全 文 ：使用建立好的 PLS1 模型对所有参与建模的 21
个样品进行验证，验证结果如表 2 所示。
表 2 21 个建模样品验证结果(n =3)
样品编号
西红花苷 I /%
预测值 实测值 绝对偏差 相对偏差
20091025-01 9. 79 9. 97 0. 18 1. 82
20091025-02 7. 15 7. 02 － 0. 13 1. 83
20091025-03 6. 8 7. 08 0. 28 4. 03
20091025-04 6. 46 6. 16 － 0. 30 4. 75
20091025-05 6. 63 6. 3 － 0. 33 5. 10
20091025-06 8. 91 8. 96 0. 05 0. 56
20091025-07 8. 86 8. 92 0. 06 0. 67
20091025-08 6. 96 6. 76 － 0. 20 2. 92
20091025-10 9. 27 10. 52 1. 25 12. 63
20091025-11 7. 09 7. 4 0. 31 4. 28
20091025-12 6. 39 6. 58 0. 19 2. 93
20091120-02 7. 77 8. 26 0. 49 6. 11
20091120-03 8. 49 8. 54 0. 05 0. 59
20091120-04 8. 45 8. 56 0. 11 1. 29
20091120-05 9. 41 9. 19 － 0. 22 2. 37
20091120-06 7. 7 7. 76 0. 06 0. 78
20091120-07 7. 08 6. 94 － 0. 14 2. 00
20091120-08 8. 49 9. 57 1. 08 11. 96
20091120-09 7. 99 7. 53 － 0. 46 5. 93
20091120-10 7. 95 8. 01 0. 06 0. 75
20091120-11 9. 05 8. 17 － 0. 88 10. 22
2. 4. 3 模型外部验证
利用建立好的校正模型对 2 个外部样品进行预
测，结果如表3所示。从表3可以看出苷 I指标的
表 3 2 个验证样品验证结果
样品编号
西红花苷 I /%
预测值 实测值 绝对偏差 相对偏差
20091025-09 6. 74 6. 39 － 0. 35 5. 33
20091120-01 8. 02 8. 34 0. 32 3. 91
模型预测 2 个外部样品的绝对偏差分别为 － 0. 35
与 0. 32，相对偏差分别为 5. 33 与 3. 91，这充分说明
校正模型能够对样品进行准确的检测。
2. 4. 4 方法的重复性
重复扫描某样品 10 次，将得到近红外数据带入
校正模型中进行计算，结果表明，10 次测量得到的
西红花苷 I的平均含量为 8. 94% ，相对标准偏差为
0. 01，说明建立的西红花中西红花苷 I 的近红外快
速测定方法精密度良好。
3 讨论
利用近红外光谱数据和校正模型能够有效测定
西红花粉末中西红花苷 I的含量。
建模样品的选择应具有代表性，同时要保证实
验所得原始数据的准确性。随着用于建模的样品数
增多，未知样品的预测准确度还会不断得以提高。
本试验所建立的西红花中西红花苷 I 的近红外
测定方法，具有操作简便，分析速度快，无样品破坏，
无需其他试剂成本等特点，为名贵药材的质量评价
和控制提供了快速有效的方法。
参考文献:
［1］ 中国药典［S］.一部. 2010:120.
［2］ 谷筱玉，徐可欣，汪 曣. 波长选择算法在近红外光谱法中药
有效成分测量中的应用［J］.光谱学与光谱分析，2006，26(9):
1618-1620.
［3］ 朱 斌，郑清明，秦路平，等. 20 种金丝桃属植物的近红外漫反
射光谱法鉴别［J］.第二军医大学学报，2003，24(4):455-456.
［4］ 蒋受军，刘丽娜，朱 斌，等. 近红外光谱法测定注射用丹参
(冻干)中丹参素、原儿茶醛及总酚含量的初步研究［J］. 药物
分析，2008，28(7):1094-1098.
HPLC法测定兰考泡桐花中洋芹素和熊果酸的含量
牛江龙1， 赵建波1， 陈佳铭2， 吴德峰2， 方 波1， 卢艳花1* ， 韩海龙1， 孟 华1
(1.华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237;2. 上海朝翔生物技术有限公司，上海
201611)
收稿日期:2009-10-18
基金项目:上海市松江区博士后创新实验基地和上海市科研资助计划资助(08R21421400)，以及上海市大学生创新性实验计划资助
作者简介:牛江龙(1985 －)，男，硕士研究生，研究方向:中药活性成分分离及分析。E-mail:mishannjl@ tom. com
* 通讯作者:卢艳花(1968 －)，女，博士，教授，研究方向:中药现代化。Tel:(021)64251185 E-mail:luyanhua@ ecust. edu. cn
关键词:兰考泡桐花;洋芹素;熊果酸;HPLC
摘要:目的:测定兰考泡桐花中主要成分洋芹素和熊果酸的含量。方法:采用高效液相色谱法测定洋芹素和熊果酸的含
1651
2010 年 9 月
第 32 卷 第 9 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
September 2010
Vol. 32 No. 9
量，分析柱为 ZORBAX XDB-C18柱(4. 6 mm × 250 mm，5 μm);洋芹素以甲醇-水(45 ∶ 55)为流动相，检测波长 340 nm;熊
果酸以甲醇-水(90 ∶ 10)为流动相，检测波长 210 nm;流速为 1. 0 mL /min，柱温 24 ℃。结果:洋芹素进样量在 0. 22 ～ 1.
10 μg范围内具有良好的线性关系(R2 = 0. 999 9)平均加样回收率为 99. 45%，RSD 为 1. 50%;熊果酸进样量在 2. 08 ～
10. 40 μg范围内具有良好的线性关系(R2 = 0. 998 3);平均加样回收率为 99. 35%，RSD 为 1. 85%。结论:该方法简便、
准确、重复性好，可用于测定洋芹素和熊果酸的含量。
中图分类号:R284. 1 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2010)09-1561-04
泡桐属(Paulownia)植物是玄参科(Scrophulari-
ace)落叶乔木，原产于我国，现有 9 个种，4 个变
种［1］。兰考泡桐(Paulownia elongata S. Y. Hu)是
其中重要的一种，分布在中国大陆的山东、河南、江
苏、陕西、安徽、湖北等地，生长于海拔 800 米的地
区。兰考泡桐常生长在野外，目前尚未由人工引种
栽培。泡桐不仅是材质优良的树种，且其花、叶、果、
树皮、根均可入药。近年来研究发现泡桐植物具有
抗氧化［2］、抗菌［3］、抗病毒［4］等药理活性。
泡桐花中主要含有三萜、倍半萜、黄酮、β-谷甾
醇等多种化学成分［5，6］，其中以黄酮和三萜酸类物
质含量最为丰富。前期研究工作发现，洋芹素和熊
果酸是兰考泡桐花中的主要活性成分。由于其显著
药理活性，泡桐花资源已引起人们广泛的关注。但
有关兰考泡桐花中洋芹素和熊果酸含量的测定方法
尚未见报道。本文采用高效液相色谱法测定兰考泡
桐花的中洋芹素和熊果酸的含量，为兰考泡桐花资
源的进一步开发和利用提供了科学依据。
1 仪器与材料
1. 1 仪器
Agilent 1100 型高效液相色谱仪系列(脱气机
G1322A、四元泵 G1311A、自动进样机 G1313A、柱恒
温箱 G1316A 和二极管阵列检测器 DAD G1315B);
超声波清洗器 SCQ25-1(上海声浦超声波设备厂);
自动双重纯水蒸馏器 1810B(上海申立玻璃仪器有
限公司)。
1. 2 材料
洋芹素和熊果酸对照品均是由本课题组从兰考
泡桐花中分离得到，含量≥98%，其 FAB-MS、IR、1H
NMR、13C NMR 数据与文献报道的一致［7-9］。泡桐
花由上海朝翔生物技术有限公司提供，经华东理工
大学卢艳花教授鉴定为兰考泡桐花。甲醇为色谱纯
(Caledon Laboratories LTD. Georgetown，Ont.，cana-
da)，水为二次重蒸馏水。
2 兰考泡桐花中洋芹素的含量测定
2. 1 色谱条件 色谱柱:Agilent ZORBAX Eclipse
XDB-C18柱(4. 6 mm × 250 mm，5 μm);流动相:甲
醇-水(45 ∶ 55);流速:1. 0 mL /min;检测波长:340
nm;柱温:24 ℃。
2. 2 溶液配制
2. 2. 1 对照品溶液的制备 精密称取洋芹素对照
品，加甲醇配制成浓度为 0. 22 mg /mL 的对照品溶
液，4 ℃保存。
2. 2. 2 供试品溶液的制备 兰考泡桐花 60 ℃干燥
并粉碎后过 20 目筛，精密称取 5. 0 g粉末，置于 100
mL量瓶中，加 75%乙醇 80 mL，超声提取 60 min，放
置至室温，定容至刻度，摇匀。取 1. 0 mL 溶液，
10 000 r /min离心 15 min，0. 45 μm 微孔滤膜滤过，
即得供试品溶液。
2. 3 标准曲线及线性范围
分别精密吸取对照品贮备溶液 0. 5，1. 0，1. 5，
2. 0，2. 5 mL，置于 10 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻
度，得各浓度分别为 11. 0，22. 0，33. 0，44. 0，55. 0
μg /mL对照品溶液。各对照品溶液进样 20 μL，以
对照品的含量(μg)为横坐标，峰面积平均值为纵坐
标，绘制标准曲线。线性回归方程为 Y = 4 518. 5X
－40. 77，R2 = 0. 999 9(n = 5)。测试结果表明，洋芹
素的进样量在 0. 22 ～ 1. 10 μg范围内具有良好的线
性关系。
2. 4 精密度试验
取上述洋芹素对照品溶液，重复进样 5 次，测定
其峰面积平均值为 2 935. 5，RSD = 0. 27%。测定结
果表明精密度良好。
2. 5 重复性试验
取同一批兰考泡桐花粉末样品 5 份，按照2. 2. 2
项方法制备供试样品溶液，测其峰面积，RSD =
1. 82%。测定结果表明重复性良好。
2. 6 稳定性试验
取上述洋芹素对照品溶液，分别于 0，2，4，8，12
h测定其峰面积，RSD = 0. 81% 。测定结果表明其
在 12 h内稳定性较好。
2. 7 加样回收率试验
精密称取已知含量的兰考泡桐花粉末样品 1. 0
g，共 5 份，分别精密加入洋芹素对照品溶液 2. 5 mL
2651
2010 年 9 月
第 32 卷 第 9 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
September 2010
Vol. 32 No. 9
(0. 22 mg /mL)，按照 2. 2. 2 项方法制备供试样品溶
液。处理后，按照 2. 1 项色谱条件测定分析，计算回
收率。结果见表 1。
表 1 洋芹素加样回收率试验
标号
原有量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD /%
1 0. 508 2 0. 550 0 1. 062 4 100. 76
2 0. 508 2 0. 550 0 1. 065 4 101. 31
3 0. 508 2 0. 550 0 1. 049 1 98. 35 99. 45 1. 50
4 0. 508 2 0. 550 0 1. 052 1 98. 89
5 0. 508 2 0. 550 0 1. 046 9 97. 95
2. 8 样品测定
精密吸取洋芹素对照品溶液、供试品溶液各 10
μL，按照 2. 1 项色谱条件测定分析，计算样品中洋
芹素的含量，结果见表 3，色谱图见图 1。
A
B
图 1 洋芹素对照品与供试样品 HPLC图谱
A. 洋芹素对照品及紫外图谱 B. 兰考泡桐花 75%乙醇提取物
3 兰考泡桐花中熊果酸的含量测定
3. 1 色谱条件
色谱柱:Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18 柱
(4. 6 mm ×250 mm，5 μm);流动相:甲醇-水(90 ∶
10);流速:1. 0 mL /min;检测波长:210 nm;柱温:
24 ℃。
3. 2 溶液配制
3. 2. 1 对照品溶液的制备 精密称取熊果酸对照
品，加甲醇配制成浓度为 0. 52 mg /mL 的对照品溶
液，4 ℃保存。
3. 2. 2 供试品溶液的制备 见 2. 2. 2 项。
3. 3 标准曲线及线性范围
分别精密吸取对照品贮备溶液 2. 0，4. 0，6. 0，
8. 0，10. 0 mL，置于 10 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻
度，得各浓度分别为 104. 0，208. 0，312. 0，416. 0，
520. 0 μg /mL对照品溶液。各对照品溶液进样 20
μL，以峰面积平均值为纵坐标，对照品的含量(μg)
为横坐标，绘制标准曲线。线性回归方程为 Y =
201. 83X + 77. 87，R2 = 0. 998 3。测试结果表明，熊
果酸的进样量在 2. 08 ～ 10. 40 μg 范围内具有良好
的线性关系。
3. 4 精密度试验
取上述熊果酸对照品溶液，重复进样 5 次，测定
其峰面积平均值为 1 345. 8，RSD = 0. 42%。测定结
果表明精密度良好。
3. 5 重复性试验
取同一批兰考泡桐花粉末样品 5 份，按照2. 2. 2
项方法制备供试样品溶液，测其峰面积，RSD =
1. 71%。测定结果表明重复性良好。
3. 6 稳定性试验
取上述熊果酸对照品溶液，分别于 0，2，4，8，12
h测定其峰面积，RSD = 0. 66%。测定结果表明其
在 12 h内稳定性较好。
3. 7 加样回收率试验
取已知含量的兰考泡桐花粉末样品 5 份，精密
加入熊果酸对照品溶液 2. 0 mL(0. 52 mg /mL)，按
照 2. 2. 2 项方法制备供试样品溶液。处理后，按照
2. 1 项色谱条件测定分析，计算回收率。结果见
表 2。
表 2 熊果酸加样回收率试验
标号
原有量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD /%
1 0. 975 1 1. 040 0 2. 001 5 98. 69
2 0. 975 1 1. 040 0 1. 989 4 97. 53
3 0. 975 1 1. 040 0 2. 021 6 100. 63 99. 35 1. 85
4 0. 975 1 1. 040 0 1. 994 5 98. 02
5 0. 975 1 1. 040 0 2. 034 6 101. 88
3. 8 样品测定
精密吸取熊果酸对照品溶液、供试品溶液各 10
μL，按照 2. 1 项色谱条件测定分析，计算样品中熊
果酸的含量，结果见表 3，色谱图见图 2。
表 3 兰考泡桐花中洋芹素与熊果酸的含量
测定结果(n =5)
洋芹素含量 /(mg /g) RSD /% 熊果酸含量 /(mg /g) RSD /%
0. 508 2 1. 68 19. 501 9 1. 47
3651
2010 年 9 月
第 32 卷 第 9 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
September 2010
Vol. 32 No. 9
AB
图 2 熊果酸对照品与供试样品 HPLC图谱
A. 熊果酸对照品及紫外图谱 B. 兰考泡桐花 75%乙醇提取物
4 讨论
取洋芹素和熊果酸对照品溶液，在 200 ～ 400
nm 扫描紫外吸收光谱，根据光谱显示，分别选择
340 nm和 210 nm 作为其检测波长，这样既可以避
免流动相对基线的影响，又提高检测的灵敏度。
本实验建立的 HPLC方法测定不同溶剂的兰考
泡桐花提取物中洋芹素和熊果酸的含量，该方法简
便、快速、重现性好，分离效果好，数据准确可靠，为
相关植物中洋芹素和熊果酸含量的测定提供了科学
的分析手段，同时，为兰考泡桐花开发利用的进一步
产业化奠定了技术基础。
参考文献:
［1］ 中国林业科学研究院泡桐组. 泡桐研究［M］. (第 1 版). 北
京:农业出版社，1980，7:7-22.
［2］ Smejkal K，Graycova L，Mark R，et al. C-geranyl compounds
from Paulounia tomentosa fruits［J］. J Nat Prod，2007，70(8):
1244-1248.
［3］ Smejkal K，Chudik S，Kloucek P，et al. Antibacterial C-geranyl
flavonoids from Paulownia tomentosa fruits ［J］. J Nat Prod，
2008，71(4):706-709.
［4］ Kang K H，Huh H，Kim B K，et al. An antiviral furanoquinone
from Paulownia tomentosa Steud［J］. Phytother Res，1999，13
(7):624-626.
［5］ 段文达，张 坚，谢 刚，等. 白花泡桐花的化学成分研究
［J］. 中药材，2007，30(2):168-170.
［6］ Chen Juan，Liu Yong，Shi Yanping. Determination of flavonoids
in the flowers of Paulownia tomentosa by high-performance liquid
chromatography［J］. J Anal Chem，2009，64(3):282-288.
［7］ 中国科学院上海药物研究所植物化学研究室编译. 黄酮体化
合物鉴定手册［M］.北京:北京科学出版社，1981.
［8］ Pant P，Rastogi RP. Castanopsone and Castanopsol Two New Trit-
erpenoids from Castanopsis indica［J］. Phytochemistry，1977，16
(11):1787-1789.
［9］ Seo S，Tomita Y，Tori K. Carbon-13 NMR spectra of urs-12-ens
and application to structural assignments of components of Isodon
japonicus Hara tissue cultures［J］. Tetrahedron Lett，1975，1:7-
檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿
10.
打造一流中小中药制药企业产品开发与技术服务平台
广州固志医药科技有限公司是国家高新技术企业，位于广州科学城科技创新基地，从事创新药、医药新材料等核心技术研究。公司拥有深
厚的行业背景及丰富的从业经验，在药品各领域包括制剂技术、质量研究、药理研究、临床研究等具备强大的技术保障体系。拥有中药制剂经
皮释药系统、中药微丸制剂、缓速释药系统、纳米药用包衣剂等方面的核心技术;拥有在药品与药用辅料创新方面扎实的理论基础和独特的创
新理念;尤其在发展与建立国内领先的中药微丸研究具有很强竞争优势。
公司在药品注册方面有丰富的经验，帮助客户开发并成功获得过百个药品生产批件，拥有数十项新药发明专利授权，十多个项目获得新药
临床批件。在医药研发技术服务行业内知名度高，是华南地区最具实力的创新药研发与技术服务中心之一。
近年来，公司先后获得省、市级科技立项多项，《中小中药制药企业产品开发与技术服务平台》获国家创新基金立项;目前我们在研品种数
十项，涵括儿科、妇科、五官科、皮肤科、肿瘤科、药用辅料等多学科，正全面进行知识产权的转让及推广!
新一代品质卓越的“珠江”牌薄膜包衣预混剂应用推广
广州固志医药科技有限公司致力于药用新材料研究，不断追求产品质量更好、成本更低、使用更简单，根据中成药普药“成本占领市场，成
本决定效益”的生产要求，应用新材料技术，设计独特的配方，研发出具有成膜好、低黏度、高韧性、高固含量、低成本等特点的第三代薄膜包衣
材料———新一代“珠江”牌包衣剂，为降低您的产品成本提供解决方案!
有关公司详细介绍请浏览以下网址:http:/ /www. guzhipharm. com 传真:020-81683200
研发中心:020-81680336 020-81683201 联系人:招小姐 谢小姐
辅料营销中心:020-87622633、87618527 辅料招商电话:13119540698 联系人:吴小姐
4651
2010 年 9 月
第 32 卷 第 9 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
September 2010
Vol. 32 No. 9