全 文 ：中 医 药 导 报
Cuiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
第14卷第10期
Vol.14 No.10
2008年 10月
October.2008
金刚藤为临床常用中药，具有清热解毒、消肿散结的作用，
用于附件炎和附件炎性包块及妇科多种炎症。为百合科植物菝
葜 Smilax china L.的干燥根茎。其主要成分为薯蓣皂苷元及其
苷、山奈酚、槲皮素、异鼠李素及其苷等[1]。薯蓣皂苷元为其主要有
效成分之一。本文以薯蓣皂苷元提取率为考察指标，以不同药液
浓度、不同醇沉浓度及静置时间为考察因素进行下交实验。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪：Waters 1525 Binary HPLC pump；Wa－
ters 2487Dual Absorbance detector。乙腈为色谱试剂：水为双
重蒸馏水，自制。薯蓣皂苷元：中国药品生物制品检定所提
供，供含水量测定用（批号：1539-200001）。金刚藤药材经湖
南省中医药研究院谢昭明副研究员鉴定为百合科植物菝葜
Smilax china L.的干燥根茎。
2 方法与结果[2,3]
2.1 色谱条件 色谱柱：Hypersil BOS C18 (大连依利特，4.6mm×
200 mm, 5 μm)，流动相：乙腈-水（92∶8），检测波长：203 nm，流
速：1.0 mL/min，柱温：室温。
2.2 金刚藤水提醇沉工艺预试验 分别取金刚藤药材最粗
粉共300 g(按处方量称取)加水回流提取2次（12∶11），第1次提
取2.0 h，第2次提取2.0 h进行预试验。滤液合并，混匀，浓缩至
适量，平均分成2份，一份继续浓缩至0.5 g生药/g，加40%乙醇
醇沉，静置8 h；另一份继续浓缩至0.75 g生药/g，加40%乙醇醇
沉，静置8 h进行预试验。滤液备用。
2.3 系统适应性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填冲剂；
乙腈-水（92∶8）为流动相；检测波长203 nm；流速为1.0 mL/min；
柱温：室温。根据薯蓣皂苷元峰计算理论板数不低于8000，分
离度＞1.5。
2.4 对照品溶液的制备 取经105 ℃干燥至恒重的薯蓣皂
苷元对照品约6 mg，精密称定，置100 mL容量瓶中，加乙腈溶
液约90 mL,超声处理（功率80 W，频率40 KHz）5 min使溶解，
放冷，加乙腈溶液稀释至刻度，摇匀，即得。
2.5 供试品溶液的制备 精密量取醇沉滤液10 mL，置蒸发皿
中水浴蒸干，残渣加400 mol/L盐酸25 mL、乙醇50 mL分次溶
解，转移至250 mL圆底烧瓶中，回流提取3 h，放冷，连同残渣一
并转移至置分液漏斗中，加乙醇约20 mL分次洗涤，洗涤液转
移至分液漏斗中，用石油醚（60-90℃）振摇提取5次，每次40 mL，
石油醚溶液置水浴上80 ℃以下蒸干，残渣用乙腈溶解，滤过，
置25 mL容量瓶中，加乙腈溶液稀释至刻度，摇匀，即得。
2.6 药材溶液的制备 取细粉约1 g，精密称定，置250 mL圆
底烧瓶中，加乙醇约50mL，4mol/L盐酸25mL，回流提取3 h，放
冷，连同残渣一并转移至置分液漏斗中，加乙醇约20 mL分次
洗涤，洗涤液转移至分液漏斗中，用石油醚（60-90℃）振摇
提取5次，每次40 mL，石油醚溶液置水浴上80 ℃以下蒸干，
残渣用乙腈溶解，滤过，置25 mL容量瓶中，加乙腈溶稀释至
刻度，摇匀，即得。
2.7 测定方法 精密吸取对照品溶液10 μL，供试品溶液10 μL，
金刚藤水提醇沉正交实验研究
林江
(湖南省人民医院，湖南 长沙 410007)
[摘要] 目的：考察金刚藤的最佳水提醇沉工艺。方法：以不同药液浓度、不同醇沉浓度及静置时间为考察因素，设计3个水
平，以薯蓣皂苷元提取率为考察指标进行正交实验。结果：金刚藤药材的最佳醇沉工艺为：药液浓度0.25 g生药/mL，醇沉浓度
40%、静置24 h。结论：本工艺成本低，薯蓣皂苷元提取率高，干浸膏得率较少。
[关键词] 金刚藤；薯蓣皂苷元；正交实验；高效液相色谱法
[中图分类号]R284.2 [文献标识码]A [文章编号]1672-951X（2008）10-0069-03
Orthogonl Design Study on Water-alcohol Method for Rootstock Smilax china
LIN Jiang
Hunan Province Peoples Hospital, Changsha, China, 410007
[Abstract] Objective: To determine the best process of water -alcohol method for rootstock Smilax china. Methods: By
orthogonal experiment with yield of the extract from rootstock Smilax china and extracting rate of diosgenin. Three factors were
chosen in this experiment，including drugs solution concentration，alcohol consistence and put time, three levels to each factor.
Results：The optimal extraction process was refluxing drugs solution content 0.25 g drugs each gram liquid extract，with 40%
alcohol，put 24 hours.Conclusion：This is a way of economic and high extraction rate of diosgenin and lower extraction rate of
drying extract.
[Key Words] Rootstock Smilax china；Diosgenin；Orthogonal experiment；HPLC
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DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2008.10.035
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药材溶液10 μL，分别注入高效液相色谱仪，测定峰面积，计算。
2.8 干浸膏得率测定方法 精密量取醇沉提取液50 mL，水浴
上蒸干，再入干燥箱中105 ℃干燥至恒重，计算，即得。(见表1)
表1 金刚藤水提醇沉预试验结果
试验号 干浸膏得率（%） 薯蓣皂苷元提取率（%）
预试1 9.20 44.63
预试2 8.46 35.28
注：金刚藤药材中薯蓣皂苷元含量为0.14%。
试验结果表明：金刚藤采用40%乙醇醇沉工艺，药液浓度
达0.75 g生药/g以上时，薯蓣皂苷元提取率较低，干浸膏得率
较少，由于金刚藤药材的木质化程度高，而且含有较多的淀
粉和黏液质，影响有效成分的提取和分离，对水提醇沉的全
过程均造成明显影响。
2.9 金刚藤水提醇沉正交试验 根据上述理由，取金刚藤药
材最粗粉共2100 g(按处方量称取)，按水提最佳工艺提取，浓
缩至适量，平均分成15份，选择以药液浓度、醇沉浓度、静置
时间作为考查因素，设计3个水平，按L9(3)4正交表安排试验，
平行操作，以薯蓣皂苷元的提取率作为考查指标，因素水平
表见表2，正交表及方差分析结果见表3、4。
试验方法及数据：分别取上述9个试验样品醇沉提取液，
备用。含量测定方法：同金刚藤水提醇沉工艺预试验。干浸膏
得率测定方法：精密量取醇沉提取液50 mL，水浴上蒸干，再
入干燥箱中105 ℃干燥至恒重，计算，即得。
表2 因素水平表
因素
水平 药液浓度A 醇沉浓度B 静置时间C
（g生药/g） （%） （h）
1 0.25 35 8
2 0.50 40 16
3 0.75 45 24
表3 金刚藤水提醇沉正交表及结果
序 号 A B C D 干浸膏得率（%） 薯蓣皂苷元
试验号 提取率（%）
1 1 1 1 1 10.23 53.95
2 1 2 2 2 10.01 56.32
3 1 3 3 3 11.80 58.10
4 2 1 2 3 9.81 43.43
5 2 2 3 1 9.38 45.94
6 2 3 1 2 10.05 46.57
7 3 1 3 2 8.03 33.74
8 3 2 1 3 7.86 34.62
9 3 3 2 1 8.36 35.25
Ⅰ 168.37 131.12 135.14 135.14
Ⅱ 135.94 136.88 135.00 136.63 G=∑yi
Ⅲ 103.61 139.92 137.78 136.15 CT=G2/9
R 64.76 8.80 2.78 1.49 S=（Ⅰ2+Ⅱ2+Ⅲ2）/3 - CT
S 698.98 13.32 1.64 0.39
注：金刚藤药材中薯蓣皂苷元含量为0.14%。浸膏未作方差分析。
从表3薯蓣皂苷元提取率结果的直观分析可知，3号为最
佳工艺，因素A对提取效果有非常显著性影响，故最佳提取工
艺为A1B3C3。又方差分析结果表明，A因素有非常显著性影响，
A选A1，B选B3，C选C3，最佳提取工艺为A1B3C3，但B3与B2的差别
很小，而试验3号比2号的干浸膏得率大很多，为便于制剂成
型和减少乙醇用量及减少服用量，故B选B3，C选C3，有利于沉
淀完全和滤过，故最佳提取工艺为A1B2C3，即水提取液浓缩至
0.25 g生药/g，加40%乙醇醇沉，静置24 h。
表4 方差分析表（薯蓣皂苷元提取率）
方差来源 离差平方和 自由度 方差 F值 显著性
A 698.98 2 349.49 1747.45 P＜0.01
B 13.32 2 6.66 33.30 P＜0.05
C 1.64 2 0.82 4.10 P＞0.1
D 0.39 2 0.20
注：F1-0.10(2,2)=9.00，F1-0.05(2,2)=19.00，F1-0.01(2,2)=99.00。
2.10 金刚藤水提醇沉验证试验 分别取金刚藤药材最粗
粉共300 g（按处方量称取），按筛选后的最佳工艺进行试验。
(见表5)
表5 金刚藤水提验证试验结果
试验号 干浸膏得率（%） 薯蓣皂苷元提取率（%）
验证1 9.24 55.83
验证2 9.45 56.30
注：金刚藤药材中薯蓣皂苷元含量为0.14%。
试验结果表明：金刚藤水提醇沉采用筛选后的最佳工艺
的薯蓣皂苷元提取率较高，工艺较稳定。
3 讨 论
金刚藤中薯蓣皂苷元的含量测定方法，文献报道较少，
参照中国药典2005年版一部菝葜（金刚藤）药材及其部颁标
准金刚藤糖浆中薯蓣皂苷元的含量测定方法，以高效液相色
谱法为最好，方法快速，灵敏度高，重现性好，可操作性强，结
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果表明石油醚（60-90 ℃）加适量乙醇萃取，可避免其它成分
的干扰，试验中发现水提时金刚藤药材不破碎，醇沉药液浓
度高于0.75 g生药/g，薯蓣皂苷元的提取率很低，硫酸水解易
破坏成分[4,5]。
中国药典2005年版一部菝葜（金刚藤）药材项下的含量
测定方法测定结果明显偏低[1]，而且方法较复杂，主要是盐酸
水解的浓度较高，薯蓣皂苷元部分被破坏所致，本文对药典
方法作了优化处理，采用药材细粉直接加4 mol/L盐酸25 mL、
乙醇50 mL水解，取样量减少，定容至25 mL，方法简化，便于
操作，与文献报道的薯蓣皂苷元最佳水解条件相吻合。
金刚藤药材中薯蓣苷元含量比山奈酚含量高一倍以上，
中国药典2005年版一部菝葜（金刚藤）药材及其部颁标准金
刚藤糖浆均以高效液相色谱法测定其薯蓣皂苷元的含量，以
石油醚（60-90 ℃）萃取，避免其它成分的干扰，故选择以薯蓣
皂苷元作为其含量测定指标比山奈酚更好。
参考文献：
[1]国家药典委员会编.中国药典[S].一部.北京L：化学工业出版
社，2005：216
[2]谢红星，潘忠平，余世春，等.金刚藤颗粒质量标准研究[J].
安徽中医学院学报，1999，18(5)：61-62
[3]刘素香.HPLC法测定金刚藤颗粒中山标素的含量[J].中草
药，2004，35(3)：284-285
[4]彭晓英，周朴华，裴刚，等.薯蓣皂苷元测定方法的研究概况
[J].湖南林业科技，2004，31(1)：27-29
[5]王俊，陈钧，杨克迪，等.水解原位萃取薯蓣皂苷元的工艺条
件研究[J].中国中药杂志，2003，28(1)：934-937
（ 收稿日期：2008-07-25 编辑：朱民）
1-对照品 2-金刚藤样品
图1 HPLC图
国家中医药管理局开展新一轮科研实验室评估
从今年第四季度起，国家中医药管理局将开展新一轮中医药科研实验室评估工作，以进一步落实《中医药创新发展
规划纲要（2006-2020年）》和《中医药事业发展十一五规划》提出的战略目标，提高中医药创新发展能力，构建并完善符
合中医药特点的科技创新体系，同时进一步巩固和扩大实验室分级管理工作取得的成效。
国家中医药管理局提出，各地要高度重视中医药科研实验室分级管理工作，把这项工作作为提高中医药科技创新能
力和加强科研条件建设的重要举措，切实加强组织领导和监督管理。根据《中医药科研实验室管理办法（修订）》的要求，
负责做好行政辖区内各级中医药科研实验室监督管理工作。组织好本行政辖区内的机构、单位申请中医药科研实验室，
吸引多学科人员和技术参与中医药科学研究工作；尽快组织成立省级中医药科研实验室专家委员会，负责指导本辖区内
中医药科研实验室建设和三级实验室申报资料的初审及一、二级实验室的评估工作。
国家中医药管理局要求，负责组织评估的省级中医药管理部门要主动与被评估单位所在地省级中医药管理部门进
行沟通，制定评估工作计划，认真组织，保证质量，按时完成，及时做好评估工作总结；被评估单位所在地省级中医药管理
部门要认真配合评估组完成评估工作，组织本辖区内中医药科研三级实验室新申请单位和换证单位做好评估准备；目前
尚未开展中医药科研实验室评估分级管理工作的省、自治区、直辖市，可结合本地区实际情况，与有关省、自治区、直辖市
中医药管理部门联系观摩评估，尽快启动本省中医药科研实验室分级管理工作。
据悉，国家中医药管理局于2001年开始，在全国范围内组织开展了以实验室评估为主要措施的中医药科研实验室分
级管理工作，以逐步实现以评估促建设、以评估促管理、以评估促改革、以评估促发展的目标。这项工作自开展以来，得
到了各地中医药管理部门的高度重视和积极支持，取得了较好的效果。（记者周颖）
[来源：2008年10月16日 中国中医药报]
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