全 文 ：工 艺 技 术
2015年第18期
Vol . 36 , No . 18 , 2015
大孔吸附树脂纯化荔枝壳总黄酮的
工艺研究
郑韵英1，韦藤幼2
（1.钦州学院石油与化工学院，广西钦州 535099；
2.广西大学化学化工学院，广西南宁 530004）
摘 要：以提纯荔枝壳黄酮类化合物为目的，通过内部沸腾法得到荔枝壳总黄酮提取液，采用大孔吸附树脂对其进行
纯化研究。结果得到AB-8树脂最适合纯化荔枝壳总黄酮，而最优纯化工艺为上样液浓度为0.5 mg/mL，用量为24.0 mL；
吸附流速为1 mL/min，洗脱液为80%乙醇，洗脱剂用量为30.0 mL，洗脱流速为1 mL/min。在该工艺条件下，荔枝壳总黄
酮的吸附量达5.18 mg/g，解吸率为99.0%，荔枝壳总黄酮的含量从31.4%提高到了82.7%，荔枝壳总黄酮回收率达
92.1%。采用AB-8大孔吸附树脂纯化内部沸腾法得到的荔枝壳提取液效果较好，且树脂更方便回收与利用。
关键词：大孔树脂，内部沸腾法，纯化，荔枝壳总黄酮
Purification technology research of total flavonoids in Litchi Pericarp
by macroporous resin
ZHENG Yun-ying1，WEI Teng-you2
（1.College of Petroleum and Chemical Engineering，Qinzhou University，Qinzhou 535099，China；
2.School of Chemistry and Chemical Engineering，Guangxi University，Nanning 530004，China）
Abstract：In order to purify of total falconoids in Litchi Pericarp，the Litchi Pericarp extraction was obtained by
inner boiling method. And the purification research of the Litchi Pericarp extraction was carried out by
macroporous resin，The results showed that the best macroporous resin was AB-8 to purify total flavonoids in
Litchi Pericarp. And the optimal purification process of sample concentration was 0.5 mg/mL，the amount was
24.0 mL；the adsorption velocity of 1 mL/min，the elution concentration of 80% ethanol solution，and the elution
volume was 30.0 mL，the elution flow rate was 1 mL/min. Under the process conditions，the adsorption amount
of flavonoids from Litchi Pericarp was 5.18 mg/g，the desorption rate was 99.0%，the content of total flavonoids
in Litchi Pericarp increased from 31.4% to 82.7% . The recovery rate of total flavonoids as 92.1% . AB -8
macroporous resin purified extractions by inner ebullition method could effectively improve the purification
effect was good. And the resin was recovered and utilized more convenient.
Key words：macroporous resin；inner boiling；purification；total flavonoids in Litchi Pericarp
中图分类号：TS255.1 文献标识码：B 文 章 编 号：1002-0306（2015）18-0271-05
doi：10.13386/j.issn1002-0306.2015.18.046
收稿日期：2014－12－19
作者简介：郑韵英（1983-），女，硕士，实验师，研究方向：精细化工，E-mail：zhengyunying921@126.com。
基金项目：广西高校科学技术研究项目（2013LX158）。
荔枝因其有较高营养和经济价值而成为我国食
品行业的重要原料以及外贸出口最具竞争力的水果
之一。同时各种荔枝加工产品也畅销国内外，比如：
荔枝干、荔枝罐头、荔枝汁与荔枝酒等[1]。然而在荔枝
加工和消费过程中，荔枝壳通常直接被遗弃，并未得
到重视。实际上，荔枝壳含有多种活性成分，如黄酮
类、酚酸和多糖类物质[2]。而这些黄酮类生理活性物
质，具有很高的药用价值[3]。在《本草纲目》中也早有
荔枝壳的记载：“果壳、果核可入药，治鼻衄，疗疝
气”。而在日常生活中，也有用荔枝壳煮水服用来解
决因为新鲜荔枝果肉吃多而上火的问题。因此，将荔
枝壳收集并加以开发研究以提高其利用价值具有重
要意义。
目前，国内外对荔枝壳总黄酮研究相对较少，主
要集中在提取工艺方面，如杨宝[4]采用响应面分析方
法分析了醇提荔枝壳总黄酮的影响，涂华等 [5-6]采用
超声波和超声波微波双辅助对荔枝壳总黄酮进行了
提取，阮尚全等[7]采用了超声波协同酶法提取荔枝壳
中总黄酮并对抗氧化性进行了研究。而荔枝壳总黄
酮的纯化工艺目前只有涂华等[8]通过乙醇回流提取
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2015年第18期
得到荔枝壳提取液，然后采用D101大孔吸附树脂对
其进行纯化，虽然获得较好的总黄酮含量，但含量数
据含糊，同时从图中可看出其解吸率稍低，而且纯化
前荔枝壳总黄酮提取液的制备时间过长。文献[9-11]
提出了一种对天然产物有效成分提取的方法内部沸
腾法。该方法提取时间短，提取效率高，溶剂用量
少且提取液杂质含量少。而文献[12]中指出该方法
提取的提取液对大孔树脂的回收再利用更为有利，
而且纯化效果也较好。本实验通过内部沸腾法获得
荔枝壳总黄酮提取液，然后采用大孔吸附树脂对其
进行纯化，旨在为荔枝壳总黄酮的进一步研究提供
参考。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
荔枝 产地广西灵山，将新鲜荔枝去果肉留果
皮，果皮洗净晒干粉碎，过100目分子筛备用；大孔树
脂 S-8、AB-8、D-101、D-4020和NKA-9 南开大学
化工厂；芦丁对照品 国药集团化学试剂有限公司；
无水乙醇、氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝 西陇化工
股份有限公司；以上化学试剂 均为分析纯试剂。
SHB-Ⅲ型循环水式多用真空泵 郑州长城仪
器有限公司；HZS-H 型恒温振荡水槽 上海市实验
仪器总厂；RE-52A型旋转蒸发仪 上海亚荣生化仪
器厂；PC2501紫外分光光度计 日本岛津公司；
BPZ-6090LC真空干燥箱 上海一恒科学仪器有限
公司。
1.2 实验方法
1.2.1 提取液制备 用4 mL 80%的乙醇溶液解吸
1.00 g荔枝壳粉末15 min，然后迅速加入85 ℃ 20 mL
25%乙醇，提取4 min，减压抽滤，收集提取液；再重复
提取一次，合并两次提取液，得到内部沸腾提取液。
用旋转蒸发仪将提取液浓缩后置于真空干燥箱内干
燥得荔枝壳总黄酮粗产物。称取一定量的粗产物，用
蒸馏水溶解并定容于250 mL容量瓶中，摇匀后于波
长为510 nm下测定其吸光值，再根据芦丁标准曲线
所得的回归方程计算溶液的总黄酮质量浓度从而计
算总黄酮含量，然后再计算出提取液中总黄酮含量
为31.4%，以纯水为溶剂配制荔枝壳总黄酮质量浓度
为1.50 mg/mL的样品液，备用。
1.2.2 芦丁标准曲线的制作 将芦丁标准品置于
105 ℃烘箱内干燥至恒重。准确称取0.1008 g芦丁标
准品于30%乙醇溶液中溶解，定容至250 mL，分别移
取 0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00 mL芦丁标
准溶液于7个25 mL容量瓶中，分别加入30%乙醇溶
液，使容量瓶中的溶液体积约为12.5 mL，摇匀后分
别加入0.7 mL 5% NaNO2溶液，摇匀，放置5 min，分
别加入0.7 mL 10% Al（NO3）3溶液摇匀，放置6 min后
分别加入5 mL 4% NaOH溶液，用30%乙醇溶液定
容，摇匀后放置10 min。以空白试剂作为参比，在波
长为510 nm下测定溶液吸光值，以吸光度为纵坐标，
浓度为横坐标，绘制标准工作曲线[13]。
1.2.3 树脂的吸附量、吸附率、解吸量及解吸率的测
定 根据芦丁标准曲线得到总黄酮质量浓度，再根
据以下公式计算吸附量、吸附率、解吸量、解吸率[14]
和总黄酮回收率。
吸附量：Qa（mg·g-1）=（C0-C1）×V1M
式（1）
吸附率：Ra（%）= C0-C1C0
×100 式（2）
解吸量：Qb（mg·g-1）= C2×V2M
式（3）
解吸率：Rb（%）= C2×V2Qa·M
×100 式（4）
回收率（%）= C2×V2
C0×V1
×100 式（5）
式中：C0为上样液初始质量浓度（mg/mL）；C1剩
余液质量浓度（mg/mL）；C2洗脱液浓度（mg/mL）；V1上
样液体积（mL）；V2洗脱体积（mL）；M为干树脂的质
量（g）。
1.2.4 树脂预处理 将树脂浸泡在95%乙醇中24 h
装柱，然后用95%乙醇进行清洗至流出乙醇溶液清
澈，再用蒸馏水洗尽乙醇至流出液为中性，树脂预处
理完毕并保存，用时抽干。
1.2.5 静态吸附与解吸实验
1.2.5.1 树脂的筛选 分别称取预处理过的AB-8、
S-8、D-101、D-4020和NKA-9树脂2.00 g置于具塞磨
口三角瓶中，加入0.5 mg/mL提取液20 mL，25 ℃恒温
振荡12 h，测定吸附后剩余液中荔枝壳总黄酮的浓
度。将吸附平衡的树脂用30 mL 95%乙醇在温度为
25 ℃下振荡解吸12 h，再根据1.2.3的公式计算平衡
时各树脂的吸附率和解吸率进而筛选出合适于纯化
荔枝壳总黄酮的树脂。
1.2.5.2 静态吸附曲线的绘制 室温条件下，在50 mL
具塞锥形瓶加入预处理好的树脂2.00 g，然后加入
20.0 mL 0.5 mg/mL提取液，置于摇床上，以转速为
120 r/min振摇12 h，期间每隔30 min吸取上层溶液测
定黄酮含量，计算树脂的吸附量，并绘制出树脂静态
动力学曲线。
1.2.6 动态吸附与解吸实验
1.2.6.1 上样液浓度对树脂吸附性能的影响 准确
称量预处理好的树脂5份各2.00 g，分别加入0.25、0.5、
0.75、1.00、1.25 mg/mL提取液各20 mL，室温下置于转
速为120 r/min的摇床中振荡360 min，测定树脂的吸附
率。绘制上样液浓度对树脂吸附性能的影响曲线。
1.2.6.2 吸附流速对吸附效果的影响 5份20.0 mL
相同浓度的样品液分别以 1.00、2.00、3.00、4.00、
5.00 mL/min的流速自上而下通过5个AB-8树脂柱，
流出液每2 mL收集一管，分别测定每管的总黄酮浓
度至流出液中总黄酮浓度为样品液浓度的1/10，即
泄露点[15]为止。然后以流出液浓度为纵坐标，流出液
体积为横坐标，绘制泄漏曲线。
1.2.6.3 上样体积对树脂吸附的影响 将浓度为
0.5 mg/mL的荔枝壳提取液加入装有2.00 g预处理好
的AB-8树脂柱，以1 mL/min的速度经过柱子，然后每
2 min收集一管流出液，分别测定其吸光值，计算吸
附量，并以吸附量为纵坐标，流出液体液为横坐标，
绘制动态吸附曲线，确定上样体积。
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图3 上样液浓度对AB-8树脂吸附性能的影响
Fig.3 Effect of sample concentration on adsorption capacity of
AB-8 resin
上样浓度（mg/mL）
0.25 0.50 0.75 1.00 1.25
90
85
80
75
70
65
60
55
50
45
40
35
30
吸
附
率
（
%）
1.2.6.4 洗脱剂浓度对树脂解吸的影响 于2.0 g吸附
饱和的树脂中分别加入30 mL浓度为40%、50%、60%、
70%、80%、90%、95%的乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱
液，测定吸光值，计算不同浓度洗脱剂下的解吸率。
1.2.6.5 洗脱流速对树脂动态解吸的影响 分别将
5份已经吸附饱和的树脂2.00 g上柱，加入30 mL 80%
乙醇洗脱剂，流速分别设置为1、2、3、4、5 mL/min，每
2 mL一管分段收集流出液，测定其吸光值，计算流出
液浓度，绘制洗脱流速曲线。
1.2.6.6 洗脱剂用量对树脂解吸的影响 分别将已
经吸附饱和的树脂2.00 g上柱，加入80%乙醇进行洗
脱，洗脱速度为1 mL/min，洗脱剂用量分别设置为
10.0、15.0、20.0、25.0、30.0、35.0 mL，收集流出液，测
定吸光值，计算不同洗脱剂用量的解吸率。
2 结果与分析
2.1 标准曲线的确定
根据1.2.2芦丁标准曲线的制作的实验数据，得
到溶液中吸光度（A）与芦丁质量浓度（c，mg/mL）的
回归方程为：A=9.7154C+0.0028（R2=0.9996），A为吸
光度，C为浓度，单位mg/mL。芦丁标准曲线见图1。
2.2 静态吸附与解吸实验
2.2.1 树脂的筛选 通过树脂筛选实验，得到荔枝
壳总黄酮的吸附和解吸性能均具有良好纯化效果的
树脂见表1。
由表1可见，AB-8、S-8、NKA-9三种树脂对荔枝
壳总黄酮具有较好的吸附效果，其中S-8树脂的吸
附量最高，AB-8树脂吸附量次之，而从解吸率上看，
AB-8、D101树脂对荔枝壳总黄酮具有较好的解吸效
果，其中D101树脂解吸率最高，AB-8树脂的解吸率
次之，而S-8树脂解吸率最低。原因是荔枝壳黄酮类
具有一定的极性，但极性不大。根据树脂的吸附特
性，极性树脂对极性物质具有较强的吸附能力，非极
性树脂对非极性物质有较强的吸附能力 [16]，而中性
树脂兼有以上两种能力。所以弱极性和极性的树脂
对荔枝壳总黄酮具有较好的吸附效果。而在洗脱的
过程中，可能是因为S-8树脂靠氢键作用于荔枝壳总
黄酮分子，比较难洗脱下来，所以解吸率较低。而非
极性和弱极性的树脂吸附物质主要靠分子间的范德
华力，况且D101树脂的孔径和比表面积的疏水性较
强，所以富集在树脂表面的荔枝壳总黄酮很容易被
洗脱，而弱极性的AB-8树脂也具有疏水性，所以D101
和AB-8树脂的解吸率较高。综合各树脂的吸附能力
与解吸能力等各方面原因，选择AB-8树脂纯化荔枝
壳总黄酮较为适合。
2.2.2 静态吸附时间曲线 由图2可知，在0~120 min
的范围内吸附较快，120~210 min吸附过程逐渐变慢
之后趋于平稳。AB-8树脂对荔枝壳总黄酮的吸附量
会随着时间变化而变化，210 min时间后吸附达到平
衡。树脂的静态吸附特性与工业生产率相关，而从
AB-8树脂对荔枝壳总黄酮的吸附平衡时间上看，吸
附达到平衡的时间不长，可为荔枝壳中总黄酮的工
业应用提供理论基础。
2.3 动态吸附与解吸工艺研究
2.3.1 上样液浓度的确定 由图3可知，上样液浓度
在0.25~0.5 mg/mL时，树脂吸附率变化较小，当浓度
超过0.5 mg/mL后，树脂的吸附率便呈下降趋势。只
图1 芦丁标准曲线
Fig.1 The standard curve of sophorin
芦丁浓度C（mg/mL）
0 0.05 0.10 0.15 0.20
1.6
1.4
1.2
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
吸
光
度
树脂类型 粒径（nm） 极性 吸附率（%） 解吸率（%）
AB-8 0.3~1.25 弱极性 85.9 90.3
D101 0.3~1.25 非极性 80.3 90.6
D-4020 0.3~1.25 非极性 81.0 87.2
S-8 0.3~1.25 极性 86.6 23.2
NKA-9 0.3~1.25 极性 84.5 33.4
表1 不同树脂对荔枝壳总黄酮的吸附和解吸能力
Table 1 The ability of adsorption and desorption of total
flavonoids in Litchi Pericarp of different resins
图2 AB-8树脂静态吸附时间曲线
Fig.2 The static adsorption curve of AB-8 resin
时间（min）
0 100 200 300 400 500
6.0
5.0
4.0
3.0
2.0
1.0
0.0
吸
附
量
（
m
g/
g）
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图5 AB-8树脂动态吸附曲线
Fig.5 The dynamic adsorption curve of AB-8 resin
流出液体积（mL）
2.0 6.0 10.0 14.0 18.0 22.0 26.0 30.0
5.2
5.1
5.0
4.9
4.8
4.7
4.6
4.5
吸
附
量
（
m
g/
g）
因在等温条件下，吸附量q是温度和提取液中吸附质
（荔枝壳总黄酮）浓度的函数，即q=f（T，C），荔枝壳总
黄酮浓度低时，吸附容易达到平衡且吸附率高，但是
吸附量少；而在荔枝壳总黄酮浓度适中时，吸附量与
浓度的1/N方成正比，吸附率与吸附量均高；而荔枝
壳总黄酮浓度高时，随着吸附液浓度的增大，而吸附
量减少，吸附率也随之减少[17]。所以，上样液浓度最
佳为0.5 mg/mL。
2.3.2 吸附流速的确定 由图4可知，吸附流速为
1 mL/min时，约需10 mL才出现泄露点，而吸附流速
为5 mL/min时，只需约4.5 mL就出现了泄漏点，树脂
的吸附过程主要是有效成分在树脂柱中的粒扩散和
膜扩散过程，吸附流速慢，有利于荔枝壳中黄酮类化
合物在AB-8树脂柱中的粒扩散和膜扩散，促使黄酮
类化合物充分吸附到树脂表面和孔内[18]。因此，选择
吸附流速为1 mL/min。
2.3.3 上样体积的确定 由图5可知，当流出液体积
从2.0~10.0 mL时，树脂吸附较快，吸附量也随之增
加，流出液体积从10.0~24.0 mL，树脂吸附量变化缓
慢，24.0 mL以后树脂吸附量基本保持不变，此时吸
附达到平衡。选择上样体积为24.0 mL为宜。在等温
条件下，荔枝壳总黄酮的质量浓度较小时，有利于其
在树脂孔径内扩散，所以荔枝壳总黄酮溶液流过树
脂的体积小时，树脂的吸附比较快，而随着荔枝壳总
黄酮质量浓度增加，使溶质分子附着在树脂上的吸
附密度增大，从而使树脂有效孔径变小，导致了扩散
传质阻力的增加[19-20]，所以随着树脂荔枝壳总黄酮溶
液流过树脂的体积的增加，树脂吸附量也变得缓慢
直至吸附饱和。
2.3.4 洗脱剂浓度的确定 由图6可见，随着乙醇浓
度的增大，解吸率也逐渐升高，当乙醇达到80%时，
总黄酮含量最高，解吸率最大，80%之后随着乙醇浓
度的增大，解吸率呈降低的趋势，原因可能是因为
80%乙醇的极性与荔枝壳黄酮类化合物的极性相
近，根据有机化合物相似相溶的原理，80%的乙醇较
易溶解树脂上吸附的荔枝壳黄酮类化合物。因此，选
用80%乙醇作为洗脱剂。
2.3.5 洗脱流速对树脂动态解吸的影响 由图7可
知，当洗脱流速为1 mL/min时，洗脱峰值相对集中且
明显，没有拖尾现象，洗脱效果较好，而随着流速的
加快，泄漏点出现较快，解吸不够充分。流速过快，洗
脱剂对吸附在树脂上的荔枝壳总黄酮分子未能充分
作用，将其从树脂上洗脱下来，解吸性能不能充分发
挥。因此，选择洗脱流速为1 mL/min。
2.3.6 洗脱剂用量的确定 由图8可知，解吸率随着
洗脱剂用量的增加而逐渐提高，当洗脱剂用量达到
30.0 mL时，解吸基本达到平衡，再增加乙醇用量解
吸率提高不明显，从乙醇用量、成本及时间效率等方
面考虑，选择洗脱剂用量为30.0 mL。
2.4 验证实验
准确称取处理好的大孔树脂2.00 g，加入0.5 mg/mL
样品液24.0 mL，以1 mL/min的流速过柱，收集流出液，
测定吸光度值，计算吸附率，加入30.0 mL 80%乙醇溶
液以1 mL/min进行洗脱，收集洗脱液，测定吸光度值，
图4 吸附流速对AB-8树脂动态吸附性能的影响
Fig.4 Effect of adsorbentvelocities on adsorption capacity of
AB-8 resin
流出液体积（mL）
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
0.50
0.45
0.40
0.35
0.30
0.25
0.20
0.15
0.10
0.05
0
流
出
液
浓
度
（
m
g/
m
L）
1 mL/min
2 mL/min
3 mL/min
4 mL/min
5 mL/min
图6 不同洗脱剂浓度的解吸效果
Fig.6 The effect of different elution agent concentration
of desorption
乙醇浓度（%）
40 50 60 70 80 90 100
95
90
85
80
75
70
解
吸
率
（
%）
图7 洗脱流速对AB-8树脂动态解吸性能的影响
Fig.7 Effect of elution flow rate on adsorption capacity of
AB-8 resin
流出液体积（mL）
2.0 6.0 10.0 14.0 18.0 22.0 26.0 30.0
0.50
0.45
0.40
0.35
0.30
0.25
0.20
0.15
0.10
0.05
0
流
出
液
浓
度
（
m
g/
m
L）
1 mL/min
2 mL/min
3 mL/min
4 mL/min
5 mL/min
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图8 洗脱剂用量对树脂解吸性能的影响
Fig.8 The influence of eluent consumption on desorption
洗脱剂用量（mL）
5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 35.0 40.0
100
90
80
70
60
50
40
解
吸
率
（
%）
计算解吸率。进行三次平行实验，求取平均值。从而
验证树脂纯化工艺的可行性及稳定性。结果见表2。
由表2可以得知，AB-8树脂纯化荔枝壳总黄酮的
吸附量达到5.18 mg/g，解吸率为99.0%。而且吸附与解
吸的现象较为稳定，具有可行性。在该条件下，荔枝壳
总黄酮的含量为82.7%，荔枝壳总黄酮回收率达92.1%。
而回收的树脂颜色较浅，残留物少，用蒸馏水清洗后，
基本上可以得到较白的树脂，很方便树脂的再利用。
3 结论
该实验研究利用了大孔吸附树脂对内部沸腾法
强化提取的荔枝壳总黄酮进行了纯化，通过静态吸
附解吸实验，筛选出AB-8大孔吸附树脂较为适合纯
化荔枝壳总黄酮有效成分。进而采用AB-8大孔吸附
树脂进行动态吸附解吸实验，得到纯化荔枝壳总黄
酮有效成分的最优条件为：以0.5 mg/mL 24.0 mL样
品液上柱，吸附流速为1 mL/min，吸附达到平衡后，
用30.0 mL浓度为80%乙醇溶液进行洗脱，洗脱流速
为1 mL/min。在该工艺条件下，荔枝壳总黄酮的吸附
量达5.18 mg/g，解吸率为99.0%，荔枝壳总黄酮回收
率达92.1%，含量为82.7%，荔枝壳总黄酮含量约为纯
化前的2.6倍。同时通过对树脂外观的观察，可以看
出树脂上残留杂质非常少，颜色较浅，方便回收再利
用。由此可见，AB-8大孔吸附树脂纯化内部沸腾法
获得的荔枝壳总黄酮工艺是有效的，可为荔枝壳的
进一步研究提供理论基础，同时，从树脂的回收与利
用的角度，推介一种天然产物有效成分的纯化工艺。
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实验号 吸附量（mg/g） 解吸率（%）
1 5.15 98.8
2 5.18 99.3
3 5.20 99.0
平均值 5.18 99.0
表2 验证实验
Table 2 Verification test
（上接第270页）
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