全 文 ：　　 [文章编号 ]　 0253-3707( 2001) 05-0495-03
[收稿日期 ]　 2001-03-05
[基金项目 ]　吉林省科委基金资助项目 ( 953548-2)
[作者简介 ]　牛凤兰 ( 1951- ) ,女 ,吉林省长春市人 ,研究员 ,主要从事中药化学研究。
菱壳水提物对胃癌细胞抑制作用的实验研究
牛凤兰 1 ,李晨旭 1 ,董威严 1 ,刘国良 1 ,程　舸 1 ,张耿月 2 ,任连广 2 ,王英丽 2
( 1. 吉林大学预防医学院中心实验室 ,吉林 长春 130021; 2.吉林省肿瘤医院 )
[摘　要 ]　目的:观察菱壳水提取物对胃癌细胞体内外抑制作用。方法:采用菱壳水提取物对离体培养胃
癌细胞及 M FC荷瘤小鼠进行体内外实验 ,观察该提取物对胃癌细胞生长抑制率和对 M FC荷瘤小鼠生
长的影响。结果:当菱壳水提物剂量达 14. 06 g /L时 ,体外实验其胃癌细胞抑制率为 37. 76% ;当菱壳水
提物剂量达 10 ml /kg时 ,体内实验其抑瘤率为 36. 1% ,并存在量效关系。结论:菱壳水提取物具有抑制
胃癌细胞的作用。
[关键词 ]　菱壳 ;水提物 ;胃癌细胞
[中图分类号 ]　 R285. 5;　 R965　　 [文献标识码 ]　 A
　　菱壳为菱科植物 ( T rapa bispinosa Roxb)或其同
属植物的果皮 [1, 2 ]。中国民间药方及中药大辞典上均介
绍菱实的醇提物有抗肿瘤作用 [ 3, 4 ]。国外的学者对于菱
的药理药效也曾进行过研究 ,他们有的进行菱实的抗
肿瘤作用及有效成分的研究 [5 ] ;有的侧重于菱实对海
拉细胞毒性研究 [ 6] ;而日本学者 Itokawa H及其合作
者进行中药的抗肿瘤筛选实验 ,实验结果就有菱实 [7 ]。
近年来 ,随着我国中药现代化步伐的加快 ,菱的各部分
的抗癌、抗肿瘤作用已逐渐引起人们的注意 [8, 9 ]但是这
些研究绝大部分都集中在菱实的抗癌、抗肿瘤活性上 ,
对于菱壳的抗肿瘤活性研究偏少。本实验发现菱壳水
提物对胃癌细胞有明显的抑制作用 ,同时这种作用在
体外、体内药理实验中得到证实。
到目前为止 ,有关菱壳水提物对胃癌细胞的抑制
作用还未见报道。为进一步验证菱壳抗肿瘤作用 ,本文
作者进行了菱壳水提物对离体培养胃癌细胞
( SGC-7901)和对 MFC荷瘤小鼠生长抑制作用的试验
研究 ,报道如下。
1　材料与方法
1. 1　试剂和仪器　 RPM I 1640培养粉 ( GIBCO
美国 ) , PN I-1002 CO2培养箱 ( PIKA-KOGYO日本 )。
1. 2　动　物　昆明种小白鼠 50只 ,雄性 ,体重为
( 22± 2) g ,由本校实验动物部提供。
1. 3　受试药物　菱壳水提物由本校预防医学院
中心实验室提供。
1. 4　瘤　株　胃癌细胞株 ( SGC-7901)、 M FC胃
癌细胞由吉林省肿瘤医院提供。
1. 5　实验方法　菱壳水提物对离体培养的胃癌
细胞的抑制作用: 常规复苏细胞 ,调整细胞生长状态良
好的胃癌细胞浓度为 1× 106 ml- 1 , 96孔平底培养板每
孔加细胞悬液 180μl,同时加入菱壳水提物 ( 1. 75,
3. 52, 7. 03, 14. 06, 28. 13, 56. 25, 112. 50, 225. 00和
450. 00 g /L)各 20μl,每浓度 3复孔 ,对照组每孔加
20μl培养液 ,置于 CO2孵箱中培养 2 h后每孔加
3
H-TdR 20μl,再置于 CO2孵箱中培养 1. 5 h,用多头
细胞收集器收集细胞 ,滤膜干后 ,用液闪仪测定
3 H-TdR掺入量 ,结果以 cpm表示。抑制百分率 (% )=
　 (对照孔细胞掺入量 cpm-药物孔细胞掺入量 cpm对照孔细胞掺入量 cpm )× 100%
菱壳水提物对 MFC荷瘤小鼠生长的影响: 取接
种 1周小鼠的 M FC胃癌腹水细胞悬液 ,稀释成
1× 108 ml- 1 ,取 0. 1 ml接种于小鼠左后肢皮下。接种
后的荷瘤小鼠随机分为 5组 ,每组 10只 ,即实验高剂
量组灌胃给 0. 01 ml /g菱壳提取物 ,中剂量组灌胃给
0. 005 ml /g ,低剂量组灌胃给 0. 002 5 m l /g。阳性对照
组腹腔内注射 5-Fu( 20 mg /kg ) ,阴性对照组灌胃等剂
量的生理盐水。每组动物在接种后第 2天按剂量给药 ,
连续给药 10 d,每 3 d称体重一次。待末次给药后次日
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第 27卷　第 5期
2001年 　　　　　　　
白　　求　　恩　　医　　科　　大　　学　　学　　报
J. N. BE THUN E UNIV. M ED. SCI.
　　　　　　 Vo l. 27　 No . 5　
2001
DOI : 10. 13481 /j . 1671 -587x. 2001. 05. 019
处死全部小鼠 ,称瘤重 ,计算抑瘤率 ,以 t检验方法进
行统计学处理。
抑瘤率 (% )= ( 1- 实验组平均瘤重对照组平均瘤重 )× 100%
2　结　果
2. 1　菱壳水提物对胃癌细胞的抑制作用的实验
结果　见表 1。
Tab. 1　 Inhibi to ry ef fect o f aqueous ex t racts
f rom w ater Cal trap shell on the gastric
cancer cell (x± s ,n= 3)
Groups
Dosage
(dB /g· L- 1 )
Cell mix rate
cpm
Inhibi to ry
rate (% )
Con tract 9 037. 80± 541. 94
Aqueous ex t racts　 f rom water 1. 75 7 614. 18± 629. 52 15. 75*
3. 52 7 422. 71± 209. 12 17. 87* *
Cal trap shell 7. 03 6 169. 60± 421. 72 31. 74* *
14. 06 5 625. 39± 371. 50 37. 76* * *
28. 13 5 384. 00± 174. 47 40. 43* * *
56. 25 3 085. 34± 111. 15 65. 86* * *
112. 50 1 081. 34± 54. 41 86. 93* * *
225. 00 0 672. 93± 113. 72 92. 55* * *
450. 00 0 179. 27± 19. 25 98. 02* * *
　　* P < 0. 05,* * P < 0. 01,* * * P < 0. 001　 compared w ith
cont rol group
结果表明 ,菱壳水提物剂量为 1. 75～ 450. 00 g /L
范围内 , 9个剂量组与对照组比较 ,差异均有显著性 ,
P < 0. 05,P < 0. 01, P < 0. 001。随着剂量的增加 ,抑制
作用也越显著 ,说明本药对胃癌细胞抑制作用显著。
2. 2　菱壳水提取物对 M FC荷瘤小鼠生长影响
的实验结果　见表 2。
结果表明 ,当 2. 5 ml /kg剂量时 ,其抑瘤率为
33. 9% , 在剂量达 到 10 ml /kg 时 ,其 抑瘤率 为
36. 1% 。 经统计学处理 , 3个剂量组与对照组比较
P < 0. 05和 P < 0. 01。 随着剂量的增加 ,抑瘤率也增
高。从结果看出本药对胃癌治疗效果较好。
3　讨　论
随着我国中药现代化研究的深入发展 ,中草药治
疗肿瘤已受到人们普遍的关注 ,并取得了很大进展 ,现
已成为继手术、放疗、化疗后又一种治疗肿瘤或辅助治
疗肿瘤的手段。为了开发资源丰富的中草药 ,本文作者
进行了菱壳水提物对胃癌细胞体内外实验 ,结果表明 ,
当体外实验剂量达 14. 06 g /L时 ,抑瘤率为 37. 76% ,
且随剂量增加 ,抑制作用也更显著。体内实验当剂量达
10 m l /kg时 ,抑瘤率为 36. 1% ,随着剂量增加 ,抑制率
也在增加。说明菱壳水提物对胃癌细胞有
Tab. 2　 Effect of aqueous ex t racts f rom wa ter calt rap shell on the g row th of M FC tumor
Groups Dosage( ml /kg )
No . mice
befo re and af ter
experiment
Weight
change
(m /g )
Tumo r
w eigh t
(m /g )
Inhibitiv e
ra te
(% )
Expe rimental 10. 0 10 /10 5. 8 2. 32± 0. 68 36. 1* *
5. 0 10 /10 4. 8 2. 38± 0. 73 34. 4*
2. 5 10 /10 4. 6 2. 40± 0. 77 33. 9*
5-Fu 20. 0 10 /10 4. 0 1. 42± 0. 45 60. 9
Nega tiv e contro l 0 10 /10 5. 0 3. 63± 1. 03 0
　　* P < 0. 05,* * P < 0. 01 compared wi th cont rol go ru p
较理想的抑制作用。比较国内同类研究 [9 ]: 菱果仁对小
鼠 S180细胞抑瘤率为 38. 7% ,对小鼠肝癌细胞抑瘤率
为 36. 0% ,可以看出菱的果仁、果壳均有抑制肿瘤的
作用。比较国外同类研究 [5～ 7 ]菱实对海拉细胞、艾氏腹
水细胞、 S180细胞等都有抑制作用 ,其抑瘤率均在 50%
左右 ,说明该植物提取物抗瘤谱较广 ,具有潜在的开发
价值。 菱壳抗肿瘤作用的活性成分及其机理有待进一
步探讨。
[参考文献 ]
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Studies on inhibition effect of the aqueous extracts from
water Caltrap shell on gastric cancer cell
NIU Feng-lan
1
, LI Chen-xu
1
, DONG Wei-yan
1
, LIU Guo-liang
1
, CHENG Ge
1
,
ZHANG Geng-yue
2
,REN Lian-guang
2
, WANG Ying-li
2
( 1　School of Preventive Medicinc, Jil in University ,Changchun 130021China;　 2　Jilin Tumor Hospital )
[Abstract ]　 Objectiv e: To explore the inhibition effect of aqueous ex t ract f rom wa ter Cal t rap shell on gastric
cancer cell. M ethods: Experiments w ere made in gast ric cancer cell in vit ro and M FC tumor-ca rrying mice in
viv o wi th the aqueous ex t ract. The inhibi tive rate and g row th of the tumo r and the w eigh t change of the mice
w ere studied. Results: When the do sage reached 14. 06 mg /ml , the inhibi tive ra te of tumor w as 37. 76% in vi tro
and the dosage reached 10 ml /kg; th e inhibitiv e ra te of tumo r w as 36. 1% in vi to. Conclusion: The aqueous
ex t ract f rom w ater Calt rap shell has the inhibi tiv e activi ty to tumo r.
[Key words ]　 water Cal trap shell; aqueous ex t ract; g ast ric cancer cell
金属内支架治疗食管狭窄的临床体会
哈尔滨工业大学医院　于　萍
黑 龙 江 省 医 院　陶宇欣　王雅彬
自 1969年 Do tter首次报道内支架 ( Stent)的实验研究以来 ,金属内支架治疗食管狭窄这一技术便很快应用到食管狭窄伴吞咽
困难的治疗上 ,迅速成为当前治疗的热点 ,并代替了部分手术。特别是对失去手术时机的病人尤为实用 ,可以有效地改善临床症状 ,
提高生活质量 ,延长生存期。 本文作者将近 3年的治疗体会报道如下。
1　临床资料　①一般资料: 1995年 3月～ 1998年 6月门诊和住院病人 24例 , 27例次 ( 1枚 24例 , 2枚 1例 , 3枚 1例 ) ,年龄
21～ 76( 56. 5± 23. 5)岁 ;男 19例 ,女 5例 ;其中食管癌 19例 ,食管癌术后瘢痕狭窄 2例 ,食管溃疡后良性狭窄 2例 ,残胃癌 (波及食
管贲门、残胃和吻合口 ) 1例 ,病变长度 4～ 12 cm;狭窄程度按 Sto oler分级分为 3级 13例 , 4级 11例。应用 Cook公司 GRZS型支架
16例 ,硅橡胶人造食管 2例 , CES-1型国产支架 9例 (江苏淮阴西格玛公司 )。 器材: 内镜、支架和其配套输送器及导丝、带电视的
X光机。 ②方　法:术前根据内镜和 X线检查确定病变与门齿间距离和病变长度 ,然后在胃镜下将安全导丝送越癌肿直达胃内 ,并
在 X线透视下将支架置于病变处 ,一般支架上口位于病变上 2～ 3 cm,下口位于病变下 2 cm。
2　结　果　放置 27例次中 , 1次放置成功 25例次。失败的 2例次中 , Cook产 GRZS支架 1次 ,支架放置 24 h后支架上口未能
张开 ,后又置入 1枚 8 cm长支架 ,与之重叠 ;另 1例为硅橡胶人造食管 ,支架放置后透视时发现食管 -气管瘘 ,且支架上口不能很好
封闭食管 ,故将支架立即取出。国产支架 3例放置后位置不够理想 ,当即用支架回收器进行调整 ,使支架置于最佳位置。近期疗效:
术后症状迅速缓解 ,在细嚼慢咽时无吞咽困难 , Sto o ler分级均可达到 0级 ,仅少数病人在进固体食物时自觉有不适感。 3个月存活
率为 73. 9% , 6个月存活率为 30. 4% ,存活超过 1年的均为良性狭窄 ,其中 1例存活已达 3年零 2个月。术后并发症有胸痛 ,应用一
般止痛剂在 4～ 7 d后多自行缓解 ;本组无穿孔、出血病例 ;术后第 3天半夜小便时心脏突停 1例 (既往有冠心病史 )。 Cook支架术后
3周支架滑入胃内 1例 ,经手术取出 ; 8周后癌肿复发 ,再次吞咽困难 ,重新放置支架再次成功 1例 ; 2年零 4个月良性狭窄复发 ,置
国产支架 1例 ;支架因食物团 (鸡肉块 )阻塞 ,经内镜清除 1例。
3　讨　论　本科诊治 24例 ( 27例次 )结果与文献报道相似 ,笔者体会金属支架具有如下特点: ①疗效确切。 对食管癌、溃疡瘢
痕和化学烧伤狭窄引起的吞咽困难 ,以往主要依靠手术治疗 ,非手术治疗常常只是补液支持治疗 ,费用高 ,生活质量低。内支架对缓
解进食困难方面近期有效率达 90%以上 ,可以显著提高生活质量和延长生存期。②自膨式金属支架放置方法与手术相比十分简便 ,
可在胃镜室和 X光室操作 ,术后即可进食 ,在注意适应证的情况下 ,安全性高 ,并发症少 ,适用于失去手术机会的老年病人。 ③几年
来作者在应用萨氏扩张管、自膨式金属内支架等多种方法治疗体会到: 自膨式金属内支架疗效稳定持久 ,使用安全 ;国产支架 ,操作
更为方便 ,可以调整位置 ,新型支架带有弯角和单向活瓣 ,产品说明可以回收 ,这是进口支架所不具有的特点 ;且花费少 ,特别适合
国内一般医院使用。
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牛凤兰等　菱壳水提物对胃癌细胞抑制作用的实验研究