免费文献传递   相关文献

HPLC测定香青兰药材中的黄酮类成分



全 文 :华西药学杂志
W C J P S 2007, 22(3):348 ~ 349   
作者简介:王建芬 ,山西太原 ,正攻读药物分析专业的硕士学位。 E -mai l:w ang jian fen121@ sina. com
*通讯作者(Correspondent author)
HPLC测定香青兰药材中的黄酮类成分
王建芬 ,徐 宇* ,李 芳 ,罗 嫄 ,刘 晟
(四川大学华西药学院 ,四川 成都 610041)
摘要:目的 建立测定香青兰药材含量的方法。方法 采用 HPLC测定。结果 所测香青兰药材中山奈素 、洋芹素 、异鼠李
素 , 各成分的线性关系良好 , 其线性范围分别为 6. 06 ~ 60. 60 μg m l-1(r =0. 9996)、3. 04 ~ 30. 40 μg m l- 1(r =0. 9997)、
2. 64 ~ 26. 40 μg m l- 1(r = 0. 9996)。其回收率分别为 96. 2%(RSD = 1. 1%)、96. 9%(RSD =1. 1%)、97. 2%(RSD =1. 2%)
(n =3)。结论 所建方法准确 、简便 ,为科学地评价香青兰药材的质量提供了依据 。
关键词:香青兰;高效液相色谱法;山奈素;洋芹素;异鼠李素
中图分类号:R917      文献标识码:A            文章编号:1006 - 0103(2007)03 - 0348 - 02
Determ ination of flavono ids components from Dracoephalum mo lolariea
WANG Jian - fen, XU Yu* , LI Fang, LUO Yuan, LIU Sheng
(West China S chool of Pharmacy, S ichuan University, Chengdu 610041, China)
Abstrac t:OBJECTIVE To e stablish a m ethod fo r de te rm ina tion flavono ids com ponen ts of Dracoephalum m ololariea(keamp fe ride,
apigenin, iso rham ne tin). METHEDS HPLC w as adop ted. RESULTS The ca lib ra tion curves w ere linea r in the range of 6. 06 -
60. 60μg m l- 1(r = 0. 9996) fo r keamp fe ride, 3. 04 - 30. 40 μg m l- 1(r = 0. 9997) for apigen in, 2. 64 - 26. 40 μg m l-1(r =
0. 9996) fo r iso rhamne tin. The average recove ry ra te s w ith the RSD (n =3) we re 96. 2%(1. 1%);96. 9%(1. 1%);97. 2%
(1.2%), respective ly. CONCLUSION  The m e thod is accu ra te, and suitable fo r the determ ination of flavono ids components in
D racoepha lum m ololariea. The m ethod can be adopted fo r qua lity contro l o fDracoepha lum mololariea.
K ey words:D racoephalum m ololariea;HPLC;Kaempfe ride;Apigen in ;Isorham ne tin
CLC num ber:R917 D ocum ent code:A A rtic le ID:1006 -0103(2007)03 - 0348 -02
  唇形科植物香青兰 Dracoephalum mololariea L为
一年生草本植物 [ 1] 。药材中含有挥发油 、萜类 、黄酮
类 、氨基酸 、微量元素等多类化学成分 [ 2] 。研究表明 ,
黄酮类化合物不但可以降血脂 、抑制血小板聚集 ,而
且还具有保肝 、抗炎 、抗病毒 、抗菌等作用 [ 3] 。香青兰
在中国华北 、东北 、西北和新疆等地都有栽培 ,因此 ,
采用 RP -HPLC法同时测定香青兰药材中山奈素 、洋
芹素 、异鼠李素等黄酮类成分的含量。
1 实验部分
1.1 仪器和试药
LC -9A高效液相色谱仪包括 SPD -6AV紫外可
见检测器 、S IL - 6B自动进样器 、C-R4A数据处理机
(日本岛津);641旋转蒸发仪(BüCH I瑞士 )。洋芹素
对照品(自制 ,经测定符合含量测定对照品的要求);
山奈素 、异鼠李素对照品 (中国药品生物制品检定
所);香青兰药材(市售 )经生药教研室王天志教授鉴
定;水为高纯水;甲醇为色谱纯;其余试剂为分析纯。
1. 2 方法与结果
1.2.1 色谱条件 色谱柱为 Shim -pack C18(150mm×
6. 0mm , 5 μm);流动相为甲醇 -水 (55:45,磷酸调
pH3. 5);检测波长 350 nm;柱温 30℃ ;流速 1. 0 m l
min
-1;进样体积 10μl。理论板数以洋芹素计大于 3×
10
3。山奈素、洋芹素、异鼠李素的分离度分别为 1. 71、1.57、
1.69,达到基线分离 ,拖尾因子分别为 0. 95、0. 97、1.12。
1. 2. 2 溶液的制备 分别取五氧化二磷减压干燥
12 h的山奈素 、洋芹素 、异鼠李素对照品适量 ,精密称
定。依次加甲醇溶解成 60. 6、30. 4、26. 4 μg m l-1的
对照品溶液。取香青兰粉末(过 24目筛 )约 2 g,精密
称定 ,加 50m l 80%乙醇 , 80℃回流提取 1. 5 h ,过滤 ,
滤液水浴蒸干 ,甲醇定容至 10 m l,作为供试品溶液。
1. 2. 3 线性关系 精密吸取山奈素 、洋芹素 、异鼠李
素对照品溶液 1、3、5、7、10m l,用流动相定容至 10 m l。
按 “1. 2. 1”项色谱条件操作 ,以浓度为横坐标 ,峰面积
为纵坐标 ,分别得回归线性方程为:Y山奈素 =7. 640×
10
3 +6. 843×102(r=0. 9996);Y洋芹素 =2. 014×104 -
1. 662 ×103 (r =0. 9997);Y异鼠李素 =5. 605 ×103 +
3. 942×102(r=0. 9996)。结果表明:线性范围分别为
6. 06 ~ 60. 60、3. 04 ~ 30. 40、2. 64 ~ 26. 40μg ml-1。
DOI牶牨牥牣牨牫牫牱牭牤j牣cnki牣wcjps牣牪牥牥牱牣牥牫牣牥牬牰
华西药学杂志
W C J P S 2007, 22(3):349 ~ 350   
1. 2. 4 精密度试验 精密吸取山奈素 、洋芹素和异
鼠李素对照品溶液。按 “ 1. 2. 1”项条件连续进样 5
次 ,每次 10 μl, RSD分别为 1. 36%、1. 07%、1. 31%。
1. 2. 5 重复性试验 分别取同批样品粉末 5份 ,精密
称定。按 “1. 2. 2”项方法制备供试品溶液 ,并按 “1. 2. 1”
项条件进样。结果 ,山奈素百分含量的 RSD =1.36%;洋
芹素的RSD =1. 73%;异鼠李素的 RSD =2. 88%。
1. 2. 6 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液 10
μl,于 0 、6 、12、18、24 h进样。山奈素 、洋芹素和异鼠
李素在 24 h内稳定 ,分别为 1. 34%、1. 12%、2. 09%。
1. 2. 7 回收率实验 采用加样回收法 ,取样品适
量 ,精密称定 ,分别精密加入 80%、100%、120%已知
含量的山奈素 、洋芹素 、异鼠李素对照品 ,按 “1. 2. 1”
“1. 2. 2”项方法操作 ,回收率分别为 96. 2%, 96. 9%,
97. 2%;RSD分别为 1. 1%、1. 1%、1. 2%。
1. 2. 8 样品的含量测定 取 10批样品 ,照 “1. 2. 2”
项方法制样 ,按 “1. 2. 1”项条件操作 ,分别计算10批药
材中山奈素 、洋芹素 、异鼠李素的含量(图 1、表 1)。
图 1 对照品溶液(A)和供试品溶液(B)的 HPLC图
F ig 1 Chromatograms of control solution (A)and sample so lution (B)
表 1 香青兰药材含量的测定结果(n = 3)
Tab le 1 A ssay ofD racoepha lum mo lola riea(n = 3)
B atch No. K aem pferide /% Isorham netin /% Apigenin /%
200401 0. 0174 0. 0076 0. 0067
200402 0. 0137 0. 0092 0. 0071
200403 0. 0253 0. 0087 0. 0085
200404 0. 0132 0. 0125 0. 0041
200405 0. 0098 0. 0068 0. 0066
200406 0. 0184 0. 0052 0. 0098
200407 0. 0215 0. 0105 0. 0126
200408 0. 0126 0. 0142 0. 0074
200409 0. 0169 0. 0087 0. 0059
200410 0. 0202 0. 0062 0. 0104
2 讨论
由于被测成分都含有多个酚羟基 ,为获得良好
的峰形 ,试验了流动相中不同的 pH。结果 pH3. 5
时 ,各峰得到良好的分离 ,峰形对称。通过香青兰药
材不同部位山奈素 、洋芹素 、异鼠李素含量的考察 ,
发现叶中黄酮类成分高于其他部位。提示在采集 、
干燥过程中应避免香青兰叶的损失。
参考文献:
[ 1]   刘永民. 维吾尔药志(一部) [M ] .乌鲁木齐:新疆医药科技
出版社 , 1999.
[ 2]   中华人民共和国卫生部药典委员会. 维吾尔药分册 [ S] . 乌
鲁木齐:新疆医药科技出版社 , 1999.
[ 3]   吴寿金 ,赵泰.现代中草药化学成分 [M ] .北京:中国医药科
技出版社 , 2002.
收稿日期:2006 - 11
作者简介:兰保强(1979 -),男 ,副研究实习员 ,从事天然药物及其制剂的研发工作。
HPLC测定生骨颗粒中延胡索乙素的含量
兰保强 ,覃 潇 ,邱宏聪
(广西中医药研究院 ,广西 南宁 530022)
摘要:目的 建立测定生骨颗粒中延胡索乙素含量的方法。方法 采用 RP -HPLC法 , 以乙腈 -磷酸盐溶液 (35:65)为流
动相 , 检测波长 281 nm , 流速 1. 0 m l m in- 1。结果 0.205 ~ 4. 100 m g延胡索乙素的线性关系良好(r=0. 9999), 平均回收率
为 98. 99%, RSD =1. 01%。结论 所用方法简便可靠 、重复性好 , 适合生骨颗粒中延胡索乙素的测定。
关键词:生骨颗粒;延胡索乙素;高效液相色谱法
中图分类号:R917      文献标识码:A           文章编号:1006 - 0103(2007)03 - 0349 - 02
Determ ination of tetrahydropalm atine in Shenggu granules by HPLC
LAN Bao - qiang, Q IN X iao, Q IU Hong - cong
(Guangxi Institute of T raditional ChineseMed ica l and Pharmaceutical S ciences, Nanning 530022, Ch ina)
Abstrac t:OBJECTIVE  To estab lish a de term ination m e thod fo r te trahydropa lm atine in Shenggu granules. METHOD S RP -
HPLC was used w ith K romasil C18Chrom a tog raphic column. M obile phase consisted o f ace ton itrile -pho sphate so lution(35:65). D e-
tection wave leng th w as 281 nm. F low ra te w as 1. 0 m l m in- 1. RESULTS  The linear range o f tetrahydropalma tine w as 0.205 -
4. 100 m g (r=0. 9999). The ave rage recove ryw as 98. 99% w ith theRSD o f 1. 01%. CONCLU SION This me thod is sim ple, re lia-