粉粒。
1.3.3理化鉴别
①检查黄酮(盐酸-镁粉试验)
取本品粉末2g,加入无水乙醇80ml,水浴加热
30分钟,用多层纱布滤过。取滤液10ml倒入小烧杯
中,加镁粉少许混匀,滴加浓盐酸数滴,观察反应现
象,并拍照记录。
②三萜检查
取本品5g,加无水正己烷150ml,在水浴上加热
30分钟,用多层纱布滤过。滤液置小蒸发皿中蒸干,
放冷。残渣溶解于氯仿中,再加冰乙酸1ml,倾入干燥
小试管中,沿管壁滴加浓硫酸,观察反应现象。
③桑白皮的薄层层析
在硅胶G板选3个点,用毛细管各取5μl,分别
点于同一聚酰胺薄膜,以36%醋酸为展开剂,展开约
10cm,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。
1.3.4蜜桑白皮的炮制方法
将净选并切制后的药物100g,加入用少许开水
稀释过的炼蜜30g,拌匀,焖透,均匀摊于干燥箱内用
的铁匾上,厚约1cm左右。蜜炙根茎类的药物应将烘
箱控制温度调至70℃;加热时间10~20min,取出摊
凉收藏。
1.3.5蜜桑白皮有效成分分析
将蜜桑白皮提取物和KBr晶体压片放入红外光
谱仪中,对提取物中的成分用红外吸收光谱和紫外
吸收光谱分析进行分析。
2 结果与分析
2.1显微检查
原料桑白皮及其横切面的显微照片(如图1所
示)。
2.2黄酮的检查
检查黄酮类的盐酸―镁粉试验是鉴定黄酮类化
合物最常用的颜色反应,它只对黄酮类中的羟基黄
酮类(黄酮醇类)反应明显,其余则不甚明显。一般黄
酮苷元难溶或不溶于水,易溶于甲醇、乙醇、醋酸乙
酯、乙醚等有机溶剂及稀碱水溶液中。
根据黄酮类的盐酸―镁粉反应呈樱红色,利用
乙醇提取桑白皮中的黄酮类化合物,加镁粉少许混
匀,滴加浓盐酸数滴后溶液呈樱红色,并有大量的气泡
产生(见图2)。实验表明:桑白皮中含有羟基黄酮类。
图2:桑白皮检查黄酮
2.3三萜的检查
三萜类化合物是由6个异戊二烯单元聚合而成
的化合物及其衍生物。以游离状态存在时称为三萜
类化合物或三萜苷元,与糖结合则称为三萜皂苷。
鉴别三萜一般常用氯仿-浓硫酸反应:样品溶
于氯仿,加入浓硫酸后,氯仿层呈红色或蓝色。如图
3在两层交界面有暗红色环,即显色后的氯仿层。实
验表明桑白皮中含有三萜。
2.4桑白皮的薄层层析
在硅胶G板选3个点,用毛细管各取5μl,分别
点于同一聚酰胺薄膜(硅胶G板)上,以36%醋酸为
展开剂,展开约10cm,取出,晾干,置紫外光灯
(365nm)下检视,结果如图4所示。
图1:桑白皮及其根内皮横切面(右图为显微图10×40)
图4:桑白皮的薄层层析的蓝色荧光斑点
图3:桑白皮检查三萜两层交界面有暗红色环
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《四川蚕业》 2009年2期
薄层层析桑白皮提取液的三个样点(见图4),均
在Rf0.35~0.38和Rf0.42~0.48位置上显相同的蓝
色荧光斑点,均呈一致的薄层色谱。符合桑白皮薄层
色谱的要求,证明该桑白皮是正品桑白皮。
2.5传统和新工艺炮制蜜桑白皮的比较
传统工艺炮制蜜桑白皮:色泽不太均匀,呈金黄
色,手抓不粘手,有少量焦粒(见图5左)。传统工艺
炮制蜜桑白皮需要长期积累经验,才能炮制出合格
的药物,较难掌握。新工艺干燥箱炮制桑白皮(见图5
右):色泽均匀,呈金黄色,手抓不粘手,质脆,效果理
想。
2.6蜜桑白皮中桑根酮C的分离与红外光谱分析
为了检测蜜炙炮制对桑白皮中的有效成分是否
有影响,本实验选取桑白皮中的有效成分桑根酮C
进行分析。由桑根酮C的柱层析流出曲线可知,在洗
脱初期没有桑根酮C流出,流出的全是杂质,然后桑
根酮C于杂质一起流出,而且桑根酮C的含量不断
增加,接着又逐渐减少,杂质始终覆盖着桑根酮C,所
以只能使桑根酮C富集,而不能与杂质完全分离。
图6:蜜桑白皮(左)和桑白皮(右)中桑根酮C的红外吸收光谱图
蜜桑白皮中桑根酮C的红外吸收光谱图(见图
6左)显示有羟基(3380cm-1),C-H键(2820cm-1,
2720cm-1),羰基(1715cm-1,1725cm-1),共轭羰
基(1690cm-1),环氧键(1210 cm-1),双键(1600~
1520cm-1)等特征吸收峰。桑白皮中桑根酮C红外
光谱(见图6右)显示有羟基(3380cm-1),共轭羰基
(1690 cm-1),环氧键(1210 cm-1),双键(1600~
1520cm-1)等特征吸峰。蜜桑白皮和桑白皮中桑根
酮C的红外吸收光谱图显示有共同的特征吸收峰,
说明蜜炙前后桑白皮中的主成分没有丢失。
2.9桑根酮C的紫外吸收光谱
蜜桑白皮中桑根酮C的紫外吸收光谱 (见图7
左) 显示在 228,281,305nm 处有最大吸收,其中
285~288nm的紫外吸收证明分子有共轭羰基。桑白
皮中桑根酮C的紫外吸收光谱 (见图7右) 显示在
230,280,305nm处有最大吸收,其中283~288nm的
紫外吸收证明分子有共轭羰基,结果同样显示蜜炙
前后两种药物的主成分没有变化。
3 讨论
桑白皮,具有降血压、利尿利泻、杀菌消炎,预防
与治疗消化道疾病,清除体内过多的自由基、延缓衰
老、抗艾滋病的活性等作用,具有很高的药用价值。
市售桑白皮中出现有混淆品种,根据桑白皮自身的
理化性质对其进行鉴别,研究炮制的方法,炮制前后
对有效成分的影响等对中药材桑白皮的临床应用具
有一定的参考价值。
蜜炙药物的传统方法是将净选或切制后的药物,
加入定量炼蜜(须用少许开水稀释),拌匀,稍焖,放入锅
内用文火炒至药物表面成规定的颜色,不粘手时,取出
放凉。加工人员改进以上传统的炮制方法,用
YHW806远红外线烘箱或DHG-9246A型电热恒温
鼓风干燥箱蜜炙药物,取得比较满意的效果。
蜜桑白皮中桑根酮C所具有的特征官能团都
能检测到,但还测定到了葡萄糖的特征官能团,原因
是在桑根酮C的分离纯化过程中未能有效去除葡萄
糖,丙酮能有效去除多糖,而蜂蜜几乎完全由葡萄糖
和果糖等单糖组成,所以有较多残留,但也证明了蜜
炙法炮制桑白皮对其有效成分无影响,具有更好的
药用价值。
参考文献:
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3 琼红,张国刚,董淑华.桑属植物化学成分及
图5:统工艺和新工艺炮制蜜桑白皮
左:传统工艺;右:新工艺
图7:蜜桑白皮和桑白皮中桑根酮C的紫外吸收光谱图
(下转第24页)
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《四川蚕业》 2009年2期
沙。
3.5桑叶筹集与试喂
共育所用的桑叶由共育室覆盖的农户无偿提
供,一张蚕种提供17.5kg桑叶,再由共育户进行叶
面消毒和试喂。
3.6小蚕发放
三龄眠起后再给桑3~4次后称量小蚕,要求
50头蚕儿体重达到4.5g以上,且蚕体健壮整齐无病
死蚕,才能发放小蚕,同时,要求农户必须带消毒合
格的蚕箔,1张蚕必须分装4~5个蚕箔。发放小蚕
要求在早、晚或者阴天进行。
宁南县针对当地特点,在小蚕共育过程中进行
了一些技术创新,如小蚕专用自动扩座器、草帘滴
灌降温等小发明、小创造。
4 共育室的管理及考核方式
4.1共育户的管理方式
宁南县全面推行共育户联农户,单产共育费挂
钩的“五包”责任制(即:包订种、包共育质量、包检
查指导、包技术培训、包统计茧量)和农户对共育户
“五保证”措施(即保证接受管理、保证接受技术培
训、保证不代订蚕种、保证及时上报售茧数量、保证
提供优质小蚕用叶),通过共育户对蚕农面对面的
技术指导和相互交流,不仅解决了科技入户的问
题,而且充分调动了共育户和蚕农的积极性和责任
心,达到蚕茧增产、蚕农增收的目的。
4.2乡镇对共育户的考核
4.2.1综合考核 各乡镇参照蚕业局制定的《共育室
考核管理办法》出台了本乡镇的管理考核制度,包
括技术操作、订种、技术培训、技术指导等,另外,每
个共育室都有一本《共育室标准化操作督查考核登
记薄》,由每天进行技术指导和跟踪检查的技术人
员对各项操作进行评分,最后按总分计发考核奖,
完成任务的每张奖5元。
4.2.2产茧考核 各乡镇对共育户共育的所有蚕种的
产茧量计发考核金。以本乡镇同批蚕产茧量为准,
共育室应得产茧考核奖=该乡镇同批蚕张数×8.00
元÷该乡镇同批蚕产茧量×共育室所交售的总茧
量。
4.3蚕茧公司对共育户的考核
每张蚕由县蚕茧公司补助7.00元的共育室考
核奖,以各乡镇蚕种实发张数计算,对各共育室按
有效售茧底单汇总的产茧量计发补助费。共育室每
季所应得补助考核奖=该乡镇同批蚕张数×7.00
元÷该乡镇同批蚕产茧量×共育室所交售的总茧
量。
5 结论与建议
宁南县推行的共育户联农户,共育费与养蚕单
产挂钩的管理方式有效地促进了小蚕的精细化管
理,标准化饲养,加强了共育户对养蚕农户面对面
的技术指导,对促进宁南蚕业健康稳定地发展发挥
了十分重要的作用。共育室管理考核办法值得在全
省借鉴和推广。
但宁南县小蚕共育规模偏小,带有浓厚的计划
管理色彩,值得研究改进。建议:今后注意探索推广
小蚕共育省力化技术,在总结“一日两回育”技术的
基础上,制定更加完善的操作方法,在全县推广;在
条件好的地方,进行小蚕饲育中心试点,集中人力、
技术进行规模化、标准化饲养小蚕,并按时、保质、
定量,以合理的市场价格供应蚕农,同时为蚕农提
供产前、产中和产后的技术服务,提高蚕农收益,稳
定蚕农的养蚕养蚕积极性。
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